转化生长因子-β2诱导人Tenon囊成纤维细胞转化及其在瘢痕形成中的作用 被引量：7

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作者 朱晓燕 李磊 +3 位作者 鲜光军 李海军 谭燕 谢琳 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期215-219,共5页

背景研究表明转化生长因子-β2（TGF-β2）能够促进瘢痕形成，但其在青光眼滤过术后局部瘢痕形成中的作用机制值得研究。目的探讨TGF-β2对人Tenon囊成纤维细胞（HTFs）转化以及在滤过术后瘢痕形成中的作用。方法在斜视手术中获取3例患... 背景研究表明转化生长因子-β2（TGF-β2）能够促进瘢痕形成，但其在青光眼滤过术后局部瘢痕形成中的作用机制值得研究。目的探讨TGF-β2对人Tenon囊成纤维细胞（HTFs）转化以及在滤过术后瘢痕形成中的作用。方法在斜视手术中获取3例患者的Tenon囊组织，并用组织块培养法在含质量分数10％胎牛血清的DMEM中培养，培养的细胞贴壁后达到70％～80％亚融合状态时更换为无血清培养基饥饿培养24h，然后分别加入质量浓度1、2、5、10、20Ixg／LTGF-β2诱导HTFs24h，另用2tzg／L或5μg／LTGF-β2 诱导HTFs6、24、48、72h，阴性对照组培养基中不加TGF-β2 用Westernblot法检测HTFs中α-平滑肌肌动蛋白（n—SMA）和pSmad2蛋白的表达，采用细胞免疫荧光技术检测“-SMA及纤维状肌动蛋白（F—actin）表达的定位，采用凝胶收缩实验检测培养细胞收缩力的变化。结果不同质量浓度TGF—B，组HTFs中0I—SMA表达的强度均明显强于阴性对照组，2tzg／L、5μg／LTGF—B，作用24～48h后HTFs中d—SMA表达强度达峰值，10μg／L、20μg／LTGF-β2组较2μg／L、5μg／LTGF-β2组α—SMA蛋白表达强度减弱。对照组HTFs中有少量α—SMA及F—actin表达，1、2、5μg／LTGF-β2组d—SMA及F—actin荧光表达明显增强，阳性细胞数明显增加，10μg／LTGF-β2组α—SMA及F-actin荧光表达较低质量浓度组减弱。2μg／LTGF-β2作用后pSmad2表达强度明显强于PBS组和FBS组，在作用后30rain～2h表达较强，2h后开始出现下降。对照组HTFs收缩凝胶面积所占原面积的百分数为（78．00-3．13）％，1、2、5、10tzg／LTGF-β2组分别为（63．88±1．78）％、（20．69±O．65）％、（19．49±O．54）％、（16．24~0．84）％，HTFs收缩凝胶面积占原面积的百分数随着TGF-β2质量浓度的增加而明显增加（F组别=859．400，P=0．000）。结论TGF-β2可诱导成纤维细胞转分化，一定程度上其作用呈质量浓度依赖性和时间依赖性，且细胞收缩力随质量浓度的增加而增强，可能是青光眼滤过术后滤过通道建立失败的重要机制。 展开更多

关键词 转化生长因子-β2 青光眼 滤过手术 瘢痕形成 TENON囊成纤维细胞 Α-平滑肌肌动蛋白

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雷帕霉素对转化生长因子-β2诱导的人晶状体上皮细胞上皮-间叶样转化的抑制作用及其机制 被引量：7

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作者 林婷婷 王思敏 +2 位作者 刘加勇 冯浩 宁宏 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期347-351,共5页

背景转化生长因子-β2（TGF-β2）诱导的人晶状体上皮细胞（LECs）上皮细胞-肌成纤维细胞转化（EMT）过程是后发性白内障（PCO）的主要发病机制，因此寻求有效抑制这一作用的药物对于防治PCO有重要意义。目的观察雷帕霉素（RAPA）对人L... 背景转化生长因子-β2（TGF-β2）诱导的人晶状体上皮细胞（LECs）上皮细胞-肌成纤维细胞转化（EMT）过程是后发性白内障（PCO）的主要发病机制，因此寻求有效抑制这一作用的药物对于防治PCO有重要意义。目的观察雷帕霉素（RAPA）对人LECs增生和TGF-β2诱导的EMT的抑制作用。方法采用含质量分数10％胎牛血清的DMEM高糖细胞培养液对人LECs系SRA01／04进行体外培养，换以无血清培养液培养后分别用TGF-β2（5mg／L）、TGF-β2＋10nlg／LRAPA、TGF-β2＋100mg／LRAPA、TGF-β2＋1000mg／LRAPA、TGF-β2＋10000mg／LRAPA共培养SRA01／0472h，仅用无血清培养液培养的SRA01／04作为对照组。采用MTT法检测各组SRAOI／04的吸光度（A490）值以评估SRA01／04的增生情况，并计算RAPA对细胞生长的抑制率。各组细胞作用48h后，采用逆转录PCR（RT-PCR）法和Westernblot法分别检测LECsETM的标志物-α平滑肌肌动蛋白（d-SMA）和上皮性钙黏附蛋白（E-cad）的表达。选取TGF-β2＋400mg／LRAPA分别作用于培养的SRA01／0424、48、72h，采用Westernblot法检测SRA01／04中α-SMA、E-cad的表达水平。结果MTT法检测结果显示，对照组、TGF-β2组、TGF-β2＋10ing／LRAPA组、TGF-β2＋100mg／LRAPA组、TGF-β2＋1000ing／LRAPA组和TGF-β2＋10000mg／LRAPA组SRA01／04的A490值分别为0．680＋0．020、0．550±0．013、0．480＋0．014、0．400＋0．011和0．200＋0．019，表明随着RAPA质量浓度的增加，SRAOI／04增生值降低，差异有统计学意义（F=101．920，P=0．000），且RAPA的抑制率逐渐增加。RT-PCR和Westernblot检测结果表明，阴性对照组SRAOI／04中α-SMAmRNA（α-SMAmRNA／β-actinmRNA）及其蛋白（α-SMA／β-actin）仅有少量表达，TGF．B，组可见SRAOI／04中01．SMAmRNA及其蛋白表达量明显增加，但不同质量浓度的RAPA作用于SRA01／04后，随着RAPA质量浓度的增加，SRAOI／04中α-SMAmRNA及蛋白的表达量均逐渐减少，但E-cadmRNA及其蛋白表达逐渐增多，各组间的总体差异均有统计学意义（α-SMAmRNA：F=294．660，P=0．000；α-SMA蛋白：F=346．950，P=0．000；E-cad mRNA：F=264．250，P=0．000；E-cad蛋白：F=317．327，P=0．000）。400mg／LRAPA作用于SRA01／04后，随着作用时间的延长，α-SMA蛋白的表达量逐渐下降，而E-cad蛋白的表达量逐渐增加，差异均有统计学意义（α-SMA：F=693．864，P=0．000；E-cad：F=369．286，P=0．000）。结论RAPA可抑制体外培养的SRA01／04增生，其作用呈剂量依赖性，此外RAPA具有抑制TGF-β2诱导的LECsETM作用，其作用呈剂量和时间依赖性。 展开更多

