表达鸡传染性支气管炎病毒S1基因重组鸡痘病毒对SPF鸡的免疫保护作用 被引量：17

1

作者 田占成 孙永科 +5 位作者 王云峰 智海东 刘胜旺 孙惠玲 王玫 童光志 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期580-586,共7页

将表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因的重组鸡痘病毒(rFPV-IBVS1)以5×106PFU剂量翅皮下注射接种4周龄的SPF鸡。血清抗体检测表明,该重组鸡痘病毒能刺激鸡体产生特异性抗体,外周血液中CD4+、TCRγδ+T淋巴细胞比例显著高于对照组... 将表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因的重组鸡痘病毒(rFPV-IBVS1)以5×106PFU剂量翅皮下注射接种4周龄的SPF鸡。血清抗体检测表明,该重组鸡痘病毒能刺激鸡体产生特异性抗体,外周血液中CD4+、TCRγδ+T淋巴细胞比例显著高于对照组,而CD8+T淋巴细胞比例低于对照组。免疫后4周用1×103.0EID50的传染性支气管炎病毒LX4株进行攻毒,结果表明,重组鸡痘病毒免疫组与IB弱毒疫苗免疫保护率分别为12/16和13/16;攻毒后喉拭子IBV分离结果表明,IB弱毒疫苗和重组鸡痘病毒免疫组的IBV气管排毒时间比对照组缩短了2 d,病毒的分离率显著低于对照组;肾脏、气管、肺脏、腺胃、脾和肝脏的病理损伤也较对照组轻,而且病变持续时间缩短。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎 重组鸡痘病毒 免疫保护性

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鸡传染性支气管炎病毒S1基因和鸡II型干扰素基因在重组鸡痘病毒中的共表达 被引量：9

2

作者 孙永科 田占成 +5 位作者 王云峰 童光志 智海东 刘胜旺 王玫 杨增岐 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期800-806,共7页

将鸡II型干扰素(ChIFNγ)基因和鸡传染性支气管炎病毒S1基因同时插入到鸡痘病毒转移载体中,构建含有这2个基因的鸡痘病毒转移载体pSY-ChIFNγS1。采用脂质体法将该质粒转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞(CEF),经过8轮蓝斑筛选,得到纯化... 将鸡II型干扰素(ChIFNγ)基因和鸡传染性支气管炎病毒S1基因同时插入到鸡痘病毒转移载体中,构建含有这2个基因的鸡痘病毒转移载体pSY-ChIFNγS1。采用脂质体法将该质粒转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞(CEF),经过8轮蓝斑筛选,得到纯化的能够同时表达鸡II型干扰素和鸡传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒rFPV-ChIFNγS1。rFPV-ChIFNγS1接种28日龄的SPF鸡1周后,可以检测到针对传染性支气管炎病毒S1基因的ELISA抗体,重组病毒接种鸡的CD4+、CD8+和γδTCR阳性T淋巴细胞的百分比含量显著高于非免疫对照鸡(P<0.05);免疫4周后用传染性支气管炎LX4强毒株攻击,rFPV-ChIFNγS1免疫组仅有1只出现轻微的呼吸道症状(1/16),而非免疫对照组则有16只发病(16/16),并有2只出现死亡(2/16),表明rFPV-ChIFNγS1对接种鸡可以产生良好的保护效果。 展开更多

关键词 传染性支气管炎病毒 鸡Ⅱ型干扰素 重组鸡痘病毒

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表达MDVgB和/或鸡γ干扰素基因的重组鸡痘病毒免疫效力试验 被引量：5

3

作者 彭大新 刘秀梵 +3 位作者 吴艳涛 高崧 程坚 周春红 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期177-182,共6页

