钠碘同向转运体表达与功能调控的研究进展 被引量：2

1

作者 喻浩威 丛馨 苏家增 《生理科学进展》 CAS 北大核心 2024年第4期334-339,共6页

钠碘同向转运体(sodium iodine symporter)广泛分布于人体各个器官,是器官转运I-的结构和功能基础。钠碘同向转运体主要表达在细胞的基底侧膜上,为各种生命活动提供所需的I-。目前已知,钠碘同向转运体的调控机制涉及激素、细胞因子、转... 钠碘同向转运体(sodium iodine symporter)广泛分布于人体各个器官,是器官转运I-的结构和功能基础。钠碘同向转运体主要表达在细胞的基底侧膜上,为各种生命活动提供所需的I-。目前已知,钠碘同向转运体的调控机制涉及激素、细胞因子、转录因子及信号分子的作用。此外,钠碘同向转运体作为甲状腺癌的重要治疗靶点逐渐受到关注,然而在治疗过程中唾液腺等其他器官吸收放射性碘而产生的并发症也值得重视。本文重点综述了钠碘同向转运体的表达、作用及其调控机制的研究进展,旨在为临床干预钠碘同向转运体异常相关疾病进程提供新思路。 展开更多

关键词 钠碘同向转运体 甲状腺 乳腺 唾液腺

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高碘摄入对SD大鼠钠/碘同向转运体蛋白表达影响的免疫组化研究 被引量：3

2

作者 王微波 滕卫平 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期399-400,408,共3页

目的:动态观察长期高碘摄入对SD大鼠甲状腺细胞钠/碘同向转运体(NIS)蛋白表达的影响。方法:SD大鼠分别饲以去离子水及不同碘浓度的碘化钾水,给碘后1 d及1,2,4,8周处死。测定尿碘、组织碘含量,免疫组织化学方法观察甲状腺细胞NIS蛋白表... 目的:动态观察长期高碘摄入对SD大鼠甲状腺细胞钠/碘同向转运体(NIS)蛋白表达的影响。方法:SD大鼠分别饲以去离子水及不同碘浓度的碘化钾水,给碘后1 d及1,2,4,8周处死。测定尿碘、组织碘含量,免疫组织化学方法观察甲状腺细胞NIS蛋白表达水平。结果:高碘摄入可引起甲状腺滤泡细胞膜表面NIS蛋白表达的下降。短期较低浓度的高碘摄入对NIS蛋白的表达无明显影响,而较高浓度的碘摄入则引起NIS蛋白表达的明显减少;长期高碘摄入对NIS蛋白表达的抑制作用,可在机体自我调节机制作用下得以部分恢复,但NIS蛋白表达仍处较低水平。结论:高碘摄入可导致甲状腺细胞表面NIS蛋白表达下降,随摄碘浓度的增加抑制作用增强;不同浓度的碘摄入对NIS蛋白表达的抑制作用表达时间不同。 展开更多

关键词 碘 钠/碘同向转运体 甲状腺

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钠碘转运体与分化型甲状腺癌 被引量：3

3

作者 袁耿彪 匡安仁 《中国介入影像与治疗学》 CSCD 2005年第1期6-9,共4页

钠碘转运体 (NIS)是甲状腺滤泡细胞基底膜上的一种糖蛋白 ,具有选择性和主动性转运碘 (I-)到甲状腺滤泡细胞内的功能。NIS不仅存在于甲状腺 ,也存在于腮腺、胃黏膜、乳腺等多种组织。有报道 ,将NIS基因转染到NIS低表达的甲状腺癌细胞和... 钠碘转运体 (NIS)是甲状腺滤泡细胞基底膜上的一种糖蛋白 ,具有选择性和主动性转运碘 (I-)到甲状腺滤泡细胞内的功能。NIS不仅存在于甲状腺 ,也存在于腮腺、胃黏膜、乳腺等多种组织。有报道 ,将NIS基因转染到NIS低表达的甲状腺癌细胞和其他类型的肿瘤细胞内 ,肿瘤细胞表达NIS ,增加了13 1I的摄取。在分化型甲状腺癌 (DTC)和其他肿瘤 ,13 展开更多

