LbCas12a转基因家蚕的制备及经济性状评价

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作者 张花瑞 尹思英 +3 位作者 张仁泽 潘国庆 包佳玲 周泽扬 《蚕业科学》 CSCD 北大核心 2024年第6期514-521,共8页

规律成簇的间隔短回文重复序列及相关蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated systems,CRISPR/Cas)系统具有灵敏度高、特异性强、操作简便等特点,近年来在基因编辑领域得到广泛应用。采用... 规律成簇的间隔短回文重复序列及相关蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated systems,CRISPR/Cas)系统具有灵敏度高、特异性强、操作简便等特点,近年来在基因编辑领域得到广泛应用。采用显微注射技术,将LbCas12a转基因载体注入家蚕品系N4的胚胎中,通过绿色荧光筛选标记筛选出阳性转基因家蚕。随后,提取转基因蚕蛾的基因组DNA、总RNA及总蛋白,基因组PCR检测确定LbCas12a基因成功插入转基因家蚕的基因组中,且定位于转基因家蚕13号染色体上。通过定量PCR检测及Western blot分析,确定LbCas12a基因在转基因家蚕中成功表达。对转基因家蚕进行经济性状评价,证实LbCas12a转基因家蚕的蚕茧及蚕蛹与正常N4品系家蚕无显著差异。综上所述,LbCas12a转基因家蚕的构建为CRISPR/Cas12a基因编辑技术在家蚕中的应用奠定了基础。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas12a 基因编辑 转基因家蚕 经济性状评价

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转基因家蚕生产含蜘蛛丝蛋白的新型复合茧丝纤维 被引量：8

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作者 张袁松 赵天福 +2 位作者 赵爱春 文红秀 中垣雅雄 《纺织学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第5期1-5,共5页

为了人工大量生产蜘蛛丝蛋白,蜘蛛牵引丝基因(MaSp1)被用piggyBac转基因载体导入家蚕染色体中。茧丝蛋白分析显示转基因家蚕可以生产含有蜘蛛牵引丝蛋白的复合茧丝新纤维。与天然茧丝相比,转基因家蚕茧丝强度增加5.3%,而断裂伸长几乎没... 为了人工大量生产蜘蛛丝蛋白,蜘蛛牵引丝基因(MaSp1)被用piggyBac转基因载体导入家蚕染色体中。茧丝蛋白分析显示转基因家蚕可以生产含有蜘蛛牵引丝蛋白的复合茧丝新纤维。与天然茧丝相比,转基因家蚕茧丝强度增加5.3%,而断裂伸长几乎没有变化。研究表明利用转基因家蚕大量生产各种新型复合蛋白质纤维材料具有潜在的应用前景。 展开更多

关键词 转基因家蚕 蜘蛛丝 复合蚕丝

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转座子K1.4可提高荧光素酶基因在转基因家蚕中的整合频率

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作者 钱信果 周丛照 李振刚 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期710-713,共4页

合适的整合表达载体对于获得转基因家蚕具有重要意义，为此本文构建了包含家蚕转座子Ｋ１．４、丝素基因上游启动子序列和荧光素酶基因ｃＤＮＡ的质粒ＳＫＦＬ以及不含Ｋ１．４的质粒ｐＦＬ，并将其通过扎卵法转移到家蚕受精卵中．通过... 合适的整合表达载体对于获得转基因家蚕具有重要意义，为此本文构建了包含家蚕转座子Ｋ１．４、丝素基因上游启动子序列和荧光素酶基因ｃＤＮＡ的质粒ＳＫＦＬ以及不含Ｋ１．４的质粒ｐＦＬ，并将其通过扎卵法转移到家蚕受精卵中．通过对当代转基因家蚕５龄幼虫丝腺和蚕体ＤＮＡ进行斑点杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交发现，荧光素酶基因在家蚕不同组织中的整合是随机的，但携带Ｋ１．４的质粒ＳＫＦＬ的整合频率明显高于质粒ｐＦＬ．这说明转座子Ｋ１．４可以有效提高外源基因在转基因家蚕中的整合频率，从而有可能成为构建转基因家蚕的一种有用的整合载体． 展开更多

关键词 家蚕 转座子 荧光素酶基因 整合频率 转基因家蚕

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表达短lef-1 dsRNA转基因家蚕对BmNPV的抵抗能力与主要经济性状 被引量：7

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作者 叶秋霞 薛仁宇 +4 位作者 曹广力 张鹏杰 潘中华 郑小坚 贡成良 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期825-831,共7页

