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钠-钙交换体单克隆抗体NCX-3F10对大鼠心室肌主要离子电流的影响及对缺血/再灌注诱发心律失常的抑制作用 被引量:2
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作者 杨明珠 陈依春 +4 位作者 王晓露 张堉琪 薛晓艳 封启龙 吴博威 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期934-941,共8页
目的观察NCX-3F10抗体对大鼠心室肌细胞主要离子电流的影响及其对缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)诱发心律失常的作用。方法(1)利用全细胞膜片钳技术记录大鼠心室肌细胞Na^+/Ca^(2+)交换电流(INa/Ca)及其他主要离子电流;(2)结扎... 目的观察NCX-3F10抗体对大鼠心室肌细胞主要离子电流的影响及其对缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)诱发心律失常的作用。方法(1)利用全细胞膜片钳技术记录大鼠心室肌细胞Na^+/Ca^(2+)交换电流(INa/Ca)及其他主要离子电流;(2)结扎左冠状动脉建立大鼠在体及离体心脏缺血/再灌注心律失常模型,观察抗体对心律失常的影响;(3)利用Ion Optix离子影像分析系统观察抗体对单个心室肌细胞钙瞬变的影响。结果(1)5~40 mg·L^(-1)的NCX-3F10抗体对I_(Na/Ca)呈剂量依赖性抑制作用,其抑制外向和内向电流的IC_(50)分别为11.15和11.69 mg·L^(-1),最大抑制率分别达到61%、62%;该抗体对钙电流(I_(Ca-L))也有一定的抑制作用,对内向整流钾电流(I_(K1))、瞬时外向钾电流(I_(to))、钠电流(I_(Na))均无影响;(2)在离体大鼠心脏I/R组,100%大鼠发生室速,88.89%大鼠出现室颤;再灌注前5 min给予NCX-3F10抗体(10 mg·L^(-1))干预后,大鼠的室速发生率下降至44.43%,室速、室颤持续时间明显减少(P<0.05);(3)麻醉大鼠再灌注前5 min给予NCX-3F10抗体(50μg·kg-1)预处理后,大鼠室早个数、室速发生率及持续时间、室颤的发生率及持续时间均明显降低(P<0.05);(4)5~40 mg·L^(-1)的NCX-3F10抗体对心肌细胞钙瞬变幅度呈剂量依赖性抑制作用。结论 NCX-3F10抗体对大鼠离体和在体心脏缺血/再灌注诱发的心律失常有明显抑制作用,其抗心律失常效应与抑制钠-钙交换电流和L-型钙电流、减轻细胞内钙超载有关。 展开更多
关键词 -交换 单克隆抗 全细胞膜片钳 离子电流 心律失常 缺血/再灌注
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钠钙交换体NCX1在急性胰腺炎发生、发展中的作用 被引量:4
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作者 余森源 谢睿 +2 位作者 陈昱杨 杨仕明 朱斌 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第13期1325-1330,共6页
目的研究钠钙交换体NCX1在急性胰腺炎发生、发展中的作用。方法分离SD大鼠胰腺腺泡细胞,用雨蛙素诱导体外AP模型,采用qRT-PCR、Western blot检测NCX1、TNF-α、IL-6 mRNA及蛋白的表达变化;再加入NCX1特异性抑制剂KB-R7943预处理腺泡细胞... 目的研究钠钙交换体NCX1在急性胰腺炎发生、发展中的作用。方法分离SD大鼠胰腺腺泡细胞,用雨蛙素诱导体外AP模型,采用qRT-PCR、Western blot检测NCX1、TNF-α、IL-6 mRNA及蛋白的表达变化;再加入NCX1特异性抑制剂KB-R7943预处理腺泡细胞,检测NCX1、TNF-α、IL-6的表达变化。构建SD大鼠AP模型,分为阴性对照组,雨蛙素组及雨蛙素+NCX1抑制剂组,qRT-PCR检测比较各组大鼠胰腺组织中NCX1、TNF-α、IL-6 mRNA的表达变化,采用生化分析仪检测各组血清淀粉酶浓度的变化;各组大鼠胰腺组织经HE染色后观察组织病理学改变。结果从细胞水平证实在急性胰腺炎中NCX1及炎症因子TNF-α、IL-6的mRNA及蛋白表达量较阴性对照组均明显升高(P<0.01),而加入NCX1特异性抑制剂KB-R7943预处理后能明显抑制雨蛙素诱导的炎症反应,NCX1、TNF-α、IL-6的mRNA及蛋白表达量较雨蛙素组均明显下降(P<0.01)。从动物水平证实在AP大鼠中NCX1及炎症因子TNF-α、IL-6的mRNA表达量较阴性对照组明显升高(P<0.01),其血清淀粉酶浓度较阴性对照组也明显升高(P<0.001);但加入NCX1特异性抑制剂KB-R7943后,NCX1、TNF-α、IL-6的mRNA表达量和血清淀粉酶水平较雨蛙素组均有所下降(P<0.01),同时急性胰腺炎的病理改变程度较雨蛙素组亦明显减轻。结论钠钙交换体NCX1介导了急性胰腺炎的发生、发展;提示NCX1可以作为急性胰腺炎治疗的靶标。 展开更多
关键词 交换ncx1 急性胰腺炎 超载 炎症因子
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钠-钙交换体单克隆抗体NCX-2D2对异丙肾上腺素诱发成年大鼠心律失常的抑制作用 被引量:2
