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重组CC家族趋化因子RANTES的原核表达及趋化活性分析 被引量:3
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作者 孙荣华 王应 +1 位作者 钟英诚 马大龙 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期123-126,共4页
目的 深入研究趋化因子 RANTES的结构与功能,为其进一步的应用研究打下基础。方法 利用 PCR技术扩增 RANTES成熟蛋白的编码区序列,将其克隆到原核表达载体,经表达纯化得到重组蛋白质纯品,利用趋化小室法测趋化活性。结果 成功扩增 R... 目的 深入研究趋化因子 RANTES的结构与功能,为其进一步的应用研究打下基础。方法 利用 PCR技术扩增 RANTES成熟蛋白的编码区序列,将其克隆到原核表达载体,经表达纯化得到重组蛋白质纯品,利用趋化小室法测趋化活性。结果 成功扩增 RANTES cDNA编码区序列,在大肠杆菌中成功表达重组 RANTES蛋白,经纯化蛋白纯度达 95%以上,对外周血淋巴细胞( PBL), U937淋巴瘤细胞系,和 HEK293-CCR4稳定株有趋化活性,对 Jurkat细胞无明显趋化作用。结论 原核表达的重组 RANTES对多种细胞具有趋化活性,并建立了用培养细胞系检测趋化活性的模型,为下一步 RANTES的结构与功能研究打下了基础。 展开更多
关键词 趋化因子 RANTES 原核表达 趋化活性 重组cc家族趋化因子
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CXC亚家族趋化因子配体10-受体3/CC亚家族趋化因子配体17-受体4轴在口腔扁平苔藓发病机制中的交互作用 被引量:6
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作者 唐楠 张雨垚 +2 位作者 程珏华 赵知白 范媛 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期405-412,共8页
目的探讨CXC亚家族趋化因子配体10(CXCL10)-CXC亚家族趋化因子受体3(CXCR3)、CC亚家族趋化因子配体17(CCL17)-CC亚家族趋化因子受体4(CCR4)两轴间在口腔扁平苔藓(OLP)发病机制中的交互关系。方法收集OLP患者(非糜烂、糜烂型)和健康对照... 目的探讨CXC亚家族趋化因子配体10(CXCL10)-CXC亚家族趋化因子受体3(CXCR3)、CC亚家族趋化因子配体17(CCL17)-CC亚家族趋化因子受体4(CCR4)两轴间在口腔扁平苔藓(OLP)发病机制中的交互关系。方法收集OLP患者(非糜烂、糜烂型)和健康对照者外周血,分离T细胞并鉴定纯度,分为空白(不加拮抗剂)、拮抗CXCR3(加入CXCR3拮抗剂)、拮抗CCR4(加入CCR4拮抗剂)三个组与T细胞共培养,流式细胞术检测各组受体CXCR3、CCR4表达,生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法检测相应配体CXCL10、CCL17的表达。结果T细胞纯度鉴定均>95%且各组间的差异无统计学意义(P>0.05)。受体表达结果显示,OLP中拮抗CXCR3和CCR4组与空白组相比,拮抗CXCR3组的CXCR3和CCR4表达均下调(P>0.05);拮抗CCR4组的CCR4表达显著下调(P<0.05),CXCR3表达上调(P>0.05)。配体表达结果示,OLP中拮抗组与空白组相比,拮抗CXCR3组的CXCL10表达显著下调(P<0.05),CCL17表达也下调(P>0.05);拮抗CCR4组的CCL17表达显著下调(P<0.05),CXCL10表达上调(P>0.05)。健康对照者受体和配体趋势与OLP一致,但拮抗组与空白组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验结果提示两轴间在OLP的发病机制中存在相关互作,且可能在OLP的发生发展过程中发挥不同作用。 展开更多
关键词 口腔扁平苔藓 CXC亚家族趋化因子受体3 CXC亚家族趋化因子配体10 cc家族趋化因子受体4 cc家族趋化因子配体17
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CC趋化因子与心肌梗死的研究进展 被引量:2
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作者 冯聚玲 王真真 +1 位作者 赵磊 陈乃宏 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1046-1055,共10页
CC类趋化因子亚家族是趋化因子家族中成员最多、研究最广泛的一大类细胞因子,其主要功能是参与炎症细胞激活、迁移、黏附等病理生理过程.大量研究表明,CC类趋化因子亚家族成员参与了心肌梗死后病理过程的各个阶段.其中研究最为深入的是... CC类趋化因子亚家族是趋化因子家族中成员最多、研究最广泛的一大类细胞因子,其主要功能是参与炎症细胞激活、迁移、黏附等病理生理过程.大量研究表明,CC类趋化因子亚家族成员参与了心肌梗死后病理过程的各个阶段.其中研究最为深入的是单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)及其受体CC趋化因子受体2(CC chemokine receptor 2,CCR2).MCP-1和CCR2在心肌梗死后炎症期、增殖期及疤痕愈合期都发挥了重要作用从而影响梗死后心室重构.近年来,CC类趋化因子亚家族其他成员亦被逐渐揭示参与了心肌梗死的发展.本文结合以往大量文献,就CC类趋化因子亚家族在心肌梗死各个阶段中的作用,尤其是梗死后各期对于心室重构的影响进行综述,以期为今后的CC趋化因子研究提供方向,为相关疾病的预防和治疗研究提示潜在的药物靶点. 展开更多
