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黑曲霉产木聚糖酶稳定性的研究 被引量:16
1
作者 聂国兴 王修启 +3 位作者 明红 李春喜 李用芳 周洪琪 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2004年第1期112-115,共4页
研究了无机离子、pH值、温度对黑曲霉(Aspergillusniger)产木聚糖酶稳定性的影响。试验结果表明:不同种类、不同浓度的无机离子对木聚糖酶活性表现出程度不同的激活或抑制作用;黑曲霉产木聚糖酶活性对pH值不敏感;温度对黑曲霉产木聚糖... 研究了无机离子、pH值、温度对黑曲霉(Aspergillusniger)产木聚糖酶稳定性的影响。试验结果表明:不同种类、不同浓度的无机离子对木聚糖酶活性表现出程度不同的激活或抑制作用;黑曲霉产木聚糖酶活性对pH值不敏感;温度对黑曲霉产木聚糖酶活性有显著影响。 展开更多
关键词 黑曲霉产木聚糖 酶稳定性 无机离子 PH值 温度 谷物饲料 抗营养因子
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哌拉西林及三唑巴坦对β-内酰胺酶稳定性研究 被引量:24
2
作者 赵彩云 李耘 李家泰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期28-32,46,共6页
比较哌拉西林、哌拉西林三唑巴坦(8∶1,4∶1,2∶1)、氨苄西林舒巴坦、阿莫西林克拉维酸、替卡西林克拉维酸和头孢哌酮舒巴坦对39株革兰氏阴性杆菌所产β内酰胺酶的稳定性。以生物法测定酶对抗生素的相对水解率、抑酶保护率。结果表明,... 比较哌拉西林、哌拉西林三唑巴坦(8∶1,4∶1,2∶1)、氨苄西林舒巴坦、阿莫西林克拉维酸、替卡西林克拉维酸和头孢哌酮舒巴坦对39株革兰氏阴性杆菌所产β内酰胺酶的稳定性。以生物法测定酶对抗生素的相对水解率、抑酶保护率。结果表明,β内酰胺酶对哌拉西林三唑巴坦(8∶1)的相对水解率明显低于单独使用哌拉西林及氨苄西林舒巴坦、阿莫西林克拉维酸、替卡西林克拉维酸,有显著性差异(P<0.01),近似于头孢哌酮舒巴坦。当哌拉西林三唑巴坦为4∶1时,相对水解率与8∶1相比又有非常显著降低。说明三唑巴坦起到了增强哌拉西林对β内酰胺酶的稳定性和抑酶保护的作用。 展开更多
关键词 哌拉西林 三唑巴坦 Β-内酰胺 酶稳定性
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反应介质对脂肪酶稳定性的影响 被引量:11
3
作者 宗敏华 刘耘 +1 位作者 尹顺义 姚汝华 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1995年第6期721-725,共5页
脂肪酶Lipozyme^(IM)在有机溶剂中的热稳定性显著提高。在水溶液中,热处理温度高于50℃后,其催化甘油三酯水解的活力迅速下降。温度升到60℃时,水解活力仅残存13.6%。温度高于70℃该酶完全失活。而在有机溶... 脂肪酶Lipozyme^(IM)在有机溶剂中的热稳定性显著提高。在水溶液中,热处理温度高于50℃后,其催化甘油三酯水解的活力迅速下降。温度升到60℃时,水解活力仅残存13.6%。温度高于70℃该酶完全失活。而在有机溶剂正庚烷中,温度高达85℃仍表现出较高的活性。反应介质的疏水性越强,酶抗超声辐射变性作用的能力越强。经同样的超声辐射处理后,正己烷中Lipozyme^(IM)的酯水解活力仅损失ll.8%,而在水溶液中其活力却损失了95.9%。 展开更多
关键词 脂肪 酶稳定性 反应介质
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酶稳定性的研究进展 被引量:9
4
作者 徐金库 张媛媛 刘均洪 《化学与生物工程》 CAS 2004年第3期1-3,共3页
酶稳定性的研究已经取得了令人瞩目的成就。尤其在化学修饰方面:交联酶结晶技术、多聚体共价结合以 及表面修饰等成果显著。综述了用化学修饰法和添加剂使酶稳定的最新研究进展。
关键词 酶稳定性 化学修饰 交联结晶 共价结合
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反应介质对脂肪酶稳定性的影响