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作者 薛晓艳 王苗苗 +3 位作者 王晓露 杨明珠 吴博威 封启龙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1308-1314,共7页
目的观察钠-钙交换体单克隆抗体NCX-2D2对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱发大鼠心律失常的影响,并探讨其电生理机制。方法利用ISO建立大鼠离体和在体心律失常模型,观察NCX-2D2抗体对心律失常的影响;通过全细胞膜片钳技术,观察NCX-2D... 目的观察钠-钙交换体单克隆抗体NCX-2D2对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱发大鼠心律失常的影响,并探讨其电生理机制。方法利用ISO建立大鼠离体和在体心律失常模型,观察NCX-2D2抗体对心律失常的影响;通过全细胞膜片钳技术,观察NCX-2D2抗体对大鼠心室肌细胞I_(Na/Ca)、I_(Ca-L)和DADs的作用。结果 10 mg·L^(-1) 2D2抗体可明显抑制ISO诱发大鼠离体心脏心律失常的发生(P<0.01);80μg·kg^(-1) 2D2抗体可明显抑制ISO诱发麻醉大鼠心律失常的发生(P<0.01);5 mg·L^(-1) 2D2抗体可部分抑制ISO对大鼠心室肌细胞I_(Na/Ca)的增大作用(P<0.01),以及对I_(Ca-L)的增大效应(P<0.01),并可有效抑制ISO诱发大鼠心室肌细胞DADs的发生(P<0.05)。结论钠-钙交换体单克隆抗体NCX-2D2可明显抑制异丙肾上腺素诱发的大鼠室性心律失常,其抗心律失常机制与抑制心肌细胞钠-钙交换体和L-型钙通道,从而减轻钙超载和抑制延迟后除极有关。 展开更多
关键词 -交换 L-型通道 心律失常 单克隆抗 全细胞膜片钳技术 延迟后除极
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大鼠在体心肌缺血再灌注损伤组织间液钙离子动态与胞膜钠钙交换体表达 被引量:11
4
作者 黄邵洪 荣健 +1 位作者 王淑云 吴钟凯 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期76-79,98,共5页
目的检测大鼠心肌在体缺血再灌注损伤(IR)组织间液钙离子浓度,比较IR前后心肌胞膜钠钙交换体(NCX)mRNA表达水平,探讨其对钙超载的意义。方法 12只SD大鼠随机分为IR组和对照组,以微透析技术连续收集心肌组织间液标本,原子吸收光谱法检测... 目的检测大鼠心肌在体缺血再灌注损伤(IR)组织间液钙离子浓度,比较IR前后心肌胞膜钠钙交换体(NCX)mRNA表达水平,探讨其对钙超载的意义。方法 12只SD大鼠随机分为IR组和对照组,以微透析技术连续收集心肌组织间液标本,原子吸收光谱法检测钙离子浓度。IR组通过结扎(20min)后松解(60min)冠状动脉前降支造成心肌缺血再灌注,结束时收取左心室缺血区和右心室心肌行NCX mRNA定量PCR检测,实验前后采血检测血钙和肌钙蛋白T(cTnT)。对照组免除结扎、松解前降支,其余操作与IR组一致。结果 IR组血浆cTnT浓度显著升高[对照组vs IR组,ng/mL:(1.62±0.60)vs.(4.29±2.22),P=0.031]。IR组心肌组织间液钙离子浓度在缺血期无明显变化,再灌注20min显著下降,心肌析出液钙离子浓度与对照组存在显著性差异[对照组vs.IR组,ng/mL:(224±31)vs.(136±39),P=0.002]。血浆Ca2+浓度实验前后无显著差异。心肌细胞膜NCX mRNA表达水平在组间和组内均无显著差异。结论大鼠在体心肌缺血20min再灌注60min,组织间液钙离子浓度在缺血期无明显变化,再灌注期迅速下降,这种变化趋势与胞膜NCX表达无关。 展开更多
关键词 缺血再灌注损伤 离子 交换
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阿托伐他汀通过调节钠-钙交换体改善心力衰竭大鼠心脏功能 被引量:8
5
作者 王姝 王瑞 +3 位作者 蒋雅楠 王岚峰 潘薇 田野 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1900-1904,共5页
目的:探讨阿托伐他汀对心力衰竭大鼠心脏功能及心肌细胞钠-钙交换体表达的影响。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支8周,制备心肌梗死后心力衰竭模型。随机分3组,即假手术组、心力衰竭组与阿托伐他汀治疗组,分别于结扎后第2天给予安慰剂或... 目的:探讨阿托伐他汀对心力衰竭大鼠心脏功能及心肌细胞钠-钙交换体表达的影响。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支8周,制备心肌梗死后心力衰竭模型。随机分3组,即假手术组、心力衰竭组与阿托伐他汀治疗组,分别于结扎后第2天给予安慰剂或阿托伐他汀治疗。8周后测定大鼠心脏功能及钠-钙交换体蛋白表达水平。培养原代乳鼠心肌细胞,通过缺氧模型分析阿托伐他汀对细胞内钙水平的影响。结果:阿托伐他汀治疗组较心衰组BNP水平降低,左室舒张末内径缩小,左室短轴缩短率升高。阿托伐他汀治疗明显降低心力衰竭时钠-钙交换体蛋白表达量,抑制缺氧诱导细胞内钙水平增加。结论:阿托伐他汀治疗改善心功能,可能与影响心力衰竭心肌细胞钠-钙交换体的表达及功能有关。 展开更多
关键词 -交换 心力衰竭 阿托伐他汀