将表达鸡 干扰素基因、表达MDVgB基因、共表达MDVgB和鸡 干扰素基因的重组鸡痘病毒进行组合免疫 ,观察在SPF鸡、狼山鸡中的免疫保护作用。在狼山鸡中随rFPV gB剂量的减少 ,保护效力逐渐下降 ,而在SPF鸡中 10 4 与 10 6PFU的rFPV gB提... 将表达鸡 干扰素基因、表达MDVgB基因、共表达MDVgB和鸡 干扰素基因的重组鸡痘病毒进行组合免疫 ,观察在SPF鸡、狼山鸡中的免疫保护作用。在狼山鸡中随rFPV gB剂量的减少 ,保护效力逐渐下降 ,而在SPF鸡中 10 4 与 10 6PFU的rFPV gB提供相同的保护效力 ,但存在减缓增重的副反应 ;在所有的疫苗组合中 ,由10 6PFU的rFPV gB、10 5PFU的rFPV IFN Ⅱ和 40 0 0PFUHVT组成三价疫苗的保护效力最高且不影响增重 ,表明鸡 干扰素既可降低重组鸡痘病毒的减缓增重的副反应 ,又具有免疫佐剂作用 ,与重组鸡痘病毒及HVT配合成疫苗是预防MD有效的冻干制剂。 展开更多

关键词 马立克氏病 重组鸡痘病毒 鸡γ干扰素 糖蛋白B 保护效力

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口蹄疫病毒重组鸡痘病毒活载体疫苗和DNA疫苗免疫牛的试验研究 被引量：4

4

作者 郑敏 金宁一 +6 位作者 秦晓冰 金扩世 刘棋 田明尧 郭建顺 徐敬龙 李昌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期158-162,共5页

将本课题组构建的共表达FMDV衣壳蛋白前体P1-2A基因以及蛋白酶3C基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTAL3CP1以及共表达P1-2A和猪白介素18基因的重组DNA疫苗(pVIRIL18P1),分别以单独及混合的共3种方式接种牛,然后通过间接ELISA、中和试验和... 将本课题组构建的共表达FMDV衣壳蛋白前体P1-2A基因以及蛋白酶3C基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTAL3CP1以及共表达P1-2A和猪白介素18基因的重组DNA疫苗(pVIRIL18P1),分别以单独及混合的共3种方式接种牛,然后通过间接ELISA、中和试验和T淋巴细胞增殖试验评价其诱导的特异性体液和细胞免疫水平。结果表明这2种基因工程疫苗均能诱导牛产生特异性的体液及细胞免疫应答。其中重组鸡痘病毒vUTAL3CP1免疫组以及联合免疫组(vUTAL3CP1/pVIRIL18P1,pVIRIL18P1/vUTAL3CP1)诱导的中和抗体滴度分别达到1∶64、1∶64和1∶54,已接近于常规灭活疫苗水平(1∶90),而特异性的T淋巴细胞增殖反应则比后者高得多(P<0.01)。该研究结果为进一步进行免疫攻毒试验,并最终筛选出最佳疫苗和免疫程序奠定了基础。 展开更多

关键词 口蹄疫 重组鸡痘病毒 DNA疫苗 体液免疫 细胞免疫

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共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒免疫抗体消长规律及免疫效力研究 被引量：4

5

作者 陈素娟 丁彦红 +3 位作者 钱程 柴茂 彭大新 刘秀梵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期596-601,共6页

为评价共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒(rFPV-AIH5AIL6)的免疫抗体消长规律及免疫效力,将重组病毒通过颈部皮下注射和翅部皮下注射2种不同的免疫途径来免疫鸡群,结果发现,2种免疫途径中,重组鸡痘病毒对鸡体质量增加... 为评价共表达鸡IL-6和H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒(rFPV-AIH5AIL6)的免疫抗体消长规律及免疫效力,将重组病毒通过颈部皮下注射和翅部皮下注射2种不同的免疫途径来免疫鸡群,结果发现,2种免疫途径中,重组鸡痘病毒对鸡体质量增加均无影响,而野生型鸡痘病毒均可抑制鸡体质量增加。翅部皮下注射疫苗组能够产生较高的血凝抑制(HI)抗体水平,免疫21d后抗体水平达到高峰,28d后开始下降,49d时仍保持在一定的水平。免疫SPF鸡21d后攻毒,表明该重组病毒能使经滴鼻攻毒的SPF鸡抵抗H5亚型AIV的致死性攻击,保护率为95%,与油苗组相同,与单表达H5亚型禽流感病毒HA基因重组鸡痘病毒组(40%)差异显著;攻毒后3、5、7d采集喉头、泄殖腔棉拭子检测排毒情况,结果发现第3天排毒率最高,其中rFPV-AIH5AIL6免疫组排毒率为最低,显示IL-6在rFPV-AIH5IL6免疫过程中起到了免疫佐剂的作用,这为研制新型的禽流感重组鸡痘病毒疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 禽流感病毒 HA基因 鸡IL-6 重组鸡痘病毒 佐剂

