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钙激活中性蛋白酶-2对肝癌细胞阿霉素耐药性的影响 被引量：1
1
作者 徐国强 唐佳艳 +5 位作者 向敏 王艳 洪阳 胡晓霞 王旭东 陈腾祥 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1108-1111,共4页
目的观察阿霉素作用下,钙激活中性蛋白酶-2(cal-pain-2)在肝癌细胞(HepG2)中的表达及其对细胞存活率的影响,评价其作为抗癌药靶的可能性。方法以倍比稀释的ADM作用于HepG2细胞,用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)实验检测阿霉素(Adriamycin,ADM)... 目的观察阿霉素作用下,钙激活中性蛋白酶-2(cal-pain-2)在肝癌细胞(HepG2)中的表达及其对细胞存活率的影响,评价其作为抗癌药靶的可能性。方法以倍比稀释的ADM作用于HepG2细胞,用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)实验检测阿霉素(Adriamycin,ADM)72 h的半数致死量(LD50);用蛋白质印迹(Western blot)检测的ADM(LD50)作用下,calpain-2和cyclin E的表达和酶解情况;给予calpain-2抑制剂(calpastatin peptide)干预后,用MTT法观察ADM对HepG2细胞存活率的影响。结果 MTT实验结果显示,ADM对HepG2的LD50为2.5μmol.L-1;Western blot发现,随ADM作用时间的延长,calpain-2的表达水平增高(P<0.01),而且被剪切的程度增加(P<0.05);MTT检测ADM对HepG2的作用发现,calpastatin peptide干预的细胞存活率明显低于对照组(P<0.01),Cyclin E被剪切的程度减轻(P<0.01)。结论肝癌细胞HepG2在ADM作用下发生凋亡的同时,也上调calpain-2的表达水平和活性,并通过其信号通路降低对ADM的敏感性,而针对calpain-2的活性抑制可以提高HepG2对ADM敏感性,提示calpain-2可以作为降低肿瘤化疗耐药性的潜在靶点。 展开更多
关键词 肝癌细胞 钙激活中性蛋白酶-2 阿霉素 周期蛋白E 化疗 耐药性
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风湿性心脏病慢性心房颤动患者钙转运调控蛋白和钙激活中性蛋白酶基因转录的表达改变
2
作者 许国军 汤宝鹏 +3 位作者 库热西.玉努斯 伊力哈木江.沙比提 木拉提.阿布提热合曼 程祖亨 《中国心血管杂志》 2007年第5期328-332,共5页
目的测定心房肌钙转运调控蛋白和钙激活中性蛋白酶(calpain1)的mRNA表达,探讨风湿性心脏瓣膜病(风心病)心房颤动(房颤)患者心房肌电重构和结构重构以及心功能下降的分子生物学机制及其在房颤发生、维持中的作用。方法采集风心病窦性心... 目的测定心房肌钙转运调控蛋白和钙激活中性蛋白酶(calpain1)的mRNA表达,探讨风湿性心脏瓣膜病(风心病)心房颤动(房颤)患者心房肌电重构和结构重构以及心功能下降的分子生物学机制及其在房颤发生、维持中的作用。方法采集风心病窦性心律组患者12例和房颤组患者16例的右心耳组织,应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,测定心房肌钙转运调控蛋白和calpain1的mRNA表达水平。结果与窦性心律组相比,房颤组L-型电压依赖钙通道a1c亚基(LVDCCa1c)、肌浆网Ca2+-ATP酶、兰尼碱受体(RYR2)的mRNA表达水平明显下调(均为P<0.01),三磷酸肌醇受体(IP3R1)的mRNA表达水平上调(P<0.05),房颤组心房肌calpain1的mRNA表达水平上调(P<0.05),且与LVDCCa1c的mRNA表达呈负相关(r=-0.583,P<0.05)。结论房颤患者心房肌钙转运调控蛋白和calpain1转录水平调控失衡可能是心房肌电重构和结构重构以及心功能下降的分子生物学机制之一,与房颤的发生和维持有关。 展开更多
关键词 心房颤动 钙转运调控蛋白 钙激活中性蛋白酶 基因表达
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酒精对乳腺癌细胞表皮生长因子受体-钙激活中性蛋白酶通路及细胞迁移的影响 被引量：5
3
作者 李勇杰 于庆龙 +3 位作者 潘际刚 王宏健 宛蕾 王旭东 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期820-825,共6页
