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针对趋化因子受体CCR5的SPA-WGA药物筛选方法 被引量：1
1
作者 陈仁海 吕燕慧 +2 位作者 胡琼莹 裴钢 陈力 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1266-1271,共6页
目的建立针对趋化因子受体CCR5的药物筛选SPA-WGA法[35S]GTPγS结合实验方法。方法通过降低SPA-WGA小球用量和对其他各种因素进行优化,如细胞膜用量、GDP浓度、体系孵育时间和样品连续测量时间,建立了SPA-WGA法[35S]GTPγS结合实验方法... 目的建立针对趋化因子受体CCR5的药物筛选SPA-WGA法[35S]GTPγS结合实验方法。方法通过降低SPA-WGA小球用量和对其他各种因素进行优化,如细胞膜用量、GDP浓度、体系孵育时间和样品连续测量时间,建立了SPA-WGA法[35S]GTPγS结合实验方法。结果最后优化得到实验条件为:100μl反应体系,0.1 mg SPA-WGA小球,10μgCHO-CCR5细胞膜,10μmol.L-1GDP和0.3 nmo.lL-1[35S]GTPγS,室温孵育1.5 h并且在1 200 m in之内完成所有样品测量。该法与传统抽滤法比较,测量得到RANTES的EC50分别为:1.40 nmol.L-1和2.90 nmol.L-1,测量得到SCH-C的IC50分别为:2.95 nmo.lL-1和2.73 nmo.lL-1,测量结果相似,均呈现出较好的剂量效应关系。利用该法筛选54个化合物,筛到3个IC50在1~10 nmol.L-1的化合物。这3个化合物是否具有H IV-1进入抑制剂的潜在开发价值,还有待体外抗H IV-1实验的进一步验证和筛选。结论此方法操作简便,灵敏性和重现性好,且可高通量和自动化,该法适用于能与Gi家族蛋白偶联的GPCR的高通量药物筛选。 展开更多
关键词 趋化因子受体ccr5 亲和闪烁法 [35^S]GTPγS结合 实验方法 高通量筛选
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趋化因子受体CCR5亲合短肽的筛选 被引量：4
2
作者 王芳宇 张添元 +4 位作者 罗进贤 李瑞芳 甘菁菁 官文俊 肖凡 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期636-641,共6页
趋化因子受体5(CCR5)是HIV-1与宿主细胞结合的辅助因子之一,其功能缺失或被CCR5拮抗剂封闭则会阻止HIV-1感染细胞.为得到与CCR5特异结合的肽类拮抗剂,采用噬菌体展示技术,以稳定表达CCR5的CHO细胞(CHO/CCR5)作为靶标,通过噬菌体随机12... 趋化因子受体5(CCR5)是HIV-1与宿主细胞结合的辅助因子之一,其功能缺失或被CCR5拮抗剂封闭则会阻止HIV-1感染细胞.为得到与CCR5特异结合的肽类拮抗剂,采用噬菌体展示技术,以稳定表达CCR5的CHO细胞(CHO/CCR5)作为靶标,通过噬菌体随机12肽库筛选与CCR5特异结合的多肽;经过四轮筛选后,挑选20个阳性噬菌体克隆进行测序,从中得到11个含有AFDWTFVPSLIL序列的小分子肽.含该序列的噬菌体能与抗人CCR5单抗(2D7)竞争性结合CCR5,且合成肽AFDWTFVPSLIL对趋化因子RANTES与CHO/CCR5的结合具有明显的抑制作用,初步证明该小肽与CCR5具有特异性结合作用. 展开更多
关键词 噬菌体展示 肽 筛选 人趋化因子受体5(ccr5) CHO细胞
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趋化因子受体CCR5的研究进展 被引量：13
3
作者 朱长斌 蒋子恺 +1 位作者 程枫 钱关祥 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期809-814,共6页
CCR5为趋化因子CC受体家族成员,属7次跨膜G蛋白耦联受体,配体为CCL3(MIP-1α)、CCL4(MIP-1β)、CCL5(RANTES)。CCR5主要表达于单核/巨噬细胞和淋巴细胞,与其配体介导CCR5+免疫细胞的趋化、募集过程。因此,多种免疫性疾病的发生和发展过... CCR5为趋化因子CC受体家族成员,属7次跨膜G蛋白耦联受体,配体为CCL3(MIP-1α)、CCL4(MIP-1β)、CCL5(RANTES)。CCR5主要表达于单核/巨噬细胞和淋巴细胞,与其配体介导CCR5+免疫细胞的趋化、募集过程。因此,多种免疫性疾病的发生和发展过程均有CCR5参与。CCR5是人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)入侵时的重要辅助受体,而在肿瘤细胞和各类肿瘤相关间质细胞的表面也可见其表达,并介导肿瘤增殖、浸润等多种生物学过程。随着相关研究技术的发展,进一步加深了对CCR5的结构、功能、信号通路及其在相关疾病中的作用的认识。 展开更多
关键词 趋化因子受体 ccr5 免疫性疾病 肿瘤
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趋化因子受体CCR5及CXCR4在HIV-1感染中的作用 被引量：4