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重组鸡痘病毒vFV282疫苗株理化特性测定 被引量：5

6

作者 徐敬龙 金扩世 +4 位作者 夏志平 贾雷立 郭建顺 金明兰 金宁一 《动物医学进展》 CSCD 2005年第3期84-85,共2页

将重组鸡痘病毒疫苗株vFV282经酸、碱、热、氯仿、乙醚以及胰蛋白酶处理,接种到CEF上,观察处理前后重组鸡痘病毒疫苗株vFV282毒力活性的变化,分析这些理化因子对重组鸡痘病毒疫苗株vFV282的影响.结果在pH 3.0～pH 9.0范围内,pH变化不会... 将重组鸡痘病毒疫苗株vFV282经酸、碱、热、氯仿、乙醚以及胰蛋白酶处理,接种到CEF上,观察处理前后重组鸡痘病毒疫苗株vFV282毒力活性的变化,分析这些理化因子对重组鸡痘病毒疫苗株vFV282的影响.结果在pH 3.0～pH 9.0范围内,pH变化不会造成该重组鸡痘病毒疫苗株vFV282毒力活性的显著变化.该重组鸡痘病毒疫苗株vFV282经50 ℃ 60 min、55 ℃ 30 min或60 ℃ 15 min即可被灭活,对氯仿敏感,经胰蛋白酶37 ℃作用1 h,TCID50降低2.55 logTCID50/0.1 mL,对乙醚不敏感,经乙醚作用24 h, TCID50下降1.0 log TCID50/0.1 mL. 展开更多

关键词 疫苗株 FV 重组鸡痘病毒 TCID50 胰蛋白酶 乙醚 活性 毒力 PH3 理化因子

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共表达FMDV P1-2A和3C重组鸡痘病毒疫苗与核酸疫苗的实验免疫研究 被引量：4

7

作者 张洪勇 金宁一 +4 位作者 葛淑敏 尹革芬 郑敏 李子健 江文正 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2004年第8期20-23,共4页

将口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因分别插入到鸡痘病毒表达载体质粒pUTA-16Lac Z的复合启动子和单一启动子的下游，构建共表达重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL3CP1，与282E4株FPV共转染鸡胚成纤维细胞，经RT-PCR、... 将口蹄疫病毒(FMDV)衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因分别插入到鸡痘病毒表达载体质粒pUTA-16Lac Z的复合启动子和单一启动子的下游，构建共表达重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL3CP1，与282E4株FPV共转染鸡胚成纤维细胞，经RT-PCR、IFA及Western blotting检测，成功获得能正确表达目的蛋白的重组鸡痘病毒株vU-TAL3CP1。并与FMDV重组核酸疫苗免疫小鼠实验表明，各实验免疫组均能诱导小鼠产生特异性的细胞免疫和体液免疫反应，其中以重组鸡痘病毒与核酸疫苗联合免疫效果好于其它实验各组。 展开更多

关键词 FMDV 重组鸡痘病毒疫苗 重组核酸疫苗 免疫原性 口蹄疫病毒

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表达马立克氏病病毒CVI988/Rispens株糖蛋白B基因的重组鸡痘病毒疫苗的免疫保护研究 被引量：2

8

作者 彭大新 刘秀梵 +8 位作者 吴长新 吴艳涛 文其乙 高崧 张如宽 吴晓丰 邢力 朱爱华 詹爱军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期139-145,共7页

