重构型caspase-3的表达及其对SKBr3细胞的凋亡诱导作用 被引量：1

1

作者 张立红 贾林涛 +6 位作者 陈广生 曲萍 于翠娟 赵晶 许彦鸣 王成济 杨安钢 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2002年第4期253-256,共4页

目的:探讨重构型caspase-3基因的表达对肿瘤细胞的凋亡诱导作用。方法:用重组PCR的方法获得大、小亚基顺序颠倒的重构型caspase-3基因并将其克隆入真核表达载体pcDNA3,转染乳腺癌细胞系SKBr3细胞,通过HE染色、流式细胞仪分析及免疫组化... 目的:探讨重构型caspase-3基因的表达对肿瘤细胞的凋亡诱导作用。方法:用重组PCR的方法获得大、小亚基顺序颠倒的重构型caspase-3基因并将其克隆入真核表达载体pcDNA3,转染乳腺癌细胞系SKBr3细胞,通过HE染色、流式细胞仪分析及免疫组化等方法观察其表达后对细胞的促凋亡活性,并将载体DNA直接注射荷瘤裸鼠研究其对肿瘤的抑制作用。结果:重构型caspase-3基因可在SKBr3细胞内表达,转染组较同期对照组出现明显的细胞死亡现象,pcDNA3-revcasp-3重组质粒直接注入对荷瘤裸鼠肿瘤生长有明显抑制作用。结论:重构型caspase-3基因表达可诱导SKBr3细胞凋亡。 展开更多

关键词 重构型caspase-3 凋亡 SKBR3 乳腺癌 肿瘤细胞

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单链抗体融合重构型人caspase-3蛋白的靶向抑瘤作用研究 被引量：1

2

作者 张立红 贾林涛 +5 位作者 于翠娟 鲍炜 金明 赵晶 王成济 杨安钢 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第3期161-165,共5页

目的 :探讨分泌表达的抗ErbB2单链抗体与重构型人caspase 3融合蛋白对ErbB2抗原阳性肿瘤细胞的靶向杀伤作用。方法 :将重构型人caspase 3基因亚克隆入 pCMV e2 3scFv PEⅡ PEⅢ相应位点 ,构建表达分泌型的抗ErbB2单链抗体与重构型人cas... 目的 :探讨分泌表达的抗ErbB2单链抗体与重构型人caspase 3融合蛋白对ErbB2抗原阳性肿瘤细胞的靶向杀伤作用。方法 :将重构型人caspase 3基因亚克隆入 pCMV e2 3scFv PEⅡ PEⅢ相应位点 ,构建表达分泌型的抗ErbB2单链抗体与重构型人caspase 3融合蛋白基因的真核表达载体 pCMV e2 3scFv PEⅡ revcasp 3,转染人T淋巴瘤细胞系Jurkat,筛选并建系 ,ELISA检测培养上清中融合蛋白的分泌表达。用含有该融合蛋白的培养介质培养人宫颈癌细胞Hela、乳腺癌细胞SKBr3以及人卵巢癌细胞SKOV3等研究该蛋白对细胞生长的抑制作用 ;将转染建系的Jurkat细胞尾静脉注射SKBr3荷瘤裸鼠研究其对肿瘤的抑制作用 ,间接免疫荧光检测重构型人caspase 3蛋白在瘤体的靶向分布。 结果 :融合蛋白基因可通过Jurkat细胞分泌表达并杀伤ErbB2抗原阳性的SKBr3和SKOV3细胞而对ErbB2抗原阴性的Hela细胞生长无明显影响 ,尾静脉注射该细胞可靶向抑制荷瘤裸鼠肿瘤生长。结论 :分泌表达的抗ErbB2单链抗体与重构型人caspase 3融合蛋白靶向诱导ErbB2抗原阳性肿瘤细胞死亡。 展开更多

关键词 重构型人caspase-3 ErbB2抗原 靶效应 HELA SKBR3 SKOV3

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基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路对泼尼松联合淫羊藿苷提高激素抵抗型肾病综合征疗效的机制研究 被引量：3

3

作者 段淑文 魏亚君 +4 位作者 武天凯 王晓辉 丁照然 刘灿 戴恩来 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1081-1090,共10页

