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耦合透性化辅酶循环制备手性(R)-苯基乙醇
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作者 彭益强 陈李玲 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1219-1226,共8页
通过耦合透性化博伊丁假丝酵母(Candida boidinii,C.boidinii)加强了近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis,C.parapsilosis)内羰基还原酶(Carbonyl reductase,CR)催化反应中的辅酶循环与反复利用,构建了有效的手性(R)-苯基乙醇透性化细... 通过耦合透性化博伊丁假丝酵母(Candida boidinii,C.boidinii)加强了近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis,C.parapsilosis)内羰基还原酶(Carbonyl reductase,CR)催化反应中的辅酶循环与反复利用,构建了有效的手性(R)-苯基乙醇透性化细胞耦合制备体系。实验结果如下:透性化的C.parapsilosis细胞底产物渗透效果增强,底物转化率由33.5%提升到43.8%;进一步外添加辅酶后,底物转化率由43.8%提高到了52.1%;耦合透性化C.boidinii细胞并同时外添加辅酶可大大增强辅酶循环效率,底物转化率可提高至71.8%。优化透性化细胞耦合体系反应条件,当以0.2 g近平滑假丝酵母(C.parapsilosis)为基准时,在C.parapsilosis与C.boidinii细胞质量比为1.5∶1,底物浓度为10 mmol/L,辅酶浓度为0.1 mmol/L时,底物转化率可达78.2%。离心法收集细胞进行多批次反应,当反应12批次时,耦合体系仍然保持有55%底物转化率,此时总的底物转化率达70.3%,产物经高效液相色谱测定为(R)-苯基乙醇,对映体过量值(e.e.值)达98.2%。 展开更多
关键词 化细胞 辅酶再生 羰基还原 甲酸脱氢 (R)-苯基乙醇 生物工程
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发酵液中酮基还原酶活性测定方法的构建 被引量:3
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作者 石小丹 李啸 +1 位作者 罗宇笛 谈亚丽 《中国酿造》 CAS 2014年第9期151-155,共5页
本研究以4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)为底物,还原型辅酶Ⅱ(NADPH)为辅酶,应用紫外-可见光分光光度计法测定发酵液中酮基还原酶活性,通过连续测定NADPH消耗量来计算酶活力,得到了最佳反应体系:NADPH浓度为0.2 mmol/L,COBE浓度为1.0 mmol/L,... 本研究以4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)为底物,还原型辅酶Ⅱ(NADPH)为辅酶,应用紫外-可见光分光光度计法测定发酵液中酮基还原酶活性,通过连续测定NADPH消耗量来计算酶活力,得到了最佳反应体系:NADPH浓度为0.2 mmol/L,COBE浓度为1.0 mmol/L,磷酸缓冲溶液浓度为100 mmol/L、p H值为6,反应温度为40℃。在此条件下平行检测5次酶活,相对标准偏差(RSD)为0.48%。此方法操作简便,耗时短,精确度高,重复性好,可作为发酵液中酮基还原酶活性测定方法加以推广。 展开更多
关键词 酮基还原 活测定 紫外-可见光分光光度计 4-氯乙酰乙酸乙酯 还原辅酶
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葡萄糖-6-磷酸脱氢酶在病毒感染中的作用
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作者 陈冬雪 李云龙 +1 位作者 魏大巧 黄芬 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1788-1796,共9页
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)是磷酸戊糖途径的第一个限速酶,不仅能维持细胞内还原型辅酶Ⅱ(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)和还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)的平衡,... 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)是磷酸戊糖途径的第一个限速酶,不仅能维持细胞内还原型辅酶Ⅱ(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)和还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)的平衡,而且在维持细胞内氧化还原平衡中也起着重要作用。研究表明,G6PD活性的降低可导致细胞内的氧化还原平衡被打破,趋向于氧化态,这不仅会导致细胞生长和信号传递的失调,还会使机体对病毒更易感。然而,目前关于G6PD的变化对病毒感染易感性的影响还没有系统的文献报道。本文将对病毒感染与G6PD之间的关系进行综述。 展开更多