5
作者 宗敏华 刘耘 +1 位作者 尹顺义 姚汝华 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 1996年第2期48-52,共5页
脂肪酶LipozymeIM在有机溶剂中的热稳定性显著提高.在水溶液中,热处理温度高于50℃后,其催化甘油三酯水解的活力迅速下降.温度升至60℃时,水解活力仅残存13.6%,温度高于70℃该酶完全失活。而在有机溶剂正庚... 脂肪酶LipozymeIM在有机溶剂中的热稳定性显著提高.在水溶液中,热处理温度高于50℃后,其催化甘油三酯水解的活力迅速下降.温度升至60℃时,水解活力仅残存13.6%,温度高于70℃该酶完全失活。而在有机溶剂正庚烷中,温度高达85℃仍表现出较高的活性。在有机溶剂中,LipozymeIM能抵抗超声辐射的变性作用。经同样的超声辐射处理后,正己烷中LipozymeIM的酯水解活力仅损失11.8%,而在水溶液中其活力却损失了95.9%。 展开更多
关键词 脂肪 有机溶剂 酯交换反应 超声辐射 酶稳定性
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黑曲霉β-葡萄糖苷酶稳定性的研究 被引量:1
6
作者 杨阳 任大明 《现代畜牧兽医》 2006年第5期22-22,共1页
关键词 Β-葡萄糖苷 酶稳定性 黑曲霉 纤维素 饲料制剂 组成部分 糖苷键 还原性 水解 配基
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储存条件对菌株11-3几丁质脱乙酰酶稳定性的研究 被引量:4
7
作者 岳洪霞 赵祥颖 +1 位作者 田延军 刘建军 《中国酿造》 CAS 北大核心 2010年第7期61-63,共3页
实验室保藏一株产几丁质脱乙酰酶(CDA)的菌株11-3,研究发现该菌所产CDA为胞内酶,在储存过程中其酶活稳定性很差,易失活。为保证该酶的后续研究,从几个方面考察了酶稳定性的影响因素,从而得出酶的最佳储存条件:干菌体储存于-20℃,2个月... 实验室保藏一株产几丁质脱乙酰酶(CDA)的菌株11-3,研究发现该菌所产CDA为胞内酶,在储存过程中其酶活稳定性很差,易失活。为保证该酶的后续研究,从几个方面考察了酶稳定性的影响因素,从而得出酶的最佳储存条件:干菌体储存于-20℃,2个月后酶活损失率仅为0.98%。 展开更多
关键词 几丁质脱乙酰 酶稳定性 红球菌
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改进酶稳定性的定向进化技术
8
作者 程峰 董俐住 +1 位作者 柳志强 郑裕国 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期93-99,共7页
酶作为一种生物催化剂,以其独特的优良特性,在"绿色化学"和"清洁生产"中得到了广泛的应用。随着酶定向进化技术的建立和发展,通过定向进化改进酶稳定性的研究越来越多。详细综述了各种定向进化方法的特点及在提高... 酶作为一种生物催化剂,以其独特的优良特性,在"绿色化学"和"清洁生产"中得到了广泛的应用。随着酶定向进化技术的建立和发展,通过定向进化改进酶稳定性的研究越来越多。详细综述了各种定向进化方法的特点及在提高酶稳定性方面的应用,并从结构和功能的角度进一步解释了相关机理。 展开更多
关键词 稳定性 定向进化 DNA改组
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提高抗菌肽抗酶解稳定性的结构修饰策略研究进展 被引量:2
9
作者 姜淑元 张昌浩 王陶然 《中国药理学与毒理学杂志》 北大核心 2025年第1期69-78,共10页
随着抗生素耐药性问题日益严重,抗菌肽作为一种新型抗生素替代药物引起广泛关注,然而抗菌肽较低的抗酶解稳定性严重限制了其临床应用。为提高抗菌肽的抗酶解稳定性,目前已开发多种结构修饰策略。本文综述了其中3种修饰策略——引入非天... 随着抗生素耐药性问题日益严重,抗菌肽作为一种新型抗生素替代药物引起广泛关注,然而抗菌肽较低的抗酶解稳定性严重限制了其临床应用。为提高抗菌肽的抗酶解稳定性,目前已开发多种结构修饰策略。本文综述了其中3种修饰策略——引入非天然氨基酸、肽链环化和化学基团修饰的基本原理及应用实例,分析其优缺点和潜在的优化方向,同时对抗菌肽酶稳定性增强策略的发展趋势和潜在挑战进行展望,旨在为抗菌肽的进一步研究和开发提供有效策略。 展开更多
