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以赭曲霉毒素A单克隆抗体建立竞争酶联免疫吸附分析方法的研究 被引量:19
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作者 刘仁荣 余宙 +1 位作者 何庆华 许杨 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第11期174-177,共4页
本研究通过活性酯法合成赭曲霉毒素A人工抗原,免疫小鼠制备单克隆抗体,在此基础上建立了竞争ELISA检测方法,线性范围为200~6000pg/ml,检测下限为150pg/ml。单抗与赭曲霉毒素B的交叉反应率为35%,与桔霉素、黄曲霉毒素B1和展青霉素等毒... 本研究通过活性酯法合成赭曲霉毒素A人工抗原,免疫小鼠制备单克隆抗体,在此基础上建立了竞争ELISA检测方法,线性范围为200~6000pg/ml,检测下限为150pg/ml。单抗与赭曲霉毒素B的交叉反应率为35%,与桔霉素、黄曲霉毒素B1和展青霉素等毒素交叉反应低于0.01%。在小麦样品中的加标回收率为83%~116%,变异系数为9.4%~19.8%。测试23份样品,赭曲霉毒素A的含量在0.6~2.56μg/kg之间。 展开更多
关键词 赭曲霉毒素A 人工抗原 单克隆抗体 免疫吸附分析方法
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呋喃西林代谢物多克隆抗体制备及酶联免疫吸附分析方法 被引量:7
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作者 任海涛 沈玉栋 +5 位作者 徐振林 杨金易 雷红涛 肖治理 王弘 孙远明 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期330-333,379,共5页
为了建立检测呋喃西林代谢物(SEM)的酶联免疫吸附分析方法(ELISA),将所设计合成的系列半抗原与牛血清白蛋白(BSA)偶联制备免疫原并免疫新西兰大白兔,筛选获得源于新颖半抗原H3的具有高亲和力、高特异性抗SEM多克隆抗体。同时,基于设计... 为了建立检测呋喃西林代谢物(SEM)的酶联免疫吸附分析方法(ELISA),将所设计合成的系列半抗原与牛血清白蛋白(BSA)偶联制备免疫原并免疫新西兰大白兔,筛选获得源于新颖半抗原H3的具有高亲和力、高特异性抗SEM多克隆抗体。同时,基于设计合成的系列同/异源包被抗原,考察了不同结构包被原对ELISA灵敏度的影响,发现H4-OVA作为异源包被原建立SEM的ELISA检测方法可获得最佳的检测效果,结果显示:ELISA方法的半抑制浓度(IC50)为12.37ng/mL;定量检测线性范围(IC20~IC80)为0.439~110.78ng/mL;检测限(IC10)达0.07ng/mL,达到了国内外相关检测限量要求,可应用于实际食品样品检测。 展开更多
关键词 硝基西林 半抗原设计 多克隆抗体 异源包被 elisa(免疫吸附分析)
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β-Casomorphin-7的酶联免疫吸附分析(ELISA)方法的建立 被引量:3
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作者 张源淑 钟海涛 +1 位作者 邹思湘 陈伟华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第2期94-97,共4页
β-酪啡肽-7(β-Casomorphin-7)是一个有代表性的乳源外啡肽,有调节动物消化道运动和采食、内分泌、免疫等多种生物学功能。本研究以β-Casomorphin-7与人血清白蛋白(HSA)经戊二醛交联的复合物作为包被抗原;一抗为鸡抗β-Casomorphin-7... β-酪啡肽-7(β-Casomorphin-7)是一个有代表性的乳源外啡肽,有调节动物消化道运动和采食、内分泌、免疫等多种生物学功能。本研究以β-Casomorphin-7与人血清白蛋白(HSA)经戊二醛交联的复合物作为包被抗原;一抗为鸡抗β-Casomorphin-7与牛血清白蛋白(BSA)交联复合物的抗血清;酶标二抗为兔抗鸡IgG经戊二醛与辣根过氧化物酶(HRP)交联的复合物。包被抗原和一抗的稀释度经方阵稀释实验确定。本实验所建立的竞争ELISA方法的孔间差异为3.3%,板间差异为8.6%,检测灵敏度20ng/ml,检测范围20~320ng/ml,在实验浓度范围内。β-Casomor-phin-7的抗血清与β-内啡肽、脑啡肽、强啡肽、精氨酸降压素和神经降压素等活性肽未显示免疫交叉反应。表明所建立的方法有较高的特异性,可用于酪啡肽的体内功能研究。 展开更多
关键词 生理学 β-Casomorphin-7 elisa 多克隆抗体 检测 免疫吸附分析方法 酪蛋白