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钠钙交换体激活CaMKⅡ介导大鼠离体心脏缺血再灌注损伤 被引量:7
6
作者 孔令恒 梁飞 +4 位作者 陈玉龙 魏明 孙娜 朱娟霞 苏兴利 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期28-34,共7页
目的:探讨钠钙交换体(Na+/Ca^(2+) exchanger,NCX)在离体心脏缺血再灌注损伤中的作用及其可能机制。方法:40只大鼠随机分为4组:正常对照组(Control组)、10μmol/L KB-R7943药物对照组(KB-R7943组)、缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR... 目的:探讨钠钙交换体(Na+/Ca^(2+) exchanger,NCX)在离体心脏缺血再灌注损伤中的作用及其可能机制。方法:40只大鼠随机分为4组:正常对照组(Control组)、10μmol/L KB-R7943药物对照组(KB-R7943组)、缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)组和10μmol/L KB-R7943干预缺血再灌注组(KB-R7943+IR组)。采用Langendorff灌流装置建立离体心脏缺血再灌注模型;以再灌注末心肌纤维形态的变化、左室发展压(LVDP)比值、左室舒张末压(LVEDP)、冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性、心肌梗死面积及细胞色素c和cleaved caspase-3蛋白的变化评价心肌损伤程度;Western印迹检测磷酸化钙/钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ(Ca^(2+)/calmodulindependent protein kinase Ⅱ,CaMKⅡ)和受磷蛋白(phospholamban,PLN)苏氨酸17位点磷酸化(pThr17)水平的变化。结果:与Control组相比,IR组再灌注末心肌纤维排列紊乱,断裂明显,心肌梗死面积、LVEDP和冠状动脉流出液中LDH活性明显增加,LVDP比值降低,细胞色素c、cleaved caspase-3、磷酸化CaMKⅡ及pThr17-PLN水平均上调(P<0.01);KB-R7943+IR组心肌梗死面积明显减小,LVEDP降低,LVDP比值明显改善,LDH活性明显降低,细胞色素c和cleaved caspase-3蛋白水平明显降低,磷酸化CaMKⅡ和pThr17-PLN水平也明显下调(P<0.01)。结论:NCX可通过激活CaMKⅡ启动细胞凋亡和坏死,进而诱导心肌缺血再灌注损伤。 展开更多
关键词 交换 /调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ 受磷蛋白 细胞色素C 乳酸脱氢酶 心肌损伤
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钠钙交换体及其抑制剂在心律失常中的作用 被引量:7
7
作者 沈磊 吴玉林 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2006年第6期610-614,共5页
在心肌细胞中,钠钙交换体对胞内钙离子的调控起着非常重要的作用。缺血/再灌注或强心苷中毒时会使细胞外的钙通过钠钙交换体的反向模式内流,造成内钙超载,导致心律失常。现今,选择性抑制其反向模式的苄氧基苯基衍生物得到了较多的研究,... 在心肌细胞中,钠钙交换体对胞内钙离子的调控起着非常重要的作用。缺血/再灌注或强心苷中毒时会使细胞外的钙通过钠钙交换体的反向模式内流,造成内钙超载,导致心律失常。现今,选择性抑制其反向模式的苄氧基苯基衍生物得到了较多的研究,并可能成为治疗心律失常的一个新的有潜力靶点。 展开更多
关键词 交换 反向模式 超载 交换 抑制剂 心律失常
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抗钠钙交换体特异位点抗体对离体大鼠心脏功能和血管张力的影响及其与哇巴因、(±)Bay K8644作用的比较 被引量:1
8
作者 白晓洁 封启龙 吴博威 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1793-1797,共5页
目的:比较抗钠钙交换体(NCX)特异位点(α-1重复序列124HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF145)抗体、传统强心药哇巴因以及L型Ca2+通道激动剂(±)Bay K8644对离体大鼠心脏和血管功能的影响,以探求新的强心作用靶点。方法:选用成年大鼠,体重250... 目的:比较抗钠钙交换体(NCX)特异位点(α-1重复序列124HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF145)抗体、传统强心药哇巴因以及L型Ca2+通道激动剂(±)Bay K8644对离体大鼠心脏和血管功能的影响,以探求新的强心作用靶点。方法:选用成年大鼠,体重250~300 g,快速分离心脏和胸主动脉,利用Langendorff离体心脏灌流装置和血管环张力测定系统观察10 nmol/L、20 nmol/L和40 nmol/L抗NCX特异位点抗体以及哇巴因(0.5mmol/L)、(±)Bay K8644(0.1 mmol/L)对心脏血流动力学指标左室发展压、左心室内压上升/下降最大速率(±dp/dt max)、冠脉阻力以及胸主动脉环张力的影响。