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酶联免疫吸附剂测定法考察丹参滴注液去除蛋白工艺的研究 被引量：1
1
作者 丁宁 郑云枫 +3 位作者 程建明 王光凤 李红阳 彭国平 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期657-660,共4页
目的研究丹参滴注液去除蛋白工艺,考察工艺的合理性。方法采用酶联免疫吸附剂测定法(ELISA法),以丹参蛋白为检测指标研究丹参滴注液制备工艺中去除蛋白的效果。结果丹参提取药液经醇沉及超滤工艺后含蛋白量大大降低,低于检测限。结论醇... 目的研究丹参滴注液去除蛋白工艺,考察工艺的合理性。方法采用酶联免疫吸附剂测定法(ELISA法),以丹参蛋白为检测指标研究丹参滴注液制备工艺中去除蛋白的效果。结果丹参提取药液经醇沉及超滤工艺后含蛋白量大大降低,低于检测限。结论醇沉和超滤工艺可有效去除丹参滴注液中的蛋白,保证制剂安全。 展开更多
关键词 丹参滴注液 抗原蛋白 酶联免疫吸附剂测定法 醇沉 超滤
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ELISA酶联免疫吸附测定法简介 被引量：7
2
作者 蒲健 冯晓红 《肉类研究》 2002年第2期41-41,40,共2页
近年来由于工业"三废"处理不当,引起了对农作物、畜禽及水产品的污染;农业与畜牧业生产中大量使用农药、化肥、抗生素、生长素,引起农药、抗生素、生长素残留超标;流通过程中的保存、包装不当造成霉菌、毒素的污染;在食品的... 近年来由于工业"三废"处理不当,引起了对农作物、畜禽及水产品的污染;农业与畜牧业生产中大量使用农药、化肥、抗生素、生长素,引起农药、抗生素、生长素残留超标;流通过程中的保存、包装不当造成霉菌、毒素的污染;在食品的生产环节中,不法者为了牟取暴利掺杂、使假、滥用添加物质引起的食品安全问题不断发生. 展开更多
关键词 elisa酶联免疫吸附测定法 猪肉 盐酸克伦特罗 瘦肉精 质量检测
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小麦胚乳贮藏蛋白多克隆抗体间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)的建立 被引量：4
3
作者 王兆华 宋希云 +2 位作者 张恩盈 张元景 吕俊华 《莱阳农学院学报》 2006年第3期161-164,169,共5页
通过对比试验研究了蛋白提取液、提取时间、还原剂DTT、封闭液、包被物与抗体浓度等对小麦胚乳贮藏蛋白多克隆抗体的影响,建立了适宜于小麦胚乳醇溶蛋白(G liad in)和低分子量谷蛋白亚基(Low molecu lar we ight glute-n in subun it,LM... 通过对比试验研究了蛋白提取液、提取时间、还原剂DTT、封闭液、包被物与抗体浓度等对小麦胚乳贮藏蛋白多克隆抗体的影响,建立了适宜于小麦胚乳醇溶蛋白(G liad in)和低分子量谷蛋白亚基(Low molecu lar we ight glute-n in subun it,LMW-GS)多克隆抗体的间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)。 展开更多
关键词 小麦 贮藏蛋白 多克隆抗体 酶联免疫吸附测定法
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酶联免疫吸附(ELISA)法测定生猪尿液中的沙丁胺醇 被引量：6
4
作者 梁丽转 《中国动物检疫》 CAS 2012年第1期42-43,48,共3页
将标准品、样品和和酶标记物一并加入到微孔板中孵育,样品中的游离沙丁胺醇与酶标记的沙丁胺醇竞争结合酶标板微孔中固定相化的沙丁胺醇特异性抗体,通过清洗步骤洗掉未结合的酶标记沙丁胺醇,再通过酶的专一性显色剂显色,微孔显蓝色,加... 将标准品、样品和和酶标记物一并加入到微孔板中孵育,样品中的游离沙丁胺醇与酶标记的沙丁胺醇竞争结合酶标板微孔中固定相化的沙丁胺醇特异性抗体,通过清洗步骤洗掉未结合的酶标记沙丁胺醇,再通过酶的专一性显色剂显色,微孔显蓝色,加入反应终止液使颜色由蓝色转为黄色。在450nm处测量吸光度(OD)值,并设置标准曲线,通过标准曲线测定样品中沙丁胺醇的含量,结果显示:OD值的大小与样品中沙丁胺醇的含量成反比。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附 elisa 猪 尿液 沙丁胺醇