关键词 雷帕霉素 转化生长因子-β2 人晶状体上皮细胞 上皮细胞一肌成纤维细胞转化

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转化生长因子-β2对实验性近视眼后极部巩膜成纤维细胞力学特性的影响 被引量：4

3

作者 陈博宇 王超英 +5 位作者 马景学 陈维毅 郝岚 刘迎庆 仝春梅 王彩荣 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期296-301,共6页

背景以往对近视眼巩膜力学特性变化的研究局限于其巩膜整体和条带的力学特性变化方面，目前对近视眼细胞水平力学特性的研究日益受到重视。目的明确TGF-β2对豚鼠镜片诱导型近视眼后极部巩膜成纤维细胞力学特性的影响。方法2周龄豚鼠12... 背景以往对近视眼巩膜力学特性变化的研究局限于其巩膜整体和条带的力学特性变化方面，目前对近视眼细胞水平力学特性的研究日益受到重视。目的明确TGF-β2对豚鼠镜片诱导型近视眼后极部巩膜成纤维细胞力学特性的影响。方法2周龄豚鼠12只，随机选取一侧眼用镜片诱导方法制备近视动物模型，对侧眼为对照。造模30d后，用组织块培养法培养豚鼠后极部巩膜成纤维细胞并传2代，采用免疫组织化学法以兔抗鼠波形蛋白、结蛋白、角蛋白、S-100抗体进行细胞鉴定。将不同质量浓度的TGF-β2（分别为0、1、10、100mg／L）加入无血清DMEM中作用24h，利用细胞微管吸吮的方法测定各组巩膜成纤维细胞的力学特性。结果模型眼0mg／LTGF—p：组与对照眼0mg／LTGF—p：组比较，模型眼的巩膜成纤维细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数明显升高，二者之间差异有统计学意义（P〈0．05）。模型眼与对照眼在TGF-β2作用下，0mg／L组与1mg／L组、10mg／组比较，细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数差异均有统计学意义（P〈0．05）。模型眼和对照眼培养细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数与TGF-β2的质量浓度均呈正相关（r=0．743、r=0．533；r=0．654、r=0．576），模型眼和对照眼中的0mg／L组与100mg／L组比较细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数差异均无统计学意义（P〉0．05），模型眼1mg／L组、10mg／L组与对照眼1mg／L组、10mg／L组比较，巩膜成纤维细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数之间差异有统计学意义（P〈0．05）；模型眼组100mg／LTGF-β2与对照眼的100mg／LTGF-β2组比较，巩膜成纤维细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数差异无统计学意义（P〉0．05）。结论随着TGF—B，质量浓度的增加，近视眼巩膜成纤维细胞的平衡杨氏模量、黏弹性参数值明显升高，1mg／L和10mg／LTGF-β2可以降低正常巩膜成纤维细胞的平衡杨氏模量及黏弹性参数，导致细胞力学特性的更大变化。 展开更多

关键词 近视 转化生长因子-β2 巩膜 成纤维细胞 力学

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叶黄素对转化生长因子-β2诱导的视网膜色素上皮细胞上皮-间质转化的影响 被引量：8

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作者 吕亚男 顾青 +1 位作者 李东丽 宫媛媛 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期571-577,571,共7页

目的·建立转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)诱导的人视网膜色素上皮细胞(retinal pigmentepithelium cell,RPE)上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)模型,探讨叶黄素的作用及其机... 目的·建立转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)诱导的人视网膜色素上皮细胞(retinal pigmentepithelium cell,RPE)上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)模型,探讨叶黄素的作用及其机制。方法·体外培养ARPE-19细胞,分为空白组、TGF-β2组、TGF-β2+叶黄素组、叶黄素组。采用real-time PCR检测各组细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤连蛋白(fibronectin,FN)、上皮钙黏素(E-cadherin)mRNA的表达。Western blotting检测各组细胞中α-SMA、FN、闭合蛋白(occludin)的蛋白表达。采用免疫荧光检测α-SMA的表达。同时用Western blotting检测TGF/Smad通路下游Smad3的磷酸化水平。结果·TGF-β2+叶黄素组EMT程度有明显减轻。纤维化指标α-SMA、FN的mRNA、蛋白表达下降,与TGF-β2组相比差异有统计学意义(均P<0.05)。同时,上皮细胞相关指标E-cadherin mRNA、occludin蛋白的表达上调(均P<0.05)。免疫荧光结果显示,叶黄素可明显抑制上皮细胞转化为肌成纤维细胞。此外,TGF-β2诱导ARPE-19细胞EMT过程中发生Smad3磷酸化水平升高现象可被叶黄素干预(P=0.001)。结论·叶黄素通过调控TGF-β/Smad信号通路抑制ARPE-19细胞EMT过程,具有潜在的抑制视网膜下纤维化的作用。 展开更多

