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Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4在胰腺导管腺癌中的表达及其与E-cadherin的相关性研究 被引量:10
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作者 李东哲 赵梅芬 +1 位作者 宋少伟 郭克建 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期562-564,共3页
目的探讨Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRSS4)和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)在胰腺导管腺癌组织中的表达及两者相关性以及其临床意义。方法 Western blot法检测16例胰腺导管腺癌和配对癌旁组织TMPRSS4和E-cadherin蛋白表达情况;免疫组织化... 目的探讨Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRSS4)和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)在胰腺导管腺癌组织中的表达及两者相关性以及其临床意义。方法 Western blot法检测16例胰腺导管腺癌和配对癌旁组织TMPRSS4和E-cadherin蛋白表达情况;免疫组织化学方法检测54例胰腺导管腺癌标本和4例正常胰腺组织中TMPRSS4和E-cadherin蛋白表达情况。结果胰腺导管腺癌组织TMPRSS4蛋白表达明显高于配对癌旁组织,E-cadherin蛋白表达癌旁组织明显高于癌组织(P<0.01);TMPRSS4蛋白阳性表达和E-cadherin表达缺失与胰腺导管腺癌分化程度、淋巴结移、临床分期相关(P<0.05);TMPRSS4和E-cadherin蛋白表达呈负相关(r=-0.419,P=0.002)。结论 TMPRSS4及E-cadherin在胰腺导管腺癌中的表达缺失与肿瘤恶性程度密切相关,联合检测2种蛋白有助于提高胰腺癌恶性程度的判断。 展开更多
关键词 蛋白酶4 E-CADHERIN 胰腺导管腺癌
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跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS3与遗传性耳聋 被引量:2
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作者 葛圣雷 易彦 谢鼎华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第8期859-866,共8页
跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS3(transmembrane protease,serine3)属于TTSPs(typeⅡtransmembrane serine proteases)家族成员,在分子结构上,TMPRSS3具有典型的TTSPs结构域,如丝氨酸蛋白酶、LDLRA、SRCR等.TMPRSS3有不同的蛋白异构体,其中异构... 跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS3(transmembrane protease,serine3)属于TTSPs(typeⅡtransmembrane serine proteases)家族成员,在分子结构上,TMPRSS3具有典型的TTSPs结构域,如丝氨酸蛋白酶、LDLRA、SRCR等.TMPRSS3有不同的蛋白异构体,其中异构体A是体内最主要的存在形式,主要在内耳表达,亚细胞水平定位于内质网膜上,TMPRSS3基因缺陷是遗传性耳聋DFNB8/10的遗传基础,因此目前对TMPRSS3的功能研究主要集中在听觉系统方面,此外蛋白异构体D还可能是卵巢癌的生物学标志物.TMPRSS3是迄今为止发现的第一个基因突变能引起耳聋的蛋白酶,表明听觉通路上的某些关键调控因子可能作为它的生理学底物被水解激活,从而介导相应的信号转导途径,但它激活了哪些信号通道,目前尚不清楚.借鉴mCAP(mouse channel activating protease)的功能预测ENaC(epithelial sodium channel)可能是TMPRSS3的作用底物,推测TMPRSS3参与内耳Na+平衡调控,但仍有待于体内实验证实.当前酶学领域研究技术的革新发展,尤其酶降解组学的应用,为认识蛋白酶TMPRSS3的功能及其复杂的分子调控机制提供了新的捷径. 展开更多
关键词 TMPRSS3 蛋白酶 内耳 底物 信号转导途径
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蛋白酶TMPRSS3在小鼠耳蜗中的表达分析 被引量:1
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作者 葛圣雷 汪芹 +2 位作者 彭安全 伍伟景 谢鼎华 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期794-798,共5页
目的:观察跨膜丝氨酸蛋白酶3(transmembrane protease,serine 3,TMPRSS3)在小鼠耳蜗组织中的表达与分布,分析不同年龄阶段耳蜗TMPRSS3 mRNA表达情况,初步探讨内耳蛋白酶TMPRSS3的作用。方法:采用免疫组织化学结合免疫荧光双标技术观察C5... 目的:观察跨膜丝氨酸蛋白酶3(transmembrane protease,serine 3,TMPRSS3)在小鼠耳蜗组织中的表达与分布,分析不同年龄阶段耳蜗TMPRSS3 mRNA表达情况,初步探讨内耳蛋白酶TMPRSS3的作用。方法:采用免疫组织化学结合免疫荧光双标技术观察C57/BL小鼠耳蜗组织TMPRSS3蛋白表达分布,解剖耳蜗、耳蜗螺旋神经元、Corti器、血管纹组织,采用实时荧光定量PCR检测上述组织细胞中TMPRSS 3的表达情况,依次取不同年龄组小鼠耳蜗标本,实时荧光定量PCR检测各年龄组耳蜗TMPRSS3 mRNA表达的变化。结果:蛋白酶TMPRSS3主要表达分布在耳蜗螺旋神经元中,耳蜗Corti器、血管纹组织细胞中也有TMPRSS3阳性表达;各年龄阶段小鼠耳蜗均存在TMPRSS3 mRNA表达,但其整体表达水平相对较低。结论:耳蜗多处部位存在蛋白酶TMPRSS3的表达,但其表达主要分布在耳蜗螺旋神经元中,提示TMPRSS3的作用可能主要体现在维护听觉螺旋神经元的生理功能方面。 展开更多
关键词 蛋白酶3 II蛋白酶 耳蜗 螺旋神经元
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稳定表达人TMPRSS2蛋白质悬浮生长MDCK细胞系的构建
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作者 冯磊 吴培培 +3 位作者 褚轩 陈丽 王伟峰 侯继波 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第5期1084-1090,共7页
为了构建能稳定表达人Ⅱ型跨膜型丝氨酸蛋白酶(TMPRSS2)的重组MDCK细胞,并考察该重组细胞株对禽流感H9亚型病毒的增殖能力,采用基因工程的方法,将TMPRSS2基因克隆入真核表达载体中获得重组表达载体p IRES-TMPRSS2。采用25 000线性PEI进... 为了构建能稳定表达人Ⅱ型跨膜型丝氨酸蛋白酶(TMPRSS2)的重组MDCK细胞,并考察该重组细胞株对禽流感H9亚型病毒的增殖能力,采用基因工程的方法,将TMPRSS2基因克隆入真核表达载体中获得重组表达载体p IRES-TMPRSS2。采用25 000线性PEI进行悬浮生长MDCK细胞的转染操作,经两轮G418抗性筛选获得能够稳定表达该蛋白质的重组MDCK-Sus-TMPRSS2细胞。RT-PCR、Western blot以及间接免疫荧光检测(IFA)的结果显示,TMPRSS2已在该重组细胞株中正常表达。该重组细胞的悬浮比生长速率达到0.438 d-1;在3 L反应器中,最大细胞密度可达到1 ml6.83×106个。在对6株禽流感H9亚型病毒的连续盲传试验中,经MDCK-Sus-TMPRSS2细胞盲传的子代病毒可以获得较高的血凝效价和半数组织感染滴度。 展开更多
关键词 MDCK细胞 稳定转染 跨膜型丝氨酸蛋白酶 禽流感病毒
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