结果:10 nmol/L、20 nmol/L和40nmol/L抗NCX特异位点抗体剂量依赖性地使大鼠离体心脏左室发展压、+dp/dt max和-dp/dt max增加,表明心脏收缩和舒张效率均增强。给药过程中均没有发生心律失常。哇巴因(0.5 mmol/L)和(±)Bay K8644(0.1 mmol/L)对正常离体灌流大鼠心脏左室发展压及+dp/dt max也有增强作用,作用强度与抗NCX特异位点抗体(40 nmol/L)的作用相当,但(±)Bay K8644(0.1 mmol/L)对-dp/dt max无明显影响,哇巴因(0.5 mmol/L)则有使-dp/dt max下降的趋势。哇巴因(0.5 mmol/L)在给药5 min后,多数离体心脏出现≥5 beats/min的早博,(±)Bay K8644(0.1 mmol/L)给药过程中离体大鼠心脏没有出现心律失常。结论:抗NCX特异位点抗体可以同时增强离体灌流大鼠心脏的收缩和舒张活动,并且不增加心律失常的发生率,同时对灌流心脏冠脉阻力以及离体大鼠的胸主动脉环张力也没有显著影响。 展开更多
关键词 交换 血流动力学 血管张力
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肥大心肌钠钙交换体的调控机制
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作者 张振英 刘秀华 胡维诚 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1862-1866,共5页
Myocardium hypertrophy is a compensated response to cardiac disease in which intracellular Ca2+ concentration is elevated,the essential signal that results in hypertrophy.The cardiac sodium-calcium exchanger(NCX) is a... Myocardium hypertrophy is a compensated response to cardiac disease in which intracellular Ca2+ concentration is elevated,the essential signal that results in hypertrophy.The cardiac sodium-calcium exchanger(NCX) is a bidirectional ion transporter in sarcolemma.The decrease in NCX activity as well as its inverse mode is one of the main mechanisms that contribute to cytosolic Ca2+ loading in hypertrophy.The extracellular signal molecules,the change of Na+ /Ca2+ concentrations and intracellular modulating proteins during cardiac hypertrophy can affect the activity or NCX function,and increase intracellular Ca2+.We summarized the regulatory mechanism of NCX in myocardium hypertrophy. 展开更多
关键词 心肌 肥大 交换 磷酸化 信号转导
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抗钠-钙交换体α-1(106-145)抗体对大鼠离体心功能的影响及其机制 被引量:2
10
作者 杨啸燕 李明华 +4 位作者 赵雷 高亚男 封启龙 武冬梅 吴博威 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1074-1079,共6页
目的观察1~103nmol·L-1抗钠-钙交换体(NCX)α-1(106-145)肽段抗体对离体大鼠心功能的影响并分析其作用机制。方法用化学合成的NCXα-1(106-145)肽段主动免疫新西兰大耳白兔制备并纯化抗体,利用Langendorff离体灌流系统观察其对大... 目的观察1~103nmol·L-1抗钠-钙交换体(NCX)α-1(106-145)肽段抗体对离体大鼠心功能的影响并分析其作用机制。方法用化学合成的NCXα-1(106-145)肽段主动免疫新西兰大耳白兔制备并纯化抗体,利用Langendorff离体灌流系统观察其对大鼠离体心功能的影响;利用全细胞膜片钳技术观察其对心肌细胞钠-钙交换电流、L-型钙电流、瞬时外向钾电流和内向整流钾电流的影响。结果经主动免疫后兔体内抗α-1(106-145)抗血清滴度明显升高,Protein A纯化后抗体浓度为13.1 g.L-1。与对照组相比,1~10 nmol·L-1α-1抗体可使大鼠离体心脏左室发展压(LVDP)和左室压最大上升速率(+dp/dtmax)明显增加(P<0.01),并使左室压最大下降速率(-dp/dtmax)减小(P<0.01),且KB-R7943(2μmol·L-1)可使α-1抗体(1 nmol·L-1)的上述效应进一步增强。然而,102~103nmol·L-1α-1抗体则可使大鼠离体心脏LVDP、±dp/dtmax呈不同程度地下降(P<0.01)。全细胞膜片钳实验结果表明,在1~103nmol·L-1浓度范围内,抗α-1抗体对大鼠心肌细胞外向和内向Na+/Ca2+交换电流均表现出剂量依赖性的抑制效应,对瞬时外向钾电流和内向整流钾电流均无明显影响。此外,102~103nmol·L-1α-1抗体对L-型钙电流也具有抑制作用。结论低浓度α-1抗体(1~10 nmol·L-1)可明显增强心肌收缩,这一效应与其在低浓度时专一性抑制Na+/Ca2+交换电流有关;高浓度α-1抗体(102~103nmol·L-1)则可同时抑制心肌收缩和舒张,该作用与其同时抑制Na+/Ca2+交换电流和L-型钙电流有关。 展开更多