关键词 抗菌肽 酶稳定性 结构优化策略
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家蝇丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin2重组蛋白体外酶学活性和稳定性研究
10
作者 王玮 谭书萍 +4 位作者 黄平 国果 修江帆 尚小丽 张昌容 《贵州农业科学》 2025年第8期77-82,共6页
【目的】探明家蝇丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin2重组蛋白在体外的酶学活性和稳定性,为重组蛋白酶的体外应用和功能研究提供科学依据。【方法】以FITC-Casein作为底物,与常见的丝氨酸蛋白酶即胰蛋白酶(Trypsin)、蛋白酶K(Proteinase K)、枯... 【目的】探明家蝇丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin2重组蛋白在体外的酶学活性和稳定性,为重组蛋白酶的体外应用和功能研究提供科学依据。【方法】以FITC-Casein作为底物,与常见的丝氨酸蛋白酶即胰蛋白酶(Trypsin)、蛋白酶K(Proteinase K)、枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin)、胰凝乳蛋白酶(Chymotrypsin)及纯化的家蝇Serpin2重组蛋白共同孵育,使用荧光多功能酶标仪检测荧光强度并计算剩余酶活,分析Serpin2重组蛋白对4种丝氨酸蛋白酶的体外抑制活性;分别设置不同温度、不同缓冲液pH和不同放置时间处理重组蛋白,检测荧光强度并计算剩余酶活,分析环境因素对家蝇Serpin2重组蛋白稳定性的影响。【结果】加入25μL浓度为1mg/mL的Serpin2重组蛋白对胰蛋白酶有极显著的抑制作用,且Serpin2重组蛋白在30℃、缓冲液pH为7、处理15min后稳定性较强,此时重组蛋白对胰蛋白酶的抑制活性均大于90.00%。【结论】家蝇Serpin2重组蛋白具有显著丝氨酸蛋白酶——胰蛋白酶类抑制活性,且在一般条件下具有较高的环境稳定性。 展开更多
关键词 家蝇 丝氨酸蛋白抑制剂2 学活性 酶稳定性
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羧甲基壳聚糖-重组虾铁蛋白接枝物的制备表征及其抗酶解稳定性分析
11
作者 张斌 申淼淼 +4 位作者 袁博 李树红 李冉 张志清 李美良 《四川农业大学学报》 北大核心 2025年第4期1073-1079,共7页
【目的】探究羧甲基壳聚糖接枝后对重组虾铁蛋白结构以及抗酶解稳定性的影响。【方法】以重组虾铁蛋白和分子量为60 kDa的羧甲基壳聚糖为原料,采用湿法糖基化方法制备重组虾铁蛋白-羧甲基壳聚糖复合物,分析复合物的结构、抗酶解稳定性... 【目的】探究羧甲基壳聚糖接枝后对重组虾铁蛋白结构以及抗酶解稳定性的影响。【方法】以重组虾铁蛋白和分子量为60 kDa的羧甲基壳聚糖为原料,采用湿法糖基化方法制备重组虾铁蛋白-羧甲基壳聚糖复合物,分析复合物的结构、抗酶解稳定性变化情况。【结果】羧甲基壳聚糖与重组虾铁蛋白糖基化反应后亚基分子量增大;粒径由13.5 nm改变为17 nm左右,且伴随一定的聚集现象;Zeta电势值由-16.7 mV改变为-26.2 mV;增强了对pH的响应性;改变了重组虾铁蛋白的周围通道环境、二级结构。模拟胃、肠液消化电泳结果表明糖基化产物经90 min消化后,降解的趋势弱于单独铁蛋白。【结论】羧甲基壳聚糖接枝可改变重组虾铁蛋白的结构,增强其抗酶解稳定性。 展开更多
关键词 羧甲基壳聚糖 重组虾铁蛋白 糖基化 结构 稳定性
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Sulperazone等抗生素对β-内酰胺酶的稳定性比较 被引量:3
12
作者 王彤 钟巍 +1 位作者 李曼宁 李家泰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期173-177,共5页