关键词 葡萄糖-6-磷酸脱氢 病毒感染 氧化还原 还原辅酶
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葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏的红细胞抗氧化能力的研究 被引量:1
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作者 张瑶苹 吴梓染 +3 位作者 陈福雄 赖永洪 湛洁谊 陈淑芳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1995年第4期395-398,共4页
本文探讨了正常和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺乏的红细胞抗氧化能力的不同。结果显示,G-6-PD缺乏的红细胞还原型辅酶Ⅱ(NADPH)含量显著低于正常红细胞;正常红细胞受过氧化刺激后,其过氧化氢酶(Cat)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHpx)活性及... 本文探讨了正常和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺乏的红细胞抗氧化能力的不同。结果显示,G-6-PD缺乏的红细胞还原型辅酶Ⅱ(NADPH)含量显著低于正常红细胞;正常红细胞受过氧化刺激后,其过氧化氢酶(Cat)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHpx)活性及NADPH含量均呈现先升后降的变化;G-6-PD缺乏的红细胞的Cat,GSHpx活性及NADPH含量则持续下降。揭示了G-6-PD缺乏的红细胞抗氧化能力不足。本文还对NADPH在红细胞抗氧化中所起的作用进行了探讨。 展开更多
关键词 葡萄糖-6-磷酸脱氨缺乏 还原辅酶 过氧化氨 谷胱甘肽过氧化物
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蒙古沙鼠耳蜗一氧化氮合酶的胆碱能调节 被引量:2
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作者 杨曙 谢鼎华 +4 位作者 伍伟景 肖自安 刘嘉 杨新明 田丰 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2002年第3期156-158,T001,共4页
目的 通过检测乙酰胆碱对蒙古沙鼠耳蜗中一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)的影响 ,初步探讨耳蜗中NOS的调节机制。方法 蒙古沙鼠耳蜗经还原型辅酶Ⅱ -黄递酶 (NADPH -黄递酶 )染色后行耳蜗铺片 ,分别以同一动物两侧耳蜗为实... 目的 通过检测乙酰胆碱对蒙古沙鼠耳蜗中一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)的影响 ,初步探讨耳蜗中NOS的调节机制。方法 蒙古沙鼠耳蜗经还原型辅酶Ⅱ -黄递酶 (NADPH -黄递酶 )染色后行耳蜗铺片 ,分别以同一动物两侧耳蜗为实验组和对照组进行对比观察 ,检测乙酰胆碱 (ACh)对耳蜗NOS活性的影响 ,其染色深度的差异通过HPIAS - 10 0 0高清晰度彩色病理图像免疫组化测量系统判断。结果 蒙古沙鼠耳蜗外毛细胞基底部传出神经末梢呈现NADPH -黄递酶染色阳性反应 ,ACh处理后染色深度明显增强 ,其平均灰度值从 74.2 8± 11.71减低至 46 .5± 7.78(P <0 .0 1)。结论 蒙古沙鼠耳蜗外毛细胞基底部的传出神经末梢可见NOS分布 ,ACh能增强其活性 。 展开更多
关键词 乙酰胆碱 一氧化氮合 还原辅酶-黄递 耳蜗
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大鼠耳蜗一氧化氮合酶的分布和表达 被引量:2
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作者 潘世恺 角南贵司子 +1 位作者 山根英雄 王正敏 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2003年第2期125-127,I002,共4页