为了提高家蚕对核型多角体病毒(BmNPV)的抵抗能力,将带有BmNPV晚期表达因子基因(lef-1)dsRNA表达盒和新霉素抗性基因(neo)表达盒的转基因载体pigA3-LEF-Neo通过精子介导法导入家蚕卵,经G418和GFP双重筛选并结合分子生物学鉴定,证实获得... 为了提高家蚕对核型多角体病毒(BmNPV)的抵抗能力,将带有BmNPV晚期表达因子基因(lef-1)dsRNA表达盒和新霉素抗性基因(neo)表达盒的转基因载体pigA3-LEF-Neo通过精子介导法导入家蚕卵,经G418和GFP双重筛选并结合分子生物学鉴定,证实获得了转基因家蚕。对G6代转基因家蚕2龄幼虫接种BmNPV,结果显示转基因家蚕的死亡率比正常家蚕(对照组)下降了10～30个百分点,表明转基因家蚕对BmNPV的抗性有所提高;对接种BmNPV的5龄转基因家蚕A、B系统的定量PCR检测结果显示,2个系统体内的lef-1 mRNA转录水平比对照组平均降低了72倍和26.5倍,最高下降了104倍,进一步表明表达lef-1 dsRNA的转基因家蚕抑制了BmNPV lef-1基因的表达。转基因家蚕的饲养成绩显示其全茧量、茧层量和茧层率等主要经济性状与正常家蚕无明显差异。 展开更多

关键词 家蚕核型多角体病毒 晚期表达因子基因 双链RNA 转基因家蚕 抗性 经济性状

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转基因家蚕与家蚕、天蚕丝心蛋白氨基酸组成的比较研究

5

作者 徐家萍 刘明辉 《安徽农学通报》 2002年第2期44-45,共2页

分别对转基因家蚕、天蚕、家蚕的茧丝丝心蛋白进行氨基酸组成的研究。结果表明以上三者在丝心蛋白氨酸组成上存在差异 ,从而进一步证实天蚕丝心蛋白基因已转移整合到家蚕基因组中 。

关键词 家蚕 天蚕 转基因家蚕 丝心蛋白 氨基酸组成 茧丝

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非转座子载体介导的转基因家蚕表达hIL-28A 被引量：1

6

作者 崔琳琳 薛仁宇 +2 位作者 陆叶 曹广力 贡成良 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第8期724-729,共6页

为了探讨非转座子载体介导转基因家蚕表达外源基因的可能性,将hIL-28A克隆进昆虫细胞表达载体pIZT/V5-His,构建了重组载体pIZT/V5-His-hIL-28A.利用精子介导法将该重组载体导入家蚕卵,通过绿色荧光筛选并结合PCR、DNA杂交等分子鉴定,证... 为了探讨非转座子载体介导转基因家蚕表达外源基因的可能性,将hIL-28A克隆进昆虫细胞表达载体pIZT/V5-His,构建了重组载体pIZT/V5-His-hIL-28A.利用精子介导法将该重组载体导入家蚕卵,通过绿色荧光筛选并结合PCR、DNA杂交等分子鉴定,证实成功获得了转基因家蚕.Western blotting结果显示,转基因家蚕表达重组hIL-28A的分子质量为25 ku,ELISA检测结果显示,hIL-28A在G3代转基因蚕、后部丝腺、脂肪组织冻干粉中的含量分别为0.198、0.320和0.238 ng/g.表明通过非转座子载体介导可以将外源基因导入家蚕基因组并实现外源基因的表达. 展开更多

关键词 非转座子载体pIZT/V5-His 转基因家蚕 hIL-28A 精子介导法

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利用非转座子载体介导的转基因家蚕表达人胰岛素样生长因子Ⅰ 被引量：1

7

作者 胡莹莹 薛仁宇 +1 位作者 曹广力 贡成良 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期658-664,共7页