用鸡痘病毒载体表达马立克氏病病毒 (MDV)糖蛋白B(gB)基因构建成重组鸡痘病毒 (rF PV)。以MDVGA或Md5和RBIB混合攻毒 ,在不同品种的鸡中评价rFPV -gB/R单价苗和与火鸡疱疹病毒 (HVT)组成的二价苗的免疫保护效力。试验结果表明 ,MDV疫苗... 用鸡痘病毒载体表达马立克氏病病毒 (MDV)糖蛋白B(gB)基因构建成重组鸡痘病毒 (rF PV)。以MDVGA或Md5和RBIB混合攻毒 ,在不同品种的鸡中评价rFPV -gB/R单价苗和与火鸡疱疹病毒 (HVT)组成的二价苗的免疫保护效力。试验结果表明 ,MDV疫苗和FPV母源抗体阴性的SPF鸡和母源抗体阳性的商品鸡中 ,rFDV - gB/R均能提供免疫保护作用 ,且其中一种商品蛋鸡中rFPV - gB/R与HVT液氮苗或HVT冻干苗结合使用 ,均有显著的免疫协同保护作用。免疫学研究指出 ,rFPV -gB/R与常规疫苗一样 ,可显著地降低疫苗免疫攻毒鸡的病毒血症和羽囊排毒。 展开更多

关键词 重组鸡痘病毒 糖蛋白B基因 马立克氏病毒 疫苗 免疫保护

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两株表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组鸡痘病毒的构建及其免疫效力 被引量：2

9

作者 刘武杰 孙蕾 +3 位作者 陈素娟 徐忠林 刘金彪 刘秀梵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期327-332,共6页

将H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因插入到具有新复制非必需区的通用型质粒载体pP12LS中构建转移载体pP12LSH9A,再分别转染预先感染不同毒力的2种鸡痘病毒(FPV)282E4株和LP株的鸡胚成纤维细胞,经系列蓝斑筛选纯化,获得了2种重组鸡痘病毒(rFP... 将H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因插入到具有新复制非必需区的通用型质粒载体pP12LS中构建转移载体pP12LSH9A,再分别转染预先感染不同毒力的2种鸡痘病毒(FPV)282E4株和LP株的鸡胚成纤维细胞,经系列蓝斑筛选纯化,获得了2种重组鸡痘病毒(rFPV),分别命名为rFPV282-12LSH9A和rFPVLP-12LSH9A。将这2株rFPV在SPF鸡和带有高水平抗H9亚型AIV母源抗体的商品鸡上分别进行免疫效力试验。结果:rF-PV282-12LSH9A和rFPVLP-12LSH9A在SPF鸡上的排毒保护率均为100%(10/10),在商品鸡上的排毒保护率分别为88%(23/26)和92%(24/26)。结果表明获得了2株在带有抗H9亚型AIV高水平母源抗体的商品鸡上免疫效力较好的rFPV。 展开更多

关键词 H9亚型禽流感病毒 重组鸡痘病毒 母源抗体 免疫效力

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共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒部分生物学特性测定 被引量：2

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作者 王云峰 石星明 +9 位作者 王玫 刘胜旺 童光志 崔红玉 木古丽 徐灵龙 何来 贺笋 葛俊伟 李一经 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1077-1082,共6页

将共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒(rFPV-IFNγS1)接种4周龄SPF鸡,免疫3周后用异源病毒LSC99I株攻击,考察重组疫苗对异源病毒攻击的保护作用。结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中很快出现抗体;外周血中C... 将共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒(rFPV-IFNγS1)接种4周龄SPF鸡,免疫3周后用异源病毒LSC99I株攻击,考察重组疫苗对异源病毒攻击的保护作用。结果显示,疫苗接种后,免疫鸡血清中很快出现抗体;外周血中CD4+和CD8+T淋巴细胞的百分含量略高于非免疫对照组,但这种差异并不显著。LSC99I株IB病毒攻击后的保护率结果表明,免疫组的发病率为50%(5/10),死亡率为20%(2/10),非免疫对照组的发病率为100%(10/10),死亡率为50%(5/10);另外免疫鸡的病理损伤程度与非免疫对照组相比,二者差异不明显,在排毒时间和排毒量上也没有明显变化。体重分析结果显示,攻毒前免疫组与对照组相比,体重均没有显著变化,但攻毒后免疫组鸡体重增长的幅度要高于非免疫对照组。从以上结果可以说明,重组疫苗虽然能在动物体内很好地表达,但不能对实验动物产生很好的保护作用,而鸡干扰素-γ基因能在动物体内表达并发挥其免疫调节作用,减轻了重组疫苗对体重增长的影响。 展开更多

