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炎症及炎症耐受模型筛选广谱趋化因子抑制肽(英文)
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作者 苏焱 孙晗笑 +2 位作者 李秀英 莫雪梅 张光 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第5期461-470,共10页
通过减少炎性组织或细胞趋化因子及炎性因子的表达量能将炎症性病理过程抑制在起始阶段.我们通过体外构建人外周血单个核细胞LPS激活的急性炎症模型及内毒素耐受模型,进行噬菌体肽库亲和筛选,ELISA检测与炎性PBMC的结合能力,分泌抑制实... 通过减少炎性组织或细胞趋化因子及炎性因子的表达量能将炎症性病理过程抑制在起始阶段.我们通过体外构建人外周血单个核细胞LPS激活的急性炎症模型及内毒素耐受模型,进行噬菌体肽库亲和筛选,ELISA检测与炎性PBMC的结合能力,分泌抑制实验筛选抑制性噬菌体克隆,经趋化抑制、竞争结合及生成抑制实验检测体外活性,大鼠足肿胀及关节炎模型检验多肽体内作用,SqRT-PCR检测趋化因子及TTP的mRNA水平,探讨其作用机制.筛选到的目标多肽CI-S5趋化抑制率达到48.72%,明显抑制噬菌体阳性克隆P15与LPS激活PBMC的结合,动物试验能明显降低大鼠足肿胀及关节炎症.机制研究显示,CI-S5多肽能降低3种趋化因子的表达量,并调节TTP使其表达增加,提示CI-S5能够靶向炎症前期PBMC,为炎症治疗提供了针对早期急性炎症反应的广谱小分子抑制肽. 展开更多
关键词 内毒素耐受 混合靶标噬菌体展示 广谱趋化因子抑制 生物活性肽 TTP
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单核细胞趋化蛋白-1抑制剂宾达利的合成及表征
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作者 杨旭锋 闫玉兵 陈栋栋 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1223-1227,1276,共6页
为了解决目前宾达利(BIN)合成工艺难放大生产的问题,报道了一种高效制备BIN的方法。以吲唑-3-羧酸为起始原料,经酯化反应得到吲唑-3-羧酸甲酯(Ⅰ),该中间体与苄溴反应得到1-苄基吲唑-3-羧酸甲酯(Ⅱ),随后酯基进一步被硼氢化钠还原得到1... 为了解决目前宾达利(BIN)合成工艺难放大生产的问题,报道了一种高效制备BIN的方法。以吲唑-3-羧酸为起始原料,经酯化反应得到吲唑-3-羧酸甲酯(Ⅰ),该中间体与苄溴反应得到1-苄基吲唑-3-羧酸甲酯(Ⅱ),随后酯基进一步被硼氢化钠还原得到1-苄基吲唑-3-甲醇(Ⅲ)。最后中间体Ⅲ与氯仿、丙酮在碱性条件下反应得到目标产物BIN,通过^(1)HNMR、^(13)CNMR、HRMS和元素分析对BIN结构进行了表征。在n(Ⅲ)∶n(Na OH)∶n(CHCl;)=1∶10∶4,反应温度为55℃,反应时间为3 h的最佳反应条件下,BIN产率为65.0%。该法步骤简单,原料廉价易得,易于工业化生产。 展开更多
关键词 宾达利 吲唑-3-羧酸 单核细胞趋化蛋白-1抑制 酯基还原 硼氢化钠 医药原料
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病毒受体拮抗性诱获配体H9的体外活性及其对人趋化因子受体CX_3CR1的作用 被引量:1
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作者 张敏 孙晗笑 +2 位作者 莫雪梅 李秀英 张光 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期597-601,共5页
目的:来源于US28受体N末端的诱惑配体多肽H9,以阐明H9的体外活性及其对细胞表面趋化因子受体CX3CR1内化及调变研究,探讨H9对人趋化因子受体CX3CR1的作用及影响。方法:立足US28的广谱趋化因子结合活性,得到趋化因子受体拮抗性多肽H9。采... 目的:来源于US28受体N末端的诱惑配体多肽H9,以阐明H9的体外活性及其对细胞表面趋化因子受体CX3CR1内化及调变研究,探讨H9对人趋化因子受体CX3CR1的作用及影响。方法:立足US28的广谱趋化因子结合活性,得到趋化因子受体拮抗性多肽H9。采用趋化抑制实验检测多肽对生理性趋化因子引起的细胞迁移活性的影响,流式细胞术方法(FCM)检测细胞内钙离子浓度变化,利用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪分别定性、定量检测CX3CR1的内化,以阐明H9的生物活性及其对人源受体CX3CR1的作用及其机制。结果:多肽H9可以阻断受体结合生理性趋化因子形成的趋化作用,本身不引起趋化运动,不影响胞内信号转导和细胞自然活性;200 ng/mL H9在给药后的最初50min钟内能使细胞表面受体CX3CR1内化达到最大值,内化率约为70%,第100分钟,内化到细胞内的CX3CR1逐渐再循环到细胞表面。证明了H9能引起细胞表面受体CX3CR1内化,内化的受体部分再循环到细胞表面。结论:H9是一种趋化因子受体抑制短肽,影响人受体CX3CR1的内化,但内化后受体再循环到细胞表面,对人受体CX3CR1生理功能没有明显影响,可以作为特异性抗病毒多肽。 展开更多