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基于特异性对硫磷单克隆抗体的间接竞争酶联免疫吸附分析方法建立 被引量:2
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作者 吕丽兰 张娅 +7 位作者 邹承武 甘志勇 吴静娜 李乾坤 吕玉莲 易国强 温绍聪 何丽珊 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1193-1200,共8页
【目的】制备特异性识别对硫磷(PA)的单克隆抗体,建立其间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA),为实现对硫磷的农残快检提供技术支持。【方法】以化合物4-(二乙氧基硫代磷酸酯基)苯甲酸为半抗原,分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(... 【目的】制备特异性识别对硫磷(PA)的单克隆抗体,建立其间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA),为实现对硫磷的农残快检提供技术支持。【方法】以化合物4-(二乙氧基硫代磷酸酯基)苯甲酸为半抗原,分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联制备人工抗原,免疫7周龄Balb/c雌性小鼠,取抗血清效价最高、特异性最优小鼠的脾脏细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,采用间接酶联免疫方法(i-ELISA)及ic-ELISA分别评价融合细胞株的阳性和特异性,通过有限稀释法筛选稳定分泌对硫磷抗体的单克隆细胞株。再通过棋盘格试验筛选出抗原抗体最佳工作浓度组合建立对硫磷ic-ELISA标准曲线,并基于对硫磷单克隆抗体与各结构类似物的交叉反应率,评估ic-ELISA的特异性。采购西红柿样品进行对硫磷的添加回收试验,运用气相色谱法(GC)验证ic-ELISA的准确性。【结果】成功合成对硫磷人工抗原PA-BSA和PA-OVA,经5次免疫后融合小鼠的血清效价为8×103;通过有限稀释法筛选获得灵敏度高、特异性最强的对硫磷单克隆细胞株4F11A10。以2μg/mL包被抗原PA-OVA、0.25μg/mL细胞株4F11A10分泌抗体为最佳抗原抗体工作浓度组合,建立对硫磷ic-ELISA及其标准曲线,其半抑制浓度(IC50)为50 ng/mL,检测范围(IC20~IC80)为2.34~300 ng/mL;所建立的对硫磷ic-ELISA与5种有机磷农药(丙溴磷、杀扑磷、倍硫磷、水胺硫磷和甲拌磷)均无交叉反应。对比ic-ELISA和GC测定西红柿样品中对硫磷的添加回收试验结果,发现ic-ELISA的添加回收率为84.86%~100.27%,GC的添加回收率为97.60%~106.40%,两种方法的检测结果一致性较好。【结论】建立的ic-ELISA可用于快速检测蔬菜、水果等农产品中的对硫磷残留。 展开更多
关键词 对硫磷 间接竞争免疫吸附分析方法(ic-elisa) 单克隆抗体 气相色谱法(GC)
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盐酸克伦特罗残留酶联免疫吸附(ELISA)检测方法的研究 被引量:6
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作者 陈存社 吕会田 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期91-94,共4页
建立了间接ELISA检测盐酸克伦特罗的方法,并对其参数进行了分析计算。在该检测方法中,抗盐酸克伦特罗(CL)抗体最适稀释度为1:1000,羊抗兔酶抗体(HRP—IgG)的最适稀释度为1:1500。该检测方法的检测灵敏度可达0.1046μg/L,生... 建立了间接ELISA检测盐酸克伦特罗的方法,并对其参数进行了分析计算。在该检测方法中,抗盐酸克伦特罗(CL)抗体最适稀释度为1:1000,羊抗兔酶抗体(HRP—IgG)的最适稀释度为1:1500。该检测方法的检测灵敏度可达0.1046μg/L,生物检测限为1.452μg/L,线性检测范围为7.26~90.75μg/L。 展开更多
关键词 盐酸克伦特罗 免疫吸附检测(elisa) 检测方法
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竞争酶联免疫吸附方法检测氯霉素假阳性原因和质量控制的探讨 被引量:12
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作者 周宏琛 朱涛 +2 位作者 闫秋成 王勇 田晓林 《水产科学》 CAS 北大核心 2007年第2期123-124,共2页
关键词 免疫吸附方法(elisa) 氯霉素 假阳性
