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中枢靶向重活化剂酰胺磷定脂质纳米颗粒对有机磷脑损伤小鼠的救治研究
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作者 林芮汁 王建宇 +5 位作者 魏雅婧 赵欣然 王淋 杨军 王永安 喻翠云 《中国药理学与毒理学杂志》 北大核心 2025年第9期641-650,共10页
目的构建新型中枢神经系统靶向的脂质纳米颗粒,并探讨其对有机磷脑损伤小鼠的救治作用。方法(1)脂质纳米颗粒制备、筛选与表征:①用薄膜分散法制备以不同摩尔比(1∶6∶3、3∶4∶3、5∶2∶3和7∶0∶3)1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-磷脂酰丝氨... 目的构建新型中枢神经系统靶向的脂质纳米颗粒,并探讨其对有机磷脑损伤小鼠的救治作用。方法(1)脂质纳米颗粒制备、筛选与表征:①用薄膜分散法制备以不同摩尔比(1∶6∶3、3∶4∶3、5∶2∶3和7∶0∶3)1-棕榈酰基-2-油酰基-sn-磷脂酰丝氨酸(POPS)、二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)和胆固醇(CHOL)的混合物(PDC)为脂质载体,酰胺磷定(HI-6)为治疗药物的脂质纳米重活化剂(HI-6@PDC 1∶6∶3、3∶4∶3、5∶2∶3和7∶0∶3)。②用荧光素钠(FLU)染料标记脂质纳米载体得到FLU@PDC 1∶6∶3、3∶4∶3、5∶2∶3和7∶0∶3,并将各制剂与磷脂酶A2(PLA2)溶液物理混合(PLA2终浓度10 kU·L-1)得到FLU@PDC+PLA2;将KM雄性小鼠随机分为正常对照组、FLU组、FLU@PDC+PLA21∶6∶3、3∶4∶3、5∶2∶3和7∶0∶3组,每组7只,iv给药,FLU给药剂量为1 mg·kg^(-1),相应载体量为80 mg·kg^(-1),1 h后,取脑组织,匀浆离心,采用荧光分光光度法测定上清液的荧光值,筛选中枢靶向效果最佳的纳米脂质载体组成。③用透射电子显微镜表征HI-6@PDC 5∶2∶3的形态,Zeta电位粒径分析仪测定其粒径、多分散性指数和Zeta电位,超滤离心法结合高效液相色谱法测定其包封率与载药量,采用透析袋扩散法结合荧光分光光度法测定HI-6@PDC 5∶2∶3和HI-6@PDC+PLA25∶2∶3的体外释放率。(2)中枢靶向性验证:①用花青素7(Cy7)标记PDC 5∶2∶3得到Cy7@PDC 5∶2∶3,将其与PLA2溶液物理混合(PLA2终浓度10 kU·L-1)得到Cy7@PDC+PLA25∶2∶3;将KM雄性小鼠随机分为正常对照组、Cy7组、Cy7@PDC 5∶2∶3组和Cy7@PDC+PLA25∶2∶3组,每组3只,iv给药,Cy7给药剂量为1 mg·kg^(-1),相应载体量为80 mg·kg^(-1),3 h后,用小动物活体成像系统观察脑组织中Cy7的荧光。②花青素3(Cy3)标记PDC 5∶2∶3得到Cy3@PDC 5∶2∶3,将其与PLA2溶液物理混合(PLA2终浓度10 kU·L-1)得到Cy3@PDC+PLA25∶2∶3;将KM雄性小鼠随机分为Cy3@PDC 5∶2∶3组和Cy3@PDC+PLA25∶2∶3组,每组3只,iv给药,Cy3给药剂量为1 mg·kg^(-1),相应载体量为80 mg·kg^(-1),2 h后,取脑组织进行荧光染色并观察Cy3荧光。