关键词 -交换 心功能 全细胞膜片钳 -交换电流 L型电流 心脏
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钙库操纵钙内流和钠钙交换体在卡巴胆碱引起的气管平滑肌收缩中的作用 被引量:3
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作者 闫德俊 尹胜 +2 位作者 丁圣刚 沈兵 杜鹃 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第8期1137-1141,共5页
目的探讨钙库操纵钙内流(SOCE)和钠钙交换体(NCX)在卡巴胆碱引起的气管平滑肌收缩中的作用。方法采用小鼠离体气管实验,观察NCX特异性阻断剂KBR7943、电压依赖型钙通道阻断剂尼非地平、Orai1阻断剂BTP2对卡巴胆碱引起的气管收缩的抑制... 目的探讨钙库操纵钙内流(SOCE)和钠钙交换体(NCX)在卡巴胆碱引起的气管平滑肌收缩中的作用。方法采用小鼠离体气管实验,观察NCX特异性阻断剂KBR7943、电压依赖型钙通道阻断剂尼非地平、Orai1阻断剂BTP2对卡巴胆碱引起的气管收缩的抑制效应。结果 KBR7943和BTP2显著阻断了累积浓度卡巴胆碱引起的小鼠气管收缩和卡巴胆碱引起的SOCE介导的气管收缩,而尼非地平未显著阻断卡巴胆碱引起的气管收缩。结论 NCX和Orai1都参与介导卡巴胆碱引起的气管平滑肌收缩,Orai1主要参与卡巴胆碱引起的起始阶段的瞬时收缩,NCX主要参与后期的持续收缩,而起始阶段的Orai1介导的钙内流可能是激活NCX的前提条件,阻断Orai1的同时也会导致后期NCX引起的收缩阻断,两者共同参与介导卡巴胆碱引起的收缩。 展开更多
关键词 气管平滑肌 交换 库操纵的内流 卡巴胆碱
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钠钙交换体与肾缺血再灌注损伤 被引量:2
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作者 陈朝虎 庄华 +7 位作者 姚志强 汉大黎 常成 马忠义 孔祥斌 曹金龙 李攀 田俊强 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2019年第3期355-360,共6页
钠钙交换体(sodium calcium exchanger,NCX)是一种广泛分布于膜性结构(细胞质膜、线粒体膜和分泌小泡膜等)上的阳离子转运蛋白,具有前向模式和反向模式。通过这种双向模式,可以对胞质内的Ca^(2+)浓度进行快速精准的调节,继而影响细胞的... 钠钙交换体(sodium calcium exchanger,NCX)是一种广泛分布于膜性结构(细胞质膜、线粒体膜和分泌小泡膜等)上的阳离子转运蛋白,具有前向模式和反向模式。通过这种双向模式,可以对胞质内的Ca^(2+)浓度进行快速精准的调节,继而影响细胞的一系列生理活动。而肾缺血再灌注时,NCX反向模式的异常激活可介导细胞Ca^(2+)超载,进而触发一系列有害代谢反应导致细胞损伤和死亡。目前,选择性抑制NCX反向模式的苯氧基衍生物得到了较多研究,并成为治疗肾缺血再灌注损伤的新药物靶点。 展开更多
关键词 交换 肾缺血再灌注 超载 苯氧基衍生物
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钠钙交换体与射血分数保留型心力衰竭研究进展 被引量:2
13
作者 陈峰 黄鈺婷 +1 位作者 王笑 樊官伟 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2023年第12期1403-1408,共6页
钠钙交换体(sodium-calcium exchanger,NCX)由SCL8家族基因编码且属于阳离子反向转运蛋白家族一员,是一种广泛分布在膜结构上的阳离子转运蛋白,控制细胞钙的外流和内流,对维持细胞内钙浓度稳态及正常心功能起着关键作用;射血分数保留型... 钠钙交换体(sodium-calcium exchanger,NCX)由SCL8家族基因编码且属于阳离子反向转运蛋白家族一员,是一种广泛分布在膜结构上的阳离子转运蛋白,控制细胞钙的外流和内流,对维持细胞内钙浓度稳态及正常心功能起着关键作用;射血分数保留型心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)具有高发病率、高住院率和高死亡率的特点,且目前没有理想的治疗方法。在HFpEF中,NCX反向模式过表达,心脏的舒张功能受损,心肌细胞钙瞬变因HFpEF的病因不同而存在差异。目前,以NCX为靶点的多种特异性抑制剂,能特异性抑制钙内流改善HFpEF的舒张功能障碍,提高HFpEF模型存活率,积极开发靶向抑制NCX的化合物是一个重要的科学挑战。 展开更多
关键词 交换 射血分数保留型心力衰竭 交换抑制剂