关键词 传染性支气管炎 重组鸡痘病毒 干扰素-Γ S1蛋白

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表达传染性支气管炎S1基因和IFN-γ基因重组鸡痘病毒安全性与最适免疫剂量分析 被引量：1

11

作者 石星明 王云峰 +7 位作者 王玫 兰德松 任刚 李继松 曾伟伟 孙妍 刘胜旺 童光志 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期712-716,共5页

对共表达鸡传染性支气管炎病毒S1基因和II型干扰素基因的重组鸡痘病毒（rFPV-IFNγS1）冻干疫苗进行安全性和最适免疫剂量的研究。取冻干疫苗，加生理盐水恢复至冻干前体积，分别取0.1 mL经翅内侧无血管处皮下接种1周龄SPF鸡，接种剂量... 对共表达鸡传染性支气管炎病毒S1基因和II型干扰素基因的重组鸡痘病毒（rFPV-IFNγS1）冻干疫苗进行安全性和最适免疫剂量的研究。取冻干疫苗，加生理盐水恢复至冻干前体积，分别取0.1 mL经翅内侧无血管处皮下接种1周龄SPF鸡，接种剂量为1.0×10^5PFU，接种后3 d出现局部反应，5 d局部肿胀达到最大，接种鸡无其它全身反应，精神、食欲以及发育等均不受影响，说明重组病毒对实验鸡是安全的。将重组疫苗用生理盐水作倍比稀释后翅内侧无血管处皮下接种4周龄SPF鸡，接种剂量为1.0×10^1-1.0×10^4PFU，免疫后3周攻击传染性支气管炎病毒LX4株。结果表明，在接种剂量为1.0×10^2-1.0×10^4PFU的剂量范围内均可以使全部实验鸡产生局部反应，并对IBV的攻击形成保护，降低免疫鸡的发病率和死亡率，发病保护率达到73%以上；1.0×10^1PFU接种实验鸡后，仅有5/11的鸡出现局部反应，对IBV攻击的发病保护率为64%，与对照组差异不显著（P〉0.05）。以上结果说明，疫苗接种后的局部反应与重组疫苗的免疫效力之间具有相关性，根据疫苗生产使用实际情况确定传染性支气管炎重组鸡痘病毒疫苗的最适免疫剂量为10^3PFU。 展开更多

关键词 传染性支气管炎 重组鸡痘病毒 S1基因 最适免疫剂量

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3株表达H5亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒的免疫效力比较 被引量：1

12

作者 王彦红 陈素娟 +4 位作者 刘武杰 仇旭升 董丽 彭大新 刘秀梵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期60-64,共5页

作者旨在探讨鸡痘病毒ORF073或ORF214基因缺失后,在母源抗体存在情况下对重组病毒免疫效力的影响。将构建好的在ORF073或ORF214基因插入H5亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒(rFPVLP-△73LRH5A、rFPVLP-△214LRH5A)及单表达H5亚型AIV HA基因... 作者旨在探讨鸡痘病毒ORF073或ORF214基因缺失后,在母源抗体存在情况下对重组病毒免疫效力的影响。将构建好的在ORF073或ORF214基因插入H5亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒(rFPVLP-△73LRH5A、rFPVLP-△214LRH5A)及单表达H5亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒(rFPVLP-12LSH5A)分别免疫SPF鸡和商品鸡,检测重组疫苗诱导的免疫效力。结果:3种重组鸡痘病毒在SPF鸡产生较高的HI抗体效价及100%的免疫保护;在HI母源抗体效价为2.45的商品鸡体内基因缺失株重组病毒比rFPVLP-12LSH5A易于清除,抗体上升缓慢而且免疫28 d后HI抗体效价较低,免疫保护率低,分别为16.7%和23.3%;在母源HI抗体效价为0的商品鸡体内基因缺失株重组病毒免疫后产生的抗体效价高,免疫28 d后分别达到3.50和3.17。结果表明在商品鸡体内母源抗体影响下,缺失ORF073或ORF214基因的重组鸡痘病毒的免疫效力降低。 展开更多