(3)救治效果验证:①KM雄性小鼠随机分为正常对照组、脑损伤组、HI-6治疗组和HI-6@PDC+PLA25∶2∶3治疗组,每组6只。除正常对照组外,所有小鼠颈部sc给予梭曼(soman)120μg·kg^(-1);随后立即iv给药,HI-6给药剂量为22 mg·kg^(-1),相应载体量为80 mg·kg^(-1)。10 min后,摘眼球取血,取脑组织并记录重量,采用Ellman法测定小鼠血液与脑组织乙酰胆碱酯酶的重活化率;②分组和处理同①,每组3只。24 h后,取脑组织,经HE染色后,观察小鼠脑组织损伤情况;③KM雄性小鼠随机分为脑损伤组和HI-6@PDC+PLA25∶2∶3治疗组,每组10只,梭曼剂量为220μg·kg^(-1),其他处理同①。观察并记录各组小鼠死亡情况,绘制生存曲线;观察并记录各组小鼠的肌颤、流涎等神经中毒症状与惊厥潜伏期。结果(1)当PDC 5∶2∶3时,小鼠脑组织匀浆上清液中的荧光值最高,药物靶向进入中枢的效果最好。HI-6@PDC 5∶2∶3呈规则球形,带负电,粒径为(219.4±3.1)nm、多分散指数为0.4±0.02;包封率为72.9%,载药量为49.7%;HI-6@PDC+PLA25∶2∶3在60 min时的累积释放率为43.5%,虽低于罗丹明B水溶液,但该释放速率经体内实验验证可有效满足中枢神经系统救治的时效性要求。(2)活体荧光结果和病理荧光结果显示,PDC摩尔比为5∶2∶3在PLA2介导下实现了药物的中枢递送。(3)重活化实验结果表明,与HI-6相比,HI-6@PDC+PLA25∶2∶3可显著提高小鼠外周血与脑组织中乙酰胆碱酯酶的重活化率。HE染色结果显示,HI-6@PDC+PLA25∶2∶3可改善梭曼中毒引起的脑组织病理损伤;经HI-6@PDC+PLA25∶2∶3治疗的脑损伤小鼠生存周期显著延长,惊厥率降低,神经系统症状减轻,惊厥潜伏期延长。结论HI-6@PDC 5∶2∶3在PLA2介导下可有效穿透血脑屏障,具有良好的中枢靶向能力,能显著提升梭曼中毒小鼠外周及中枢乙酰胆碱酯酶重活化率,对有机磷脑损伤小鼠救治作用明显。 展开更多
关键词 有机磷化合物 脂质纳米颗粒 重活化 磷脂酶A2 血脑屏障 酰胺磷定
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对硫磷与对氧磷抑制的人脑乙酰胆碱酯酶的老化及重活化 被引量:2
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作者 李劲彤 张雨 +1 位作者 杜先林 孙曼霁 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期143-146,共4页
目的 了解对硫磷与对氧磷在试管内对人脑乙酰胆碱酯酶 (AChE)的抑制 ,膦酰化酶的老化速率及肟类药物的重活化效能有何差别。方法 微量羟胺比色法测定AChE活性。结果 对硫磷与对氧磷抑制人脑AChE 5 0 %活性的摩尔浓度的负对数值(pI50 ... 目的 了解对硫磷与对氧磷在试管内对人脑乙酰胆碱酯酶 (AChE)的抑制 ,膦酰化酶的老化速率及肟类药物的重活化效能有何差别。方法 微量羟胺比色法测定AChE活性。结果 对硫磷与对氧磷抑制人脑AChE 5 0 %活性的摩尔浓度的负对数值(pI50 )分别为 4 .10及 7.5 1,抑制人脑AChE 90 %活性的摩尔浓度的负对数值 (pI90 )值分别为 2 .5 5及6 .5 7。