sulperazone与其它抗生素对β-内酰胺酶的稳定性比较结果表明:sulpeazone对12个标准酶中的11个酶均高度稳定,对TFM-1、TEM-2和SHV-1的稳定性较头孢酮显著增强,与头孢噻肟相同。对14个临... sulperazone与其它抗生素对β-内酰胺酶的稳定性比较结果表明:sulpeazone对12个标准酶中的11个酶均高度稳定,对TFM-1、TEM-2和SHV-1的稳定性较头孢酮显著增强,与头孢噻肟相同。对14个临床分离高度耐药菌所产生的β-内酰胺酶,sulperazone的酶稳定性也较头孢酮显著加强,其中12个酶对sulperazone的相对水解率较头孢酮降低2.2~80.2倍。对6个超广谱酶,sulperazone具有较好的酶稳定性,对肺炎克雷伯氏菌No,1091、447、877和异型枸橼酸杆菌No.887的酶稳定性好于头孢酮和头孢噻肟,与头孢他啶和氨曲南接近。 展开更多
关键词 Sulperazone 酶稳定性 Β-内酰胺 超广谱
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丝素蛋白葡萄糖氧化酶膜的储存稳定性 被引量:1
13
作者 徐新颜 徐家萍 +2 位作者 徐静斐 吉鑫松 袁中一 《安徽农业科学》 CAS 1997年第1期46-48,57,共4页
以共价交联法将葡萄糖氧化酶固定化在丝素蛋白膜上,探讨丝素酶膜在不同体系下的储存稳定性。研究结果表明:糖醇类小分子物质(乳糖、肌醇、甘露醇)和聚乙二醇、牛血清白蛋白等大分子物质组成的混合体系对酶膜存在着明显的稳定作用,... 以共价交联法将葡萄糖氧化酶固定化在丝素蛋白膜上,探讨丝素酶膜在不同体系下的储存稳定性。研究结果表明:糖醇类小分子物质(乳糖、肌醇、甘露醇)和聚乙二醇、牛血清白蛋白等大分子物质组成的混合体系对酶膜存在着明显的稳定作用,聚乙二醇、牛血清白蛋白、乳糖等单一体系也能降低酶膜在储存过程中的失活作用。其中牛血清白蛋白+肌醇+赖氨酸这一体系稳定作用最为显著,78d储存后酶膜仍能保持原来活力的92.1%(4℃)、82.1%(室温) 展开更多
关键词 丝素蛋白膜 葡萄糖氧化 酶稳定性 储存体系
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效应物对辣椒过氧化物酶活性和稳定性的影响 被引量:1
14
作者 杨文英 靳利娥 《太原理工大学学报》 北大核心 2017年第4期576-581,共6页
为了提高辣椒过氧化物酶(chilli peroxidase,CH-POD)的活力和稳定性,在辣椒中提取的CH-POD中分别加入硫酸锌(zinc sulfate,ZS)、葡萄糖酸锌(zinc gluconate,ZG)、乙酸锌(zinc acetate,ZA)等锌效应物和D-山梨醇(D-sorbitol,D-SOR)、D-甘... 为了提高辣椒过氧化物酶(chilli peroxidase,CH-POD)的活力和稳定性,在辣椒中提取的CH-POD中分别加入硫酸锌(zinc sulfate,ZS)、葡萄糖酸锌(zinc gluconate,ZG)、乙酸锌(zinc acetate,ZA)等锌效应物和D-山梨醇(D-sorbitol,D-SOR)、D-甘露醇(D-mannitol,D-MAN)等糖效应物,考察上述效应物对CH-POD活力的影响,选出最佳效应物。通过化学动力学确定了最佳效应物存在下CH-POD失活速率与储存时间之间的关系,并研究了效应物对酶Zeta电位的影响。结果表明,上述效应物均可提高CH-POD的活性,由ZA和D-SOR所组成的二元效应物(ZA-DSOR)为最佳效应物;ZA-D-SOR的加入增强了CH-POD的热稳定性,延长了储存半衰期,提高了Zeta电位稳定性。 展开更多
关键词 过氧化物活性 酶稳定性 效应物 乙酸锌 D-山梨醇
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近平滑假丝酵母ATCC 7330羰基还原酶CpCR突变体酶的稳定性研究
15
作者 龚大春 王德林 +4 位作者 万里 刘润 吕育财 罗华军 宋婷 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期59-64,共6页