为了实现利用非转座子载体介导的转基因家蚕整体表达人胰岛素样生长因子Ⅰ(hIGF-Ⅰ),将hIGF-Ⅰ基因克隆进非转座子类型的昆虫细胞表达载体pIZT/V5-His,构建转基因载体pIZT/V5-His-hIGF-Ⅰ。利用精子介导法将该转基因载体导入家蚕卵,通... 为了实现利用非转座子载体介导的转基因家蚕整体表达人胰岛素样生长因子Ⅰ(hIGF-Ⅰ),将hIGF-Ⅰ基因克隆进非转座子类型的昆虫细胞表达载体pIZT/V5-His,构建转基因载体pIZT/V5-His-hIGF-Ⅰ。利用精子介导法将该转基因载体导入家蚕卵,通过绿色荧光筛选并结合PCR和Dot blotting检测鉴定,表明已成功获得hIGF-Ⅰ转基因家蚕。对培育至G2代的转基因家蚕5龄幼虫蛋白质样品进行Western blotting分析,结果显示hIGF-Ⅰ在转基因家蚕中获得表达,重组hIGF-Ⅰ的分子质量约12.5 kD;ELISA检测hIGF-Ⅰ在G2代转基因家蚕5龄幼虫全蚕以及后部丝腺、脂肪体冻干粉中的质量比分别为65、411、469 ng/g。试验结果再次证实通过非转座子载体pIZT/V5-His介导可以将外源基因导入家蚕基因组,并实现外源基因在转基因家蚕中整体表达。 展开更多

关键词 转基因家蚕 非转座子载体pIZT/V5-His 人胰岛素样生长因子Ⅰ 精子介导法

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利用转基因家蚕在蚕丝中表达重组人表皮生长因子 被引量：1

8

作者 吴美玉 叶小刚 +3 位作者 周丽 阮靖华 赵硕 钟伯雄 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期222-229,共8页

人表皮生长因子(human epidermal growth factor,hEGF)具有刺激细胞增殖的强大能力,是伤口愈合的关键因子。利用转基因技术,在家蚕后部丝腺利用丝素轻链基因(fibroin light chain,FibL)启动子驱动FibL-hEGF融合蛋白的表达。借助piggyBa... 人表皮生长因子(human epidermal growth factor,hEGF)具有刺激细胞增殖的强大能力,是伤口愈合的关键因子。利用转基因技术,在家蚕后部丝腺利用丝素轻链基因(fibroin light chain,FibL)启动子驱动FibL-hEGF融合蛋白的表达。借助piggyBac转座子将FibL-hEGF融合基因导入到家蚕基因组,利用荧光检测总共获得8个转基因阳性卵圈,转基因阳性率为36.36%。PCR和反向PCR检测证明外源融合基因FibL-hEGF已被成功整合到家蚕基因组中,且随机插入到家蚕染色体的5个位点。Western blotting检测表明FibL-hEGF融合蛋白在家蚕后部丝腺中表达且成功分泌到蚕茧中,进一步证实了转基因家蚕的产生。本研究中利用piggyBac转座子介导的转基因技术成功获得了转基因家蚕并得到重组hEGF蚕丝,该蚕丝可用于制造伤口敷料。 展开更多

关键词 转基因家蚕 人表皮生长因子 重组蚕丝

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美国培育出新型转基因家蚕

9

《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期109-109,共1页

据美国物理学家组织网报道，美国的研究人员近日宣称，他们成功培育出了一种转基因家蚕，其能吐出含有蛛丝蛋白的蚕丝纤维．比天然蚕丝具有更好的强度和柔韧性，可在医疗、军事、纺织等领域发挥重要作用。很早之前科学家们就注意到了蛛... 据美国物理学家组织网报道，美国的研究人员近日宣称，他们成功培育出了一种转基因家蚕，其能吐出含有蛛丝蛋白的蚕丝纤维．比天然蚕丝具有更好的强度和柔韧性，可在医疗、军事、纺织等领域发挥重要作用。很早之前科学家们就注意到了蛛丝的优良性能：在力学强度上， 展开更多

关键词 转基因家蚕 美国 培育 蚕丝纤维 蛛丝蛋白 力学强度 物理学家 研究人员

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转基因家蚕生产含蜘蛛丝蛋白的新型复合茧丝纤维

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《针织工业》 北大核心 2012年第6期70-70,共1页

为了人工大量生产蜘蛛丝蛋白．蜘蛛牵引丝基因（MaSpl）被用piggyBac转基因载体导人家蚕染色体中。茧丝蛋白分析显示，转基因家蚕可以生产含有蜘蛛牵引丝蛋白的复合茧丝新纤维。与天然茧丝相比．转基因家蚕茧丝强度增加5．3％．而断裂... 为了人工大量生产蜘蛛丝蛋白．蜘蛛牵引丝基因（MaSpl）被用piggyBac转基因载体导人家蚕染色体中。茧丝蛋白分析显示，转基因家蚕可以生产含有蜘蛛牵引丝蛋白的复合茧丝新纤维。与天然茧丝相比．转基因家蚕茧丝强度增加5．3％．而断裂伸长几乎没有变化。研究表明。利用转基因家蚕大量生产各种新型复合蛋白质纤维材料具有潜在的应用前景。 展开更多