关键词 钠碘转运体 分化型甲状腺癌 放射性碘 nis 肿瘤

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碘化钠对甲状腺细胞钠/碘转运体基因调节的研究

4

作者 刘超 李倩 +3 位作者 段宇 覃又文 刘翠萍 武晓泓 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期115-115,共1页

目的　研究碘化钠对甲状腺细胞膜上钠 /碘转运体 (NIS)基因表达的影响 ,探讨其在甲状腺功能调控和甲状腺疾病发病与治疗中的作用和地位。方法　新鲜甲状腺组织去除包膜并反复洗涤后剪成 1mm左右的碎块 ,以 2 .5 g·L-1胰酶及 0 .3g&... 目的　研究碘化钠对甲状腺细胞膜上钠 /碘转运体 (NIS)基因表达的影响 ,探讨其在甲状腺功能调控和甲状腺疾病发病与治疗中的作用和地位。方法　新鲜甲状腺组织去除包膜并反复洗涤后剪成 1mm左右的碎块 ,以 2 .5 g·L-1胰酶及 0 .3g·L-1胶原酶消化 ,过筛后用含 15 % (体积分数 )小牛血清和适量抗生素的Eagle营养液调整细胞浓度 ,置培养瓶 ,放 37℃含 5 %CO2 (体积分数 )的细胞培养箱中孵育 ,隔天换液 1次 ,5天后以不同浓度 (0、10 -8、10 -6、10 -4)mol·L-1的碘化钠刺激单层培养的甲状腺原代细胞 ,72h后再用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测甲状腺细胞NISmRNA含量的变化 ,组间差异采用方差分析 ,用国际通用的SAS系统软件进行处理。结果　碘化钠浓度为 10 -8mol·L-1时较空白对照组NIS基因表达受到轻度抑制 ,但无统计学意义 ;当浓度为 10 -6mol·L-1、10 -4mol·L-1时明显抑制NIS基因的表达。结论　钠 /碘转运体是位于甲状腺细胞基底膜上的一类膜抗原 ,在甲状腺对碘的主动转运过程中发挥重要作用。碘化钠呈剂量依赖性地降低甲状腺细胞基底膜上NIS基因的表达 ,表明高碘抑制甲状腺细胞对碘的摄取能力 ,在甲状腺疾病的发生、发展。 展开更多

关键词 碘化钠 甲状腺细胞 钠转运体 碘转运体 基因调节 nis 甲状腺疾病

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抗人钠碘转运体单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立与鉴定

5

作者 袁庆新 刘超 +2 位作者 段宇 仇镇宁 管晓红 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期108-108,共1页

目的　利用合成短肽制备抗人钠碘转运体 (NIS)单克隆抗体。方法　以人NIS蛋白质的两个片段 (第 2膜外段和第14f段 )为抗原免疫小鼠 ,运用杂交瘤技术 ,制备鼠抗人NIS单克隆抗体 (rhNISMAb) ,然后采用小鼠Ig亚类测定试剂条测定单抗的亚类 ... 目的　利用合成短肽制备抗人钠碘转运体 (NIS)单克隆抗体。方法　以人NIS蛋白质的两个片段 (第 2膜外段和第14f段 )为抗原免疫小鼠 ,运用杂交瘤技术 ,制备鼠抗人NIS单克隆抗体 (rhNISMAb) ,然后采用小鼠Ig亚类测定试剂条测定单抗的亚类 ,并通过ELISA、Western blot、免疫组化染色等技术鉴定其特异性。结果　运用杂交瘤技术成功地制备出能稳定分泌抗人NIS单克隆抗体的细胞系。Western blot分析表明 :此单抗所识别的靶分子的相对分子量主要在 97KD ,免疫组化染色显示 :甲状腺滤泡细胞膜上有棕黄色着色 ,以基底侧最为明显。结论　成功地制备出抗人NIS单克隆抗体 ,为NIS抗原 展开更多