4
作者 孙利 张久聪 +1 位作者 白雪帆 孙永涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期508-510,共3页
关键词 趋化因子受体 HIV CXCR4 ccr5
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拮抗CC趋化因子受体5信号诱导肿瘤细胞凋亡并调节肿瘤微环境抑制肿瘤生长 被引量：1
5
作者 何伟 刘丽萍 +3 位作者 卓静薇 张小冬 杨通 冯巨滨 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第9期1204-1210,共7页
目的探索拮抗CC趋化因子受体5(CCR5)信号通路对肿瘤生长和肿瘤微环境的影响。方法采用CCK8细胞毒试验研究CCR5选择性拮抗剂Maraviroc体外对小鼠Lewis肺腺癌细胞增殖的影响,并运用流式细胞术和RT-PCR检测肿瘤细胞凋亡和Caspase 8基因的... 目的探索拮抗CC趋化因子受体5(CCR5)信号通路对肿瘤生长和肿瘤微环境的影响。方法采用CCK8细胞毒试验研究CCR5选择性拮抗剂Maraviroc体外对小鼠Lewis肺腺癌细胞增殖的影响,并运用流式细胞术和RT-PCR检测肿瘤细胞凋亡和Caspase 8基因的表达。然后采用免疫荧光组织化学染色法研究了Maraviroc对小鼠体内肿瘤生长和肿瘤微环境中CD4^(+)和CD8^(+)以及Foxp3^(+)细胞比例的影响。结果拮抗CCR5信号在体内外均能够抑制癌细胞的生长。体外研究发现:CCR5拮抗剂可通过增强凋亡基因Caspase 8表达而诱导肿瘤细胞凋亡。在小鼠体内,CCR5拮抗剂可明显增加肿瘤微环境中CD4^(+)和CD8^(+)细胞的浸润而减少Foxp3^(+)细胞的浸润。结论拮抗CCR5信号可能通过诱导肿瘤细胞凋亡,逆转免疫抑制性肿瘤微环境而抑制肿瘤生长。 展开更多
关键词 CC趋化因子受体5 肿瘤微环境 凋亡 调节性T细胞
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趋化因子受体CCR3、CCR5和CXCR3与自然流产的相关性 被引量：6
6
作者 姜培娟 林其德 +2 位作者 鲍世民 赵爱民 肖世金 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1535-1540,共6页
目的探讨外周血、脾脏、胸腺趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3与自然流产的关系。方法用双标记流式细胞分析技术检测自然流产模型组小鼠(CBA/J×DBA/2,n=14)、正常妊娠模型组小鼠(CBA/J×BALB/c,n=13)和正常非孕组小鼠(CBA/J,n=11... 目的探讨外周血、脾脏、胸腺趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3与自然流产的关系。方法用双标记流式细胞分析技术检测自然流产模型组小鼠(CBA/J×DBA/2,n=14)、正常妊娠模型组小鼠(CBA/J×BALB/c,n=13)和正常非孕组小鼠(CBA/J,n=11)外周血、脾脏以及胸腺中CD4+T细胞CCR3、CCR5和CXCR3这三类趋化因子受体的表达。结果自然流产模型组外周血CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.01),CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组(P<0.05,P<0.01);但三个指标与正常非孕组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。自然流产模型组脾脏CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.01),高于正常非孕组(P<0.05);而CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组(P<0.05),但与正常非孕组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。自然流产模型组胸腺CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.05),高于正常非孕组(P<0.01);而CXCR3的表达率高于正常妊娠模型组(P<0.05),但与正常非孕组相比,差异无统计学意义(P>0.05);CCR5与其他两组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论CD4+T细胞上CCR3、CCR5和CXCR3的表达异常可能在自然流产的发病中起作用。 展开更多
关键词 趋化因子受体 ccr3 ccr5 CXCR3 CD4^+ T细胞 自然流产
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糖皮质激素治疗对ITP患者外周血趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3表达的影响 被引量：7