关键词 cc趋化因子家族 心肌梗死 炎症 心室重构
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家鸡单核细胞趋化因子MCP-1克隆、融合表达及序列分析
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作者 马磊 张婷婷 +1 位作者 杨微 吕鲁杰 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2008年第6期672-675,共4页
本研究从鸡cDNA文库中,通过菌落PCR筛选获得单核细胞趋化激活因子(MCP-1)基因的cDNA,将该cDNA中的ORF插入到pET-28a(+)质粒(携带T7/lac启动子序列和His-Tag标签序列)中,得到pET-mcp-1质粒;重组质粒转化E.coliBL21(DE3)后,经IPTG诱导表... 本研究从鸡cDNA文库中,通过菌落PCR筛选获得单核细胞趋化激活因子(MCP-1)基因的cDNA,将该cDNA中的ORF插入到pET-28a(+)质粒(携带T7/lac启动子序列和His-Tag标签序列)中,得到pET-mcp-1质粒;重组质粒转化E.coliBL21(DE3)后,经IPTG诱导表达得到MCP-1和His-Tag的融合蛋白(HisTag-MCP-1)。该基因不仅具有CC趋化因子家族Cys-Cys氨基酸模序,并且与结构和功能相关的氨基酸高度保守。 展开更多
关键词 MCP-1 Cys-Cys氨基酸模序 cc趋化因子家族
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定量检测CCL20的竞争性内参照RT-PCR的建立及其初步应用 被引量:3
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作者 叶巍 邵先安 +3 位作者 郑秀娟 陈习武 储以微 熊思东 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期359-364,共6页
目的 建立检测趋化因子CC亚家族配体2 0 (CCL2 0 )表达水平的内参照定量逆转录聚合酶链反应(RT PCR)方法。方法 将人CCL2 0编码基因克隆到pBs ΔANK质粒中(PAL 2 ) ,将一4 2bp的外源核苷酸片断插入到上述重组质粒的CCL2 0中间,构建内... 目的 建立检测趋化因子CC亚家族配体2 0 (CCL2 0 )表达水平的内参照定量逆转录聚合酶链反应(RT PCR)方法。方法 将人CCL2 0编码基因克隆到pBs ΔANK质粒中(PAL 2 ) ,将一4 2bp的外源核苷酸片断插入到上述重组质粒的CCL2 0中间,构建内参照质粒PAL- 2 - IS。在该定量系统中以PAL- 2 -IS和PAL- 2为模板,用CCL2 0的特异性引物扩增,根据扩增出的两个不同大小的条带的光密度扫描值对CCL2 0进行相对定量。结果 将PAL -2与已知不同系列浓度的PAL- 2 - IS以内参照竞争定量RT- PCR共扩增定量PAL- 2浓度,PAL- 2计算浓度与实际浓度无差异(P >0 .0 5 )。在同一细胞数量水平(10 5数量级) ,内参照竞争定量RT- PCR检测表明:CCL2 0在L0 2、HepG2、Hepal、Hepa3中表达水平高于Hepa2 ,而在HepG2 .2 .15中最低。结论 建立了检测CCL2 0表达水平的内参照定量RT -PCR方法,该方法可用于细胞中CCL2 0不同表达水平的检测。 展开更多
关键词 趋化因子cc家族配体20 内参照 定量 竞争 逆转录聚合酶链反应
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动员后骨髓和外周血采集物中T细胞CCR5表达的对比研究
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作者 王萌 任汉云 +4 位作者 孙慧 谢新生 马杰 甘思林 刘延方 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期821-826,共6页
目的:研究动员后骨髓和外周血采集物中T细胞CCR5表达的异同,分析移植物中T细胞CCR5的表达与移植后急性移植物抗宿主病(GVHD)发生的相关性。方法:选取行亲缘异基因造血干细胞移植的46对供受者为研究对象,应用重组人粒细胞集落刺激因子(rh... 目的:研究动员后骨髓和外周血采集物中T细胞CCR5表达的异同,分析移植物中T细胞CCR5的表达与移植后急性移植物抗宿主病(GVHD)发生的相关性。方法:选取行亲缘异基因造血干细胞移植的46对供受者为研究对象,应用重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员后,测定并比较骨髓(G-BM)和外周血采集物(G-PB)中CCR5^+T细胞的相对比例和绝对数量,然后分析输注的CCR5^+T细胞数量和移植后Ⅱ-Ⅳ度急性GVHD发生的相关性。结果:G-PB中CD3^+CD4^+及CD3^+CD8^+T细胞的CCR5^+细胞所占的比例均明显低于G-BM(P<0.01),但G-PB中CD3^+CD4^+CCR5^+及CD3^+CD8^+CCR5^+T细胞的绝对数均是骨髓中的15-25倍,且输注的CCR5^+T细胞的绝对数量不是受者发生急性GVHD的危险因素(P>0.05)。结论:G-PB和G-BM中CCR5^+T细胞比例和绝对数量存在显著差别,不同来源的干细胞具有不同的免疫特性。此外,移植后急性GVHD的发生与移植物中CCR5^+T细胞的数量无关,而可能受其相对比例影响。 展开更多
关键词 急性移植物抗宿主病 cc趋化因子受体5 重组人粒细胞集落刺激因子 外周血采集物 骨髓采集物
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