关键词 视网膜下纤维化 叶黄素 转化生长因子-β2 上皮-间质转化 视网膜色素上皮细胞

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转化生长因子-β2促进牙髓干细胞增殖和分化的作用研究 被引量：3

5

作者 熊梦琳 吴龙 +1 位作者 马丽 赵今 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 2021年第6期635-639,共5页

目的探讨转化生长因子-β2(TGF-β2)对牙髓干细胞(DPSCs)增殖和分化的影响。方法分离、培养DPSCs,分为阴性对照组、阳性对照组和TGF-β2组。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活力,碱性磷酸酶(ALP)活性测定试剂盒检测细胞内ALP活性,蛋... 目的探讨转化生长因子-β2(TGF-β2)对牙髓干细胞(DPSCs)增殖和分化的影响。方法分离、培养DPSCs,分为阴性对照组、阳性对照组和TGF-β2组。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活力,碱性磷酸酶(ALP)活性测定试剂盒检测细胞内ALP活性,蛋白质印迹法检测Runt相关转录因子2(Runx2)、骨涎蛋白(BSP)和骨桥蛋白(OPN)的表达,免疫组织化学染色检测Runx2阳性表达。结果与阳性对照组相比,TGF-β2作用3、7、10 d后DPSCs的活力不断升高,细胞内ALP活性上调,Runx2、BSP和OPN蛋白表达水平升高,Runx2阳性表达程度升高(P<0.05)。结论TGF-β2可促进DPSCs增殖及成骨分化。 展开更多

关键词 转化生长因子-β2 牙髓干细胞 增殖 分化

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骨形态发生蛋白-6对转化生长因子-β2所致视网膜色素上皮细胞迁移的影响

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作者 吉梦 刘明 +3 位作者 马波 刘轩 裴澄 陈丽 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2021年第8期717-721,共5页

目的探讨骨形态发生蛋白-6(BMP-6)对转化生长因子-β2(TGF-β2)所致视网膜色素上皮(RPE)细胞迁移的影响。方法RPE细胞常规培养后,用5μg·L-1 TGF-β2处理48 h,Western blot检测细胞中BMP-6蛋白水平的变化,Transwell法检测细胞迁移... 目的探讨骨形态发生蛋白-6(BMP-6)对转化生长因子-β2(TGF-β2)所致视网膜色素上皮(RPE)细胞迁移的影响。方法RPE细胞常规培养后,用5μg·L-1 TGF-β2处理48 h,Western blot检测细胞中BMP-6蛋白水平的变化,Transwell法检测细胞迁移能力变化。随后,筛选BMP-6 siRNA抑制率最高的片段用于后续实验,构建BMP-6过表达质粒并进行鉴定后用于后续实验,RPE细胞随机分组,即(1)对照组加入正常培养基培养48 h;(2)TGF-β2组培养基中加入5μg·L-1 TGF-β2培养48 h;(3)BMP-6 siRNA组转染BMP-6-homo-1087后培养48 h;(4)BMP-6过表达组转染BMP-6过表达质粒后培养48 h;(5)TGF-β2+BMP-6过表达组转染BMP-6过表达质粒24 h后,加入5μg·L-1TGF-β2继续培养48 h。Transwell法检测细胞迁移数的变化,倒置显微镜观察细胞形态的变化。结果TGF-β2组迁移细胞数为(122.00±5.57)个,与对照组(63.67±4.04)个相比差异有统计学意义(P=0.000)。TGF-β2组BMP-6蛋白表达水平为0.41±0.13,与对照组(0.70±0.08)相比差异具有统计学意义(P=0.031)。BMP-6 siRNA组迁移细胞数为(115.67±1.53)个,与对照组(57.00±7.00)个相比差异具有统计学意义(P=0.000)。BMP-6过表达组迁移细胞数为(44.33±5.51)个,与对照组(60.00±6.25)个相比差异无统计学意义(P=0.076)。TGF-β2+BMP-6过表达组迁移细胞数为(90.33±3.51)个,与TGF-β2组(112.00±9.64)个相比差异具有统计学意义(P=0.016)。结论BMP-6可以阻止TGF-β2所致的RPE细胞的迁移,为增生性玻璃体视网膜病变的防治提供新的视角。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白-6 转化生长因子-β2 视网膜色素上皮细胞 增生性玻璃体视网膜病变 细胞迁移

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转化生长因子-β_2(TGF-β_2)诱导人视网膜色素上皮层细胞上皮-间质转分化中miRNA-29b的表达及意义 被引量：4

7

作者 刘亚军 闫峰 +2 位作者 叶巍 朱欣悦 黄振平 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第11期1001-1005,共5页