目的:探讨泼尼松联合淫羊藿苷(icariin,ICA)对激素抵抗型肾病综合征(SRNS)的治疗作用及可能的分子机制。方法:体内实验用阿霉素建立大鼠模型,将大鼠分为空白组、模型组、泼尼松组(6.3 mg·kg^(-1)·d^(-1))、联合组(泼尼松6.3 m... 目的:探讨泼尼松联合淫羊藿苷(icariin,ICA)对激素抵抗型肾病综合征(SRNS)的治疗作用及可能的分子机制。方法:体内实验用阿霉素建立大鼠模型,将大鼠分为空白组、模型组、泼尼松组(6.3 mg·kg^(-1)·d^(-1))、联合组(泼尼松6.3 mg·kg^(-1)·d^(-1)+淫羊藿苷50 mg·kg^(-1)·d^(-1)),各给药组分别予相应药物灌胃,连续6周。CBB法检测大鼠24小时尿蛋白;全自动血液生化分析仪检测大鼠白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、肌酐、尿素氮;HE、Masson染色检测大鼠肾组织形态学变化;免疫组化及Western blot检测GR-α、GR-β、NLRP3、caspase-1、GSDMD的表达。体外实验用阿霉素诱导HK-2细胞损伤模型,分为空白组、模型组、联合组和NLRP3沉默组,Rt-PCR检测GR-α、GR-β、caspase-1、GSDMD mRNA的表达,Western blot检测GR-α、GR-β、caspase-1、GSDMD蛋白的表达。结果:体内实验中,与空白组比较,模型组大鼠的体质量减轻,24小时尿蛋白增多,白蛋白减少,总胆固醇、甘油三酯、肌酐、尿素氮升高,肾小管萎缩,肾间质区水肿,其中炎症细胞浸润明显,有纤维组织增生,肾组织中GR-β、NLRP3、caspase-1、GSDMD的水平上升,GR-α的水平降低(P<0.01);与模型组比较,联合组大鼠的体质量增加,24小时尿蛋白减少,白蛋白增多,总胆固醇、甘油三酯、肌酐、尿素氮降低,肾小管萎缩减轻,肾间质炎症细胞浸润减少,肾组织中GR-β、NLRP3、caspase-1、GSDMD的水平降低,GR-α的水平升高(P<0.01)。体外实验中,与空白组比较,模型组GR-β、caspase-1、GSDMD的mRNA及蛋白表达增加(P<0.01),GR-α的m RNA及蛋白表达降低(P<0.01);与模型组比较,联合组及NLRP3沉默组GR-β、caspase-1、GSDMD的mRNA及蛋白表达减少(P<0.01),GR-α的m RNA及蛋白表达增加(P<0.01)。结论:泼尼松联合ICA对SRNS大鼠的肾脏具有保护作用,可以提高SRNS大鼠的疗效,其机制可能与NLRP3/caspase-1/GSDMD通路相关。 展开更多

关键词 激素抵抗型肾病综合征 泼尼松 淫羊藿苷 NLRP3/caspase-1/GSDMD通路

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重构型人caspase-8基因的表达诱导HeLa细胞凋亡 被引量：3

4

作者 桂俊豪 赵晶 +4 位作者 许彦鸣 于翠娟 贾林涛 王成济 杨安钢 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第5期738-743,共6页

以两种大、小亚基基因次序颠倒的重构型人caspase 8基因的pIRES2 EGFP真核表达载体转染HeLa细胞 ,用间接免疫荧光染色、免疫细胞化学染色和电镜观察等方法 ,研究重构型人caspase 8基因在HeLa细胞中的表达及其促凋亡活性 .结果显示 ,两... 以两种大、小亚基基因次序颠倒的重构型人caspase 8基因的pIRES2 EGFP真核表达载体转染HeLa细胞 ,用间接免疫荧光染色、免疫细胞化学染色和电镜观察等方法 ,研究重构型人caspase 8基因在HeLa细胞中的表达及其促凋亡活性 .结果显示 ,两种重构型人caspase 展开更多

关键词 重构型人caspase-8基因 表达 诱导 HELA细胞 细胞凋亡

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四藤方对SGC-7901胃癌Caspase-3、剪辑型PARP及Livin表达影响 被引量：3

5

作者 何萍 沈克平 +1 位作者 胡兵 卢艳琳 《中华中医药学刊》 CAS 2014年第2期247-249,I0001,共4页

目的:观察四藤方对人胃癌SGC-7901裸小鼠皮下移植瘤Caspase-3、剪辑型PARP及Livin蛋白表达的影响。方法:人胃腺癌SGC-7901细胞BALB/C裸小鼠皮下移植瘤模型,随机分为3组,每组10只。对照组予生理盐水0.3 mL灌胃,1次/d;四藤方组予四藤方煎... 目的:观察四藤方对人胃癌SGC-7901裸小鼠皮下移植瘤Caspase-3、剪辑型PARP及Livin蛋白表达的影响。方法:人胃腺癌SGC-7901细胞BALB/C裸小鼠皮下移植瘤模型,随机分为3组,每组10只。对照组予生理盐水0.3 mL灌胃,1次/d;四藤方组予四藤方煎剂0.3 mL灌胃,1次/d;5-Fu组予5-Fu腹腔注射,1 mg/次·周。免疫组织化学法检测胃癌组织Caspase-3、剪辑型PARP及Livin蛋白表达。结果:四藤方治疗后,SGC-7901裸小鼠移植瘤Caspase-3及剪辑型PARP蛋白表达升高(P<0.05);Livin蛋白表达降低(P<0.01)。结论:四藤方可上调SGC-7901裸鼠移植瘤Caspase-3,促进PARP剪辑,下调Livin蛋白表达。 展开更多

关键词 胃癌 四藤方 caspase-3 剪辑型PARP LIVIN

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survivin在鼻型NK/T细胞淋巴瘤的表达及其与caspase-3、ki-67相关性的研究 被引量：3

