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酵母三杂交系统的应用研究进展
1
作者
张浩
王全立
毛秉智
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
1999年第6期551-553,共3页
介绍了酵母三杂交系统的原理、应用、前景和存在的不足． 在酵母双杂交基础上发展起来的酵母三杂交系统， 将应用范围扩大到研究蛋白质蛋白质、蛋白质ＲＮＡ、蛋白质小分子药物间的相互作用．
关键词
酵母三杂交系统
蛋白质
相互作用
应用
原理
RNA
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职称材料
G_β,G_(βγ)与腺苷酸环化酶Ⅱ在酵母双杂交和三杂交系统中的相互作用
被引量：
1
2
作者
李旌军
鲁宁
黄秉仁
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期115-118,共4页
目的 探讨 G蛋白β和γ亚基在 G_(βγ)与效应器相互作用中的地位 ,特别是γ亚基在此相互关系中的作用。方法 利用酵母双杂交和自行构建的酵母三杂交系统分别研究 G_(β 1)和 G_(β 1)γ 2与腺苷酸环化酶Ⅱ (ACⅡ )的相互作用。 结果 ...
目的 探讨 G蛋白β和γ亚基在 G_(βγ)与效应器相互作用中的地位 ,特别是γ亚基在此相互关系中的作用。方法 利用酵母双杂交和自行构建的酵母三杂交系统分别研究 G_(β 1)和 G_(β 1)γ 2与腺苷酸环化酶Ⅱ (ACⅡ )的相互作用。 结果 发现酵母三杂交系统中 AD-β 1，γ 2和 BD-ACⅡ间的相互作用明显强于双杂交系统中 AD-β 1和 BD-ACⅡ的相互作用。对 BD-ACⅡ Q和 AD-β 1在酵母双杂交系统和三杂交系统中的表达进行免疫印迹杂交分析 ,发现其表达水平与β-半乳糖苷酶活力大小无关 ,即酵母三杂交系统和双杂交系统中相互作用的显著差别不是由 BD-ACⅡ Q和 AD-β 1蛋白表达水平的差异所造成。结论 β亚基对维持 G_(βγ)与 ACⅡ的相互作用十分重要 ,而γ亚基的存在显著增强了β亚基与 ACⅡ的相互作用 ,对维持 G_(βγ)与 ACⅡ的高亲和性很重要。
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关键词
Gβγ
腺苷酸环化酶Ⅱ
酵母三杂交系统
酵母
双
杂交
系统
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职称材料
从放线菌发酵液中高通量筛选端粒酶抑制剂
被引量：
2
3
作者
张慧敏
曹莹
+5 位作者
王卫国
李波兰
沈会芳
林壁润
庞建新
吴曙光
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期40-43,共4页
目的从2000多株放线菌发酵液中高通量筛选特异性端粒酶抑制剂。方法经对持有的3种端粒酶抑制剂筛选模型即3株酵母菌PCR验证后,将其接种于含3-AT、组氨酸缺乏的酵母培养液,然后分别调整其菌液浓度和筛选样品剂量,以备高通量筛选。将酵母...
目的从2000多株放线菌发酵液中高通量筛选特异性端粒酶抑制剂。方法经对持有的3种端粒酶抑制剂筛选模型即3株酵母菌PCR验证后,将其接种于含3-AT、组氨酸缺乏的酵母培养液,然后分别调整其菌液浓度和筛选样品剂量,以备高通量筛选。将酵母菌液移于96孔板,加入待测样品,振摇培养并定时经多功能微孔板分析仪进行定量分析,选取抑菌率大于0.45的样品进行复筛。结果经验证所持有的3种端粒酶抑制剂筛选模型均可用于下一步的筛选,并选取酵母菌液OD595nm 0.04做为起始筛选浓度,选取放线菌发酵液剂量为5ml,通过对放线菌发酵液进行初筛和复筛,发现了14株放线菌发酵液的抑菌效率超过0.45。结论该研究首次高通量筛选端粒酶抑制剂,方法简便快捷,筛选结果稳定可靠,并筛选到14株放线菌发酵液可能具有抗肿瘤活性,为进一步研究和开发抗肿瘤新药奠定基础。
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关键词
放线菌发酵液
高通量筛选
端粒酶抑制剂
酵母三杂交系统
96孔板
抗肿瘤活性
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职称材料
题名
酵母三杂交系统的应用研究进展
1
作者
张浩
王全立
毛秉智
机构
军事医学科学院野战输血研究所
军事医学科学院放射医学研究所
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
1999年第6期551-553,共3页
文摘
介绍了酵母三杂交系统的原理、应用、前景和存在的不足． 在酵母双杂交基础上发展起来的酵母三杂交系统， 将应用范围扩大到研究蛋白质蛋白质、蛋白质ＲＮＡ、蛋白质小分子药物间的相互作用．
关键词
酵母三杂交系统
蛋白质
相互作用
应用
原理
RNA
Keywords