关键词 转基因家蚕 蜘蛛丝蛋白 茧丝 生产 复合 丝纤维 转基因载体 蛋白分析

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上海科学家的研究表明转基因家蚕的蚕丝产量提高60％

11

《生物学教学》 北大核心 2011年第9期78-78,共1页

据中国军网2011年3月22日援引新华社上海2011年3月22日电，中国科学院上海生命科学院植物生理生态研究所李胜研究员和西南大学夏庆友教授合作进行的一项研究表明，利用转基因家蚕来提高蚕丝产量的方法切实可行。这意味着，运用转基因等... 据中国军网2011年3月22日援引新华社上海2011年3月22日电，中国科学院上海生命科学院植物生理生态研究所李胜研究员和西南大学夏庆友教授合作进行的一项研究表明，利用转基因家蚕来提高蚕丝产量的方法切实可行。这意味着，运用转基因等分子育种技术进行家蚕种质改良创新，可望实现蚕丝产业的革命。 展开更多

关键词 转基因家蚕 蚕丝产量 上海 科学家 中国科学院 植物生理生态 分子育种技术 种质改良

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日本研究人员培育出吐黄丝的转基因家蚕

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作者 增田智子 《生物产业技术》 2008年第2期6-6,共1页

日本的东京大学，日本大学，九州大学、农业生物资源研究所、国立感染症研究所的研究小组共同确定了决定蚕茧颜色的基因，并成功培育出了可生产黄丝的转基因家蚕。这是通过基因重组，实现用天然色素对天然纤维染色的首例。

关键词 转基因家蚕 日本大学 研究人员 黄丝 培育 天然色素 东京大学 九州大学

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《家蚕转基因技术及应用》简介

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《蚕学通讯》 2024年第3期30-30,共1页

西南大学向仲怀院士领导的研究团队,长期致力于家蚕转基因技术开发及应用研究,是国内最早开展家蚕转基因技术研究的团队之一,近年来取得了一系列的研究成果。由该研究团队的赵爱春教授和向仲怀院士共同主编的《家蚕转基因技术及应用》专... 西南大学向仲怀院士领导的研究团队,长期致力于家蚕转基因技术开发及应用研究,是国内最早开展家蚕转基因技术研究的团队之一,近年来取得了一系列的研究成果。由该研究团队的赵爱春教授和向仲怀院士共同主编的《家蚕转基因技术及应用》专著,历经3年多时间的辛劳编撰和不断完善,终于付梓成册。《家蚕转基因技术及应用》全书共55万字,分12章系统地介绍了家蚕转基因的技术路线,家蚕转基因的载体构建,外源基因导入技术,转基因家蚕的内外源基因整合、功能检测、基因定点突变家蚕的鉴定与筛选,家蚕转基因中特异序列捕获技术、基因特异性表达调控技术、条件基因打靶技术,基因组编辑技术,转基因家蚕素材创新、滞育性蚕品种转基因体系的建立,以及转基因家蚕的安全管理和安全评价等。是当今国内外对家蚕转基因的理论与技术方法研究,以及转基因技术应用和安全管理介绍最为系统、全面的学术专著,将为研究人员利用转基因技术改良家蚕重要经济性状,推动家蚕转基因技术的发展及在基因功能研究、生物反应器开发、新型蚕丝材料创制、安全转基因体系建立等领域的应用提供有益参考。另外,家蚕是转基因研究和应用最为深入的昆虫之一,其科研成果可为广大科技工作者开展昆虫转基因研究提供理论、方法及实践的补益。 展开更多

关键词 转基因技术 科技工作者 转基因家蚕 生物反应器 外源基因导入 向仲怀 基因定点突变 科研成果

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家蚕转基因方法的初步研究 被引量：3

14

作者 王宇 刘辉芬 +1 位作者 李维 邱兴林 《四川动物》 CSCD 北大核心 2006年第3期455-458,440,共5页

为建立家蚕转基因研究中切实可行的外源基因导入方法、分别用显微注射法、精子介导法、脂质体法和压力渗透法将含有绿色荧光蛋白(gfp)基因的转座子载体和辅助质粒转入到家蚕的受精卵中。在后代中检测到发绿色荧光的蚕茧,用PCR方法检测... 为建立家蚕转基因研究中切实可行的外源基因导入方法、分别用显微注射法、精子介导法、脂质体法和压力渗透法将含有绿色荧光蛋白(gfp)基因的转座子载体和辅助质粒转入到家蚕的受精卵中。在后代中检测到发绿色荧光的蚕茧,用PCR方法检测到后代个体染色体中含有gfp基因,并比较了上述几种方法的优缺点,为进一步进行转基因家蚕的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 转基因家蚕 显微注射 脂质体法 精子介导法