目的探究转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)诱导人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)层细胞上皮-间质转分化中miRNA-29b的表达变化及意义。方法使用不同浓度TGF-β2刺激RPE细胞上皮-间质转分化后... 目的探究转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)诱导人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)层细胞上皮-间质转分化中miRNA-29b的表达变化及意义。方法使用不同浓度TGF-β2刺激RPE细胞上皮-间质转分化后,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,Western blot、RT-PCR检测成纤维化相关分子纤维连接蛋白(fibronection,FN)、神经钙粘连蛋白(nerve calcium adhesion protein,N-Cadherin)的表达。采用RT-PCR检测不同浓度TGF-β2及不同时间TGF-β2(5μg·L^(-1))刺激RPE细胞后miRNA-29b的表达。结果 TGF-β2刺激后的RPE细胞形态呈纤维化改变。在一定浓度范围内(1μg·L^(-1)、5μg·L^(-1)、10μg·L^(-1)),随着TGF-β2浓度的增加FN、N-Cadherin及相应mRNA随之增加,1μg·L^(-1)、5μg·L^(-1)、10μg·L^(-1)组与对照组(0μg·L^(-1))相比,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。TGF-β2在一定浓度范围内(0μg·L^(-1)、1μg·L^(-1)、5μg·L^(-1))以剂量依赖的方式诱导RPE细胞miRNA-29b表达的降低,1μg·L^(-1)、5μg·L^(-1)、10μg·L^(-1)组与对照组(0μg·L^(-1))相比,差异均有统计学意义(均为P<0.01),在TGF-β2浓度为5μg·L^(-1)时miRNA-29b表达量最低。TGF-β2在一定时间范围内(0 h、3 h、6 h、12 h)以时间依赖的方式诱导RPE细胞miRNA-29b表达的降低,3 h、6 h、12 h、24 h、48 h组与0 h相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论一定范围内TGF-β2以剂量和时间依赖的方式诱导RPE细胞miRNA-29b的表达,为进一步研究miRNA-29b与TGF-β2在RPE细胞上皮-间质转分化过程中的相互作用提供理论基础。 展开更多

关键词 人视网膜色素上皮层细胞 上皮-间质转分化 转化生长因子-β2 miRNA-29b 增生性玻璃体视网膜病变

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特异性转化生长因子-β_2 shRNA对人眼Tenon囊成纤维细胞的抑制作用 被引量：5

8

作者 骆玮 孙璐 李静敏 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2010年第12期1150-1153,共4页

目的观察转化生长因子-β2(TGF-β2)特异性短发夹RNA(shRNA)对人眼Tenon囊成纤维细胞(TCFs)TGF-β2表达的影响及对人TCFs增生的抑制作用。方法根据小干扰RNA(siRNA)的设计原则,针对TGF-β2基因序列特征构建特异性shRNA载体,转染培养的人... 目的观察转化生长因子-β2(TGF-β2)特异性短发夹RNA(shRNA)对人眼Tenon囊成纤维细胞(TCFs)TGF-β2表达的影响及对人TCFs增生的抑制作用。方法根据小干扰RNA(siRNA)的设计原则,针对TGF-β2基因序列特征构建特异性shRNA载体,转染培养的人TCFs。MTT比色法检测细胞的增生情况;ELISA法检测shRNA对TGF-β2蛋白表达的抑制作用。结果 TGF-β2shRNA转染组的细胞增生及TGF-β2蛋白的表达均受到抑制。转染24、48、72h后MTT比色法检测显示,TGF-β2shRNA转染组培养的Tenon囊的成纤维细胞的增生值分别为0.5426±0.05、0.5210±0.03、0.4055±0.04,明显低于阴性对照组的0.5655±0.03、0.5378±0.03、0.5268±0.04,3个组和各时间点的总体差异均有统计学意义(F组=54.691,P=0.000;Ftime=66.888,P=0.000)。ELISA法检测显示,TGF-β2shRNA转染组TGF-β2蛋白的表达水平下降,24、48、72hTGF-β2蛋白的表达量分别为(543.58±25.32)、(400.26±30.74)、(202.72±23.24)ng/L,明显低于阴性对照组的(659.78±20.95)、(547.45±24.65)、(442.87±17.43)ng/L及空白组的(721.75±30.19)、(756.61±30.19)、(787.60±18.37)ng/L,3个组和各时间点的总体差异均有统计学意义(F组=163.082,P=0.000;F时间=31.498,P=0.000)。结论 TGF-β2特异性shRNA能显著抑制人TCFsTGF-β2的表达,载体介导的TGF-β2特异性shRNA对眼前节术后的抗瘢痕化治疗具有潜在的可能性。 展开更多

关键词 RNA干扰技术 TENON囊 成纤维细胞 转化生长因子-β2

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转化生长因子-β_2在豚鼠形觉剥夺性近视中的表达 被引量：3

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作者 闫磐石 张金嵩 郭浩轶 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期168-170,共3页

目的观察形觉剥夺性近视(FDM)形成中视网膜转化生长因子-β2(TGF-β2)水平的变化,对FDM的发病机制做进一步的探讨。方法出生3d豚鼠以半透明眼罩遮盖右眼2个月建立FDM模型,左眼作为对照,视网膜检影检测双眼屈光度,A型超声测量双眼眼轴长... 目的观察形觉剥夺性近视(FDM)形成中视网膜转化生长因子-β2(TGF-β2)水平的变化,对FDM的发病机制做进一步的探讨。方法出生3d豚鼠以半透明眼罩遮盖右眼2个月建立FDM模型,左眼作为对照,视网膜检影检测双眼屈光度,A型超声测量双眼眼轴长度。免疫组织化学分析TGF-β2的表达,RT-PCR检测TGF-β2 mRNA的表达。结果形觉剥夺使近视屈光度增加,遮盖眼与对照眼相比差异有统计学意义(P<0·01),遮盖眼视网膜光感受器细胞层TGF-β2蛋白表达减少(P<0·01),TGF-β2mRNA的表达下调。结论TGF-β2参与调控FDM形成。 展开更多

关键词 形觉剥夺性近视 转化生长因子-β2 豚鼠

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转化生长因子-β_2在糖尿病仓鼠视网膜中的表达意义 被引量：1

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作者 彭惠 洪苏玲 +1 位作者 陶永贤 姜蓉 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第6期827-830,共4页