关键词 单克隆抗体 杂交瘤 抗人钠转运体 单克隆抗体 人nis蛋白质 甲状腺滤泡细胞膜 nis抗原 合成短肽 抗人碘转运体

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杆状病毒载体介导钠碘转运体基因放射治疗肝癌的实验研究

6

作者 乌海飞 刘帅 +5 位作者 潘昱 周翔 尹红燕 李彪 江旭峰 张一帆 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期560-566,共7页

目的探讨以杆状病毒为载体、钠碘转运体(NIS)基因介导131I放射治疗肝细胞癌的可行性。方法通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统制备重组的绿色荧光蛋白(GFP)和NIS基因杆状病毒(Bac-GFP和Bac-NIS)。采用流式细胞仪检测在有无丁酸钠条件下HepG... 目的探讨以杆状病毒为载体、钠碘转运体(NIS)基因介导131I放射治疗肝细胞癌的可行性。方法通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统制备重组的绿色荧光蛋白(GFP)和NIS基因杆状病毒(Bac-GFP和Bac-NIS)。采用流式细胞仪检测在有无丁酸钠条件下HepG2细胞的感染效率和荧光表达强度,以及在高感染复数(MOI)杆状病毒条件下对HepG2细胞的毒性。进行Bac-NIS感染HepG2细胞的动态摄碘实验和高氯酸钠(NaClO4)摄碘抑制实验,以及Bac-NIS感染HepG2细胞的131I杀伤细胞克隆形成实验。结果 HepG2的感染效率和荧光强度随着Bac-GFP MOI的增加而增加,Bac-GFP对HepG2具有较高的感染效率(MOI=200时,感染效率为65%),丁酸钠可进一步提高HepG2的感染效率。在高MOI(MOI=400)条件下,未见Bac-GFP对HepG2的细胞毒性作用,与对照组(MOI=0)比较差异无统计学意义(P>0.05)。Bac-NIS感染的HepG2细胞表现出摄碘功能和NaClO4抑制的特性。细胞克隆形成实验表明,Bac-NIS感染的HepG2细胞克隆存活率明显低于Bac-GFP感染的HepG2细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Bac-NIS可有效介导肝癌细胞的碘摄取,高效杀伤肿瘤细胞,为肝癌细胞的靶向基因放射治疗提供了实验基础。 展开更多

关键词 杆状病毒 钠碘同向转运体 肝细胞癌 基因治疗 放射治疗

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重组杆状病毒载体介导钠碘转运体基因在胰岛细胞中表达的研究

7

作者 刘帅 潘昱 张一帆 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期263-268,共6页

目的探讨以杆状病毒为载体,钠碘同向转运体(NIS)基因作为报告基因监测胰岛细胞的可行性。方法通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统制备绿色荧光蛋白(GFP)和NIS基因重组杆状病毒(Bac-GFP和Bac-NIS)。分别以不同感染复数(MOI)的Bac-GFP感染大... 目的探讨以杆状病毒为载体,钠碘同向转运体(NIS)基因作为报告基因监测胰岛细胞的可行性。方法通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统制备绿色荧光蛋白(GFP)和NIS基因重组杆状病毒(Bac-GFP和Bac-NIS)。分别以不同感染复数(MOI)的Bac-GFP感染大鼠胰岛细胞,荧光显微镜观察胰岛细胞的感染百分比和荧光表达强度;以MOI为40的Bac-GFP感染胰岛细胞,荧光显微镜下观察荧光表达时间及细胞生存状态。以不同MOI的Bac-NIS感染胰岛细胞,测定感染细胞的碘摄取情况;以MOI为40的Bac-NIS感染胰岛细胞,动态观察感染细胞摄碘能力的变化以及高氯酸钠(NaClO4)对细胞摄碘的影响。结果 Bac-GFP可高效感染SD大鼠胰岛细胞,对细胞无毒性作用;感染的胰岛细胞百分比和荧光强度随MOI的提高而上升,细胞感染百分比可高达95%以上(MOI=40),且荧光表达时间可持续2周左右。Bac-NIS感染的胰岛细胞表现出摄碘功能增强和NaClO4抑制摄碘的特性,且感染细胞摄碘的放射性计数随MOI的提高而增加;MOI为40时,Bac-NIS感染细胞摄碘的放射性计数是空白对照的12倍。结论杆状病毒介导的NIS基因在胰岛细胞中高效表达,有效介导放射性碘摄取,可用对胰岛细胞移植情况的监测。 展开更多