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钠钙交换体及其抑制剂在脑缺血中的作用
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作者 曾雯君 沈磊 吴玉林 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2009年第2期237-240,共4页
在神经细胞中,钠钙交换体对胞内钙离子的调控起着非常重要的作用。缺血/再灌注使细胞外的钙通过钠钙交换体的反向模式内流,造成内钙超载,导致脑细胞损伤。现今,选择性抑制其反向模式的苄氧基苯基衍生物得到了较多的研究,并可能成为一个... 在神经细胞中,钠钙交换体对胞内钙离子的调控起着非常重要的作用。缺血/再灌注使细胞外的钙通过钠钙交换体的反向模式内流,造成内钙超载,导致脑细胞损伤。现今,选择性抑制其反向模式的苄氧基苯基衍生物得到了较多的研究,并可能成为一个新的治疗脑缺血的有潜力靶点。 展开更多
关键词 交换 反向模式 超载 交换抑制剂 脑缺血/再灌注
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抗钠-钙交换体α-2(840-877)单克隆抗体3F10的制备及其预处理对大鼠缺血性心律失常的抑制作用
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作者 王苗苗 陈依春 +2 位作者 白晓洁 马瑞君 封启龙 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第23期2827-2831,共5页
目的:制备和纯化抗钠-钙交换体(Na+-Ca 2+exchanger,NCX)α-2(840-877)单克隆抗体,并观察该抗体对大鼠缺血性心律失常的影响。方法:利用化学合成的NCXα-2(840-877)肽段为免疫原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术和间接ELISA法筛选,获得可... 目的:制备和纯化抗钠-钙交换体(Na+-Ca 2+exchanger,NCX)α-2(840-877)单克隆抗体,并观察该抗体对大鼠缺血性心律失常的影响。方法:利用化学合成的NCXα-2(840-877)肽段为免疫原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术和间接ELISA法筛选,获得可稳定分泌NCXα-2(840-877)单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过ELISA和SDS-PAGE等方法检测其效价和纯度。结扎冠脉左前降支建立大鼠缺血性心律失常模型。缺血前5 min用3F10(10μg/ml)抗体灌注离体心脏,在体实验经大鼠尾静脉注射3F10(50μg/kg)抗体,观察抗体大鼠室早数目、室速和室颤发生率和持续时间的影响。应用全细胞膜片钳技术观察3F10(10μg/ml)抗体对正常大鼠心肌细胞I Na/Ca的影响。结果:①成功制备并获得抗NCXα-2(840-877)单克隆抗体3F10,其效价和浓度分别为1∶40960、1.62 mg/ml。②3F10抗体预处理可明显抑制大鼠离体和在体缺血性心律失常的发生。缺血前5 min给予3F10(10μg/ml)抗体预处理后,离体心脏的室速、室颤的发生率分别由100%和77.78%降至25%和25%,其持续时间和室早的个数也明显减少(P<0.05)。在麻醉大鼠,当给予3F10(50μg/kg)抗体预处理后,与模型组相比,大鼠室速和室颤的发生率分别由100%和83.33%降至33.33%和33.33%,其持续时间及室早的数目均明显减少(P<0.05)。③膜片钳实验发现3F10抗体(10μg/ml)对I Na/Ca具有显著抑制作用。在钳制电位为+50 mV和-100 mV时,外向和内向I Na/Ca分别由(3.23±0.05)和(-50.57±0.13)pA/pF降至(2.14±0.03)和(-3.14±0.06)pA/pF(P<0.05)。结论:成功获得一株可稳定分泌抗NCXα-2(840-877)单克隆抗体的杂交瘤细胞株(3F10),该抗体预处理对大鼠缺血性心律失常具有显著抑制作用,推测其作用机制与抑制心肌I Na/Ca有关。 展开更多
关键词 缺血性心律失常 -交换 单克隆抗 全细胞膜片钳
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钠钙交换体阻滞剂CB-DMB对人胶质母细胞瘤细胞生长的抑制作用 被引量:1
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作者 刘景景 胡慧洁 +1 位作者 刘子楷 宋明柯 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期710-716,共7页