7
作者 赵霞 杨倩 +2 位作者 刘志 何高燕 肖淑欣 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第15期1883-1886,共4页
原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)是临床最常见的自身免疫性出血性疾病[1-2]。研究证明,慢性ITP是一种以Th1细胞异常聚集为特征的Th1优势性自身免疫性疾病[3-4]。Th1和Th2细胞分别表达不同的趋化因子受体,... 原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)是临床最常见的自身免疫性出血性疾病[1-2]。研究证明,慢性ITP是一种以Th1细胞异常聚集为特征的Th1优势性自身免疫性疾病[3-4]。Th1和Th2细胞分别表达不同的趋化因子受体,并与不同的趋化因子结合,其中Th1细胞优势性表达CXCR3、CCR5,Th2细胞优势性表达CCR3,从而调控Th1和Th2细胞活化与极化[5]。在CD4+T淋巴细胞表面,以上趋化因子受体可作为区分Th1和Th2细胞的标志物[6]。尽管目前ITP发病机制的研究较多,但多数是基于混合淋巴细胞培养的研究,本文旨在研究CCR3、CCR5、CXCR3在ITP患者CD4+T淋巴细胞表面的表达情况及其临床意义。 展开更多
关键词 CXCR3 原发免疫性血小板减少症 ccr3 自身免疫性疾病 ccr5 趋化因子受体 混合淋巴细胞培养 ITP
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趋化因子5及其受体CCR5与糖尿病并发症 被引量：17
8
作者 李桂林 梁尚栋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1333-1337,共5页
趋化因子是一组能够趋化细胞定向移动的小分子细胞因子,参与白细胞迁移的调控,在炎症中诱导性表达,与炎症过程密切相关,最初的研究主要局限于免疫系统。近几年来研究发现,趋化因子不仅参与糖尿病的炎症过程,而且在糖尿病并发症的发生发... 趋化因子是一组能够趋化细胞定向移动的小分子细胞因子,参与白细胞迁移的调控,在炎症中诱导性表达,与炎症过程密切相关,最初的研究主要局限于免疫系统。近几年来研究发现,趋化因子不仅参与糖尿病的炎症过程,而且在糖尿病并发症的发生发展中发挥重要的调节作用。该文主要针对趋化因子5及其受体CCR5在糖尿病并发症中的作用及相关机制的研究予以综述,以便深入理解趋化因子与糖尿病的关系,为进一步的研究提供帮助。 展开更多
关键词 趋化因子5 趋化因子受体5 炎症 糖尿病 糖尿病肾病 糖尿病心血管病
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IV-1协同受体CXCR4、CCR5及相关趋化因子SDF-1在胎盘的表达 被引量：2
9
作者 吴霞 李大金 +2 位作者 袁敏敏 王明雁 孟毅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期622-628,共7页
目的 :研究HIV 1协同受体CXCR4、CCR5及CXCR4的特异性配体SDF 1在人胎盘组织的表达 ,探索HIV 1子宫内垂直传播的分子机制。方法 :半定量RT PCR检测早、中、晚孕期胎盘及早孕滋养细胞CXCR4、CCR5mRNA水平 ;免疫组化和免疫细胞化学检测早... 目的 :研究HIV 1协同受体CXCR4、CCR5及CXCR4的特异性配体SDF 1在人胎盘组织的表达 ,探索HIV 1子宫内垂直传播的分子机制。方法 :半定量RT PCR检测早、中、晚孕期胎盘及早孕滋养细胞CXCR4、CCR5mRNA水平 ;免疫组化和免疫细胞化学检测早孕胎盘及原代培养滋养细胞CXCR4、CCR5蛋白表达 ;原位杂交及免疫组化分析SDF 1在早孕胎盘的表达 ;ELISA测定滋养细胞SDF 1的动态分泌水平。结果 :各孕期胎盘表达CXCR4及CCR5mRNA ;CXCR4蛋白定位于滋养细胞 ,而CCR5蛋白定位于绒毛基质中。滋养细胞可转录并翻译SDF 1,且能分泌可溶性SDF 1。结论 :滋养细胞同时表达CXCR4及SDF 1,SDF 1可能通过降调CXCR4而拮抗X4 HIV 1感染胎儿细胞 ;R5 HIV 1或许能通过滋养层裂隙感染CCR5 + 基质细胞和 或Hofbauer细胞 ,从而发生子宫内垂直传播。 展开更多
关键词 HIV-1 子宫内垂直传播 趋化因子 趋化因子受体 滋养细胞 胎盘 CXCR4 ccr5 艾滋病
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趋化因子RANTES及其受体CCR5与炎性疾病 被引量：5
10
作者 袁景 刘微 任汉云 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期977-980,共4页
趋化因子（Chemokines）是一类对不同靶细胞具有趋化效应的蛋白质家族,分子量多为8-12 k D,由机体多种细胞（尤其是活化免疫细胞）分泌,主要依赖与特异性受体的结合而发挥生物学作用,在细胞生长、分化、黏附及定向迁移等方面起重要作用。