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应用酶联免疫吸附法(ELISA)初探古代墓葬壁画胶结材料中的狗胶原蛋白 被引量:15
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作者 颜菲 葛琴雅 +3 位作者 李强 于淼 朱旭东 潘皎 《文物保护与考古科学》 北大核心 2014年第1期71-75,共5页
古代墓葬壁画颜料中的胶结材料成分研究是国内外考古界研究的热点方向之一。本研究针对我国北方公元5世纪墓葬壁画中红色、黑色和黄色壁画颜料样品,利用酶联免疫吸附法(ELISA),对样品中的狗胶原蛋白浓度进行了分析测定。结果发现,红色... 古代墓葬壁画颜料中的胶结材料成分研究是国内外考古界研究的热点方向之一。本研究针对我国北方公元5世纪墓葬壁画中红色、黑色和黄色壁画颜料样品,利用酶联免疫吸附法(ELISA),对样品中的狗胶原蛋白浓度进行了分析测定。结果发现,红色干燥壁画颜料中含有狗胶原蛋白,含量为7.328mg/L,而黑色、黄色和红色湿润壁画颜料中均未检测到狗胶原蛋白成分。利用ELISA成功检测出我国古代壁画颜料中胶结材料成分。该检测方法可以直接、快速检测古代壁画胶结材料中动物胶原蛋白的种类。 展开更多
关键词 古代墓葬壁画 胶结材料成分 免疫吸附法(elisa)
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间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清4型鸭疫里默氏杆菌抗体的研究 被引量:13
8
作者 程安春 汪铭书 +4 位作者 方鹏飞 郭宇飞 刘兆宇 陈孝跃 周毅 《中国家禽》 北大核心 2004年第16期11-14,共4页
应用超声波裂解法制备的血清4型鸭疫里默氏杆菌(RA)裂解物作为抗原包被酶标板,成功建立了4型RA抗体检测的间接ELISA法。
关键词 间接免疫吸附试验 elisa 血清4型 鸭疫里默氏杆菌 抗原 抗体检测 养鸭业
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用于测定多环芳烃的酶联免疫吸附分析法的研究 被引量:7
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作者 张彦峰 张清敏 +1 位作者 高志贤 戴树桂 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期537-540,共4页
将芘丁酸(1-pyrenebutyricacid,PBA)通过活性酯法与牛血清白蛋白(BSA)共价结合,以PBA-BSA结合物为免疫原制备抗血清,利用该抗血清建立了测定多环芳烃类物质的间接竞争酶联免疫吸附分析法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA),并研究... 将芘丁酸(1-pyrenebutyricacid,PBA)通过活性酯法与牛血清白蛋白(BSA)共价结合,以PBA-BSA结合物为免疫原制备抗血清,利用该抗血清建立了测定多环芳烃类物质的间接竞争酶联免疫吸附分析法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA),并研究了10种多环芳烃与该抗血清的交叉反应。结果表明,该方法用于测定芘和芘丁酸的IC50值分别为0.132mg·L-1和0.253mg·L-1,检出限分别为0.1mg·L-1和0.01mg·L-1,该方法不受溶剂甲醇的影响,因此可以用于经过预富集的环境样品中多环芳烃类物质的测定。 展开更多
关键词 免疫吸附分析法(elisa) 多环芳烃(PAHs) 测定
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间接竞争酶联免疫分析方法检测青霉素G 被引量:2
10
作者 王玉珍 田茂忠 +2 位作者 张小玲 温雅琼 王珠倩 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期657-661,共5页
本研究介绍了青霉素G残留的危害,并建立了间接竞争酶联免疫分析方法(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测牛奶类样品中青霉素G的残留量。首先制备出青霉素G的单克隆抗体,在最优实验条件下,青霉素G浓度范围在1~1000 ng·mL... 本研究介绍了青霉素G残留的危害,并建立了间接竞争酶联免疫分析方法(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测牛奶类样品中青霉素G的残留量。首先制备出青霉素G的单克隆抗体,在最优实验条件下,青霉素G浓度范围在1~1000 ng·mL^(-1)内,所建立方法的灵敏度(IC_(50))为17.33 ng·mL^(-1),检出限为0.75 ng·mL^(-1)。该抗体与苄星青霉素交叉反应率为30.09%,而与氨苄青霉素、羧苄青霉素、阿莫西林、先锋霉素、头孢噻肟钠均无交叉反应。牛奶类样品中青霉素G的加标回收率为81.70%~99.08%,相对标准偏差为1.82%~11.41%。以上结果表明,本研究建立的间接竞争酶联免疫吸附分析方法有较高的灵敏度和较强的特异性,可以用于青霉素G的检测。 展开更多