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菊酯类农药酶联免疫吸附测定研究进展 被引量：14
5
作者 刘廷凤 杨敏娜 +2 位作者 刘亚子 顾颖 孙成 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期100-102,共3页
介绍了菊酯类农药残留的酶联免疫分析(ELISA)的技术原理、关键技术环节,综述了国内外的酶联免疫测定菊酯类农药残留的研究动态,并展望了此技术的发展及应用前景。
关键词 酶联免疫吸附测定(elisa) 拟除虫菊酯 农药 进展
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甲基对硫磷的酶联免疫吸附分析(ELISA)研究 被引量：17
6
作者 韩丽君 贾明宏 +2 位作者 钱传范 李成文 张冰 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期187-190,共4页
根据甲基对硫磷的结构特征,从甲基对硫磷的甲氧基部位连接了两种间隔臂,合成了两种半抗原,并通过活性酯法和混合酸酐法分别制备了与不同的载体蛋白偶联的人工抗原。采用其中两种结合物进行动物免疫,得到了针对两种抗原的高效价抗体。在... 根据甲基对硫磷的结构特征,从甲基对硫磷的甲氧基部位连接了两种间隔臂,合成了两种半抗原,并通过活性酯法和混合酸酐法分别制备了与不同的载体蛋白偶联的人工抗原。采用其中两种结合物进行动物免疫,得到了针对两种抗原的高效价抗体。在此基础上,建立了两种甲基对硫磷的酶联免疫吸附测定(ELISA)方法。结果表明,该方法检测限分别为2.0和6.1ng·mL-1。两种抗体对甲基对硫磷表现了很高的特异性,除了对硫磷以外,对结构相似的几种有机磷农药均无交叉反应。土壤和河水中的添加回收实验结果表明,采用ELISA方法得到的回收率及CV值都与GC方法基本吻合,且检测灵敏度比GC还高,符合农药残留分析的要求。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附测定法 甲基对硫磷 农药残留
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用于测定多环芳烃的酶联免疫吸附分析法的研究 被引量：7
7
作者 张彦峰 张清敏 +1 位作者 高志贤 戴树桂 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期537-540,共4页
将芘丁酸(1-pyrenebutyricacid,PBA)通过活性酯法与牛血清白蛋白(BSA)共价结合,以PBA-BSA结合物为免疫原制备抗血清,利用该抗血清建立了测定多环芳烃类物质的间接竞争酶联免疫吸附分析法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA),并研究... 将芘丁酸(1-pyrenebutyricacid,PBA)通过活性酯法与牛血清白蛋白(BSA)共价结合,以PBA-BSA结合物为免疫原制备抗血清,利用该抗血清建立了测定多环芳烃类物质的间接竞争酶联免疫吸附分析法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA),并研究了10种多环芳烃与该抗血清的交叉反应。结果表明,该方法用于测定芘和芘丁酸的IC50值分别为0.132mg·L-1和0.253mg·L-1,检出限分别为0.1mg·L-1和0.01mg·L-1,该方法不受溶剂甲醇的影响,因此可以用于经过预富集的环境样品中多环芳烃类物质的测定。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附分析法(elisa) 多环芳烃(PAHs) 芘 测定
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酶联免疫吸附分析法测定水样中的毒死蜱 被引量：8
8
作者 韩丽君 钱传范 +2 位作者 李文明 江树人 王小如 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期35-37,共3页