yeast three hybrid system, yeast two hybrid system, protein protein interaction
分类号
Q－33 [生物学]
Q81 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
G_β,G_(βγ)与腺苷酸环化酶Ⅱ在酵母双杂交和三杂交系统中的相互作用
被引量：
1
2
作者
李旌军
鲁宁
黄秉仁
机构
中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期115-118,共4页
基金
国家自然科学基金!( 39630120)&&
文摘
目的 探讨 G蛋白β和γ亚基在 G_(βγ)与效应器相互作用中的地位 ,特别是γ亚基在此相互关系中的作用。方法 利用酵母双杂交和自行构建的酵母三杂交系统分别研究 G_(β 1)和 G_(β 1)γ 2与腺苷酸环化酶Ⅱ (ACⅡ )的相互作用。 结果 发现酵母三杂交系统中 AD-β 1，γ 2和 BD-ACⅡ间的相互作用明显强于双杂交系统中 AD-β 1和 BD-ACⅡ的相互作用。对 BD-ACⅡ Q和 AD-β 1在酵母双杂交系统和三杂交系统中的表达进行免疫印迹杂交分析 ,发现其表达水平与β-半乳糖苷酶活力大小无关 ,即酵母三杂交系统和双杂交系统中相互作用的显著差别不是由 BD-ACⅡ Q和 AD-β 1蛋白表达水平的差异所造成。结论 β亚基对维持 G_(βγ)与 ACⅡ的相互作用十分重要 ,而γ亚基的存在显著增强了β亚基与 ACⅡ的相互作用 ,对维持 G_(βγ)与 ACⅡ的高亲和性很重要。
关键词
Gβγ
腺苷酸环化酶Ⅱ
酵母三杂交系统
酵母
双
杂交
系统
Keywords
G_(βγ)； adenylyl cyclaseⅡ； yeast three-hybrid system
yeast two-hybrid system Acta Acad Med Sin,2001,23(2):115～ 118
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
从放线菌发酵液中高通量筛选端粒酶抑制剂
被引量：
2
3
作者
张慧敏
曹莹
王卫国
李波兰
沈会芳
林壁润
庞建新
吴曙光
机构
南方医科大学药学院新药评价中心
珠江医院药材科
广东省农科院植物保护所
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期40-43,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No306724487)
文摘
目的从2000多株放线菌发酵液中高通量筛选特异性端粒酶抑制剂。方法经对持有的3种端粒酶抑制剂筛选模型即3株酵母菌PCR验证后,将其接种于含3-AT、组氨酸缺乏的酵母培养液,然后分别调整其菌液浓度和筛选样品剂量,以备高通量筛选。将酵母菌液移于96孔板,加入待测样品,振摇培养并定时经多功能微孔板分析仪进行定量分析,选取抑菌率大于0.45的样品进行复筛。结果经验证所持有的3种端粒酶抑制剂筛选模型均可用于下一步的筛选,并选取酵母菌液OD595nm 0.04做为起始筛选浓度,选取放线菌发酵液剂量为5ml,通过对放线菌发酵液进行初筛和复筛,发现了14株放线菌发酵液的抑菌效率超过0.45。结论该研究首次高通量筛选端粒酶抑制剂,方法简便快捷,筛选结果稳定可靠,并筛选到14株放线菌发酵液可能具有抗肿瘤活性,为进一步研究和开发抗肿瘤新药奠定基础。
关键词
放线菌发酵液
高通量筛选
端粒酶抑制剂
酵母三杂交系统
96孔板
抗肿瘤活性
Keywords
actinomycetes fermentation broth high-throughput screening telomerase inhibitors yeast threehybrid system 96-well plates anti-tumor activity
分类号
R378.994 [医药卫生—病原生物学]
R345.9 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
酵母三杂交系统的应用研究进展
张浩
王全立
毛秉智
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
1999
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
G_β,G_(βγ)与腺苷酸环化酶Ⅱ在酵母双杂交和三杂交系统中的相互作用
李旌军
鲁宁
黄秉仁
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
从放线菌发酵液中高通量筛选端粒酶抑制剂
张慧敏
曹莹
王卫国
李波兰
沈会芳
林壁润
庞建新
吴曙光
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
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