目的:探讨糖尿病视网膜损伤和转化生长因子-β(2TGFβ2)产生的关系以及TGF-β2的作用机制。方法:链脲佐菌素制备仓鼠糖尿病模型,用免疫组织化学法检测正常对照组和糖尿病动物模型(16周)视网膜中TGF-β2的表达,电镜观察其超微结构的变化... 目的:探讨糖尿病视网膜损伤和转化生长因子-β(2TGFβ2)产生的关系以及TGF-β2的作用机制。方法:链脲佐菌素制备仓鼠糖尿病模型,用免疫组织化学法检测正常对照组和糖尿病动物模型(16周)视网膜中TGF-β2的表达,电镜观察其超微结构的变化。结果:糖尿病仓鼠视网膜内TGF-β2表达呈阳性染色反应,超微结构出现膜盘结构分层,数量稀少;节细胞层内质网扩张,核周间隙扩大,细胞内线粒体肿胀等变化。结论:提示TGF-β2与糖尿病视网膜病变(DR)形成过程有关。 展开更多

关键词 糖尿病视网膜病变 转化生长因子-β2 糖尿病仓鼠动物模犁 免疫组织化学法

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孕激素调节人成骨细胞转化生长因子-β1、β2的表达 被引量：4

11

作者 罗湘杭 廖二元 +2 位作者 苏欣 廖慧娟 伍贤平 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2003年第1期12-15,共4页

目的　研究孕激素对正常成人成骨细胞转化生长因子 (TGF) β1、TGF β2表达的调节作用 ,探讨孕激素治疗绝经后骨质疏松症 (OP)的作用机制。方法　鉴定成人成骨细胞 (hOB) ,测定碱性磷酸酶 (ALP)活性、骨钙素分泌 ,VanGieson氏苦味酸酸... 目的　研究孕激素对正常成人成骨细胞转化生长因子 (TGF) β1、TGF β2表达的调节作用 ,探讨孕激素治疗绝经后骨质疏松症 (OP)的作用机制。方法　鉴定成人成骨细胞 (hOB) ,测定碱性磷酸酶 (ALP)活性、骨钙素分泌 ,VanGieson氏苦味酸酸性复红染色法进行Ⅰ型胶原染色。hOB用孕酮干预。Northern杂交、ELISA分别检测hOBTGF β1、TGF β2mRNA和蛋白质分泌。结果　观察到hOB分泌的ALP活性为 (74 3± 4 7)mU/mg蛋白 ,培养上清液骨钙素含量为 (3 84± 0 3 9)ng/ml蛋白 ,Ⅰ型胶原染色呈红色。观察到孕酮增强hOBTGF β1、TGF β2mRNA表达呈剂量依赖性 (P <0 0 0 1) ;10 -9mol/L孕酮诱导 12～ 2 4h促进TGF β1、TGF β2mRNA表达 ,呈时间依从性。孕酮促进hOBTGF β1、TGF β2蛋白质分泌呈剂量依赖性 (P <0 0 0 1) ;10 -9mol/L孕酮诱导 12～ 2 4h促进TGF β1、TGF β2蛋白质分泌 ,呈时间依从性。结论　孕激素可能通过诱导成骨细胞TGF β1、TGF β2表达 ,促进成骨细胞增殖与分化 ,增强成骨功能及骨基质合成 。 展开更多

关键词 孕激素 成骨细胞 转化生长因子-β1 绝经后 骨质疏松症 转化生长因子-β2

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康柏西普可逆转TGF-β2诱导的晶状体上皮细胞发生上皮间质转化:基于调节TGF-β/Smad信号通路 被引量：2

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作者 朱梦云 王剑锋 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1459-1466,共8页

目的探讨康柏西普(conbercept)对转化生长因子-β2(TGF-β2)诱导人晶状体上皮细胞(HLECs)发生上皮间质转化(EMT)的逆转机制。方法体外培养HLEC-SRA01/04细胞并分为对照组、TGF-β2组、conbercept组、TGF-β2+conbercept组。采用MTT法、... 目的探讨康柏西普(conbercept)对转化生长因子-β2(TGF-β2)诱导人晶状体上皮细胞(HLECs)发生上皮间质转化(EMT)的逆转机制。方法体外培养HLEC-SRA01/04细胞并分为对照组、TGF-β2组、conbercept组、TGF-β2+conbercept组。采用MTT法、流式细胞术、划痕实验、Transwell检测细胞增殖、凋亡与迁移,Western blotting和qRT-PCR检测EMT相关上皮细胞标记物E-Cadherin、α-SMA、snail、细胞外基质和TGF-β/Smad信号通路相关基因的表达。结果TGF-β2+conbercept组EMT程度明显减轻,细胞间充质及细胞外基质标志物α-SMA、snail、collagenⅠ、collagenⅣ、FN1的表达量均明显减少,与TGF-β2组的差异有统计学意义(P<0.05)。上皮细胞相关标志物E-Cadherin的蛋白及mRNA的表达上调(P<0.05)。Transwell结果显示,与TGF-β2组相比,TGF-β2+conbercept组细胞迁移能力减弱(P<0.05)。此外,TGF-β2诱导HLEC-SRA01/04细胞发生EMT过程中发生Smad2/3磷酸化水平升高现象可被康柏西普抑制(P<0.01)。结论康柏西普可能通过TGF-β/Smad信号通路抑制HLEC-SRA01/04细胞EMT过程,具有预防及治疗PCO的能力。 展开更多

关键词 后发性白内障 康柏西普 上皮间质转化 转化生长因子-β2

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高度近视并发POAG机制及早期预测:基于HIF-1α、TGF-β2交互的研究

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作者 刘家敏 王大萍 刘建华 《眼科新进展》 北大核心 2025年第2期125-130,共6页