6

作者 金永丽 王靖华 +1 位作者 陈龙邦 周航波 《医学研究生学报》 CAS 2008年第3期242-244,248,I0002,共5页

目的:探讨survivin在鼻型NK/T细胞淋巴瘤中的表达,并进一步分析其表达与caspase-3基因表达和细胞增殖的关系。方法:应用免疫组化EnVision System检测survivin、caspase-3和ki-67在50例鼻型NK/T细胞淋巴瘤和12例正常淋巴结组织石蜡标本... 目的:探讨survivin在鼻型NK/T细胞淋巴瘤中的表达,并进一步分析其表达与caspase-3基因表达和细胞增殖的关系。方法:应用免疫组化EnVision System检测survivin、caspase-3和ki-67在50例鼻型NK/T细胞淋巴瘤和12例正常淋巴结组织石蜡标本中的表达,并分析肿瘤组织中survivin与caspase-3基因表达、ki-67增殖指数的关系。结果:肿瘤组织中survivin阳性表达率为60%(30/50),正常淋巴结组织中survivin阳性表达率为16.7%(2/12),且主要局限于少数生发中心细胞,两者差异有显著性(P<0.05);caspase-3在肿瘤组织和正常淋巴结中的阳性表达率分别为84%(42/50)和100%(12/12),但两者差异无显著性统计学意义(P>0.05)。survivin高表达与caspase-3基因表达下调密切相关(P<0.05)。survivin阳性组ki-67增殖指数(38.23±16.54)%明显高于survivin阴性组(23.15±21.53)%(P<0.05)。结论:在鼻型NK/T细胞淋巴瘤组织中,survivin可能通过抑制caspase-3的激活而发挥其抑制细胞凋亡的作用,survivin与细胞增殖指数呈正相关,可能促进肿瘤细胞增殖。survivin异常表达在鼻型NK/T细胞淋巴瘤的发生发展中有一定的作用。 展开更多

关键词 鼻型NK/T细胞淋巴瘤 SURVIVIN caspase-3 ki-67增殖指数

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盐地碱蓬对2型糖尿病大鼠胰腺Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响 被引量：6

7

作者 张国伟 陈新新 +5 位作者 田春雨 马雷雷 付文浩 李继安 王自善 付常宽 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1644-1651,共8页

通过观察盐地碱蓬对2型糖尿病(T2DM)大鼠血糖及胰腺Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响,探讨盐地碱蓬改善糖代谢的作用机制。采用高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病大鼠模型,检测空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(PG2h)、... 通过观察盐地碱蓬对2型糖尿病(T2DM)大鼠血糖及胰腺Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响,探讨盐地碱蓬改善糖代谢的作用机制。采用高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病大鼠模型,检测空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(PG2h)、糖耐量(OGTT)并计算曲线下面积(AUC);检测血清中糖化血红蛋白(GHb)、C-肽(C-P)并计算胰岛素抵抗指数(IR指数);苏木素-伊红(HE)染色观察胰腺组织病理形态学变化;免疫组化检测(IHC)胰腺组织中Bax、Bcl-2蛋白平均光密度值,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胰腺组织中Bax、Bcl-2、Caspase-3、cleaved-Caspase-3蛋白表达水平。结果发现与正常组相比模型组FBG、PG2h、OGTT-AUC及GHb显著升高,C-P显著降低(P<0.01),胰腺组织中Bcl-2蛋白表达水平显著下调(P<0.01),Bax、Caspase-3、cleaved-Caspase-3蛋白水平显著上调(P<0.01);与模型组相比,盐地碱蓬组FBG、PG2h、OGTT-AUC及GHb显著降低,C-P显著升高(P<0.01),胰腺组织中Bcl-2蛋白表达水平显著上调,Bax、Caspase-3、cleaved-Caspase-3蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。研究表明盐地碱蓬可以改善T2DM大鼠糖代谢,其作用机制可能与上调胰腺组织中Bcl-2,下调Bax、Caspase-3,降低cleaved-Caspase-3蛋白表达水平有关。 展开更多

关键词 盐地碱蓬 2型糖尿病 BAX BCL-2 caspase-3 cleaved-caspase-3

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黄芪-当归对新鲜同种异体骨软骨移植术后兔软骨细胞凋亡及Bax、caspase-3/9表达的影响

8

作者 董万涛 杨攀 +5 位作者 杨秀娟 邱世明 袁鹏 刘静怡 黄九妹 周预 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2288-2294,共7页

目的 通过观察黄芪-当归对软骨细胞凋亡的干预作用,探讨黄芪-当归对新鲜同种异体骨软骨移植成活的影响。方法 4月龄新西兰白兔48只,雌雄各半,随机分为假手术组、模型组、阳性组、黄芪当归5:1组。除假手术组外,其余组雌雄互为供体与受体... 目的 通过观察黄芪-当归对软骨细胞凋亡的干预作用,探讨黄芪-当归对新鲜同种异体骨软骨移植成活的影响。方法 4月龄新西兰白兔48只,雌雄各半,随机分为假手术组、模型组、阳性组、黄芪当归5:1组。除假手术组外,其余组雌雄互为供体与受体,进行膝关节骨软骨交叉移植造模。药物干预8周后取材,进行大体观察、HE染色、番红-O染色、免疫组化染色、qPCR及Western blot检测。结果 与模型组相比,黄芪当归5:1组、阳性组移植修复部位愈合较好,软骨细胞形态趋于正常,分裂增殖明显;蛋白多糖沉积增多,Ⅱ型胶原含量较高,差异均有统计学意义(P<0.05);qPCR及Western blot结果显示,与模型组相比,其余组Bax、caspase-3、caspase-9 mRNA及蛋白表达量均明显降低(P <0.05)。结论 黄芪-当归可促进新鲜同种异体骨软骨移植成活,其机制可能与促进胶原蛋白的产生、促进软骨细胞增殖与抑制软骨细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 黄芪-当归药对 新鲜同种异体骨软骨移植 Ⅱ型胶原 BAX caspase-3 caspase-9