关键词 杆状病毒 钠碘同向转运体 胰岛细胞 报告基因

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hNIS转基因介导^(131)碘对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：5

8

作者 钟兴 弓健 +1 位作者 曾祥凤 徐浩 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期387-392,共6页

目的:克隆人的甲状腺钠/碘同向转运体(hNIS)基因,研究其转导在鼻咽癌细胞内的功能,以及131碘对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用逆转录和聚合酶链反应(RT-PCR)从毒性弥漫性甲状腺肿(Graves病)病人的甲状腺组织中扩增得到hNIS的可... 目的:克隆人的甲状腺钠/碘同向转运体(hNIS)基因,研究其转导在鼻咽癌细胞内的功能,以及131碘对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用逆转录和聚合酶链反应(RT-PCR)从毒性弥漫性甲状腺肿(Graves病)病人的甲状腺组织中扩增得到hNIS的可编码区基因,并克隆到pcDNA3.1(+)-FLAG载体,获得重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-hNIS-FLAG。采用脂质体转染的方法,将pcDNA3.1(+)-hNIS-FLAG质粒导入到鼻咽癌细胞株CNE2,G418筛选得到稳定表达hNIS鼻咽癌细胞系CNE2-hNIS,体外培养条件下检测其对放射性碘的摄取和外流情况。CCK8试剂盒检测131碘对鼻咽癌细胞增殖的作用,AnnexinⅤ-FITC/PI双标记流式细胞技术(FCM)检测131碘作用后鼻咽癌细胞凋亡情况。结果:成功克隆hNIS基因,并建立能稳定表达hNIS的鼻咽癌细胞系CNE2-hNIS。CNE2-hNIS对125碘的吸收量比CNE2高约15倍,但在无碘的环境中,细胞内滞留的碘外流迅速,有效半衰期约8min。131碘在72 h后对CNE2-hNIS的增殖产生抑制作用,细胞早期凋亡率增加,并随着131碘浓度的增加,作用逐渐增强(P<0.01)。结论:从Graves病人的甲状腺组织中克隆的hNIS基因转染鼻咽癌细胞后,能使鼻咽癌细胞发挥高水平吸碘功能,131碘能够抑制转染hNIS的鼻咽癌细胞的增殖,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 人钠/碘同向转运体 基因转染 碘放射性同位素

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siRNA沉默survivin增强hNIS转染的鼻咽癌细胞株对^(131)碘的敏感性 被引量：2

9

作者 钟兴 弓健 +1 位作者 郭斌 徐浩 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期246-250,共5页

目的:研究Survivin特异性小片段干扰RNA(siRNA)能否增强人钠碘同向转运体(hNIS)转染的鼻咽癌细胞株(CNE-2-hNIS)对131碘的放射敏感性.方法:设计并合成针对survivin基因的特异性siRNA,利用脂质体法转染CNE-2-hNIS细胞,通过实时荧光定量... 目的:研究Survivin特异性小片段干扰RNA(siRNA)能否增强人钠碘同向转运体(hNIS)转染的鼻咽癌细胞株(CNE-2-hNIS)对131碘的放射敏感性.方法:设计并合成针对survivin基因的特异性siRNA,利用脂质体法转染CNE-2-hNIS细胞,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和Westernblot方法检测细胞survivin基因沉默效果.CCK-8、克隆形成实验和Annexin VFITC/PI双染流式细胞仪检测131碘孵育后对细胞增殖和凋亡的影响.结果:SurvivinsiRNA转染CNE-2-hNIS细胞72h后,细胞的survivin基因mRNA和蛋白表达明显降低,Si-survivin组较SiRNA-NC组细胞增殖率降低,131碘孵育后,Si-survivin组较SiRNA-NC组细胞增殖率降低,凋亡率增高,差别有统计学意义(P<0.05).结论:Survivin特异性siRNA能显著沉默CNE-2-hNIS细胞的survivin基因的表达,增加CNE-2-hNIS对131碘的放射敏感性. 展开更多