目的·研究钠钙交换体(Na^(+)/Ca^(2+)exchanger,NCX)阻滞剂对人胶质母细胞瘤生长的抑制作用。方法·体外培养人胶质母细胞瘤细胞(U87、U251、SF188)和星形胶质细胞,用NCX阻滞剂SN-6、YM244769、SEA0400、5-(N-4-氯苄基)-N-(2... 目的·研究钠钙交换体(Na^(+)/Ca^(2+)exchanger,NCX)阻滞剂对人胶质母细胞瘤生长的抑制作用。方法·体外培养人胶质母细胞瘤细胞(U87、U251、SF188)和星形胶质细胞,用NCX阻滞剂SN-6、YM244769、SEA0400、5-(N-4-氯苄基)-N-(2’,4’-二甲基)氨苯蝶啶(CB-DMB)以及化学治疗药物替莫唑胺(temozolomide,TMZ)处理细胞。SN-6、YM244769和SEA0400是NCX反向模式的选择性阻滞剂;CB-DMB是NCX双向模式的选择性阻滞剂,但优先阻滞NCX的正向模式;TMZ作为参考。CCK-8实验测定细胞生长活性,并分析药物对胶质母细胞瘤细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))。钙成像技术检测NCX阻滞剂处理后U87细胞内Ca^(2+)信号的变化,Western blotting检测促分裂原活化的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路蛋白的表达,流式细胞术检测NCX阻滞剂对细胞凋亡的影响。结果·CCK-8实验结果表明,与胶质母细胞瘤细胞(U87、U251、SF188)共孵育48 h后,NCX双向阻滞剂CB-DMB呈剂量依赖性地抑制肿瘤细胞的生长活性,IC_(50)值分别为2.06、2.19和1.82μmol/L;而NCX反向阻滞剂SN-6、YM244769和SEA0400对胶质母细胞瘤细胞的生长活性均无显著影响。CB-DMB对星形胶质细胞生长活性的影响较小。钙成像和Western blotting结果表明,CB-DMB通过阻滞NCX的正向模式导致U87细胞内Ca^(2+)增加,引起胞内钙超载,进而诱导U87细胞凋亡,并激活MAPK信号通路。流式细胞术结果表明,与TMZ相比,CB-DMB能够更快地引起U87细胞凋亡(P=0.002);CB-DMB与TMZ联合用药,增强了TMZ对肿瘤细胞生长活性的抑制作用。结论·CB-DMB对人胶质母细胞瘤的抑制作用可能与阻滞NCX的正向转运模式有关。细胞膜NCX可能成为胶质母细胞瘤治疗的潜在新靶点。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 交换 阻滞剂 5-(N-4-氯苄基)-N-(2’ 4’-二甲基)氨苯蝶啶(CB-DMB) 细胞凋亡 替莫唑胺
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钠钙交换体亚型2在大鼠逼尿肌细胞中的表达与功能
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作者 钟晓 王平贤 +3 位作者 胡文刚 王青青 李龙坤 黄赤兵 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期302-306,共5页
目的检测大鼠逼尿肌细胞是否表达钠钙交换体亚型2(NCX2),并测试其功能。方法 10只大鼠(7只雌性,3只雄性)为实验对象,取膀胱组织为实验组,大脑组织为对照组。首先利用急性酶分离技术,制备和培养大鼠逼尿肌细胞,再采用反转录-聚合酶链式... 目的检测大鼠逼尿肌细胞是否表达钠钙交换体亚型2(NCX2),并测试其功能。方法 10只大鼠(7只雌性,3只雄性)为实验对象,取膀胱组织为实验组,大脑组织为对照组。首先利用急性酶分离技术,制备和培养大鼠逼尿肌细胞,再采用反转录-聚合酶链式反应和免疫印迹技术,检测大鼠膀胱组织中是否表达NCX2基因及蛋白;免疫荧光技术进一步明确NCX2与逼尿肌细胞的关系;膜片钳技术测试逼尿肌细胞是否存在NCX2电流。结果首先制备了光镜下以梭形为主,免疫组化染色α-actin呈阳性的逼尿肌细胞;利用逆转录-聚合酶链式反应,在大鼠大脑组织、膀胱组织中分别发现NCX2 mRNA表达;免疫印迹技术在上述组织中检测NCX2的蛋白相对表达量,差异均未见统计学意义;免疫荧光双抗进一步证实NCX2蛋白与逼尿肌细胞共表达;膜片钳检测到逼尿肌细胞上的NCX2电流,电流密度为(0.79±0.45)p A/p F。结论发现NCX2表达于大鼠逼尿肌细胞,电生理证实NCX2具有维持逼尿肌细胞内钙离子平衡的能力,其生理作用需要进一步的探索。 展开更多
关键词 大鼠 膀胱 平滑肌 交换亚型2 膜片钳
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DMA对正常大鼠离体心脏和乳头肌的正性变力作用及其机制 被引量:2
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作者 师锐赞 高福平 +2 位作者 李洁 张明升 武冬梅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1609-1612,共4页
目的研究二甲基氨氯吡咪(dimethylamiloride,DMA)对正常大鼠离体心脏和乳头肌的正性变力作用,并探讨其机制。方法采用Langendorff心脏灌流和离体乳头肌灌流方法观察DMA的变力性作用,并应用L-型钙通道阻滞药和Na^+/Ca^2+交换体(sodi... 目的研究二甲基氨氯吡咪(dimethylamiloride,DMA)对正常大鼠离体心脏和乳头肌的正性变力作用,并探讨其机制。方法采用Langendorff心脏灌流和离体乳头肌灌流方法观察DMA的变力性作用,并应用L-型钙通道阻滞药和Na^+/Ca^2+交换体(sodium calcium exchanger,NCX)抑制剂探讨其作用机制。结果①1-20μmol·L^-1DMA对正常大鼠离体心脏产生正性变力作用,即增强左室主动收缩压(LVSP-LVDP)、左室压最大上升速率(+dp/dtmax)、左室压最大下降速率(-dp/dtmax);增强乳头肌收缩功能,即升高发展张力(TC),缩短收缩至最大速率的时间(T-dp/dtmax)。与用药前相比,差异有显著性(P〈0.05或P〈0.01)。②DMA的正性变力作用不能被L-型钙通道阻滞药尼卡地平(nicardipine)阻断。③NCX抑制剂氯化镍(NiCl2)可阻断DMA的正性变力作用。结论①(1-20)μmol·L^-1 DMA对正常大鼠离体心脏和乳头肌产生正性变力作用。②DMA正性变力作用与L-型钙通道无关。③DMA通过激动NCX产生正性变力作用。 展开更多