目的研究缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、转化生长因子-β2(TGF-β2)交互影响高度近视(HM)并发原发性开角型青光眼(POAG)的作用及早期预测价值。方法选取我院2021年2月至2023年6月收治的265例(421眼)HM患者进行前瞻性队列研究,均行全面眼科... 目的研究缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、转化生长因子-β2(TGF-β2)交互影响高度近视(HM)并发原发性开角型青光眼(POAG)的作用及早期预测价值。方法选取我院2021年2月至2023年6月收治的265例(421眼)HM患者进行前瞻性队列研究,均行全面眼科检查,光学相干断层扫描测量总Bruch膜开口-盘沿最小宽度(BMO)参数,Humphrey视野仪测量视野指数(VFI)、视野平均缺损(MD)值。随访1年(失访2例),根据是否发生POAG分为发生组(51例82眼)、未发生组(212例337眼)。比较两组患者临床资料[年龄、性别、体重指数(BMI)、中央角膜厚度(CCT)、眼轴长度(AL)、屈光度、VFI、视野MD、视盘水平径、视盘垂直径、椭圆指数、视盘面积、视杯面积、盘沿面积、杯盘面积比、总BMO]及泪液HIF-1α、TGF-β2,绘制泪液HIF-1α、TGF-β2预测HM并发POAG的受试者工作特征曲线(ROC),获取最佳截断值,采用交互作用分析泪液HIF-1α、TGF-β2及交互影响HM并发POAG的作用,采用Pearson法分析泪液HIF-1α、TGF-β2与HM患者视盘结构相关性,并采用ROC分析HIF-1α、TGF-β2联合预测POAG的价值。结果发生组患者的VFI、总BMO均低于未发生组,视野MD、视杯面积、杯盘面积比及泪液HIF-1α、TGF-β2均高于未发生组患者,差异均有统计学意义(均为P<0.05);交互作用分析显示,泪液HIF-1α、TGF-β2两者交互为超相乘模型,对HM并发POAG的影响具有正向交互作用(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,泪液HIF-1α、TGF-β2与HM患者VFI、总BMO均呈负相关,与视野MD、视杯面积、杯盘面积比均呈正相关(均为P<0.05);ROC曲线分析结果显示,泪液HIF-1α联合TGF-β2预测HM并发POAG的曲线下面积(AUC)为0.925(95%CI:0.896~0.949),优于两指标单独预测价值。结论HIF-1α、TGF-β2在HM并发POAG患者泪液中表达上调,且在POAG发生过程中呈正向交互作用,联合检测对POAG具有一定预测价值,可作为临床预测POAG的辅助预测因子,并可指导临床防治。 展开更多

关键词 缺氧诱导因子1Α 转化生长因子-β2 交互作用 高度近视 原发性开角型青光眼 预测

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TGF-β_2干预的缺氧状态下补肾活血剂对Mller细胞及谷氨酰胺合成酶活性的影响 被引量：16

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作者 马殿伟 谢学军 +1 位作者 李晓微 张梅 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期407-411,共5页

目的观察在缺氧和(或)转化生长因子-β2(TGF-β2)干预条件对体外培养的Mller细胞活力以及谷氨酰胺合成酶(GS)的影响。方法用出生7d的SD大鼠体外培养视网膜Mller细胞,将第2代细胞在含20%胎牛血清的DMEM中培养24h后,换用无血清的DMEM... 目的观察在缺氧和(或)转化生长因子-β2(TGF-β2)干预条件对体外培养的Mller细胞活力以及谷氨酰胺合成酶(GS)的影响。方法用出生7d的SD大鼠体外培养视网膜Mller细胞,将第2代细胞在含20%胎牛血清的DMEM中培养24h后,换用无血清的DMEM孵育24h。分组为:空白血清对照组(20%正常SD大鼠血清的DMEM);TGF-β2组(20%正常SD大鼠血清的DMEM及终质量浓度为150ng/L的TGF-β2);模拟缺氧组(20%正常SD大鼠血清的DMEM及终浓度1.0mmol/L的连二亚硫酸钠);TGF-β2+缺氧组(20%正常SD大鼠血清的DMEM液、终浓度1.0mmol/L的连二亚硫酸钠和终质量浓度为150ng/L的TGF-β2);中药血清组(20%中药SD大鼠血清的DMEM);中药血清+TGF-β2+缺氧组(20%中药SD大鼠血清的DMEM、终浓度1.0mmol/L的连二亚硫酸钠和终质量浓度为150ng/L的TGF-β2)。以透射电镜观察视网膜Mller细胞超微结构、以490型酶标仪测定细胞外液乳酸脱氢酶(LDH)释放量及GS活性。结果在缺氧条件下Mller细胞的超微结构发生明显的改变,如:细胞核变形,固缩;细胞器破坏;微绒毛内糖原明显增多。与正常对照组比较,TGF-β2干预组、缺氧组、TGF-β2+缺氧组的LDH释放量均明显增加(P<0.05),缺氧组、TGF-β2+缺氧组的GS活性均明显下降(P<0.01);与缺氧组比较,TGF-β2+缺氧组的LDH释放量明显增加、GS活性明显下降(P<0.05、P<0.01)。补肾活血中药血清能降低24h及48h时正常以及TGF-β2与缺氧同时存在条件下LDH的释放量(P<0.05),增强12h时正常条件下以及12h和24h时TGF-β2与缺氧同时存在条件下GS的活性(P<0.05、P<0.01)。结论 TGF-β2可加重缺氧条件下Mller细胞活力与GS活性的降低;补肾活血中药含药血清能增强视网膜Mller细胞活力及GS活性。 展开更多