关键词 SURVIVIN RNA干扰 鼻咽癌 钠/碘同向转运体 碘放射性同位素

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hTPO和hNIS共转染肺癌细胞系H460介导放射性碘摄取的研究 被引量：1

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作者 李玮 谭建 龙雷 《中国肺癌杂志》 CAS 2010年第6期575-579,共5页

背景与目的肺癌严重危害人类生命和健康,目前国内外肺癌的发病率和死亡率仍在不断上升。尤其是非小细胞肺癌(non-small cell lungcacer,NSCLC)治疗效果多年来一直没有显著提高。本研究旨在将人甲状腺过氧化物酶(hTPO)基因及人钠碘转运体... 背景与目的肺癌严重危害人类生命和健康,目前国内外肺癌的发病率和死亡率仍在不断上升。尤其是非小细胞肺癌(non-small cell lungcacer,NSCLC)治疗效果多年来一直没有显著提高。本研究旨在将人甲状腺过氧化物酶(hTPO)基因及人钠碘转运体(hNIS)基因共转入肺癌细胞系后研究其摄碘能力的变化。方法克隆,重组,包装并扩增纯化得到重组腺病毒(AdTPO),测定病毒滴度,Western blot检测重组腺病毒的表达。使用脂质体转染法将hNIS基因转染入人肺癌细胞系H460中,经G418抗生素筛选获得稳定表达hNIS的细胞系hNIS-H460,为hNIS-H460组;使用重组腺病毒将hTPO基因转导入hNIS-H460中,使肺癌细胞系获得hTPO基因,为AdTPO-hNIS-H460组;未转入hTPO和hNIS的细胞为对照组(H460)。然后进行三组稳定表达细胞系的体外摄125I实验。三组间两两比较用q检验(Newman-Keuls法)。结果AdTPO-hNIS-H460细胞、hNIS-H460细胞和H460细胞所摄取125I分别为(59637.67±1281.13)、(48622.17±2242.28.)和(1440.17±372.86)计数·min-1。三组间总体具有统计学差异(P<0.01)。AdTPO-hNIS-H460组较对照组(H460)摄125I能力增高约41倍(P<0.01),hNIS-H460组较对照组(H460)摄碘能力增高约34倍(P<0.01)。AdTPO-hNIS-H460组较hNIS-H460组高约1.2倍(P<0.01)。结论将hTPO和hNIS基因共转染至肺癌细胞系H460后,可有效提高H460的摄碘能力。 展开更多

关键词 钠/碘同向转运体 甲状腺过氧化物酶 重组腺病毒 基因治疗 放射性核素治疗

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重组pDC316-MCMV/hNIS真核表达质粒的构建及在肿瘤细胞的功能 被引量：4

11

作者 周泉波 陈汝福 +3 位作者 李志花 周嘉嘉 唐启彬 陈积圣 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期383-386,407,共5页