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《家蚕转基因技术及应用》一书出版发行

15

《北方蚕业》 2022年第1期51-51,共1页

西南大学赵爱春教授和向仲怀院士共同主编的《家蚕转基因技术及应用》一书由上海科学技术出版社于2017年12月出版发行,16开本,精装,定价198元。该书分12章,共55万字,系统地介绍了家蚕转基因的技术路线,家蚕转基因的载体构建,外源基因导... 西南大学赵爱春教授和向仲怀院士共同主编的《家蚕转基因技术及应用》一书由上海科学技术出版社于2017年12月出版发行,16开本,精装,定价198元。该书分12章,共55万字,系统地介绍了家蚕转基因的技术路线,家蚕转基因的载体构建,外源基因导入技术,转基因家蚕的内外源基因整合、功能检测,基因定点突变家蚕的鉴定与筛选,家蚕转基因中特异序列捕获技术、基因特异性表达调控技术、条件基因打靶技术、基因组编辑技术,转基因家蚕素材创新、滞育性蚕品种转基因体系的建立,转基因家蚕的安全管理和安全评价等。 展开更多

关键词 基因组编辑技术 科学技术出版社 载体构建 出版发行 转基因家蚕 外源基因导入 基因定点突变 向仲怀

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基于piggyBac转座子转hGM-CSF基因家蚕的研究 被引量：17

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作者 曹广力 薛仁宇 +3 位作者 何泽 郑小坚 沈卫德 贡成良 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期324-327,447,共5页

将由家蚕核型多角体病毒IE-1基因启动子控制下的hGM-CSF基因克隆到p igA3GFP载体中,构建了家蚕转基因载体p igA3GFP[IE-GMCSF],利用压力渗透法和精子介导法将其与辅助质粒helper p igA3一起导入家蚕蚕卵,获得产生绿色荧光的家蚕,次代产... 将由家蚕核型多角体病毒IE-1基因启动子控制下的hGM-CSF基因克隆到p igA3GFP载体中,构建了家蚕转基因载体p igA3GFP[IE-GMCSF],利用压力渗透法和精子介导法将其与辅助质粒helper p igA3一起导入家蚕蚕卵,获得产生绿色荧光的家蚕,次代产生荧光蚕的比例分别为0.17%,0.15%。将次代荧光蚕与正常蚕交配后代(G1)的荧光蚕个体再相互杂交,连续进行多代选育,获得了稳定遗传的转hGM-CSF基因家蚕品系。 展开更多

关键词 piggyBac因子 转基因家蚕 人类粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 IE-1启动子 精子介导法

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蜘蛛拖牵丝蛋白基因转家蚕表达质粒的构建 被引量：6

17

作者 刘辉芬 李维 +2 位作者 王宇 蒋平 郭聪 《湖南大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第5期105-109,共5页

利用DNA重组技术对络新妇蛛(Nephila clavipes)拖牵丝蛋白基因MaSp1高度重复序列进行多次重组,人工构建成1.6 kb的蜘蛛拖牵丝蛋白人工基因Sil-E,DNA序列分析证明了人工基因序列的正确性.将家蚕L链基因启动子片段、L链cDNA、L链基因终止... 利用DNA重组技术对络新妇蛛(Nephila clavipes)拖牵丝蛋白基因MaSp1高度重复序列进行多次重组,人工构建成1.6 kb的蜘蛛拖牵丝蛋白人工基因Sil-E,DNA序列分析证明了人工基因序列的正确性.将家蚕L链基因启动子片段、L链cDNA、L链基因终止子融合在一起,构建成丝腺特异性表达单元.再与Sil-E融合构建成蜘蛛拖牵丝蛋白基因家蚕丝腺特异表达单元.将该表达单元克隆到转座子piggyBac的转基因载体中,获得了蜘蛛拖牵丝蛋白转基因表达载体.采用显微注射法将其与辅助质粒共导入到家蚕蚕卵中.筛选转基因阳性个体,经PCR和Southern杂交鉴定,结果表明目的基因整合到家蚕基因组中,为进一步研究家蚕作为生物反应器表达蜘蛛拖牵丝蛋白基因奠定了基础. 展开更多