背景与目的:酒精(ethyl alcohol,Et OH)可促进乳腺癌的恶性演进,但其信号机制尚未完全明了。本研究通过观察Et OH对乳腺癌细胞钙激活中性蛋白酶(calcium-activated neutral protease,CANP)-周期蛋白E/局部黏着斑激酶(focal adhesion kin... 背景与目的:酒精(ethyl alcohol,Et OH)可促进乳腺癌的恶性演进,但其信号机制尚未完全明了。本研究通过观察Et OH对乳腺癌细胞钙激活中性蛋白酶(calcium-activated neutral protease,CANP)-周期蛋白E/局部黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)信号通路和细胞迁移的影响,以及表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在其中的介导作用,探讨Et OH促进乳腺癌细胞迁移的信号机制。方法:以人乳腺肿瘤细胞系MCF-7为模型细胞(MCF-10A乳腺上皮细胞为对照);采用蛋白[质]印迹法(Western blot)分析周期蛋白E和FAK蛋白剪切反应;通过伤口愈合实验观察细胞迁移效应;采用EGFR抑制剂(EGFR inhibitor,EGFR-I)或CANP抑制剂Calpeptin抑制EGFR或CANP活性,观察抑制剂对Et OH诱导CANP1大亚基、周期蛋白E/FAK蛋白剪切及细胞迁移的影响。结果:以Et OH(0.3%)处理模型细胞可观察到周期蛋白E和FAK出现明显蛋白剪切且该效应呈剂量和时间依赖性,还观察到Et OH刺激细胞迁移活动(+47.30%,P<0.05),但Et OH对MCF-10A细胞迁移无明显影响;以Calpeptin(10μmol/L)预处理模型细胞,可见Et OH(0.3%)或EGF(10 ng/m L)诱导的周期蛋白E/FAK蛋白剪切效应受到明显抑制;EGFR-I(3μmol/L)可显著抑制Et OH诱导的CANP1大亚基和周期蛋白E/FAK蛋白剪切及细胞迁移效应(-53.00%,P<0.01)。结论:Et OH可通过EGFR激活乳腺癌细胞CANP信号活动并促进细胞迁移,EGFR-CANP通路参与介导Et OH与EGF之间的串话,提示EGFR-CANP信号通路中的关键分子可为防止乳腺癌转移的潜在药物靶点。 展开更多
关键词 酒精 表皮生长因子受体 钙激活中性蛋白酶 细胞迁移 乳腺癌
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肌肉内源蛋白酶及其在干腌火腿加工过程中的作用 被引量：18
4
作者 赵改名 周光宏 徐幸莲 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期70-75,共6页
综述了组织蛋白酶和钙激活中性蛋白酶的性质、水解能力、抑制剂及其影响因素的研究进展 ,并对国外就其在干腌火腿加工过程中的活性变化及其与火腿加工质量关系的研究结果进行了总结 。
关键词 干腌火腿 肌肉内源蛋白酶 组织蛋白酶 钙激活中性蛋白酶 肉制品 活性变化 加工质量
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细胞死亡方式及其清除 被引量：20
5
作者 崔天盆 郑承红 +1 位作者 陈杰 苏斌涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期843-846,共4页
细胞死亡可根据其表观形态学分为：细胞凋亡、坏死、细胞自噬等；也可根据有无核酸酶或不同类别的蛋白酶的参与分为：半胱天冬酶参与的细胞死亡，钙激活中性蛋白酶参与的细胞死亡，组织蛋白酶和谷氨酰胺转胺酶参与的细胞死亡；还可以根... 细胞死亡可根据其表观形态学分为：细胞凋亡、坏死、细胞自噬等；也可根据有无核酸酶或不同类别的蛋白酶的参与分为：半胱天冬酶参与的细胞死亡，钙激活中性蛋白酶参与的细胞死亡，组织蛋白酶和谷氨酰胺转胺酶参与的细胞死亡；还可以根据功能方面分为：程序性的细胞死亡，意外的细胞死亡，生理性的细胞死亡或病理性的细胞死亡；或者根据免疫学特性分为：免疫原性的细胞死亡或无免疫原性的细胞死亡。2009年细胞死亡命名委员会（Nomenclature Committee on Cell Death，NCCD）［1］建议统一根据形态学标准定义和分类细胞死亡，目前发现细胞死亡种类有凋亡（ Apoptosis ）、自噬性细胞死亡（ Autophagic cell death ）、坏死（ Necrosis ）、角化性细胞死亡（ Cornification ）、非典型细胞死亡，包括有丝分裂崩溃（ Mitotic catastrophe ）、失巢凋亡（Anoikis）、沃勒变性（Wallerian degeneration）、副凋亡（ Paraptosis ）、细胞焦亡（ Pyroptosis ）、内亡（Entosis）、兴奋性中毒（Excitotoxicity）、铁死亡（Fer-roptosis）。死亡细胞的有效清除对一个有机体的存活是必要的。正在死亡的或者已经死亡细胞的通过吞噬作用清除，根据不同的细胞死亡模式即凋亡、自噬和坏死，存在不同的机制来保证细胞残骸的清除。 展开更多
关键词 细胞死亡方式 钙激活中性蛋白酶 Paraptosis APOPTOSIS 谷氨酰胺转胺酶 自噬性细胞死亡 形态学标准 细胞凋亡
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低氧调控EIMD后calpain活性与肌细胞膜损伤机制的探索研究 被引量：2
6