【目的】克隆人的钠/碘同向转运体(hNIS)基因可编码序列,并研究其在非甲状腺肿瘤细胞内的功能表达。【方法】利用逆转录和聚合酶链反应(RT-PCR)从毒性弥漫性甲状腺肿(又称Graves病)病人的甲状腺组织中扩增得到NIS的可编码区基因,并克隆... 【目的】克隆人的钠/碘同向转运体(hNIS)基因可编码序列,并研究其在非甲状腺肿瘤细胞内的功能表达。【方法】利用逆转录和聚合酶链反应(RT-PCR)从毒性弥漫性甲状腺肿(又称Graves病)病人的甲状腺组织中扩增得到NIS的可编码区基因,并克隆到T载体,测序后亚克隆到腺病毒载体穿梭质粒pDC316载体上,获得重组真核表达质粒载体pDC316-MCMV/hNIS。采用脂质体转染的方法,把pDC316-MCMV/hNIS重组质粒(实验组)或pDC316空质粒(对照组)分别导入到胰腺癌细胞株CAPAN-Ⅱ细胞、PANC-1细胞和卵巢癌细胞株SK-OV-3细胞,转染后48h采用RT-PCR方法检测转染细胞内的hNIS mRNA水平,转染后第2、3、4天分别检测肿瘤细胞对125I的吸收功能。【结果】序列分析结果证实克隆片段与文献报道的hNIS基因cDNA序列完全一致。实验组转染后48h,在CAPAN-Ⅱ细胞、PANC-1细胞及SK-OV-3细胞内均能检测到hNIS mRNA高水平表达,对照组基本无hNIS mRNA表达。转染后第3天细胞吸碘达到高峰,实验组CAPAN-Ⅱ细胞、PANC-1细胞和SK-OV-3细胞对125I的吸收量分别比对照组高24倍、17倍和13倍。【结论】从Graves病人的甲状腺组织中克隆的hNIS基因转染肿瘤细胞后,能使肿瘤细胞发挥高水平吸碘功能,为进一步运用放射性核素体内靶向治疗非甲状腺肿瘤奠定了基础。 展开更多

关键词 人钠/碘同向转运体 逆转录聚合酶链反应 基因转染 碘放射性同位素

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hNIS/TK基因共转染介导^(131)Ⅰ/GCV对肝癌细胞株的毒性作用

12

作者 郭国英 陈立波 +2 位作者 刘天津 郭礼和 朱瑞森 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期826-831,共6页

背景与目的:与传统的单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpessimplex virus thymidine kinase,HSV-TK)/丙氧鸟苷(ganci clovir,GCV)肿瘤自杀系统相比,人钠/碘同向转运体(human sodium-iodidesymporter,hNIS)是近年来发现的新型治疗基因。然而,两... 背景与目的:与传统的单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpessimplex virus thymidine kinase,HSV-TK)/丙氧鸟苷(ganci clovir,GCV)肿瘤自杀系统相比,人钠/碘同向转运体(human sodium-iodidesymporter,hNIS)是近年来发现的新型治疗基因。然而,两者的疗效尚需进一步提高。本研究旨在探索hNIS介导的放射性核素体系与HSV TK/GCV自杀基因体系对肝癌细胞的联合毒性作用。方法:构建EF1-α启动子调控下的hNIS的表达载体与CMV启动予调控下的GFP和HSV-TK共表达载体,慢病毒包装后转染肝癌细胞HepG2,荧光显微镜下观察重组肿瘤细胞HepG2/NTG荧光蛋白的表达;采用RT-PCR技术进一步检测目的基因hNIS和HSV-TK的表达情况;MTT检测GCV对HepG2/NTG的杀伤作用;摄碘试验及流出试验评价HepG2/NTG对碘的摄取及滞留情况;最后通过克隆形成实验评价GCV和^(131)I对HepG2/NTG的单独及联合杀伤作用。结果:RT-PCR技术、荧光显像证实hNIS、GFP和HSV-TK基因在肝癌细胞中成功表达;与对照组相比,HepG2/NTG的摄碘高出76倍,20 mi n摄碘率最高,其后表现出碘外流,有效半衰期不到10 min,同时这种碘摄取能被NaC1O_4特异性抑制。GCV或^(131)I对HepG2/NTG的毒性作用呈现剂量依赖性:50μg/mL GCV作用72 h后,实验组细胞的存活率仅为(33.98±2.71)%;放射性浓度为7.4 MBq/mL的^(131)I处理7 h后,细胞的存活率仅为(41.17±0.72)%;GCV和^(131)I联合作用后,细胞的存活率仅为(8.55±1.22)%,较单一药物作用细胞存活率下降了6倍。结论:^(131)I/GCV对重组肝癌细胞产生显著的毒性作用,提示慢病毒介导hNIS/TK基因共转染介导肿瘤的放射化学治疗是可行的。 展开更多