关键词 重组鸡痘病毒 H5亚型AIV 免疫效力

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马立克氏病病毒(MDV)糖蛋白gB在重组鸡痘病毒中的表达 被引量：1

13

作者 丁巧玲 陈溥言 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期64-66,共3页

将马立克氏病病毒gB基因用EcoRⅠ从质粒pUR MDVEgB中切下。两端补平后,插入到质粒pEFgpt12s的PstⅠ酶切位点。构建了含有完整的MDVgB基因的转移载体pEFgpt12s gB。这个载体的特点是,它含有两个启动子,在强的复合启动子Spromoter的下游... 将马立克氏病病毒gB基因用EcoRⅠ从质粒pUR MDVEgB中切下。两端补平后,插入到质粒pEFgpt12s的PstⅠ酶切位点。构建了含有完整的MDVgB基因的转移载体pEFgpt12s gB。这个载体的特点是,它含有两个启动子,在强的复合启动子Spromoter的下游是插入的gB基因,另一个反向启动子vvP7 5的下游是标记基因Ecogpt,它的两端是FPV的非必需区。携带gB基因的质粒pEFgpt12s gB通过磷酸钙的方法转染用282E4株FPV感染3 4h的鸡胚成纤维细胞。通过药物筛选,得到含有gB基因的重组病毒。通过PCR、免疫荧光检测,证实了重组病毒中含有gB基因,并且gB糖蛋白也得到了表达。 展开更多

关键词 马立克氏病病毒 MDV 糖蛋白gB 表达 糖蛋白B抗原 重组鸡痘病毒

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表达鸡马立克氏病病毒糖蛋白B基因重组鸡痘病毒毒种的纯净性检验及冻干疫苗的保存期测定 被引量：1

14

作者 卢军 胡传伟 +3 位作者 金乔 刘武杰 彭大新 刘秀梵 《中国兽药杂志》 2010年第9期1-3,共3页

为了检测高效表达鸡马立克氏病病毒gB基因的重组鸡痘病毒(rFPV-gB/R)的纯净性,对纯化后的0代重组病毒毒种进行了细菌和支原体检验;并对中间试制的冻干疫苗在-20℃保存期进行了测定。结果表明,重组病毒毒种高度纯净,没有污染任何细菌或... 为了检测高效表达鸡马立克氏病病毒gB基因的重组鸡痘病毒(rFPV-gB/R)的纯净性,对纯化后的0代重组病毒毒种进行了细菌和支原体检验;并对中间试制的冻干疫苗在-20℃保存期进行了测定。结果表明,重组病毒毒种高度纯净,没有污染任何细菌或支原体,符合新制品制造和检验规程申报的要求;中试冻干疫苗在-20℃保存了12个月,病毒含量始终大于109PFU/mL,疫苗保存期可达12个月。 展开更多

关键词 鸡马立克氏病 GB基因 重组鸡痘病毒 纯净性检验 保存期

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1日龄雏鸡免疫鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗安全性及效力的研究 被引量：3

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作者 高晓磊 韩明宝 +5 位作者 刘思桐 赵丽霞 朱秀同 刘浩 郁宏伟 谢康 《中国动物保健》 2019年第4期57-58,共2页

将鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗以皮下注射和皮下刺种2种不同免疫途径免疫1日龄雏鸡,评价其安全性和效力。以10羽份/只剂量接种后,两组鸡均未观察到全身反应。以1羽份/只剂量接种后28d攻毒,两种免疫方式均可以使免疫鸡产... 将鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗以皮下注射和皮下刺种2种不同免疫途径免疫1日龄雏鸡,评价其安全性和效力。以10羽份/只剂量接种后,两组鸡均未观察到全身反应。以1羽份/只剂量接种后28d攻毒,两种免疫方式均可以使免疫鸡产生较强免疫力,能够抵抗传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株强毒和鸡痘病毒(FPV)102株的攻击。以上结果显示,鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗以皮下注射和皮下刺种2种不同途径免疫1日龄雏鸡,具有良好的安全性和有效性。 展开更多