关键词 蜘蛛拖牵丝蛋白基因 转座子表达质粒 转基因家蚕

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转蜘蛛拖牵丝蛋白基因家蚕蚕丝氨基酸组成及其机械性能 被引量：5

18

作者 王昌河 蒋平 +2 位作者 刘辉芬 吴灵芝 郭聪 《四川动物》 CSCD 北大核心 2006年第3期451-454,440,共5页

将以绿色荧光蛋白基因为报告基因、含有人工合成的1.6 kb的蜘蛛拖牵丝蛋白基因及转座子pig-gyBac的转基因载体成功导入减秋无滞育家蚕受精卵,得到转蜘蛛拖牵丝蛋白基因家蚕及绿色荧光茧。对转基因家蚕与对照家蚕丝素蛋白进行了氨基酸组... 将以绿色荧光蛋白基因为报告基因、含有人工合成的1.6 kb的蜘蛛拖牵丝蛋白基因及转座子pig-gyBac的转基因载体成功导入减秋无滞育家蚕受精卵,得到转蜘蛛拖牵丝蛋白基因家蚕及绿色荧光茧。对转基因家蚕与对照家蚕丝素蛋白进行了氨基酸组成分析,结果表明转基因蚕茧丝素蛋白甘氨酸和丙氨酸的百分含量分别增加了1.65%和1.80%(平均值);对其生丝的机械性能进行了测试研究,结果表明转基因蚕茧生丝的伸长率降低,断裂强度和初始模量增加,且差异均显著,与理论预期结果吻合。结果表明转基因家蚕蚕丝的机械性能一定程度上得到了提高。 展开更多

关键词 转基因家蚕 蜘蛛拖牵丝蛋白基因 蚕丝 氨基酸组成 机械性能

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转基因动物研究概况 被引量：1

19

作者 冯丽春 《蚕学通讯》 1995年第1期41-43,17,共4页

转基因动物是指以实验方法导入的外源基因在其染色体基因组内稳定整合并能遗传给后代的一类动物.自从本世纪七十年代初期重组DNA技术问世以来,经过二十多年的探索,基因工程无论在理论研究上,还是在生产的实际应用方面都取得了惊人的成绩... 转基因动物是指以实验方法导入的外源基因在其染色体基因组内稳定整合并能遗传给后代的一类动物.自从本世纪七十年代初期重组DNA技术问世以来,经过二十多年的探索,基因工程无论在理论研究上,还是在生产的实际应用方面都取得了惊人的成绩.随着重组DNA技术的不断发展,许多具有重要价值的蛋白基因及有关调控序列得以克隆,并通过体外培养细胞实现了表达.但是,体外培养细胞虽然可以无限繁殖。 展开更多

关键词 转基因动物 研究概况 病毒载体 外源基因 转基因家蚕 体外培养细胞 重组DNA技术 反转录 转基因技术 ES细胞

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转绿色荧光蛋白基因家蚕品系的纯化与综合经济性状改良 被引量：6

20

作者 张雨丽 张桂征 +2 位作者 闭立辉 祁广军 赵爱春 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期384-389,共6页

为了使转绿色荧光蛋白基因家蚕品系能在生产上推广应用,利用传统育种方法对转基因家蚕品系进行系统分离纯化和综合经济性状的杂交改良。对转基因家蚕材料西绿的绿色荧光茧性状进行分离纯化后,按茧色分成深绿茧品系、中绿茧品系、浅绿茧... 为了使转绿色荧光蛋白基因家蚕品系能在生产上推广应用,利用传统育种方法对转基因家蚕品系进行系统分离纯化和综合经济性状的杂交改良。对转基因家蚕材料西绿的绿色荧光茧性状进行分离纯化后,按茧色分成深绿茧品系、中绿茧品系、浅绿茧品系,其中深绿茧品系的绿茧率达100%,但在纯化过程中发现外源基因转入对家蚕的茧形与茧层率、丝质等经济性状均有不良影响。以纯化后的转基因家蚕西绿的深绿茧品系为父本,分别与普通白茧家蚕实用品种932、7532进行杂交,经多代选育获得具有一定生产性能的转基因家蚕绿茧品系,该转育品系的平均虫蛹生命率在90%以上,茧色纯化快,茧形正,缫丝成绩优于西绿。 展开更多

关键词 绿色荧光蛋白 转基因家蚕 系统分离 杂交改良

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