关键词 放射治疗 基因治疗 肝癌 钠/碘同向转运体 单纯疱疹病毒胸苷激酶

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基于hNIS基因的辐射正反馈重组杆状病毒体系制备

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作者 郭睿 李彪 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1566-1572,共7页

目的构建含早期生长应答因子1(Egr1)辐射敏感启动子调控的人钠碘同向转运体(hNIS)基因重组杆状病毒,为进一步延长核素在细胞中的滞留时间,提高hNIS介导的恶性肿瘤放射性核素基因靶向治疗疗效提供理论基础。方法空载体pFB取自质粒pFB-CMV... 目的构建含早期生长应答因子1(Egr1)辐射敏感启动子调控的人钠碘同向转运体(hNIS)基因重组杆状病毒,为进一步延长核素在细胞中的滞留时间,提高hNIS介导的恶性肿瘤放射性核素基因靶向治疗疗效提供理论基础。方法空载体pFB取自质粒pFB-CMV-EGFP,Egr1启动子取自质粒PGL3-Egr1-luc,hNIS取自质粒pcDNA3.1-CMV-hNIS,构建重组杆状病毒载体质粒pFB-Egr1-Hnis;同时构建含CMV启动子的质粒pFB-CMV-hNIS作为阳性对照,并将杆状病毒空载体质粒pFB-0作为阴性对照。随后制备各组杆状病毒,扩增收集重组杆状病毒并进行滴度测定。为进一步鉴定病毒功能,一方面通过体外感染U87脑胶质瘤细胞并采用131I刺激,通过免疫荧光检测131I刺激后的hNIS蛋白表达;另一方面通过摄碘实验进一步验证所表达的hNIS蛋白的摄碘功能和特性。结果成功构建重组杆状病毒载体质粒pFB-Egr1-hNIS和pFB-CMV-hNIS;转座成功并提取了重组Bacmid;重组Bacmid转染Sf 9细胞后扩增收集的重组杆状病毒滴度可以达到1×1010pfu/mL。体外感染U87细胞后,免疫荧光检测表明131I刺激后可增加hNIS的表达,感染细胞表达的hNIS蛋白位于细胞膜上,且具有摄碘的功能。结论成功构建了重组杆状病毒载体质粒pFB-Egr1-hNIS及pFB-CMV-hNIS,获得高滴度的重组杆状病毒Bac-Egr1-hNIS、Bac-CMV-hNIS和Bac-0并得到验证;建立了基于hNIS基因的辐射正反馈重组杆状病毒体系,为进一步提高核素靶向治疗疗效奠定了重要的理论基础。 展开更多

关键词 人钠碘同向转运体 早期生长应答因子1 重组杆状病毒 正反馈

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NIS mRNA在分化型甲状腺癌中的表达及其临床意义 被引量：3

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作者 许建林 梁晓燕 +2 位作者 南永刚 赵华 施常备 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期260-263,共4页