自制了毒死蜱多克隆抗体,考察了离子强度和甲醇含量对抗原抗体竞争反应的影响,对反应体系进行了优化,最终建立了水样中毒死蜱的残留检测ELISA方法。结果表明,毒死蜱对抗体竞争性结合的I50为76.8μg/L,方法检出限为5.2μg/L。河水样品经... 自制了毒死蜱多克隆抗体,考察了离子强度和甲醇含量对抗原抗体竞争反应的影响,对反应体系进行了优化,最终建立了水样中毒死蜱的残留检测ELISA方法。结果表明,毒死蜱对抗体竞争性结合的I50为76.8μg/L,方法检出限为5.2μg/L。河水样品经简单前处理后分别采用ELISA和GC测定,用ELISA方法测得水样中毒死蜱的添加回收率为93.40%～102.1%,C.V为4.04%～5.18%,在水样中的最低检出浓度为0.08μg/L,检测灵敏度远高于GC,符合农药残留检测的要求。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附测定法 毒死蜱 水样 残留检测
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乳铁蛋白的免疫化学分析法——酶联免疫吸附测定法 被引量：15
9
作者 卢蓉蓉 孙震 +1 位作者 许时婴 王璋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第4期102-104,共3页
应用酶联免疫法测定初乳中乳铁蛋白的含量。检测的线性范围为３．１～２００　ｎｇ／ｍｌ，最小检测限为１．５　ｎｇ／ｍｌ，回收率在９１．８２％～１１５．５６　％之间，变异系数在６．２０％～９．１８　％之间。
关键词 乳铁蛋白 免疫化学分析法 酶联免疫吸附测定法
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应用酶联免疫吸附法(ELISA)初探古代墓葬壁画胶结材料中的狗胶原蛋白 被引量：15
10
作者 颜菲 葛琴雅 +3 位作者 李强 于淼 朱旭东 潘皎 《文物保护与考古科学》 北大核心 2014年第1期71-75,共5页
古代墓葬壁画颜料中的胶结材料成分研究是国内外考古界研究的热点方向之一。本研究针对我国北方公元5世纪墓葬壁画中红色、黑色和黄色壁画颜料样品,利用酶联免疫吸附法(ELISA),对样品中的狗胶原蛋白浓度进行了分析测定。结果发现,红色... 古代墓葬壁画颜料中的胶结材料成分研究是国内外考古界研究的热点方向之一。本研究针对我国北方公元5世纪墓葬壁画中红色、黑色和黄色壁画颜料样品,利用酶联免疫吸附法(ELISA),对样品中的狗胶原蛋白浓度进行了分析测定。结果发现,红色干燥壁画颜料中含有狗胶原蛋白,含量为7.328mg/L,而黑色、黄色和红色湿润壁画颜料中均未检测到狗胶原蛋白成分。利用ELISA成功检测出我国古代壁画颜料中胶结材料成分。该检测方法可以直接、快速检测古代壁画胶结材料中动物胶原蛋白的种类。 展开更多
关键词 古代墓葬壁画 胶结材料成分 酶联免疫吸附法(elisa)
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检测T-2毒素的直接竞争性酶联免疫吸附测定法的研究 被引量：8
11
作者 曹艳红 孟宪清 +2 位作者 冯杰 惠洋 孙殿军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期132-135,共4页
目的 本研究在自制T-2毒素酶标半抗原的基础上，结合市售抗T-2毒素单克隆抗体，建立了检测谷物中T-2毒素的直接竞争性酶联免疫吸附测定法（ELISA）。方法粮食样品经70％甲醇-水溶液提取，用滤纸过滤并稀释后。再用0．45μm滤器过滤净化... 目的 本研究在自制T-2毒素酶标半抗原的基础上，结合市售抗T-2毒素单克隆抗体，建立了检测谷物中T-2毒素的直接竞争性酶联免疫吸附测定法（ELISA）。方法粮食样品经70％甲醇-水溶液提取，用滤纸过滤并稀释后。再用0．45μm滤器过滤净化，该滤液用于ELISA检测。结果本方法最低检出量为0．125ng／ml，添加70-280ng／g T-2毒素的大米样品和面粉样品的平均回收率分别为85～117．5％和98．1～102．5％。结论结果表明，该方法简化了粮样提取步骤。可用于谷物及加工产品中T-2毒素的检测。 展开更多
关键词 T-2毒素 直接竞争性酶联免疫吸附测定 谷物
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间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清4型鸭疫里默氏杆菌抗体的研究 被引量：13