关键词 1日龄雏鸡 鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗 安全性 效力

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人工设计的HIV-1重组鸡痘病毒诱导恒河猴产生免疫应答的研究

16

作者 张立树 金宁一 +8 位作者 宋英 洪宝庆 马鹤雯 尚玉璞 王宏 孙岩松 金洪涛 战大伟 李昌 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1198-1203,共6页

将人工设计的HIV-1多表位-p24嵌合基因重组鸡痘病毒rFPV-MEGp24大量制备并纯化后,分别在0周、8周、18周肌肉注射至实验恒河猴中,在第2次免疫后2周和第3次免疫后2周采集血液,分离血清和外周血淋巴细胞（PBMC）,ELISA法检测血清HIV-1抗体... 将人工设计的HIV-1多表位-p24嵌合基因重组鸡痘病毒rFPV-MEGp24大量制备并纯化后,分别在0周、8周、18周肌肉注射至实验恒河猴中,在第2次免疫后2周和第3次免疫后2周采集血液,分离血清和外周血淋巴细胞（PBMC）,ELISA法检测血清HIV-1抗体和PBMC培养上清Th1类细胞因子的含量,MTT法测定PBMC的增殖能力,乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测PBMC特异性CTL杀伤活性。结果表明：HIV-1多表位-p24嵌合基因重组鸡痘病毒可刺激恒河猴产生HIV-1特异性抗体;免疫猴的PBMC在HIV-1抗原肽刺激下细胞增殖能力加强,针对HIV-1靶细胞的特异性CTL杀伤活性产生,分泌Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2的水平升高。研究提示,HIV-1多表位-p24嵌合基因重组鸡痘病毒能诱导恒河猴产生特异性细胞和体液免疫应答。 展开更多

关键词 人免疫缺陷病毒I型 人工设计 重组鸡痘病毒 恒河猴 免疫应答

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表达鸡传染性喉气管炎病毒GB基因重组鸡痘病毒转移载体的构建

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作者 王晓丽 邵卫星 +1 位作者 田夫林 单虎 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2008年第6期27-30,共4页

根据文献设计2对引物,PCR扩增FPV复制非必需区中外源基因插入位点两侧翼的片段,分别克隆到pUC19和pSK质粒中,并命名为pFP1和pFP2。根据文献设计引物,PCR扩增鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)的GB基因的编码区。将GB基因克隆到质粒pFP1中获得... 根据文献设计2对引物,PCR扩增FPV复制非必需区中外源基因插入位点两侧翼的片段,分别克隆到pUC19和pSK质粒中,并命名为pFP1和pFP2。根据文献设计引物,PCR扩增鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)的GB基因的编码区。将GB基因克隆到质粒pFP1中获得重组质粒pFP1-GB;用酶切质粒pEGFP,得到GFP片段并克隆到质粒pFP2中,得到重组质粒pFP2-GFP。双酶切pFP1-GB得到FP1-GB片段,并克隆到质粒pFP2-GFP中,得到重组质粒pFP1GB-FP2GPF。酶切质粒pE/L-7.5,获得背向连接的2个鸡痘病毒启动子片段——PE/L-7.5,并将该片段克隆到重组质粒pFP1GB-FP2GPF获得重组质粒pGB-GFP,该质粒即为鸡痘病毒的转移质粒。在质粒pGB-GFP中,2个背向连接的启动子被克隆到的GB和GFP基因之间,分别启动GB和GFP基因的表达。经酶切和测序鉴定pGB-GFP,启动子PE/L和P7.5已分别正确地插入到GB和GFP基因之间,分别启动外源表达基因GB和筛选标记基因GFP的表达,从而证明已获得表达鸡传染性喉气管炎病毒GB基因重组鸡痘病毒转移载体pGB-GFP。该载体为下一步获得表达鸡传染性喉气管炎病毒GB基因的重组鸡痘病毒奠定基础。 展开更多

