目的研究百会穴久留针法通过脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸受体激酶B(TrkB)通路改善缺血性脑卒中小鼠神经功能的作用及机制。方法选择雄性C57BL/6J小鼠48只,随机分为假手术1组、模型1组、久留针1组、普通留针组,每组12只。后3组采用...目的研究百会穴久留针法通过脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸受体激酶B(TrkB)通路改善缺血性脑卒中小鼠神经功能的作用及机制。方法选择雄性C57BL/6J小鼠48只,随机分为假手术1组、模型1组、久留针1组、普通留针组,每组12只。后3组采用线栓法制备缺血性脑卒中模型,手术造模后第1天起久留针1组和普通留针组分别给予百会穴久留针和普通留针治疗,连续14 d。另选择雄性C57BL/6J小鼠40只,随机分为假手术2组、模型2组、久留针2组、久留针3组,每组10只。后3组采用线栓法制备缺血性脑卒中模型,针灸治疗前分别给予腺相关病毒100μl单次尾静脉注射。采用改良神经功能缺损评分(mNSS)及水迷宫实验的逃避潜伏期、目标象限停留时间、穿越原平台次数评价神经功能。结果与假手术1组比较,模型1组mNSS评分、目标象限停留时间、穿越原平台次数及缺血脑组织BDNF、TrkB表达明显降低,细胞凋亡率及裂解型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型1组比较,久留针1组和普通留针组mNSS评分、目标象限停留时间、穿越原平台次数及缺血脑组织BDNF、TrkB表达明显增加,细胞凋亡率及裂解型Caspase-3表达明显降低,且久留针1组上述变化较普通留针组更为显著,差异有统计学意义(P<0.05)。与久留针2组比较,久留针3组mNSS评分、目标象限停留时间、穿越原平台次数及缺血脑组织中BDNF表达明显降低(P<0.05),细胞凋亡率及裂解型Caspase-3表达明显增加[(16.41±2.25)%vs(7.59±1.09)%;1.46±0.16 vs 0.94±0.12,P<0.05]。结论百会穴久留针治疗对缺血性脑卒中小鼠神经功能的改善作用更为显著,激活BDNF/TrkB通路是其发挥神经保护作用的相关分子机制。展开更多
目的观察微小RNA-200c(miR-200c)与酪氨酸激酶受体B(Trk B)腰椎间盘髓核组织中的表达变化,并探讨其与腰椎间盘髓核退变程度的相关性。方法收集腰椎间盘髓核组织标本60例,用Pfirmlann分级对髓核退变程度进行分级,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级各20例。采...目的观察微小RNA-200c(miR-200c)与酪氨酸激酶受体B(Trk B)腰椎间盘髓核组织中的表达变化,并探讨其与腰椎间盘髓核退变程度的相关性。方法收集腰椎间盘髓核组织标本60例,用Pfirmlann分级对髓核退变程度进行分级,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级各20例。采用细胞衰老β-半乳糖苷酶实验检测不同分级髓核组织中衰老髓核细胞百分比,RT-PCR技术检测髓核组织中miR-200c、Trk B mRNA表达,Western blotting技术检测髓核组织中Trk B蛋白表达,采用Pearson相关分析miR-200c、Trk B与衰老髓核细胞的关系。结果 PfirmlannⅡ、Ⅲ、Ⅳ级髓核组织中衰老髓核细胞百分比、miR-200c相对表达量、Trk B mRNA及蛋白相对表达量两两比较,P均<0.05。miR-200c mRNA与Trk B mRNA相对表达量呈负相关(r=-0.71,P<0.05),miR-200c mRNA相对表达量与衰老髓核细胞百分比呈正相关(r=0.75,P<0.05),Trk B mRNA相对表达量与衰老髓核细胞百分比呈负相关(r=-0.70,P<0.05)。结论腰椎间盘髓核退变程度越高,miR-200c表达越高,Trk B mRNA表达越低;miR-200c可能通过下调Trk B表达参与腰椎间盘髓核组织的退变过程。展开更多
Objective: To find out an effective fixative in immunohistochemistry for high-affinity neurotrophin receptor-tyrosine kinase (Trk) B. Methods: Comparing the results from four groups of adult rats which were fixed by d...Objective: To find out an effective fixative in immunohistochemistry for high-affinity neurotrophin receptor-tyrosine kinase (Trk) B. Methods: Comparing the results from four groups of adult rats which were fixed by different fixatives before the brain sections were processed for TrkB immunohistochemistry. Results: In the four groups, TrkB immunoreactive cells were observed throughout the whole brain, but the intensity of immunoreactive cells and the background staining exhibited a marked difference among the groups. Conclusion: Using 0.3%-0.5% paraformaldehyde in 75% saturated picric acid 0.1 mol/L di-sodium hydrogen phosphate buffer as the fixative may yield the best quality of TrkB immunoreactivity.展开更多