关键词 补肾活血中药 转化生长因子-β2 缺氧 视网膜Mller细胞 乳酸脱氢酶 谷氨酰胺合成酶

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TGF-β_2局部应用对大鼠角膜碱烧伤后CD44和E-selectin表达的影响 被引量：8

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作者 李雪 徐锦堂 +1 位作者 崔浩 胡琦 《眼科新进展》 CAS 2006年第7期491-494,共4页

目的研究TGFβ2局部应用对大鼠角膜碱烧伤后CD44和Eselectin的mRNA合成的影响,探求其对角膜碱烧伤的治疗作用。方法制备Wistar大鼠角膜碱烧伤模型,一组给予TGFβ2(浓度为1mg·L-1)局部滴眼,每日3次,一组未给予TGFβ2治疗。于角膜碱... 目的研究TGFβ2局部应用对大鼠角膜碱烧伤后CD44和Eselectin的mRNA合成的影响,探求其对角膜碱烧伤的治疗作用。方法制备Wistar大鼠角膜碱烧伤模型,一组给予TGFβ2(浓度为1mg·L-1)局部滴眼,每日3次,一组未给予TGFβ2治疗。于角膜碱烧伤后3d和2周应用RTPCR方法检测TGFβ2治疗组与未治疗组角膜CD44和Eselectin的mRNA合成情况。结果角膜碱烧伤3d时CD44mRNA表达无显著变化,碱烧伤2周时CD44表达量增加,同正常对照组相比差异显著(P<0.01)。TGFβ2治疗组3d和2周时CD44的mRNA合成同未治疗组相比均有增加,2组差异显著。角膜碱烧伤3d时EselectinmRNA的表达量低于正常对照组,碱烧伤2周时Eselectin表达量高于正常对照组,有显著差异(P<0.01)。TGFβ2治疗组3d和2周时Eselectin的mRNA合成同未治疗组相比均有增加,3d时增加明显,差异极显著。结论TGFβ2能促进急性期和营养紊乱期CD44和EselectinmRNA的合成,减轻碱烧伤后的炎症反应。TGFβ2能够通过影响角膜局部粘附分子的合成和表达来减轻病理损伤,促进创伤愈合。 展开更多

关键词 转化生长因子-β2 角膜碱烧伤 CD44 E-SELECTIN

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地塞米松诱发先天性腭裂对TGF-β_1、TGF-β_2表达的影响 被引量：2

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作者 邓末宏 龙星 +1 位作者 李宏礼 董红梅 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期598-600,共3页

目的 :探讨TGF β1、TGF β2 在先天性腭裂发病过程中的作用。方法 :在GD12 12 以磷酸地塞米松注射液 (50mg/kg)经母鼠腹腔注射 ,对照组则以等量生理盐水代替。分别于GD13 12 、GD14 12 、GD1512 取出胎鼠头部标本 ,作冠状位切片。采用... 目的 :探讨TGF β1、TGF β2 在先天性腭裂发病过程中的作用。方法 :在GD12 12 以磷酸地塞米松注射液 (50mg/kg)经母鼠腹腔注射 ,对照组则以等量生理盐水代替。分别于GD13 12 、GD14 12 、GD1512 取出胎鼠头部标本 ,作冠状位切片。采用免疫组化方法检测TGF β1、TGF β2 的表达。结果 :地塞米松在GD12 12 作用于孕鼠可以诱发小鼠先天性腭裂 ,并使胚胎腭中TGF β1表达较同期正常组高 ,TGF β2 表达较正常组高 ,腭突上抬后的降低被抑制。结论 :地塞米松诱发先天性腭裂与TGF β1、TGF β2 展开更多

关键词 地塞米松 先天性腭裂 TGF-β1 TGF-β2 转化生长因子-β1 转化生长因子-β2

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补肾活血剂对TGF-β_2干预缺氧状态下视网膜Müller细胞谷氨酸代谢的影响 被引量：2

17

作者 马殿伟 谢学军 +1 位作者 张梅 万李 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2013年第9期804-807,共4页

目的应用血清药理学方法探讨补肾活血中药对体外培养的视网膜Müller细胞在缺氧及转化生长因子-β2(transforming growth factorβ2,TGF-β2)干预下谷氨酸(glutamate,Glu)代谢的影响。方法取新生7 d SD大鼠5只,颈椎脱位处死后进行... 目的应用血清药理学方法探讨补肾活血中药对体外培养的视网膜Müller细胞在缺氧及转化生长因子-β2(transforming growth factorβ2,TGF-β2)干预下谷氨酸(glutamate,Glu)代谢的影响。方法取新生7 d SD大鼠5只,颈椎脱位处死后进行视网膜Müller细胞培养。根据[3H]标记的D,L-Glu摄入量判断体外培养第2代视网膜Müller细胞的Glu的摄入功能;以酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定体外培养细胞外液中谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)活性。结果与正常对照组比较,12 h、24 h、48 h时缺氧组、TGF-β2+缺氧组的Glu摄入量增加(均为P<0.05),而24 h、48h时GS活性明显下降(均为P<0.05);与缺氧组比较,TGF-β2+缺氧组12 h、48 h时Glu摄入量减少,48 h时GS活性下降(P<0.05)。24 h、48 h时TGF-β2干预组较正常对照组Glu摄入量增加(均为P<0.05),12 h时GS活性增加(P<0.05)。与TGF-β2+缺氧组比较,中药血清+TGF-β2+缺氧组12 h、24 h时Glu摄入量减少(均为P<0.05),但GS的活性增加(均为P<0.05)。结论缺氧使视网膜Müller细胞的Glu摄入功能明显增强,GS活性明显降低,而TGF-β2加重缺氧条件下Müller细胞GS活性的降低;在缺氧和TGF-β2同时存在条件下,补肾活血中药血清下调视网膜Müller细胞的Glu摄入能力,增加GS的活性。 展开更多