通过蛋白质理性设计和定点突变技术,在近平滑假丝酵母ATCC 7330羰基还原酶wtCpCR的基础上,构建5个突变体酶A98N、S307N、G262N、S216N和S258N,考察了有机溶剂、温度、剪切力、氧气、辅酶NADPH浓度对突变体酶的稳定性影响。研究表明,A98 ... 通过蛋白质理性设计和定点突变技术,在近平滑假丝酵母ATCC 7330羰基还原酶wtCpCR的基础上,构建5个突变体酶A98N、S307N、G262N、S216N和S258N,考察了有机溶剂、温度、剪切力、氧气、辅酶NADPH浓度对突变体酶的稳定性影响。研究表明,A98 N在磷酸盐(potassium phosphate,PB)缓冲溶液中比酶活力提高10%,而S307 N没有酶活力,其他3个突变体比酶活力均有降低;A98 N和G262 N在PB/甲基叔丁基醚的双相体系中界面稳定性比原始酶wtCpCR分别提高1.7和1.4倍;4个突变体酶的耐热特性略有下降,T_(50)值介于31~36℃;在100、200 r/min条件下,4个突变体耐剪切力均增强,在300 r/min条件下G262 N突变酶的耐剪切稳定性比wtCpCR增强1.3倍;G262 N突变酶在有氧条件下的稳定性更好,比野生酶提高1.4倍,半衰期(t_(1/2))达到11.87 h;辅酶浓度为0~0.4 mmol/L时,G262 N突变酶更加稳定。该研究为该羰基还原酶wtCpCR的多点突变进一步改善酶稳定性提供重要的科学依据,同时可提高该酶在双相体系生物催化工艺的经济性。 展开更多
关键词 近平滑假丝酵母 羰基还原 理性设计 定点突变 酶稳定性
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静电作用与修饰铜锌超氧化物歧化酶的稳定性
16
作者 李维忠 缪方明 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第6期537-541,共5页
铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD)表面的赖氨酸经化学修饰后,酶的稳定性显著提高.赖氨酸被修饰后,酶的电荷结构遂发生变化,从而影响到酶分子电场.使用FDPB方法(有限差分法求解Poission-BOltzman方... 铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD)表面的赖氨酸经化学修饰后,酶的稳定性显著提高.赖氨酸被修饰后,酶的电荷结构遂发生变化,从而影响到酶分子电场.使用FDPB方法(有限差分法求解Poission-BOltzman方程)计算了酶修饰前后的静电场变化,以及对维持酶的结构稳定起重要作用的Cu,Zn配位结构的影响结果表明,Cu,Zn配位体的两级离解常数在酶修饰后分别约下降103,106. 展开更多
关键词 超氧化物歧化 酶稳定性 化学修饰 静电作用
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表面活性剂及其复配体系对漆酶活性和稳定性的影响 被引量:2
17
作者 刘海 张淑琴 +3 位作者 任大军 叶俊 何小勇 张晓晴 《武汉科技大学学报》 CAS 北大核心 2018年第1期75-80,共6页
本文研究了5种表面活性剂Brij-35、Tween-80、TX-100、AOT和甜菜碱对漆酶活性和稳定性的影响,探讨漆酶最适宜的反应温度和pH值,并通过Brij-35与其他4种表面活性剂组建不同类型的复配体系,分析在表面活性剂复配体系中漆酶活性与稳定性的... 本文研究了5种表面活性剂Brij-35、Tween-80、TX-100、AOT和甜菜碱对漆酶活性和稳定性的影响,探讨漆酶最适宜的反应温度和pH值,并通过Brij-35与其他4种表面活性剂组建不同类型的复配体系,分析在表面活性剂复配体系中漆酶活性与稳定性的变化情况。结果表明,不同类型和浓度的表面活性剂对漆酶催化性能的影响各异,影响方式主要取决于其头部基团的离子性质;加入表面活性剂后,漆酶的最佳反应温度(40℃)没有改变,最佳pH值(3.0)基本没变,但添加AOT的漆酶最佳pH值迁移到3.5;在合适条件下,表面活性剂可以提高漆酶的活性和稳定性,在4种复配体系中,非离子型与非离子型复配的表面活性剂(Brij-35/Tween-80,Brij-35/TX-100)最有利于漆酶的稳定性。 展开更多
关键词 表面活性剂 活性 酶稳定性 复配体系 Brij-35