关键词 青霉素G 单克隆抗体 免疫吸附分析方法(elisa) 样品
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间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清2型鸭疫里默氏杆菌抗体的研究 被引量:13
11
作者 程安春 汪铭书 +4 位作者 方鹏飞 郭宇飞 刘兆宇 陈孝跃 周毅 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第12期14-16,共3页
关键词 RA 抗体 血清流行病学调查 elisa 间接免疫吸附试验 抗原成分 慢性 鸭疫里默氏杆菌 气囊炎 琼脂扩散试验
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百菌清酶联免疫吸附检测方法的影响因素 被引量:4
12
作者 郭乃菲 纪淑娟 +2 位作者 周艳明 高兴 于基成 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第12期259-263,共5页
以方阵滴定法筛选适合百菌清酶联免疫吸附检测的包被抗原和抗体浓度,同时研究反应缓冲体系和pH值等因素对酶联免疫吸附方法的影响以及百菌清多克隆抗体的亲和性和特异性,建立蔬菜中百菌清残留检测的间接竞争酶联免疫吸附法。结果表明:... 以方阵滴定法筛选适合百菌清酶联免疫吸附检测的包被抗原和抗体浓度,同时研究反应缓冲体系和pH值等因素对酶联免疫吸附方法的影响以及百菌清多克隆抗体的亲和性和特异性,建立蔬菜中百菌清残留检测的间接竞争酶联免疫吸附法。结果表明:方法最低检测限(IC20)为0.0123ng/mL,回收率为84.0%~89.8%,变异系数为3.0%~7.6%,与百菌清结构类似化合物交叉反应率均小于0.01%,可在试剂样品检测中应用。 展开更多
关键词 百菌清 免疫吸附(elisa) 多克隆抗体 交叉反应
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苏丹红Ⅰ酶联免疫吸附检测方法的建立 被引量:4
13
作者 涂顺 裘雪梅 +2 位作者 谢少霞 吴前辉 刘仁荣 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期791-794,共4页
应用抗苏丹红Ⅰ单克隆抗体12D8建立了间接竞争ELISA方法,用于检测辣椒粉中的苏丹红Ⅰ,最低检出限为4.22 ng/mL,检测范围为7.8~125 ng/mL。用体积分数70%甲醇水溶液提取辣椒粉中的苏丹红Ⅰ(80~4000 ng/g),回收率为52.3%~110%,变异... 应用抗苏丹红Ⅰ单克隆抗体12D8建立了间接竞争ELISA方法,用于检测辣椒粉中的苏丹红Ⅰ,最低检出限为4.22 ng/mL,检测范围为7.8~125 ng/mL。用体积分数70%甲醇水溶液提取辣椒粉中的苏丹红Ⅰ(80~4000 ng/g),回收率为52.3%~110%,变异系数为3.2%~8.9%。 展开更多
关键词 苏丹红Ⅰ 免疫吸附试验(elisa) 检测 单克隆抗体
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酶联免疫吸附分析法测定环境水体中的萘 被引量:3
14
作者 杨丽波 庄惠生 +1 位作者 周纯 叶其炎 《化工环保》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期563-566,共4页
使用自制的包被原和抗萘多克隆兔抗体,建立了测定环境水体中痕量萘的间接竞争酶联免疫吸附法,并优化了实验条件。工作曲线线性方程为I=8.394logρ+50.21(I为抑制率,ρ为萘的质量浓度),线性范围10^(-3)~10μg/L内的相关系数为0.985 6,... 使用自制的包被原和抗萘多克隆兔抗体,建立了测定环境水体中痕量萘的间接竞争酶联免疫吸附法,并优化了实验条件。工作曲线线性方程为I=8.394logρ+50.21(I为抑制率,ρ为萘的质量浓度),线性范围10^(-3)~10μg/L内的相关系数为0.985 6,方法灵敏度为0.944μg/L,检出限为0.250 ng/L,回收率为86.00%~106.00%,批间误差为5.00%~15.00%,批内误差为2.00%~8.00%,与四种结构类似物的交叉率均小于14.0%。 展开更多
关键词 免疫吸附 分析方法
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酶联免疫吸附试验(ELISA)三种底物的比较试验 被引量:6