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具有自发活性的重组caspase-3对裸鼠SKBr-3肿瘤生长的抑制 被引量：2

9

作者 鲍炜 张立红 +3 位作者 贾林涛 曲萍 王成济 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期23-26,共4页

目的 :探讨具有自发活性的caspase 3分子对乳腺癌肿瘤细胞凋亡的诱导作用。方法 :重构型caspase 3转染SKBr 3细胞后 ,以观察细胞的形态、进行细胞计数和及流式细胞仪分析等方法 ,验证caspase 3大、小亚基顺序颠倒的重构型caspase 3分子... 目的 :探讨具有自发活性的caspase 3分子对乳腺癌肿瘤细胞凋亡的诱导作用。方法 :重构型caspase 3转染SKBr 3细胞后 ,以观察细胞的形态、进行细胞计数和及流式细胞仪分析等方法 ,验证caspase 3大、小亚基顺序颠倒的重构型caspase 3分子的促凋亡活性。将重组真核表达载体 pcDNA3 revcas pase 3直接注射荷瘤裸鼠研究其对肿瘤生长的抑制作用 ,间接免疫荧光染色法检测肿瘤组织中重构型caspase 3基因表达情况 ,用TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡。结果 :重构型cas pase 3基因转染后 ,可诱导SKBr 3细胞凋亡 ,将 pcDNA3 revcaspase 3重组质粒直接注射荷SKBr 3瘤裸小鼠后 ,肿瘤的生长明显受到抑制 ,免疫组化染色可检出重构型caspase 3蛋白的表达 ;TUNEL法检测证实肿瘤细胞发生凋亡。结论 :重构型caspase 3基因的体内表达可诱导SKBr 展开更多

关键词 重构型caspase-3 自发活性 凋亡

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乌司他丁对兔缺血缺氧性海马损伤神经元nNOS和Caspase-3表达的影响 被引量：6

10

作者 梁亚统 刘冰冰 +3 位作者 周代伟 张超城 舒海华 肖晓山 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第4期550-553,共4页

目的:研究乌司他丁(UTI)预处理对兔缺血缺氧性损伤海马神经元神经元型一氧化氮合酶(n NOS)和Caspase-3表达的影响。方法:动物分为正常对照组(Cont组)、控制性降压组(CH组)和UTI预处理组(UTI组),后者在降压之前静脉注射UTI 50 000 U/kg。... 目的:研究乌司他丁(UTI)预处理对兔缺血缺氧性损伤海马神经元神经元型一氧化氮合酶(n NOS)和Caspase-3表达的影响。方法:动物分为正常对照组(Cont组)、控制性降压组(CH组)和UTI预处理组(UTI组),后者在降压之前静脉注射UTI 50 000 U/kg。TUNEL染色观察海马CA1区细胞凋亡程度,n NOS免疫组化染色观察CA1神经元形态学改变,Western blot检测n NOS和Caspase-3蛋白的表达水平。结果:UTI组TUNEL染色的细胞凋亡指数和n NOS免疫组化染色的光密度值均明显比CH组低(P<0.05)。UTI组n NOS和Caspase-3蛋白表达水平均显著低于CH组,但高于Cont组(P<0.05)。结论:UTI可能是通过抑制n NOS蛋白表达,减少细胞凋亡,从而减轻CH诱导的兔海马缺血缺氧性损伤。 展开更多

关键词 乌司他丁 控制性降压 缺血缺氧性脑损伤 神经元型一氧化氮合酶 caspase-3

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猪圆环病毒3型7个ORFs不能诱导PK-15细胞凋亡 被引量：1

11

作者 柳迦鹏 刘鑫宇 +3 位作者 胡胜云 王阳 石玉佩 周双海 《北京农学院学报》 2019年第2期67-70,共4页

【目的】为了探明猪圆环病毒3型的致病机制。【方法】用PCR技术扩增PCV3的ORF1-ORF7基因片段并克隆到pEGFP-C1载体,构建7个真核表达质粒后分别转染PK-15细胞,在转染后不同时间观察细胞中荧光表达情况,并检测Caspase-3活性变化。【结果】... 【目的】为了探明猪圆环病毒3型的致病机制。【方法】用PCR技术扩增PCV3的ORF1-ORF7基因片段并克隆到pEGFP-C1载体,构建7个真核表达质粒后分别转染PK-15细胞,在转染后不同时间观察细胞中荧光表达情况,并检测Caspase-3活性变化。【结果】7个真核表达质粒转染PK-15细胞后均可观察到荧光,表明PCV3的ORF1-ORF7基因均可在PK-15细胞中获得表达,但在表达丰度方面存在差异。与单独的PK-15细胞和pEGFP-C1载体转染的PK-15细胞相比,7个真核表达质粒转染PK-15细胞后都未出现Caspase-3活性的显著(P>0.05)变化,表明均未引起PK-15细胞发生凋亡。【结论】PCV3的ORF1-ORF7基因均无诱导PK-15细胞发生凋亡的作用。 展开更多