12
作者 程安春 汪铭书 +4 位作者 方鹏飞 郭宇飞 刘兆宇 陈孝跃 周毅 《中国家禽》 北大核心 2004年第16期11-14,共4页
应用超声波裂解法制备的血清4型鸭疫里默氏杆菌(RA)裂解物作为抗原包被酶标板,成功建立了4型RA抗体检测的间接ELISA法。
关键词 间接酶联免疫吸附试验 elisa 血清4型 鸭疫里默氏杆菌 抗原 抗体检测 养鸭业
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酶联免疫吸附分析法测定土壤中的毒死蜱 被引量：7
13
作者 韩丽君 钱传范 +2 位作者 李文明 江树人 王小如 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2005年第8期53-56,共4页
采用自制多克隆抗体,考察了pH值和甲醇含量对竞争反应的影响,并对反应体系进行了优化,最终建立了土壤中毒死蜱的残留检测ELISA方法.试验表明,毒死蜱对抗体竞争性结合的I50为76.8 μg/L, 方法检出限为5.2 μg/L.土壤样品经简单前处理后,... 采用自制多克隆抗体,考察了pH值和甲醇含量对竞争反应的影响,并对反应体系进行了优化,最终建立了土壤中毒死蜱的残留检测ELISA方法.试验表明,毒死蜱对抗体竞争性结合的I50为76.8 μg/L, 方法检出限为5.2 μg/L.土壤样品经简单前处理后,分别采用ELISA和GC测定,用ELISA方法测得土壤中毒死蜱的添加回收率为80.33%～83.36%,CV为5.28%～9.83%,最低检出限为 0.005 mg/kg,与GC测定结果基本相当,符合农药残留分析的要求. 展开更多
关键词 酶联免疫吸附测定法 毒死蜱 土壤 残留检测
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间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清2型鸭疫里默氏杆菌抗体的研究 被引量：13
14
作者 程安春 汪铭书 +4 位作者 方鹏飞 郭宇飞 刘兆宇 陈孝跃 周毅 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第12期14-16,共3页
关键词 RA 抗体 血清流行病学调查 elisa 间接酶联免疫吸附试验 抗原成分 慢性 鸭疫里默氏杆菌 气囊炎 琼脂扩散试验
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高敏感度酶联免疫吸附测定法检测分泌蛋白MPB64对于活动性肺结核诊断的价值 被引量：9
15
作者 赵冰 侯萍 +4 位作者 黄静 贺文从 欧喜超 刘东鑫 赵雁林 《中国防痨杂志》 CAS 2017年第12期1303-1308,共6页
目的评价以结核分枝杆菌（MTB）分泌蛋白MPB64为检测抗原的高敏感度酶联免疫吸附测定法（high sensitivityenzyme-linked immunosorbent assay，HI-ELISA）用于检测痰液中MTB的价值。方法选取97份储存的疑似肺结核患者的痰标本，分别进... 目的评价以结核分枝杆菌（MTB）分泌蛋白MPB64为检测抗原的高敏感度酶联免疫吸附测定法（high sensitivityenzyme-linked immunosorbent assay，HI-ELISA）用于检测痰液中MTB的价值。方法选取97份储存的疑似肺结核患者的痰标本，分别进行BACTEC MGIT960液体培养（简称“MGIT960培养”）、MTB／利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测系统（Gene Xpert MTB／RIF，简称“Xpert检测”）和HI-ELISA检测，通过与MGIT 960培养比较来评价HI-ELISA的诊断效能。结果本研究97份痰标本中，MGIT 960培养、HI-ELISA检测MTB的阳性率分别为36．08％（35／97）、32．99％（32／97）；与MGIT 960培养比较，HI-ELISA的检测敏感度、特异度、总体符合率分别为88．57％（31／35）、98．39％（61／62）、94．85％（92／97）。在Xpert检测阳性的66份痰标本中，MGIT 960培养、HI-ELISA检测MTB的阳性率分别为51．51％（34／66）、48．48％（32／66）；与MGIT 960培养相比，HI-ELISA的检测敏感度、特异度、总体符合率分别为91．18％（31／34）、96．88％（31／32）、93．93％（62／66）。Xpert检测MTB为阴性的31份痰标本中，仅有1份标本的MGIT960培养阳性而HI-ELISA未能检测到MTB，其他30份标本检测结果全部相符，符合率为96．77％（30／31）。结论HI-ELISA可以特异性检测MTB活菌，对活动性肺结核的诊断及治疗评价有很高的应用价值。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 分泌蛋白 MPB64 酶联免疫吸附测定 敏感性与特异性 诊断