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射频加热灭酶处理对米糠稳定性和品质的影响 被引量:13
18
作者 史乐伟 王珂 +2 位作者 邓红 孟永宏 贺小化 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期113-117,共5页
以米糠为原料,采用传统热风加热和射频加热两种方式处理米糠,比较了不同处理对米糠的稳定化效果;分析探讨了射频加热稳定化处理对米糠营养品质的影响。实验结果表明:传统热风加热难以达到稳定米糠目的,其过氧化物酶活仍为27%;射频灭酶... 以米糠为原料,采用传统热风加热和射频加热两种方式处理米糠,比较了不同处理对米糠的稳定化效果;分析探讨了射频加热稳定化处理对米糠营养品质的影响。实验结果表明:传统热风加热难以达到稳定米糠目的,其过氧化物酶活仍为27%;射频灭酶处理的米糠,脂肪酶和过氧化物酶活力显著降低,其过氧化物酶活下降了98.7%;存放过程中米糠油脂降解慢,酸值低,表现出较好的储藏稳定性;但米糠在120℃射频加热时颜色变深,营养物质有所损失。所以射频加热灭酶处理对提高米糠稳定性有良好作用,值得推广应用。 展开更多
关键词 米糠 射频加热 稳定性 品质
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从后处理工艺提高植酸酶热稳定性的研究进展 被引量:7
19
作者 刘梅英 彭健 +1 位作者 刘敏跃 高雁 《饲料工业》 2007年第11期1-3,共3页
植酸酶(Phytase)即肌醇六磷酸水解酶(Myoinosi-tol hexaphosphate phosphohydrotase),是催化植酸及植酸盐水解成肌醇与磷酸(或磷酸盐)的一类酶的总称(Ullah,1996)。在猪与家禽饲料中添加植酸酶可以使植物性饲料中磷的利用率提高... 植酸酶(Phytase)即肌醇六磷酸水解酶(Myoinosi-tol hexaphosphate phosphohydrotase),是催化植酸及植酸盐水解成肌醇与磷酸(或磷酸盐)的一类酶的总称(Ullah,1996)。在猪与家禽饲料中添加植酸酶可以使植物性饲料中磷的利用率提高60%,粪便中磷的排泄量减少40%左右;同时还能提高蛋白质、微量元素等的吸收利用。然而在植酸酶的生产应用中一直存在着植酸酶的热稳定性问题, 展开更多
关键词 稳定性 植酸 后处理工艺 肌醇六磷酸 植物性饲料 稳定性问题 家禽饲料 高蛋白质
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融合自组装双亲短肽提高碱性果胶酶热稳定性 被引量:5
20
作者 刘松 汪明星 +1 位作者 堵国成 陈坚 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1-6,共6页
考察了N-端融合自组装双亲短肽(SAP)对PGL热稳定性的影响.将6种具有不同疏水性和柔性的SAP融合至Bacillus sp.WSHB04-02 PGL N-端,得到融合酶PGL-S1、PGL-S2、PGL-S3、PGL-S4、PGL-S5和PGL-S6.与PGL相比,融合酶的55℃半衰期(t1/2)提... 考察了N-端融合自组装双亲短肽(SAP)对PGL热稳定性的影响.将6种具有不同疏水性和柔性的SAP融合至Bacillus sp.WSHB04-02 PGL N-端,得到融合酶PGL-S1、PGL-S2、PGL-S3、PGL-S4、PGL-S5和PGL-S6.与PGL相比,融合酶的55℃半衰期(t1/2)提高9.69 ~ 72.03倍;PGL-S1比酶活提高1.5倍达到458.52 U/mL,其他融合酶比酶活下降38.27% ~93.94%.此外,6种融合酶Km均较PGL显著下降;S1-PGL的kcat/Km提高3.52倍,其他融合酶kcat/Km则下降38%以上.所有SAP-PGL融合酶最适反应pH均在pH 9.4~10.6,符合其工业应用环境要求.上述结果表明,N-端融合SAP能有效提高PGL热稳定性和催化活性,获得的融合酶S1-PGL具有理想的应用前景. 展开更多
关键词 碱性果胶 自组装双亲短肽 融合 稳定性
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