关键词 猪圆环病毒3型 开放阅读框 caspase-3 细胞凋亡

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盐酸小檗碱通过抑制TNF-α/caspase-8/caspase-3信号通路减轻急性低氧暴露引起的肝损伤 被引量：5

12

作者 张子昂 董倩 +3 位作者 官瑞丽 孙亚菲 刘新秦 邹远康 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期48-53,共6页

目的 研究盐酸小檗碱(BBR)对急性低氧暴露后肝脏的保护作用及相关机制。方法 C57BL/6小鼠分为常氧组、低氧暴露组、低氧暴露联合BBR组。实验第7天处死小鼠,取肝脏组织。称量小鼠及肝组织的质量,利用HE染色观察肝组织病变情况,利用实时定... 目的 研究盐酸小檗碱(BBR)对急性低氧暴露后肝脏的保护作用及相关机制。方法 C57BL/6小鼠分为常氧组、低氧暴露组、低氧暴露联合BBR组。实验第7天处死小鼠,取肝脏组织。称量小鼠及肝组织的质量,利用HE染色观察肝组织病变情况,利用实时定量PCR检测肝组织白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达水平,Western blot法检测肝脏组织TNF-α、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、 caspase-8的蛋白表达水平,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测小鼠肝组织细胞凋亡情况。结果 低氧暴露7 d后,小鼠体质量及肝质量显著降低且肝组织损伤明显、肝组织细胞TNF-α和IL-1β的mRNA的水平以及caspase-8、 c-caspase-3蛋白的表达显著增加、肝组织细胞凋亡增加;BBR给药处理可以显著提升低氧暴露7d小鼠体质量及肝质量、降低TNF-αmRNA表达水平以及caspase-8、 c-caspase-3蛋白表达水平、减轻肝组织的细胞凋亡。结论 BBR可能通过抑制TNF-α/caspase-8/caspase-3凋亡信号通路缓解低氧暴露导致的肝脏损伤。 展开更多

关键词 低氧 肝损伤 肿瘤坏死因子α(TNF-α) 盐酸小檗碱(BBR) 白细胞介素1β(IL-1β) IL-6 裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3) 胱天蛋白酶8(caspase-8)

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p38 MAPK信号通路在异氟醚诱导新生大鼠海马神经细胞凋亡的作用 被引量：6

13

作者 廖朝霞 王飞 +2 位作者 曹德雄 柳垂亮 李玉娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1661-1666,共6页

目的探讨异氟醚麻醉对新生大鼠海马组织的p38丝裂原活化蛋白激酶通路(mitogen-activated protein kinase,MAPK)激活的影响,以及p38 MAPK信号通路对异氟醚诱导海马神经细胞凋亡的影响。方法 48只出生后7 d的新生大鼠随机分为DMSO对照组(A... 目的探讨异氟醚麻醉对新生大鼠海马组织的p38丝裂原活化蛋白激酶通路(mitogen-activated protein kinase,MAPK)激活的影响,以及p38 MAPK信号通路对异氟醚诱导海马神经细胞凋亡的影响。方法 48只出生后7 d的新生大鼠随机分为DMSO对照组(Air+DMSO组)、p38 MAPK抑制剂SB203580对照组(Air+SB20组)、异氟醚+DMSO组(Iso+DMSO组)和异氟醚+SB203580组(Iso+SB20组)。对照组吸入空气,异氟醚组吸入体积分数为0.011异氟醚4 h。麻醉前30 min,分别侧脑室注射SB203580(20 nmol)或者体积分数为0.1 DMSO 5μl。麻醉结束后6 h,部分幼鼠灌注取脑,TUNEL荧光染色检测幼鼠脑海马CA1区神经细胞凋亡(n=6);部分幼鼠取新鲜脑海马,Western blot法检测磷酸化p38(phospho-p38,p-p38)、p38、cleaved caspase-3、磷酸化NF-κB(phospho-NF-κB,p-NF-κB)、Bcl-2、Bax等蛋白表达的变化(n=6)。结果 Iso+DMSO组海马CA1区TUNEL阳性细胞数比Air+DMSO组增加了4.8倍(P<0.01),与Iso+DMSO组相比,Iso+SB20组海马CA1区TUNEL阳性细胞数降低了约3/5(P<0.01);Iso+DMSO组海马cleaved caspase-3蛋白表达较Air+DMSO组表达增加(P=0.003),Iso+SB20组减少了异氟醚引起的海马cleaved caspase-3增加(P=0.007);与Air+DMSO组比较,异氟醚增加了p-p38及其下游p-NF-κB的表达,增加了Bax的表达,降低了Bcl-2的表达;而p38抑制剂SB203580则减少了异氟醚引起的pp38、p-NF-κB和Bax的增加,增加了Bcl-2的表达。结论异氟醚通过激活p38 MAPK信号通路诱导发育期大鼠海马神经细胞凋亡。 展开更多

关键词 异氟醚 细胞凋亡 p38 丝裂原活化蛋白激酶 海马 激活型 caspase-3 BCL 相关死亡蛋白

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参麦注射液改善急性心肌梗死大鼠心功能与左室重构的机制初探 被引量：6

14

作者 陈彦静 李建东 +1 位作者 郝然 黄启福 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1628-1629,共2页