氯磷定、双复磷、双磷定和酰胺磷定 4种重活化剂对对硫磷与对氧磷抑制的人脑AChE的重活化作用有较大差异 ,等摩尔浓度条件下 ,其对对氧磷的重活化作用普遍好于对硫磷。且双肟类重活化剂作用普遍强于单肟类重活化剂 ;对硫磷与对氧磷的最佳重活化剂均为双复磷。对硫磷与对氧磷人脑AChE磷酰化酶的半老化时间 (t0 .5)分别为 14及 12h ,老化达到 99%的时间 (t0 .99)分别为 95及 81h。结论 对硫磷或对氧磷中毒时应尽早使用双复磷或双磷定。且在急性中毒症状控制后 ,仍须连续使用重活化剂 4d。 展开更多
关键词 有机磷化合物 乙酰胆碱酯酶 肟类 重活化 老化 毒理学
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重活化剂抗有机磷中毒直接作用机制探讨 被引量:4
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作者 关里 王汉斌 李万华 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期307-308,共2页
目的 为明确重活化剂直接抗有机磷化合物中毒作用机制 ,并为指导临床合理用药提供实验室依据。方法 肺神经 膈肌标本制备 ,观察有机磷化合物中毒和筒箭毒碱中毒所致肌麻痹 ,重活化剂对抗效果。结果 ①重活化剂对梭曼 (2mg·L- 1... 目的 为明确重活化剂直接抗有机磷化合物中毒作用机制 ,并为指导临床合理用药提供实验室依据。方法 肺神经 膈肌标本制备 ,观察有机磷化合物中毒和筒箭毒碱中毒所致肌麻痹 ,重活化剂对抗效果。结果 ①重活化剂对梭曼 (2mg·L- 1)所致膈肌麻痹模型强直收缩面积的影响 ,随重活化剂使用剂量增大 ,时间的延长 ,中毒膈肌强直收缩功能逐渐恢复。且这种恢复过程中没有发现明显的胆碱酯酶重活化现象。②重活化剂 (1mmol·L- 1)对抗 2μmol·L- 1箭毒化膈肌模型单收缩有较好恢复作用 ,对强直收缩抑制无明显影响。③重活化剂 (1mmol·L- 1)对抗箭毒 (0 .7μmol·L- 1)致肌麻痹的强直收缩有明显的恢复作用。④膈肌在经过有重活化剂的浴槽中孵育后 ,再建立箭毒化膈肌模型所需的箭毒浓度 ,要比没有经过孵育的膈肌箭毒化所需浓度大。其中L 2 0 0 0最明显。HI 6和双复磷次之。结论L 2 0 0 0等重活化剂的抗有机磷化合物中毒作用 ,除对磷酰化胆碱酯酶的重活化作用外 ,还可以通过其直接作用发挥抗毒效果 ,重活化剂在此过程中的作用如何 。 展开更多
关键词 有机磷中毒 重活化 L-2000 HI-6 双复磷 筒箭毒碱 梭曼
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胆碱酯酶结构与功能及磷酰化酶重活化机理 被引量:10
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作者 罗春元 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第4期329-333,355,共6页
对近几年来应用计算机模拟和分子生物学定点突变技术研究乙酰胆碱酯酶的结构与功能关系的进展进行了综述,对不同抑制剂的抑制作用机理及重活化药物对不可逆抑制剂有机磷酸酯磷酰化酶的重活化作用机理研究进展也进行了综述.