15
作者 张喜悦 徐天刚 +4 位作者 王志亮 吴延功 王君玮 赵云玲 徐培莲 《中国动物检疫》 CAS 2003年第11期23-24,共2页
同时应用OPD(邻苯二胺)、TMB(3,3,5,5-四甲基联苯胺)、ABTS(2,2’-连氮-双-(3-乙基苯并塞唑啉磺酸))3种底物,每种底物都分别使用S1(终止液1)、S2(终止液2)和S3(终止液3)3种终止液,做牛布氏杆菌病ELISA试验,对每种底物的作用规律进行摸... 同时应用OPD(邻苯二胺)、TMB(3,3,5,5-四甲基联苯胺)、ABTS(2,2’-连氮-双-(3-乙基苯并塞唑啉磺酸))3种底物,每种底物都分别使用S1(终止液1)、S2(终止液2)和S3(终止液3)3种终止液,做牛布氏杆菌病ELISA试验,对每种底物的作用规律进行摸索。最终确认TMB更适合作ELISA试验底物之用。 展开更多
关键词 免疫吸附试验 elisa 比较试验 邻苯二胺 3 3 5 5-四甲基苯胺 3-乙基苯并塞唑啉磺酸
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动物源性食品安全快速检测及酶联免疫吸附方法的应用 被引量:12
16
作者 周宏琛 闫秋成 +1 位作者 田晓林 朱涛 《肉类研究》 2006年第3期29-32,共4页
本文介绍了动物源性食品安全的定义和存在的主要问题,重点阐述了酶联免疫吸附方法(ELISA)在兽药残留、农药残留、动物疫病、微生物、动物毒素快速检测中的应用。
关键词 动物源性食品安全 快速检测 免疫吸附方法(elisa)
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酶联免疫分析方法在有机磷农药残留检测中的应用研究进展 被引量:7
17
作者 丁晓燕 卢平 胡德禹 《山地农业生物学报》 2011年第6期547-553,共7页
对近年来酶联免疫分析方法(ELISA)在有机磷农药残留检测分析中的研究进展及其前景进行了阐述。
关键词 有机磷农药 残留 免疫吸附分析法(elisa) 展望
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ELISA酶联免疫吸附测定法简介 被引量:7
18
作者 蒲健 冯晓红 《肉类研究》 2002年第2期41-41,40,共2页
近年来由于工业"三废"处理不当,引起了对农作物、畜禽及水产品的污染;农业与畜牧业生产中大量使用农药、化肥、抗生素、生长素,引起农药、抗生素、生长素残留超标;流通过程中的保存、包装不当造成霉菌、毒素的污染;在食品的... 近年来由于工业"三废"处理不当,引起了对农作物、畜禽及水产品的污染;农业与畜牧业生产中大量使用农药、化肥、抗生素、生长素,引起农药、抗生素、生长素残留超标;流通过程中的保存、包装不当造成霉菌、毒素的污染;在食品的生产环节中,不法者为了牟取暴利掺杂、使假、滥用添加物质引起的食品安全问题不断发生. 展开更多
关键词 elisa免疫吸附测定法 猪肉 盐酸克伦特罗 瘦肉精 质量检测
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应用酶联免疫吸附法(ELISA)结合胶体金试纸法快速筛选猪尿中的盐酸克伦特罗残留 被引量:3
19
作者 刘子芝 尹望中 +1 位作者 杜永平 阳积文 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2005年第11期23-24,共2页
猪尿中盐酸克伦特罗(Clenbuterol,简称CL)的残留检测,目前的检测方法,主要有高效液相色谱法(HPLC),气相色谱-质谱法(GC/MS),毛细管区带电泳法(CE)和酶联免疫吸附法(ELISA)等.其中GC/MS法是农业部规定的动物组织中CL确证检测方法(NY/T468... 猪尿中盐酸克伦特罗(Clenbuterol,简称CL)的残留检测,目前的检测方法,主要有高效液相色谱法(HPLC),气相色谱-质谱法(GC/MS),毛细管区带电泳法(CE)和酶联免疫吸附法(ELISA)等.其中GC/MS法是农业部规定的动物组织中CL确证检测方法(NY/T468-2001),ELISA法是农业部规定的猪尿中CL筛选检测方法. 展开更多
关键词 免疫吸附 盐酸克伦特罗 elisa 残留检测 猪尿 快速筛选 应用 试纸法 胶体金
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酶联免疫吸附试验(ELISA)在水产品药物残留检测中存在的问题及对策 被引量:1
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作者 孔蕾 张晓辉 《河北渔业》 2007年第6期47-47,共1页
关键词 免疫吸附试验 药物残留检测 水产品 elisa 操作过程 假阳性结果 药残检测 己烯雌酚
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