文摘目的研究百会穴久留针法通过脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸受体激酶B(TrkB)通路改善缺血性脑卒中小鼠神经功能的作用及机制。方法选择雄性C57BL/6J小鼠48只,随机分为假手术1组、模型1组、久留针1组、普通留针组,每组12只。后3组采用线栓法制备缺血性脑卒中模型,手术造模后第1天起久留针1组和普通留针组分别给予百会穴久留针和普通留针治疗,连续14 d。另选择雄性C57BL/6J小鼠40只,随机分为假手术2组、模型2组、久留针2组、久留针3组,每组10只。后3组采用线栓法制备缺血性脑卒中模型,针灸治疗前分别给予腺相关病毒100μl单次尾静脉注射。采用改良神经功能缺损评分(mNSS)及水迷宫实验的逃避潜伏期、目标象限停留时间、穿越原平台次数评价神经功能。结果与假手术1组比较,模型1组mNSS评分、目标象限停留时间、穿越原平台次数及缺血脑组织BDNF、TrkB表达明显降低,细胞凋亡率及裂解型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型1组比较,久留针1组和普通留针组mNSS评分、目标象限停留时间、穿越原平台次数及缺血脑组织BDNF、TrkB表达明显增加,细胞凋亡率及裂解型Caspase-3表达明显降低,且久留针1组上述变化较普通留针组更为显著,差异有统计学意义(P<0.05)。与久留针2组比较,久留针3组mNSS评分、目标象限停留时间、穿越原平台次数及缺血脑组织中BDNF表达明显降低(P<0.05),细胞凋亡率及裂解型Caspase-3表达明显增加[(16.41±2.25)%vs(7.59±1.09)%;1.46±0.16 vs 0.94±0.12,P<0.05]。结论百会穴久留针治疗对缺血性脑卒中小鼠神经功能的改善作用更为显著,激活BDNF/TrkB通路是其发挥神经保护作用的相关分子机制。
文摘目的观察微小RNA-200c(miR-200c)与酪氨酸激酶受体B(Trk B)腰椎间盘髓核组织中的表达变化,并探讨其与腰椎间盘髓核退变程度的相关性。方法收集腰椎间盘髓核组织标本60例,用Pfirmlann分级对髓核退变程度进行分级,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级各20例。采用细胞衰老β-半乳糖苷酶实验检测不同分级髓核组织中衰老髓核细胞百分比,RT-PCR技术检测髓核组织中miR-200c、Trk B mRNA表达,Western blotting技术检测髓核组织中Trk B蛋白表达,采用Pearson相关分析miR-200c、Trk B与衰老髓核细胞的关系。结果 PfirmlannⅡ、Ⅲ、Ⅳ级髓核组织中衰老髓核细胞百分比、miR-200c相对表达量、Trk B mRNA及蛋白相对表达量两两比较,P均<0.05。miR-200c mRNA与Trk B mRNA相对表达量呈负相关(r=-0.71,P<0.05),miR-200c mRNA相对表达量与衰老髓核细胞百分比呈正相关(r=0.75,P<0.05),Trk B mRNA相对表达量与衰老髓核细胞百分比呈负相关(r=-0.70,P<0.05)。结论腰椎间盘髓核退变程度越高,miR-200c表达越高,Trk B mRNA表达越低;miR-200c可能通过下调Trk B表达参与腰椎间盘髓核组织的退变过程。
文摘Objective: To find out an effective fixative in immunohistochemistry for high-affinity neurotrophin receptor-tyrosine kinase (Trk) B. Methods: Comparing the results from four groups of adult rats which were fixed by different fixatives before the brain sections were processed for TrkB immunohistochemistry. Results: In the four groups, TrkB immunoreactive cells were observed throughout the whole brain, but the intensity of immunoreactive cells and the background staining exhibited a marked difference among the groups. Conclusion: Using 0.3%-0.5% paraformaldehyde in 75% saturated picric acid 0.1 mol/L di-sodium hydrogen phosphate buffer as the fixative may yield the best quality of TrkB immunoreactivity.