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重构型人caspase-8基因的表达诱导HeLa细胞凋亡 被引量:3
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作者 桂俊豪 赵晶 +4 位作者 许彦鸣 于翠娟 贾林涛 王成济 杨安钢 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第5期738-743,共6页
以两种大、小亚基基因次序颠倒的重构型人caspase 8基因的pIRES2 EGFP真核表达载体转染HeLa细胞 ,用间接免疫荧光染色、免疫细胞化学染色和电镜观察等方法 ,研究重构型人caspase 8基因在HeLa细胞中的表达及其促凋亡活性 .结果显示 ,两... 以两种大、小亚基基因次序颠倒的重构型人caspase 8基因的pIRES2 EGFP真核表达载体转染HeLa细胞 ,用间接免疫荧光染色、免疫细胞化学染色和电镜观察等方法 ,研究重构型人caspase 8基因在HeLa细胞中的表达及其促凋亡活性 .结果显示 ,两种重构型人caspase 展开更多
关键词 重构型人caspase-8基因 表达 诱导 HELA细胞 细胞凋亡
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重构型人caspase-8基因的表达及其对HeLa细胞生长的影响 被引量:4
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作者 桂俊豪 贾林涛 +7 位作者 许彦鸣 金明 于翠娟 赵晶 王智 张淼丽 王成济 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期117-120,共4页
目的  克隆人caspase-8催化结构域基因片段,并将其改建成2种大、小亚基基因次序颠倒的重构型人caspase-8基因,转染HeLa细胞,观察重构型人caspase-8基因的表达及其对HeLa细胞生长的影响。 方... 目的  克隆人caspase-8催化结构域基因片段,并将其改建成2种大、小亚基基因次序颠倒的重构型人caspase-8基因,转染HeLa细胞,观察重构型人caspase-8基因的表达及其对HeLa细胞生长的影响。 方法  用RT-PCR法,克隆人caspase-8催化结构域基因片段,经重组PCR改造,构建大、小亚基基因次序颠倒的重构型人caspase-8基因。将其克隆入绿色荧光蛋白(GFP)真核表达载体pIRES2-EGFP,转染HeLa细胞,用荧光显微镜和倒置显微镜镜观察细胞的形态和结构。 结果用RT-PCR法,成功地克隆了人caspase-8催化结构域基因片段,构建了3种重构型人 caspase-8基因及其真核表达载体。转染HeLa细胞后,重构型人caspase-8基因的表达可导致HeLa细胞死亡。 结论重构型人caspase-8基因在HeLa细胞中的表达可以有效地引起HeLa细胞死亡。 展开更多
关键词 重构 人caspase-8 PIRES2-EGFP HELA细胞 基因表达
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右旋甲硫氨酸联合化疗诱导胃癌细胞凋亡的机制 被引量:1
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作者 曹伟新 费旭峰 +2 位作者 陈雪华 朱正纲 林言箴 《上海第二医科大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第6期579-583,共5页
目的探索右旋甲硫氨酸(D-Met)和联合应用周期特异性化疗药物诱导胃癌细胞凋亡的机制和途径。方法将人胃癌细胞株SGC7901分别置于六种不同培养基中:含LMet、含D-Met、不含Met而替以同型半胱氨酸(Met-Hcy+),或在上述培养基中分别加入5FU... 目的探索右旋甲硫氨酸(D-Met)和联合应用周期特异性化疗药物诱导胃癌细胞凋亡的机制和途径。方法将人胃癌细胞株SGC7901分别置于六种不同培养基中:含LMet、含D-Met、不含Met而替以同型半胱氨酸(Met-Hcy+),或在上述培养基中分别加入5FU。培养48h后,在蛋白和mRNA水平检测凋亡相关基因bcl2、bax和p53的表达,以及caspase3、caspase-8和caspase-9的活性。结果各组间bcl-2、bax和p53蛋白表达无明显差异;各组均见baxmRNA和p53mRNA表达,但未见bcl-2mRNA表达。三种培养基组间caspase-3活性无统计学差异,而DMet组的caspase8活性明显低于LMet和Met-Hcy+组,LMet组的caspase9活性显著高于Met-Hcy+和DMet组;与未加入化疗药物时相比,联合应用5FU后,各组caspase3、caspase8和caspase9活性均明显提高。结论D-Met诱导胃癌细胞凋亡至少部分系通过p53非依赖途径所介导,且可能以caspase非依赖方式进行;无证据支持bcl2和bax参与凋亡的调节;5FU可能既通过死亡受体信号传递途径,又通过线粒体途径诱导肿瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃癌细胞凋亡 甲硫氨酸 caspase-9 caspase-8 化疗诱导 caspase-3活性 右旋 SGC-7901 mRNA表达 基因BCL-2 p53蛋白表达 化疗药物诱导 人胃癌细胞株 半胱氨酸 信号传递途径 肿瘤细胞凋亡 5-FU 周期特异性 统计学差异
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