目的:观察了参脉注射液对心肌梗死后心功能和心室重构的影响,及其对心肌细胞凋亡的影响. 方法:(1)结扎大鼠左冠状动脉前降支建立大鼠心肌梗死心室重构模型,随机分为心肌梗死后1、2周模型组,②参麦注射液治疗1、2周治疗组,另设两假手术组... 目的:观察了参脉注射液对心肌梗死后心功能和心室重构的影响,及其对心肌细胞凋亡的影响. 方法:(1)结扎大鼠左冠状动脉前降支建立大鼠心肌梗死心室重构模型,随机分为心肌梗死后1、2周模型组,②参麦注射液治疗1、2周治疗组,另设两假手术组.多导生理记录仪测量:左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和下降速率(-dp/dtmax)以反映左室收缩与舒张功能.测定心脏心脏总重量、左室截面直径,并计算心室重量指数;HE染色、Masson染色、透射电镜观察心结构改变.(2)乳鼠心肌细胞原代培养,AngⅡ诱导凋亡模型.利用荧光染色观察凋亡形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡、心肌细胞线粒体膜电位;激光共聚焦显微镜检测钙离子荧光强度,免疫组化染色检测Bcl-2/Bax、Caspase-3蛋白的表达. 展开更多

关键词 急性心肌梗死 参麦注射液 左室重构 心功能 大鼠 caspase-3蛋白 心肌细胞凋亡 钙离子荧光强度 BCL-2/BAX

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脑外伤后T型钙通道对神经干细胞增殖的诱导作用 被引量：1

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作者 张熙 娄淼 +1 位作者 周乐 尉春艳 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期484-488,512,共6页

目的探讨脑外伤后T型钙通道对神经干细胞的诱导作用及其相关机制。方法构建成年大鼠脑损伤模型,分为手术组和手术+米贝地尔组(米贝地尔组),并另设正常对照组、假手术组。分离侧脑室壁的脑室下层(subventricular zone,SVZ)细胞,用神经干... 目的探讨脑外伤后T型钙通道对神经干细胞的诱导作用及其相关机制。方法构建成年大鼠脑损伤模型,分为手术组和手术+米贝地尔组(米贝地尔组),并另设正常对照组、假手术组。分离侧脑室壁的脑室下层(subventricular zone,SVZ)细胞,用神经干细胞悬浮培养法进行培养并鉴定其干细胞性质;在神经干细胞培养基中加入不同剂量的米贝地尔,通过计数神经干细胞球、噻唑蓝(MTT)法分析米贝地尔对神经干细胞增殖抑制作用,计算米贝地尔对神经干细胞的半抑制浓度(IC50),Western blot法检测脑组织中Cav3.2以及神经干细胞中Cav3.2、Cyclin A和caspase-3的蛋白表达。结果体内实验表明,手术组中神经干细胞的增殖能力显著高于正常对照组和假手术组,应用米贝地尔腹腔注射抑制脑组织中T型钙通道后,神经干细胞的增殖明显降低。体外细胞实验表明,米贝地尔能够明显抑制神经干细胞球的形成,MTT法显示米贝地尔浓度大于5μmol/L时,可显著抑制细胞增殖,5、10、20μmol/L组的吸光度(A值)与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。IC50值为8.93μmol/L。Western blot检测结果显示,米贝地尔组的Cav3.2蛋白和Cyclin A蛋白的表达显著降低,caspase-3蛋白的表达显著升高。结论脑外伤后可激活脑组织中T型钙通道,上调神经干细胞的增殖能力。 展开更多

关键词 脑外伤 神经干细胞 T型钙通道 米贝地尔 细胞周期 Cav3.2 CYCLIN A caspase-3

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氧化型低密度脂蛋白对PC12细胞的毒性作用 被引量：1

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作者 曹莉 尹鸿操 +1 位作者 周礼 王拥军 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2004年第2期166-170,共5页

目的 :探讨氧化型低密度脂蛋白 (oxLDL)对PC1 2细胞的毒性作用。方法 :通过HE染色、透射电镜、MTT实验、LDH释放实验、TUNEL实验及Caspase 3测定来观察oxLDL对PC1 2细胞形态、存活率、细胞膜通透性、细胞核及Caspase 3活性的影响。结果 ... 目的 :探讨氧化型低密度脂蛋白 (oxLDL)对PC1 2细胞的毒性作用。方法 :通过HE染色、透射电镜、MTT实验、LDH释放实验、TUNEL实验及Caspase 3测定来观察oxLDL对PC1 2细胞形态、存活率、细胞膜通透性、细胞核及Caspase 3活性的影响。结果 :透射电镜及光镜下oxLDL作用的PC1 2细胞以坏死为主并伴少量凋亡细胞。细胞存活率随着ox LDL浓度及作用时间增加而下降 ;LDH释放率、TUNEL阳性细胞数及Caspase 3活性随着浓度增高而增高 ;LDL对上述各项指标无影响。结论 :oxLDL通过Caspase 3途径致PC1 2细胞的毒性作用主要以坏死细胞为主并伴少量凋亡细胞 ,并呈量效与时效关系 ; 展开更多

关键词 氧化型低密度脂蛋白 PC12细胞 细胞毒性 caspase-3

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东亚型CagA^+幽门螺杆菌感染与不同胃黏膜病变中凋亡蛋白表达的关系 被引量：5