目的 本实验先用组织化学法 ,通过观察还原型辅酶Ⅱ -黄递酶 (NADPH -黄递酶 )的活性了解一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)在大鼠耳蜗内分布。再用亲合免疫细胞组织化学技术 ,研究大鼠耳蜗内神经元型NOS(neuronalNOS ,nNOS)与... 目的 本实验先用组织化学法 ,通过观察还原型辅酶Ⅱ -黄递酶 (NADPH -黄递酶 )的活性了解一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)在大鼠耳蜗内分布。再用亲合免疫细胞组织化学技术 ,研究大鼠耳蜗内神经元型NOS(neuronalNOS ,nNOS)与内皮型NOS(endothelialNOS ,eNOS)的表达。方法 组化组大鼠耳蜗切片用辅酶Ⅱ孵育液在 37℃条件下孵育 1小时。免疫组化组大鼠耳蜗切片经消除内源性过氧化物酶 ,3%山羊正常血清封闭非正常结合点后 ,用兔抗nNOS抗体、兔抗eNOS抗体 ,室温下孵育 6 0分钟 ,再用生物素标记的山羊抗兔第二抗体孵育、滴加ABC试剂 ,以DAB试剂显色。结果 大鼠耳蜗血管球内皮细胞有明显NADPH -黄递酶活性 ,血管纹及螺旋神经节细胞也有NADPH -黄递酶活性反应。大鼠耳蜗内、外毛细胞、螺旋神经节细胞nNOS、eNOS的表达呈阳性。血管纹细胞处有阳性nNOS、eNOS的表达。耳蜗血管球的内皮细胞无nNOS的表达 ,但eNOS的表达呈强阳性。 展开更多
关键词 一氧化氮合 一氧化氮 还原辅酶-黄递 耳蜗 免疫组织化学 耳蜗
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豚鼠耳蜗─氧化氮合酶的分布
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作者 潘世恺 角南贵司子 +1 位作者 山根英雄 王正敏 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2001年第1期19-21,T001,共4页
目的 用组织化学法,通过观察NADPH-黄递酶的活性了解一氧化氮合酶在豚鼠耳蜗内分布。方法 经4%多聚甲醛心脏灌注固定后,取出耳蜗,经3%依地酸脱钙后,作厚10μm冰冻切片,用辅酶Ⅱ孵育液在37℃条件下孵育1小时。结果... 目的 用组织化学法,通过观察NADPH-黄递酶的活性了解一氧化氮合酶在豚鼠耳蜗内分布。方法 经4%多聚甲醛心脏灌注固定后,取出耳蜗,经3%依地酸脱钙后,作厚10μm冰冻切片,用辅酶Ⅱ孵育液在37℃条件下孵育1小时。结果 发现在耳蜗内、外毛细胞底部与耳蜗神经末梢接头处及毛细血管球内皮细胞有明显NADPH-黄递酶活性,此外在内、外柱细胞、支持细胞、血管纹及螺旋神经节细胞也有NADPH-黄递酶活性反应。结论 NO在维持耳蜗正常神经传导及毛细血管张力中起着重要作用。 展开更多
关键词 一氧化氮合 还原辅酶-黄递 耳蜗 组织化学 豚鼠
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双氯醇胺对肥育猪脂肪与蛋白质代谢的影响
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作者 程进 肖日进 《动物营养学报》 CAS CSCD 1995年第3期8-14,共7页
用添加10、15和20mg/kg双氯醇胺的饲粮饲喂“杜长大”肥育猪,均导致了试验猪背部皮下脂肪还原性辅酶Ⅱ(NADPH,下同)生成酶活性降低,其中以15mg/kg剂量组最为明显,分别使苹果酸脱氢酶活性降低35%(P<0.01),葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性降... 用添加10、15和20mg/kg双氯醇胺的饲粮饲喂“杜长大”肥育猪,均导致了试验猪背部皮下脂肪还原性辅酶Ⅱ(NADPH,下同)生成酶活性降低,其中以15mg/kg剂量组最为明显,分别使苹果酸脱氢酶活性降低35%(P<0.01),葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性降低55%(P<0.05),异柠檬酸脱氢酶降低63%(P<0.05);此外,双氯醇胺还使屠宰后30天肌蛋白的降解速度明显减慢。血清生化指标测定结果表明:双氯醇胺(15mg/kg)使血清尿氮浓度降低25%(P<0.05),血清胆固醇下降22%(P<0.05)。由上述结果推测:双氯醇胺通过减少脂肪合成,抑制肌肉蛋白质降解和促进蛋白氮利用发挥其营养再分配作用。 展开更多
关键词 双氯醇胺 还原性辅酶ⅱ-生成酶 脂肪合成 蛋白质降解
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强直电刺激海马致痫后大鼠大脑皮质NOS神经元变化研究
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作者 张健 袁华 +2 位作者 韩丹 张先荣 王小云 《武汉科技大学学报》 CAS 2000年第4期401-403,共3页
采用强直电刺激大鼠海马建立致痫模型 ,观察 NOS神经元在致痫大鼠和正常大鼠大脑皮质的分布特征 ,探讨 NO在癫痫发作中的作用。实验结果表明 ,建模组大脑皮质的阳性细胞数较正常组明显增多 ;NOS神经元弥散分布于致痫大鼠大脑皮质 ,细胞... 采用强直电刺激大鼠海马建立致痫模型 ,观察 NOS神经元在致痫大鼠和正常大鼠大脑皮质的分布特征 ,探讨 NO在癫痫发作中的作用。实验结果表明 ,建模组大脑皮质的阳性细胞数较正常组明显增多 ;NOS神经元弥散分布于致痫大鼠大脑皮质 ,细胞胞体较大 ,并借突起相互交织成网。由此可得到如下结论 :癫痫发生时脑内 NO作用明显 ,这可能与癫痫引起的神经元损伤及 NO介导的痫性放电的发生、传播、汇集有关 ;NOS-NO途径可能参与癫痫的启动与传播。 展开更多
关键词 一氧化氮 一氧化氮合 癫痫 大脑皮质 还原辅酶依赖黄递
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