关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 糖蛋白GB基因 重组鸡痘病毒 转移载体

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表达番鸭细小病毒VP3基因重组鸡痘病毒转移载体的构建 被引量：1

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作者 李林林 孙敏华 +5 位作者 董嘉文 向蓉 袁建丰 邝瑞欢 胡奇林 张建峰 《广东农业科学》 CAS 2015年第3期134-139,F0003,共7页

根据Genbank上痘病毒TK基因序列分别设计左右同源臂引物TKL-F/R和TKR-F/R,以FPV基因组为模板,扩增左右同源重组臂(TKL、TKR);PCR连接左右同源臂,使中间带有多酶切位点MCS,然后连入pBluescriptIISK(+)骨架质粒,获得的阳性质粒命名为pTK;... 根据Genbank上痘病毒TK基因序列分别设计左右同源臂引物TKL-F/R和TKR-F/R,以FPV基因组为模板,扩增左右同源重组臂(TKL、TKR);PCR连接左右同源臂,使中间带有多酶切位点MCS,然后连入pBluescriptIISK(+)骨架质粒,获得的阳性质粒命名为pTK;合成反向串联表达盒:p7.5-MCS1-SV40-MCS2-P11,将表达盒插入质粒pTK的MCS位点,筛选获得阳性质粒pTKS;在鸡痘病毒早期启动子P7.5后的MCS1处插入MDPVVP3基因,晚期启动子P11后的MCS2处插入EGFPBGHpA,从而构建MDPVVP3基因重组鸡痘病毒转移载体pTKS-VP3-EGFP,对构建好的转移载体进行酶切和测序鉴定。将转移载体pTKS-VP3-EGFP转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)后,经RT-PCR和绿色荧光蛋白基因表达鉴定了MDPVVP3基因的表达,为进一步研制安全、高效的MDPV重组鸡痘病毒疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 番鸭细小病毒 VP3基因 重组鸡痘病毒

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传染性喉气管炎新城疫鸡痘重组病毒免疫效力的研究 被引量：4

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作者 智海东 王云峰 +3 位作者 张晶 王玫 王凤雪 童光志 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期807-811,共5页

在表达鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白gB基因和新城疫病毒(NDV)F基因的重组鸡痘病毒(rF-PV-gB-F)安全性检验合格后,以5.0×101～5.0×104PFU不同含量按0.1 mL/鸡的剂量免疫100只30日龄SPF鸡,30 d后分组分别用ILTVWG株和NDVF4... 在表达鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白gB基因和新城疫病毒(NDV)F基因的重组鸡痘病毒(rF-PV-gB-F)安全性检验合格后,以5.0×101～5.0×104PFU不同含量按0.1 mL/鸡的剂量免疫100只30日龄SPF鸡,30 d后分组分别用ILTVWG株和NDVF48E9株强毒进行攻击.免疫鸡抗鸡痘病毒抗体都转为阳性,痘反应和接种剂量有关,重组疫苗的最小反应剂量为50PFU.重组疫苗可以诱发对新城疫和传染性喉气管炎的保护,0.1mL/鸡的接种量在500～5 000PFU浓度范围内的免疫效果最好,对于ILTV攻击的发病保护率在70%以上,对NDV强毒攻击的抗死亡保护率可以达到80%,这为进一步考察疫苗的免疫效力试验以及进行田间试验奠定了基础. 展开更多

关键词 传染性喉气管炎 新城疫 重组鸡痘病毒 最佳免疫剂量 安全性

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我国禽流感疫苗大突破鸡的免疫保护期更长

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《北方牧业》 2005年第4期25-25,共1页

在农业部和科技部共同主持下．具有国际先进水平的新型高效的重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N亚型）和禽流感重组鸡痘病毒载体活疫苗．由农业部动物流感重点开放实验室研制成功。

关键词 禽流感疫苗 禽流感病毒 重组鸡痘病毒 免疫保护 灭活疫苗 动物 农业部 亚型 载体 中国

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