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作者 郭焱 王进海 +3 位作者 赵平 王莉 龚均 戴社教 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期623-627,631,共6页

目的通过观察幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)及其东亚型CagA+菌株在西安地区不同胃黏膜病变中的感染情况及其对胃黏膜中凋亡蛋白Bax、Bcl-2、Fas及caspase-3表达的影响,以探讨其在胃癌发生发展中的作用。方法在西安地区通过内镜获... 目的通过观察幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)及其东亚型CagA+菌株在西安地区不同胃黏膜病变中的感染情况及其对胃黏膜中凋亡蛋白Bax、Bcl-2、Fas及caspase-3表达的影响,以探讨其在胃癌发生发展中的作用。方法在西安地区通过内镜获取不同胃黏膜病变的胃黏膜组织并经HE染色病理确诊。其中包括浅表性胃炎(chronic superficial gastritis,CSG)、萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)、萎缩性胃炎伴不典型增生(chronic atrophic gastritis with dysplasia,Dys)、胃癌(gastric cancer,GC)。用快速尿素酶试验及免疫组织化学方法检测Hp及东亚型CagA+菌株感染情况;用免疫组化方法分别检测各组中凋亡蛋白Bax、Bcl-2、Fas、caspase-3的表达情况。结果①西安地区Hp及东亚型CagA+菌株感染在胃癌中最高,在慢性浅表性胃炎中最低,差异有统计学意义(P<0.05);②Hp(+)组中Bax、Fas表达率高于Hp(-)组(P<0.05),东亚型CagA+Hp感染组Bax、Fas、caspase-3表达率高于非东亚型CagA+Hp感染组(P<0.05),而Bcl-2表达率低于非东亚型CagA+HP感染组(P<0.05);③在CAG组、Dys组、GC组中,Bax、Fas、caspase-3表达率逐渐减低,Bcl-2表达率逐渐升高。结论西安地区以东亚型CagA+菌株感染为主,东亚型CagA+Hp感染后,促进胃黏膜上皮细胞凋亡,与其他多种因素共同作用,最终导致胃癌的发生。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 东亚型CagA+菌株 胃癌 BAX Bcl-2 FAS caspase-3

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RON蛋白与CXC趋化因子受体4蛋白的表达与去势抵抗型前列腺癌患者阿比特龙耐药的相关性 被引量：3

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作者 魏松长 杨红琪 +2 位作者 张宏娟 施晓丽 任凯文 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2021年第4期414-422,共9页

目的:研究受体酪氨酸激酶(RON)蛋白与CXC趋化因子受体4(CXCR4)蛋白的表达与去势抵抗型前列腺癌(CRPC)患者阿比特龙耐药的相关性。方法:选取2017年1月至2020年2月我院收治的127例接受阿比特龙治疗的CRPC患者,根据是否耐药分为观察组(n=32... 目的:研究受体酪氨酸激酶(RON)蛋白与CXC趋化因子受体4(CXCR4)蛋白的表达与去势抵抗型前列腺癌(CRPC)患者阿比特龙耐药的相关性。方法:选取2017年1月至2020年2月我院收治的127例接受阿比特龙治疗的CRPC患者,根据是否耐药分为观察组(n=32,阿比特龙耐药患者)、对照组(n=95,缓解患者)。采用免疫组化与蛋白免疫印迹检测比较两组RON、CXCR4蛋白表达,采用Logistic回归分析进行RON、CXCR4蛋白与耐药的单因素、多因素分析,采用受试者工作特征曲线(ROC)及ROC下面积(AUC)分析RON、CXCR4蛋白预测耐药的价值,并在阿比特龙耐药细胞株中加入RON、CXCR4抑制剂,观察两者对阿比特龙耐药细胞凋亡指标[半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、caspase-9、细胞凋亡率]的影响。结果:免疫组化显示,观察组RON阳性表达率(71.88%,23/32)较对照组(27.37%,26/95)高;观察组CXCR4阳性表达率(65.63%,21/32)较对照组(12.63%,12/95)高;蛋白免疫印迹检测显示,观察组RON、CXCR4蛋白较对照组高(P<0.05);RON、CXCR4蛋白与耐药均呈正相关(P<0.05);加入RON、CXCR4抑制剂后,RON、CXCR4表达被成功抑制,且caspase-3、caspase-9、细胞凋亡率均高于阿比特龙耐药细胞株(P<0.05);Transwell实验检测细胞迁移及侵袭显示,抑制RON、CXCR4表达,细胞迁移及侵袭细胞数目均显著降低(P<0.05);RON蛋白预测阿比特龙耐药的AUC为0.789,截断值>4.11,敏感度为84.37%,特异度为61.05%(P<0.05);CXCR4蛋白预测阿比特龙耐药的AUC为0.825,截断值>3.42,敏感度为75.00%,特异度为80.00%(P<0.05);RON+CXCR4蛋白预测阿比特龙耐药的AUC为0.884(95%CI:0.815~0.934),敏感度为87.50%,特异度为83.16%(P<0.05)。结论:CRPC患者RON、CXCR4蛋白表达显著增加,与患者阿比特龙耐药密切相关,有望成为预测耐药的标志物,抑制RON、CXCR4蛋白表达,可促进CRPC阿比特龙耐药细胞的凋亡。 展开更多