目的观察钠碘同向转运体（sodium/iodide symporter,NIS）mRNA在分化型甲状腺癌组织中的表达,并进一步探讨其在分化型甲状腺癌诊治中的作用和价值。方法利用实时荧光定量PCR方法观察NIS mRNA在21例结节性甲状腺肿、45例分化型甲状腺癌... 目的观察钠碘同向转运体（sodium/iodide symporter,NIS）mRNA在分化型甲状腺癌组织中的表达,并进一步探讨其在分化型甲状腺癌诊治中的作用和价值。方法利用实时荧光定量PCR方法观察NIS mRNA在21例结节性甲状腺肿、45例分化型甲状腺癌（包含35例甲状腺乳头状癌和10例甲状腺滤泡状癌）组织中的表达,分析NIS转录表达与甲状腺癌各临床病理参数之间的关系。结果与良性结节性甲状腺肿相比,分化型甲状腺癌组织中NIS mRNA表达显著下降（P〈0.05）。NIS mRNA表达虽然与分化型甲状腺癌患者的年龄、性别、肿瘤大小以及组织病理学类型无关,但与颈淋巴结转移以及与肿瘤临床AJCC分期密切相关（P〈0.05）。有颈淋巴结转移组患者NIS mRNA表达量比无淋巴结转移组显著下降（P〈0.05）。此外,Ⅲ~Ⅳ期肿瘤患者癌组织NIS mRNA表达量比Ⅰ~Ⅱ期显著下降（P〈0.05）。结论 NIS表达差异可以为分化型甲状腺癌个性化放射性碘治疗提供依据。 展开更多

关键词 分化型甲状腺癌 钠碘同向转运体(nis) 放射性碘治疗 实时荧光定量PCR

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二甲双胍对甲状腺功能减退大鼠甲状腺激素的影响 被引量：4

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作者 薛嵩 王超群 +1 位作者 邹俊杰 刘志民 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期589-594,共6页

目的探讨二甲双胍对甲状腺功能减退大鼠甲状腺激素水平的影响及其机制。方法取3个月龄雄性SD大鼠36只,随机分为正常对照(NC)组、甲状腺功能减退(HT)组、二甲双胍(Met)组。HT组和Met组以含0.01%氨基三唑的饮用水喂养大鼠4周制备甲状腺功... 目的探讨二甲双胍对甲状腺功能减退大鼠甲状腺激素水平的影响及其机制。方法取3个月龄雄性SD大鼠36只,随机分为正常对照(NC)组、甲状腺功能减退(HT)组、二甲双胍(Met)组。HT组和Met组以含0.01%氨基三唑的饮用水喂养大鼠4周制备甲状腺功能减退大鼠模型,NC组大鼠喂养普通饮用水。造模成功后,Met组用200 mg/kg二甲双胍灌胃,HT组和NC组用等体积0.05%羟甲基纤维素钠(CMC-Na)灌胃。于灌胃第8周时对3组大鼠甲状腺组织行H-E染色,采用q PCR检测下丘脑促甲状腺激素释放激素前体(pro TRH)mRNA的表达;于灌胃第8、12周时采用电化学发光法检测3组大鼠血清T3、T4水平,采用q PCR和蛋白质印迹法检测甲状腺组织钠碘同向转运体(NIS)mRNA和蛋白表达。结果在灌胃8、12周时,HT组大鼠血清T3、T4水平均低于NC组,而Met组T3、T4水平均高于HT组(P<0.05)。灌胃8周时,H-E染色结果显示NC组滤泡大小不等,内见大量胶质及吸收空泡;HT组大鼠甲状腺滤泡缩小,滤泡上皮成柱状,滤泡周围吸收空泡减少;Met组滤泡上皮增生较HT组稍改善。灌胃8周时,q PCR结果显示HT组大鼠下丘脑pro TRH和甲状腺组织NIS mRNA表达均高于NC组,而Met组均低于HT组(P<0.05);蛋白质印迹法检测结果显示Met组NIS蛋白表达低于HT组(P<0.05),而HT组和NC组NIS蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。灌胃12周时,HT组和Met组甲状腺组织NIS mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),Met组NIS蛋白表达高于HT组(P<0.05)。结论二甲双胍能升高甲状腺功能减退大鼠的甲状腺激素水平,但短期内并不是由甲状腺NIS表达升高所致。 展开更多

关键词 甲状腺 二甲双胍 甲状腺激素类 甲状腺功能减退症 钠碘同向转运体

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