关键词 乙酰胆碱酯酶 磷酰化酶 重活化机理
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3种肟类化合物对中毒乙酰胆碱酯酶的重活化能力比较 被引量:1
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作者 张轶辉 吴刚 《华东昆虫学报》 2006年第4期301-304,共4页
3种肟类化合物(TMB4、LUH6和2-PAM-Cl)对辛硫磷抑制的鲫鱼、蟑螂和家蝇的乙酰胆碱酯酶(AChE)均具有重活化作用。初步比较研究了3种肟类化合物对中毒AChE的重活化能力,发现它们对被抑制的蟑螂和家蝇的AChE重活化能力差异不显著;但是对被... 3种肟类化合物(TMB4、LUH6和2-PAM-Cl)对辛硫磷抑制的鲫鱼、蟑螂和家蝇的乙酰胆碱酯酶(AChE)均具有重活化作用。初步比较研究了3种肟类化合物对中毒AChE的重活化能力,发现它们对被抑制的蟑螂和家蝇的AChE重活化能力差异不显著;但是对被抑制的鲫鱼的AChE来说,TMB4和L H6的重活化能力明显比2-PAM-Cl强。推测这3种肟类化合物对蟑螂、家蝇和鲫鱼的中毒AChE的活化能力的差异可能是由脊椎动物与无脊椎动物AChE本身的差异性造成的。 展开更多
关键词 肟类化合物 乙酰胆碱酯酶 重活化 蟑螂 家蝇 鲫鱼
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VX染毒小鼠乙酰胆碱酯酶活性和含量与作用时间的相互关系 被引量:1
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作者 黄静宜 章子男 +4 位作者 李尧 邢欢纯 王琦 王永安 杨军 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2021年第2期109-115,共7页
目的评价不同剂量VX对小鼠脑和外周血乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性和含量随时间变化的影响。方法小鼠sc给予VX 5,10和16μg·kg^(-1),分别于10 min,1 h,4 h,24 h,48 h和72 h记录体重和脑重,计算脑系数;Ellman法测定AChE活性;ELISA测定A... 目的评价不同剂量VX对小鼠脑和外周血乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性和含量随时间变化的影响。方法小鼠sc给予VX 5,10和16μg·kg^(-1),分别于10 min,1 h,4 h,24 h,48 h和72 h记录体重和脑重,计算脑系数;Ellman法测定AChE活性;ELISA测定AChE含量;并计算被VX抑制的AChE含量和VX消耗量。结果在染毒后72 h内,各组小鼠体重、脑重和脑系数均未见明显变化。与同剂量下染毒10 min相比,VX 5,10和16μg·kg^(-1)组外周血AChE活性抑制率在各时间点均明显下降(P<0.05,P<0.01)。与同剂量染毒10 min比较,VX 16μg·kg^(-1)组脑AChE活性抑制率在4~72 h显著下降(P<0.01);10μg·kg^(-1)组在48和72 h显著下降(P<0.01);5μg·kg^(-1)组在24 h显著上升(P<0.01),而在其他时间点无明显变化。各剂量组脑和外周血中VX的消耗量均在48 h达到最低,在72 h略有回升。VX 16μg·kg^(-1)组VX消耗量仅占染毒剂量的28%。结论在染毒后48 h内大部分毒剂残留在体内,72 h后可能再次引起中枢AChE抑制。因此,对于神经性毒剂VX中毒的救治,建议急性中毒症状控制后,在染毒48 h内再次给予抗毒药物。 展开更多
关键词 神经性毒剂 VX 抑制剂 乙酰胆碱酯酶 重活化
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制革、造纸和湖泊污泥燃烧特性的研究 被引量:13
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作者 李春雨 蒋旭光 +7 位作者 费振伟 安春国 池涌 严建华 俞恺 傅娟娟 潘金华 施政 《燃料化学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第6期757-762,共6页
利用热重分析法对城市湖泊污泥、制革污泥,以及两种造纸污泥进行了实验研究,并分析了污泥的燃烧特性。结果表明,四种污泥都具有高挥发分、高灰分、低热值的特点。污泥的燃烧分为挥发分燃烧和固定碳燃烧两个阶段,除了制革污泥在两个阶段... 利用热重分析法对城市湖泊污泥、制革污泥,以及两种造纸污泥进行了实验研究,并分析了污泥的燃烧特性。结果表明,四种污泥都具有高挥发分、高灰分、低热值的特点。污泥的燃烧分为挥发分燃烧和固定碳燃烧两个阶段,除了制革污泥在两个阶段失重份额相当外,湖泊污泥和造纸污泥的挥发分燃烧阶段失重都超过燃烧总失重的70%,表明挥发分是污泥中的主要可燃成分,而且挥发分和燃烧过程温度范围比较宽。污泥的挥发分燃烧DTG峰有明显的多峰叠加现象,表明污泥的挥发分析出组分较为复杂。运用Coats-Redfern积分法进行动力学分析后表明,大部分污泥的燃烧过程为二级反应,污泥燃烧的活化能较低。 展开更多
关键词 污泥 燃烧特性 动力学 分析 活化
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有机磷化合物的胆碱酯酶动力学研究进展 被引量:6