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大豆胰蛋白酶抑制因子酶联免疫吸附测定方法的研究 被引量：17
16
作者 张国龙 李德发 《动物营养学报》 CAS CSCD 1997年第1期12-20,共9页
本研究以纯化的大豆Kunitz胰蛋白酶抑制因子（KTI）为抗原，对兔子进行35天免疫得到了兔抗KTI血清。分别用辣根过氧化物酶（HRP）标记纯化的抗原与抗体，制备了标记适度的酶标抗原与酶标抗体。建立了3种检测KTI含量的酶联免疫吸附测定（... 本研究以纯化的大豆Kunitz胰蛋白酶抑制因子（KTI）为抗原，对兔子进行35天免疫得到了兔抗KTI血清。分别用辣根过氧化物酶（HRP）标记纯化的抗原与抗体，制备了标记适度的酶标抗原与酶标抗体。建立了3种检测KTI含量的酶联免疫吸附测定（ELISA）方法，即酶标抗原竞争、酶标抗体直接抑制和问接抑制法。结果表明，抑制率在20％～70％范围之内，3种方法得到的标准曲线均呈现良好的线性关系（r＞0．96），且检测下限均低于20ng／ml。根据得到的标准曲线，用酶标抗原竞争ELISA法测定了不同温度热处理的KTI中剩余活性部分的含量。结果表明，ELISA法与酶化学分析法的测定结果高度相关（r＝0．99），同时样品添加的回收率试验误差小于10％。酶标抗原竞争法还被用来测定了不同温度热处理的大豆和熟豆粕、全价饲料等几种大豆产品中KTI的含量。以上结果说明，用ELISA法检测生大豆和不同热加工形式的大豆产品中的剩余KTI含量是可行的。 展开更多
关键词 大豆 胰蛋白酶 抑制因子 酶联免疫 吸附测定
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应用酶联免疫吸附测定检测鸡血液中抗新城疫病毒抗体的动力学研究 被引量：3
17
作者 高维凡 宋世勇 +3 位作者 韩露 杜绍范 李义 宁志利 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 1997年第3期214-217,共4页
应用新城疫ＬａＳｏｔａ系疫苗接种１日龄雏鸡并在２１日龄用ＬａＳｏｔａ系疫苗及油佐剂灭活苗联合接种。应用酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）和血凝抑制试验（ＨＩ）检测鸡血液中抗体水平，并在３０，６０日龄进行攻毒试验。结果表明... 应用新城疫ＬａＳｏｔａ系疫苗接种１日龄雏鸡并在２１日龄用ＬａＳｏｔａ系疫苗及油佐剂灭活苗联合接种。应用酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）和血凝抑制试验（ＨＩ）检测鸡血液中抗体水平，并在３０，６０日龄进行攻毒试验。结果表明：ＨＩ效价与攻毒保护率之间没有相关性，不能真正反映出机体的免疫水平，而ＥＬＩＳＡ用于检测其抗体水平具有很高的敏感性，ＥＬＩＳＡ滴度与攻毒保护率具有相关性，可作为评定机体免疫力的可靠指标。 展开更多
关键词 新城疫 酶联免疫吸附 测定 血凝抑制试验 鸡病
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完整弓形虫P35重组蛋白IgM-酶联免疫吸附测定法检测弓形虫急性感染 被引量：4
18
作者 吕斌 吴少廷 +5 位作者 周宜开 徐顺清 张仁利 高世同 林敏 张志仁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期134-137,共4页