关键词 RON蛋白 CXC趋化因子受体4蛋白 去势抵抗型前列腺癌 阿比特龙 耐药 caspase-3 caspase-9 凋亡率

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淫羊藿次苷Ⅱ对野百合碱所致肺动脉重构大鼠凋亡相关蛋白的影响 被引量：1

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作者 李叶丽 廖娅 +3 位作者 钱志强 朱玲 李意奇 杨丹莉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1736-1740,共5页

目的研究淫羊藿次苷Ⅱ(ICSⅡ)对野百合碱(MCT)所致大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响,并初步探讨其机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、ICSⅡ低、中、高剂量组(4、8、16 mg·kg^(-1))。模型组和ICSⅡ组大鼠经皮下注射MCT诱导... 目的研究淫羊藿次苷Ⅱ(ICSⅡ)对野百合碱(MCT)所致大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响,并初步探讨其机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、模型组、ICSⅡ低、中、高剂量组(4、8、16 mg·kg^(-1))。模型组和ICSⅡ组大鼠经皮下注射MCT诱导肺动脉重构模型,ICSⅡ组于MCT注射后d 1开始给药至d 28结束,模型组和对照组给予等量溶媒。HE染色观察肺小动脉形态学变化;TUNEL染色观察肺动脉平滑肌细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法检测肺组织Bax、Bcl-2和活化的caspase-3蛋白的表达。结果与对照组比,模型组肺小动脉中膜明显增厚;肺动脉平滑肌细胞发生凋亡,TUNEL阳性细胞比率升高(P<0.05);肺组织Bax、Bcl-2、活化的caspase-3的表达上调(P<0.05)。与模型组比,ICSⅡ中、高剂量组肺小动脉中膜变薄;细胞凋亡数均明显增加,TUNEL阳性细胞比率升高(P<0.05);肺组织Bcl-2的表达明显下调(P<0.05),Bax、活化的caspase-3的表达均上调(P<0.05)。结论 ICSⅡ具有促进MCT所致大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的作用,其机制可能与下调Bcl-2,上调Bax和活化的caspase-3的表达有关。 展开更多

关键词 淫羊藿次苷Ⅱ 肺动脉重构 凋亡 BAX BCL-2 活化的caspase-3

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SMYD3介导的组蛋白H3K4me3修饰在大鼠PAH-ASD肺血管重构中的作用

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作者 龙珊 吴书琪 +3 位作者 彭昌 唐婷 陈连梅 王丽 《中国病理生理杂志》 2025年第9期1685-1693,共9页

目的:探讨组蛋白甲基转移酶含SET和MYND结构域蛋白3(SMYD3)介导的组蛋白H3第4位赖氨酸三甲基化(H3K4me3)修饰失衡在大鼠房间隔缺损相关性动脉型肺动脉高压(PAH-ASD)模型肺血管重构中的作用。方法:通过房间隔穿刺+热消融方法构建PAH-ASD... 目的:探讨组蛋白甲基转移酶含SET和MYND结构域蛋白3(SMYD3)介导的组蛋白H3第4位赖氨酸三甲基化(H3K4me3)修饰失衡在大鼠房间隔缺损相关性动脉型肺动脉高压(PAH-ASD)模型肺血管重构中的作用。方法:通过房间隔穿刺+热消融方法构建PAH-ASD大鼠模型,按随机数字表法分为正常组、假手术组、模型组、溶剂对照组、SMYD3抑制剂组(PAH-ASD+BCI-121),每组6只。收集建模后4周大鼠肺血管及肺组织,进行如下检测:Western blot检测SMYD3、H3K4me3、转化生长因子β1(TGF-β1)和III型胶原(Col III)蛋白表达水平;RT-qPCR检测TGF-β1的mRNA水平;Masson染色和HE染色观察肺血管纤维化及肺血管平滑肌增殖情况;免疫共沉淀检测SMYD3、H3K4me3和TGF-β1之间的调控关系;生物医学信号采集与处理系统记录平均肺动脉压力(mPAP)。结果:Western blot结果显示,模型组大鼠肺血管中SMYD3、TGF-β1和Col III的蛋白表达水平及H3K4me3甲基化水平均显著高于假手术组(P<0.05);RT-qPCR结果显示模型组TGF-β1的mRNA水平显著高于假手术组(P<0.05);Masson染色及HE染色显示,模型组大鼠肺血管纤维化、肺血管面积及面积指数均显著高于假手术组(P<0.05)。此外,模型组大鼠右心室肥厚指数(RVHI)和mPAP均显著高于假手术组(P<0.05)。给予SMYD3抑制剂BCI-121能够显著降低SMYD3、TGF-β1和Col III表达水平及H3K4me3甲基化水平(P<0.05),且肺血管纤维化程度、RVHI、mPAP、肺血管面积及面积指数均显著降低(P<0.05)。免疫共沉淀结果表明,SMYD3、H3K4me3和TGF-β1之间能够相互结合。结论:组蛋白甲基转移酶SMYD3介导的组蛋白H3K4me3甲基化修饰参与了PAH-ASD模型大鼠的肺血管重构,其机制可能是通过调控TGF-β1和Col III过表达介导的肺血管增殖和纤维化。 展开更多

关键词 动脉型肺动脉高压 房间隔缺损 SMYD3蛋白 组蛋白甲基化 肺血管重构

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