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作者 李克新 刘艳芹 +2 位作者 刘玉龙 郭磊 谢剑炜 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2021年第12期949-961,共13页
有机磷化合物(OP)是在磷(膦)骨架上形成的复杂多样的结构,部分具有剧毒和高毒性。如军用制式神经性毒剂(NA)和有机磷农药等,对人类健康和生命造成了严重威胁。OP的胆碱酯酶(ChE)动力学研究是其毒性机制和抗毒药物研究的重要基础。本文... 有机磷化合物(OP)是在磷(膦)骨架上形成的复杂多样的结构,部分具有剧毒和高毒性。如军用制式神经性毒剂(NA)和有机磷农药等,对人类健康和生命造成了严重威胁。OP的胆碱酯酶(ChE)动力学研究是其毒性机制和抗毒药物研究的重要基础。本文在文献计量聚类分析的基础上,主要针对NA和部分有机磷农药,论述了OP抑制ChE的反应机制和胆碱酯酶动力学研究方法,重点总结了不同结构OP和不同种属ChE的动力学特征,特别针对OP对人ChE的抑制、老化与自发重活化动力学特征与模型、肟类重活化剂的重活化动力学特征和新型重活化剂的研究等进行综述,以期为全面了解OP毒性及其毒性特征、有效评估解毒剂和开发更有效的治疗方案等提供有益参考。 展开更多
关键词 有机磷化合物 神经性毒剂 胆碱酯酶 酶动力学 重活化
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Effect of different surfactants on removal efficiency of heavy metals in sewage sludge treated by a novel method combining bio-acidification with Fenton oxidation 被引量:2
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作者 任苗苗 袁兴中 +7 位作者 朱艺 黄华军 曾光明 李辉 陈明 王侯 陈畅亚 林宁波 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS 2014年第12期4623-4629,共7页
The aim of this work was to investigate the effect of different surfactants on the removal efficiency of heavy metals in sewage sludge treated by a method combining bio-acidification with Fenton oxidation. Four surfac... The aim of this work was to investigate the effect of different surfactants on the removal efficiency of heavy metals in sewage sludge treated by a method combining bio-acidification with Fenton oxidation. Four surfactants were adopted such as anionic surfactant(sodium dodecyl benzene sulfonate, SDBS), nonionic surfactants(tween-20 and tween-60) and cationic surfactant(hexadecyl trimethyl ammonium chloride, HTAC), respectively. The indigenous sulfur-oxidizing bacteria in bio-acidification phase were enriched and cultured from fresh activated sludge obtained from a wastewater treatment plant. It is shown that different surfactants exhibited distinct effect on the removal efficiency of heavy metals from sewage sludge. The nonionic surfactants,especially tween-60, promotes the solubilization of heavy metals, while the anionic and cationic surfactants hinder the removal of heavy metals. Copper is efficiently leached. The removal efficiency of cadium is relatively lower than that of Cu due to the demand for rigorous p H value. Lead is leached with a low efficiency as the formation of low soluble Pb SO4 precipitates. 展开更多
关键词 sewage sludge heavy metals surfactants bio-acidification Fenton oxidation
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