为利用重组的完整弓形虫表面抗原P35 GST蛋白对弓形虫感染进行血清学诊断 ,构建了可表达P35 GST的JM10 9细胞株 .采用亲和层析对融合蛋白进行分离和纯化 ,用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和蛋白质印迹 (Westernblot)分析所表达... 为利用重组的完整弓形虫表面抗原P35 GST蛋白对弓形虫感染进行血清学诊断 ,构建了可表达P35 GST的JM10 9细胞株 .采用亲和层析对融合蛋白进行分离和纯化 ,用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和蛋白质印迹 (Westernblot)分析所表达的蛋白质 ,并用纯化的重组蛋白进行IgM 酶联免疫吸附测定法 (IgM ELISA)检测不同病人血清中的抗 P35抗体 .SDS PAGE分析发现P35 GST重组蛋白的大小约 6 0ku ,为一亲水性蛋白 ,蛋白质印迹分析表明该蛋白与弓形虫阳性感染病人的血清有特异性反应 .利用P35 GST为抗原 ,对 6 0例血清进行IgM ELISA分析 ,发现P35 GST可明显区分近期感染和既往感染 ,在弓形虫的诊断上有很大的应用前景 . 展开更多
关键词 完整弓形虫表面抗原 P35-GST蛋白 弓形虫感染 IgM-酶联免疫吸附测定法
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β-Casomorphin-7的酶联免疫吸附分析(ELISA)方法的建立 被引量：3
19
作者 张源淑 钟海涛 +1 位作者 邹思湘 陈伟华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第2期94-97,共4页
β-酪啡肽-7(β-Casomorphin-7)是一个有代表性的乳源外啡肽,有调节动物消化道运动和采食、内分泌、免疫等多种生物学功能。本研究以β-Casomorphin-7与人血清白蛋白(HSA)经戊二醛交联的复合物作为包被抗原;一抗为鸡抗β-Casomorphin-7... β-酪啡肽-7(β-Casomorphin-7)是一个有代表性的乳源外啡肽,有调节动物消化道运动和采食、内分泌、免疫等多种生物学功能。本研究以β-Casomorphin-7与人血清白蛋白(HSA)经戊二醛交联的复合物作为包被抗原;一抗为鸡抗β-Casomorphin-7与牛血清白蛋白(BSA)交联复合物的抗血清;酶标二抗为兔抗鸡IgG经戊二醛与辣根过氧化物酶(HRP)交联的复合物。包被抗原和一抗的稀释度经方阵稀释实验确定。本实验所建立的竞争ELISA方法的孔间差异为3.3%,板间差异为8.6%,检测灵敏度20ng/ml,检测范围20～320ng/ml,在实验浓度范围内。β-Casomor-phin-7的抗血清与β-内啡肽、脑啡肽、强啡肽、精氨酸降压素和神经降压素等活性肽未显示免疫交叉反应。表明所建立的方法有较高的特异性,可用于酪啡肽的体内功能研究。 展开更多
关键词 生理学 β-Casomorphin-7 elisa 多克隆抗体 检测 酶联免疫吸附分析方法 酪蛋白
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酵母表面展示-酶联免疫吸附测定法的建立 被引量：2
20
作者 叶茂 韩双艳 +2 位作者 林影 唐语谦 王小宁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1113-1117,共5页
以表面展示人源蛋白酶体α亚基6蛋白的重组酵母细胞,结合酶联吸附免疫原理检测技术,以表面展示有人源蛋白酶体α亚基6(proteasome subunit alpha6,PSα6)的重组酵母细胞及其对应的单克隆抗体3D7D12D为研究对象,建立酵母酶联免疫吸附(yea... 以表面展示人源蛋白酶体α亚基6蛋白的重组酵母细胞,结合酶联吸附免疫原理检测技术,以表面展示有人源蛋白酶体α亚基6(proteasome subunit alpha6,PSα6)的重组酵母细胞及其对应的单克隆抗体3D7D12D为研究对象,建立酵母酶联免疫吸附(yeast-ELISA)检测技术,应用于检测小鼠单克隆抗体及单抗效价.应用该方法最佳酵母浓度为0.50A600;测得单抗效价为1∶5×105,与常规ELISA效价接近;交叉试验和阻断试验表明该方法特异性强;同时该方法可用于检测抗血清.结果表明,yeast-ELISA可直接应用于检测单抗,测得效价与常规抗原包被间接ELISA具有良好一致性,特异性好,无交叉反应性. 展开更多
关键词 酵母表面展示 抗体检测 酶联免疫吸附测定法
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