关键词 二甲基氨氯吡咪(DMA) 交换(ncx) 正性变力作用
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NCX1在肝癌中的表达、调控Ca^(2+)浓度及其对肝癌细胞增殖和迁移的影响 被引量:8
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作者 徐靖宇 江义霞 +3 位作者 谢睿 金海 文国容 庹必光 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期735-742,共8页
背景与目的:钠钙交换体亚型1(Na^+-Ca^(2+) exchanger isoform 1,NCX1)可通过对细胞Ca2+平衡的调节参与癌症的发生,但是否参与肝癌的发生、发展及其作用机制的研究鲜见报道。该研究旨在探讨NCX1在肝癌中的表达变化,对人肝癌细胞HepG2增... 背景与目的:钠钙交换体亚型1(Na^+-Ca^(2+) exchanger isoform 1,NCX1)可通过对细胞Ca2+平衡的调节参与癌症的发生,但是否参与肝癌的发生、发展及其作用机制的研究鲜见报道。该研究旨在探讨NCX1在肝癌中的表达变化,对人肝癌细胞HepG2增殖、迁移能力的影响及其可能的机制。方法:运用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测NCX1 m RNA及蛋白在人正常肝细胞株LO2、肝癌细胞株HepG2、人正常肝组织和原发性肝细胞癌患者癌组织中的表达。采用共聚焦显微镜技术观察NCX1在细胞外无钠溶液刺激活化后,对正常肝细胞LO2及肝癌细胞HepG2中钙离子浓度的调控。采用MTT法、细胞划痕实验检测NCXl特异性的阻断剂KB-R7943对人肝癌细胞HepG2增殖、迁移的影响。结果:在肝癌细胞株HepG2和肝细胞癌组织中,NCX1 m RNA和蛋白质的表达均高于正常肝细胞株LO2和正常肝组织(P<0.05)。共聚焦显微镜实验发现,细胞外无钠溶液可以激活细胞内钙升高,正常肝细胞LO2及肝癌细胞HepG2细胞内钙离子浓度均增高,但肝癌细胞HepG2细胞内钙离子增高的幅值明显高于LO2细胞(P<0.05),NCXl特异性阻断剂KB-R7943可以显著阻断胞外无钠诱导的细胞内钙离子升高(P<0.05)。KB-R7943可以显著抑制肝癌细胞HepG2的增殖及迁移(P<0.05)。结论:原发性肝癌中NCX1的表达量上调,NCX1的活化可以调节细胞内钙变化,抑制NCX1的活性可以进一步抑制肝癌细胞的增殖和迁移。这提示NCX1可能在原发性肝癌的发生、发展中起了重要的作用。 展开更多
关键词 交换亚型1 离子 肝细胞癌 细胞增殖 细胞迁移 KB—R7943
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NCX α1重复序列短肽主动免疫大鼠对心脏结构和功能的影响 被引量:4
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作者 白晓洁 封启龙 +1 位作者 刘慧 吴博威 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期303-305,共3页
目的:观察钠钙交换体(NCX)α1重复序列中胞外环124HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF145合成肽段长期主动免疫大鼠对其心脏结构和功能的影响。方法:选用2月龄健康Wistar雄性大鼠,以NCXα1重复序列中胞外环124HNFTAGDLGP-STIVGSAAFNMF145合成肽段... 目的:观察钠钙交换体(NCX)α1重复序列中胞外环124HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF145合成肽段长期主动免疫大鼠对其心脏结构和功能的影响。方法:选用2月龄健康Wistar雄性大鼠,以NCXα1重复序列中胞外环124HNFTAGDLGP-STIVGSAAFNMF145合成肽段对其进行主动免疫,对照组给予同等剂量佐剂。连续免疫12周。用ELISA法监测抗体滴度。实验结束后经Langendorff离体心脏灌流方法检测其心脏功能(左心室主动发展压LVSP-LVDP,收缩最大速率+dp/dtmax,舒张最大速率-dp/dtmax)。组织病理切片观察心室肌细胞的结构的变化。结果:免疫组所有大鼠均产生了较高浓度的特异性抗体;与对照组相比,免疫组大鼠心脏功能指标(LVSP-LVDP,+dp/dtmax,-dp/dtmax)均明显增强(P<0.05)。HE染色切片显示对照组心肌纤维排列整齐、致密、且纤维连续性较好。免疫组心肌纤维排列紊乱,部分可见肌原纤维断裂,细胞间有淋巴细胞浸润。结论:钠钙交换体(NCX)α1重复序列中胞外环124HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF145合成肽段长期主动免疫大鼠可以同时加强心脏的收缩和舒张功能,但是长期高滴度的抗体存在可以造成心肌结构损伤。 展开更多
关键词 交换 主动免疫 心功能 心肌结构
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