关键词 病毒受体 趋化因子受体 趋化抑制 诱惑配体 趋化因子受体拮抗剂 受体内化
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金黄色葡萄球菌CHIPS基因克隆及原核表达 被引量:2
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作者 张大生 崔玉东 +1 位作者 朱战波 朴范泽 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期63-67,共5页
趋化抑制蛋白(Chemotaxis Inhibitory Protein ofStaphylococcus aureus,CHIPS)是由金黄色葡萄球菌分泌到菌体外的一种蛋白。在感染早期,它能特异性地与中性粒细胞和单核细胞上的C5a受体(C5aR)和fMLP受体(FPR)结合,从而阻止中性粒细胞... 趋化抑制蛋白(Chemotaxis Inhibitory Protein ofStaphylococcus aureus,CHIPS)是由金黄色葡萄球菌分泌到菌体外的一种蛋白。在感染早期,它能特异性地与中性粒细胞和单核细胞上的C5a受体(C5aR)和fMLP受体(FPR)结合,从而阻止中性粒细胞和单核细胞对C5a和fMLP的结合作用,导致对病原吞噬作用的延迟。人们可以利用CHIPS对C5a-C5aR的阻止作用来研制治疗由C5a诱发的炎症性疾病的药物。将CHIPS作为免疫原防治疾病也将成为新的研究课题。实验成功构建了CHIPS蛋白的原核表达系统,为CHIPS免疫原性研究及蛋白的其他功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 趋化抑制蛋白 基因克隆 原核表达 C5A FMLP
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人类巨细胞病毒编码US28受体拮抗性多肽的筛选鉴定及体外活性研究 被引量:1
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作者 李璐 何滔 +3 位作者 莫雪梅 李秀英 张光 孙晗笑 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第6期618-626,共9页
立足US28的广谱趋化因子结合活性,寻找拮抗剂多肽的先导物.通过预测US28的结合模拟位设计多肽序列,合成相关多肽,再利用自建的25种趋化因子随机构成的噬菌体12肽库筛选结合模拟位,竞争性ELISA方法验证,从而获得30个阳性克隆,测序并推导... 立足US28的广谱趋化因子结合活性,寻找拮抗剂多肽的先导物.通过预测US28的结合模拟位设计多肽序列,合成相关多肽,再利用自建的25种趋化因子随机构成的噬菌体12肽库筛选结合模拟位,竞争性ELISA方法验证,从而获得30个阳性克隆,测序并推导氨基酸序列,得到7种序列:GSESLNAHCALW、EIDGFNAHCALL、VIARLNAHCALR、ATECLNAHCALW、VIESLNAHCALW、DNGSINAHCALL及VKKTLNAHCALR.所有序列富含疏水氨基酸,其中8个克隆有LNAHCAL保守序列.采用趋化抑制实验检测多肽对生理性趋化因子引起的细胞迁移活性的影响,流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度变化.结果表明,利用人源趋化因子序列构建肽库并筛选有效序列的方法取得成功,筛选出的阳性克隆保守序列LNAHCAL可以模拟HumanMIP-1β与US28N端的结合位,从而与合成多肽H22结合,多肽H22可以阻断受体结合生理性趋化因子形成的趋化作用,本身不引起趋化运动,不影响胞内信号转导和细胞自然活性,具有广谱趋化因子拮抗剂的可能性. 展开更多
关键词 人类巨细胞病毒 US28 结合模拟位 趋化抑制 拮抗剂
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金黄色葡萄球菌CHIPS研究进展
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作者 张大生 崔玉东 任宪刚 《畜牧兽医杂志》 2006年第4期38-39,共2页
趋化抑制蛋白(Chemotaxis Inhibitory Protein of Staphylococcus aureus,CHIPS)是由金黄色葡萄球菌体外的一种蛋白质。在感染早期,它能特异性地与中性粒细胞和单核细胞上的C5a受体(C5aR)和fLMP受体(FPR)结合,从而阻止中性粒细胞和单细... 趋化抑制蛋白(Chemotaxis Inhibitory Protein of Staphylococcus aureus,CHIPS)是由金黄色葡萄球菌体外的一种蛋白质。在感染早期,它能特异性地与中性粒细胞和单核细胞上的C5a受体(C5aR)和fLMP受体(FPR)结合,从而阻止中性粒细胞和单细胞与C5a和fMLP的结合作用,导致对病原吞噬作用的延迟。人们可以利用CHIPS对C5a-C5aR的阻止作用来研制治疗由C5a诱发的炎症性疾病的药物。将CHIPS作为免疫原来预防和治疗由金黄色葡萄球菌引起的疾病也将成为新的研究课题。 展开更多
关键词 趋化抑制蛋白 金黄色葡萄球菌 中性粒细胞 单核细胞
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