关键词 补肾活血 转化生长因子-β2 缺氧 视网膜MÜLLER细胞 谷氨酸 谷氨酰胺合成酶

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TGF-β_2对体外培养豚鼠巩膜成纤维细胞的影响 被引量：3

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作者 谢坤鹏 吕勇 《眼科新进展》 CAS 2006年第6期428-431,共4页

目的 探讨豚鼠巩膜成纤维细胞（guinea pig scleral fibroblast,GSF）体外培养的方法，研究转化生长因子-β2（transforming growth factor-β2，TGF-β2）对体外培养GSF的增生及胶原蛋白合成的影响。方法 GSF原代培养，取生长状态良好... 目的 探讨豚鼠巩膜成纤维细胞（guinea pig scleral fibroblast,GSF）体外培养的方法，研究转化生长因子-β2（transforming growth factor-β2，TGF-β2）对体外培养GSF的增生及胶原蛋白合成的影响。方法 GSF原代培养，取生长状态良好的3～6代GSF分别加入不同浓度的TGF-β2（0．00～50．00μg·L^-1）。应用MTT法和氯胺T法分别观察比较GSF的增生及胶原蛋白合成情况。结果TGF-β2体外能促进GSF的增生，最佳作用浓度为10．00／μg·L^-1。在0．01～10．00／μg·L^-1浓度范围内促进胶原蛋白的合成．呈剂量依赖性。结论 TGF-β2体外能够促进GSF增生及胶原蛋白的合成。 展开更多

关键词 转化生长因子-β2 巩膜 成纤维细胞 豚鼠

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U73122和SQ22536对视网膜色素上皮细胞增生及分泌TGF-β_2的影响 被引量：1

19

作者 张未娟 赵少贞 邓志宏 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2010年第6期519-523,共5页

目的观察磷脂酶C(PLC)抑制剂U73122和腺苷酸环化酶(AC)抑制剂SQ22536对豚鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞增生及分泌转化生长因子-β2(TGF-β2)的影响。方法胰蛋白酶消化法培养原代豚鼠RPE细胞,角蛋白免疫组织化学染色鉴定为阳性后,传2代细... 目的观察磷脂酶C(PLC)抑制剂U73122和腺苷酸环化酶(AC)抑制剂SQ22536对豚鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞增生及分泌转化生长因子-β2(TGF-β2)的影响。方法胰蛋白酶消化法培养原代豚鼠RPE细胞,角蛋白免疫组织化学染色鉴定为阳性后,传2代细胞用于实验。实验组加入含不同浓度U73122或SQ22536的培养液,设溶剂对照。24h后观察RPE细胞形态,噻唑蓝(MTT)法检测加入不同浓度U73122后RPE细胞的增生情况。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测1×10-5mol/LU73122及SQ22536作用2、4、6、8、16h后细胞培养液中TGF-β2的分泌量。结果培养的RPE细胞通过角蛋白染色后呈棕黄色阳性反应。MTT法检测显示,U73122实验组中除5×10-6mol/L浓度组外,其余各浓度组OD值与对照组比较均显著下降,且随着浓度的增加,OD值下降越明显(P<0.05);SQ22536各浓度组与对照组OD值相比差异均无统计学意义(F=1.316,P>0.05)。ELISA结果显示,加入1×10-5mol/LU73122后2h实验组TGF-β2的分泌量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),4、6、8、16h后,实验组较对照组及2h组均明显增加(P<0.05);而SQ22536组RPE细胞TGF-β2的分泌量在2、4、6、16h比较差异无统计学意义(P>0.05),8h时分泌量降低。结论 PLC抑制剂U73122能抑制RPE细胞的增生,并可使RPE细胞分泌TGF-β2增加。AC抑制剂SQ22536对RPE细胞的生长和TGF-β2的分泌无明显影响。提示RPE细胞分泌TGF-β2的调控可能与PLC信号转导途径有关。 展开更多

关键词 视网膜色素上皮细胞 转化生长因子-β2 磷脂酶抑制剂 腺苷酸环化酶抑制剂

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压力对人眼小梁细胞自分泌TGF-β_2的影响

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作者 张虹 陈莲一 +1 位作者 李贵刚 单长梅 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期241-243,共3页

目的 采用开放式压力控制培养系统研究压力对体外培养的人眼小粱细胞自分泌转化生长因子-β2（TGF-β2）的影响，探讨TGF-β2在原发开角型青光眼发病机制中的作用。方法 体外培养人眼小梁细胞并传至第5代。对照组不施加压力（0mmHg，1mm... 目的 采用开放式压力控制培养系统研究压力对体外培养的人眼小粱细胞自分泌转化生长因子-β2（TGF-β2）的影响，探讨TGF-β2在原发开角型青光眼发病机制中的作用。方法 体外培养人眼小梁细胞并传至第5代。对照组不施加压力（0mmHg，1mmHg=0．133kPa），实验组施加20、40、60及80mmHg压力，分别持续0、12、24、36h。采用双抗体夹心酶联免疫吸附（ELISA）法测定细胞上清液中TGF-β2浓度。结果 小梁细胞自分泌TGF-β2随压力增高而增加，与对照组比较，差异有显著性意义（P〈0．05）；在20～60mmHg范围内，加压时间越长，TGF-β2增高越明显；虽然80mmHg压力水平下TGF-β2增高幅度下降，但加压12和24h组TGF-β2水平仍明显高于对照组（P〈0．05）。结论随压力增高，小梁细胞自分泌TGF-β2增多，其水平与压力大小及作用时问相关，推测TGP-β2分泌异常可能是原发开角型青光眼病理进程中的重要机制之一。 展开更多

关键词 转化生长因子-β2 青光眼 小梁细胞 压力

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