作者 徐飞 覃丽凤 +3 位作者 黄巧婷 曹建民 王平 徐玉明 《中国体育科技》 CSSCI 北大核心 2019年第2期54-63,共10页
目的:观察低氧对运动性肌损伤(exercise-induced muscle damage,EIMD)后肌细胞膜损伤、钙激活中性蛋白酶(calpain)和肌细胞膜骨架蛋白(dystrophin、utrophin和dysferlin)的影响,探索低氧调控EIMD后肌细胞膜损伤的可能机制。方法:110只雄... 目的:观察低氧对运动性肌损伤(exercise-induced muscle damage,EIMD)后肌细胞膜损伤、钙激活中性蛋白酶(calpain)和肌细胞膜骨架蛋白(dystrophin、utrophin和dysferlin)的影响,探索低氧调控EIMD后肌细胞膜损伤的可能机制。方法:110只雄性SD健康大鼠分两批进行实验。研究Ⅰ:70只大鼠随机均分为安静对照组、常氧24 h、48 h和72 h组以及低氧24 h、48 h和72 h组,每组10只。大鼠在-16°跑台上以26.8 m/min速度持续运动5 min,运动10次,组间休息1 min。低氧和常氧各组大鼠运动后注射伊文氏蓝荧光染色剂观察膜损伤情况,用RT-q PCR和Western blot测定腓肠肌calpain和膜骨架蛋白的mRNA表达和蛋白含量。研究Ⅱ:40只大鼠随机均分为空白对照组、安慰剂24 h、48 h组和calpain抑制剂24 h、48 h组,每组8只。测定calpain抑制剂对其蛋白含量的影响,观察膜损伤情况,并验证calpain在EIMD后低氧损伤肌细胞膜中所起的作用。结果:大鼠EIMD后,1)低氧各组膜的通透性增加、完整性被破坏,阳性细胞率(positive ratio of cell,PRC)与对照组和常氧对应组相比有显著差异(P<0.01);2)低氧72 h组calpain1、calpain2的mRNA表达显著高于常氧72 h组(P<0.05),低氧各组calpain1、calpain2和calpain3的蛋白含量与常氧对应组相比无显著差异(P>0.05);3)低氧24 h组dystrophin、utrophin的m RNA表达显著低于常氧24 h组(P<0.01),但两组的蛋白含量无显著差异(P>0.05)。低氧各组dys-ferlin的mRNA表达和蛋白含量与常氧各组相比无显著差异(P> 0.05)。4)抑制calpain1、calpain2活性后,低氧24 h组calpain蛋白含量显著降低(P<0.05),低氧各组阳性细胞率显著低于安慰剂各组(P<0.01),但仍显著高于对照组(P<0.05)。结论:1) calpain1、calpain2被激活与低氧加剧大鼠EIMD后的肌细胞膜损伤有关,但calpain并非通过降解膜骨架蛋白dystrophin、utrophin和dysferlin的途径而导致膜损伤。2)抑制calpain1、calpain2活性能有效减轻但不能避免低氧加剧EIMD后的膜损伤,其中还可能存在其它的调节机制。 展开更多
关键词 运动性肌损伤 低氧 钙激活中性蛋白酶 肌细胞膜损伤 膜骨架蛋白 蛋白降解
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Calpain2在FN诱导的口腔鳞癌细胞上皮间质转化中的作用 被引量：1
7
作者 张玉莲 龚靖淋 +3 位作者 刘一秀 李真华 周晓红 叶果 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期638-641,共4页
目的:探讨Calpain2在FN诱导的口腔鳞癌细胞上皮间质转化(EMT)中的作用。方法:以口腔鳞癌Tca8113细胞为研究模型,FN诱导模型细胞48 h;侵袭小室实验考察细胞的侵袭能力;siRNA转染沉默Calpain2蛋白表达;应用蛋白质印记法检测各蛋白表达水... 目的:探讨Calpain2在FN诱导的口腔鳞癌细胞上皮间质转化(EMT)中的作用。方法:以口腔鳞癌Tca8113细胞为研究模型,FN诱导模型细胞48 h;侵袭小室实验考察细胞的侵袭能力;siRNA转染沉默Calpain2蛋白表达;应用蛋白质印记法检测各蛋白表达水平。结果:FN(15μg/ml)处理Tca8113细胞12、24、48 h发现,Calpain2和Twist蛋白表达逐渐增加(P<0.05或P<0.01);E-cadherin蛋白表达逐渐降低(P<0.05或P<0.01)。与空白对照组相比,FN处理组细胞侵袭数增加了(116.7±5.1)%(P<0.01)。与siRNA-NC组相比,siRNA-Calpain2组Calpain2蛋白表达下调(90.3±3.3)%(P<0.01)。FN处理细胞48 h,与siRNA-NC组相比,siRNA-Calpain2组E-cadherin蛋白表达下调和Twist蛋白表达上调被逆转(P<0.01);siRNA-Calpain2组细胞侵袭数下降(51.3±4.5)%(P<0.01)。结论:FN能诱导口腔鳞癌Tca8113细胞发生EMT,该作用可能与Calpain2蛋白表达上调相关。 展开更多
关键词 钙激活中性蛋白酶2(Calpain2) 口腔鳞癌 侵袭 上皮间质转化(EMT) 纤连蛋白(FN)
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