关键词 RANTES ccr5 炎性疾病 趋化因子 蛋白质家族 趋化效应 CHEMOKINE 免疫细胞 细胞生长 靶细胞
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小鼠β趋化因子受体CCR_5基因的克隆 被引量：3
11
作者 郭葆玉 久野耕嗣 +2 位作者 向田直史 原田明久 松岛纲治 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期231-234,共4页
目的：克隆小鼠β趋化因子相关的受体并研究其表达。方法：使用共同引物用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔巨噬细胞的Ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ中扩增出一０．５ｋｂｃＤＮＡ，再根据其序列，设计一特异引物，用Ｍａｒａｔｈｏ... 目的：克隆小鼠β趋化因子相关的受体并研究其表达。方法：使用共同引物用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔巨噬细胞的Ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ中扩增出一０．５ｋｂｃＤＮＡ，再根据其序列，设计一特异引物，用ＭａｒａｔｈｏｎＰＣＲ法扩增得一２．８ｋｂｃＤＮＡ，用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ方法检测分析该基因，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ方法分析其表达。结果：成功克隆出小鼠ＣＣＲ５ｃＤＮＡ，其开放阅读框为１０６５ｂｐ，编码３５５个氨基酸，与人巨噬细胞炎性趋化蛋白５受体（ｈｕＭＩＰ－５Ｒ）同源性为８１％，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ结果显示该基因为单拷贝，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ结果显示小鼠巨噬细胞、脾脏等有表达。结论：克隆得到小鼠ＣＣＲ５基因，可作为研究ＨＩＶ－１感染机制及ＡＩＤＳ治疗有价值的实验模型。 展开更多
关键词 受体 β趋化因子 ccr5基因 基因克隆
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人单核细胞趋化因子受体5(CCR5)N-端膜外第一襻特异抗体F(ab′)_2的制备及鉴定
12
作者 张莉 郭葆玉 +1 位作者 苗红 张冉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期236-239,共4页
目的 :研究人 β趋化因子受体 5 (huCCR5 )NH2 端膜外第一襻特异抗体F(ab′) 2 的制备及鉴定方法。方法 :计算机分析定位超基因家族中同源顺序最低的结构域NH2 端膜外第一襻 ,PCR扩增出该基因片段后克隆到原核表达载体pGEX 1N中 ,经测... 目的 :研究人 β趋化因子受体 5 (huCCR5 )NH2 端膜外第一襻特异抗体F(ab′) 2 的制备及鉴定方法。方法 :计算机分析定位超基因家族中同源顺序最低的结构域NH2 端膜外第一襻 ,PCR扩增出该基因片段后克隆到原核表达载体pGEX 1N中 ,经测序鉴定正确后 ,在E coli中表达 ,纯化后免疫新西兰白兔。经A蛋白 SepharoseCL 4B亲和层析纯化后 ,用胃蛋白酶消化IgG ,经S 2 0 0凝胶过滤柱分离制备F(ab′) 2 。结果 :经还原和非还原聚丙烯酰胺凝胶电泳和ELISA阻断实验分析证明得到抗huCCR5NH2 端的特异性抗体。结论 :这一简捷快速的特定功能结构域抗体F(ab′) 2 的制备方法 ,对研究该基因在体内的表达及生物学功能提供了重要的实验材料 ,同时也对超基因家族中亚家族特异抗体研制提供了一种研究思路和方法。 展开更多
关键词 人单核细胞趋化因子受体5 融合蛋白 抗体 制备
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趋化因子CCL20及其受体CCR6在肺腺癌组织中的表达及与复发转移的关系研究 被引量：4
13
作者 张霄鹏 胡志娟 +4 位作者 孟爱宏 贾晓梅 段国辰 王志康 赵庆涛 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第25期3065-3068,3073,共5页
目的通过观察复发和非复发肺腺癌患者癌组织中CCL20和CCR6的表达情况,探讨CCL20和CCR6在肺腺癌发生发展中的作用。方法选取2009年2月—2011年12月河北省人民医院收治的肺腺癌患者162例,根据随访期间的复发转移情况分为复发组(n=50)和非... 目的通过观察复发和非复发肺腺癌患者癌组织中CCL20和CCR6的表达情况,探讨CCL20和CCR6在肺腺癌发生发展中的作用。方法选取2009年2月—2011年12月河北省人民医院收治的肺腺癌患者162例,根据随访期间的复发转移情况分为复发组(n=50)和非复发组(n=112)。采用免疫组织化学染色检测CCL20和CCR6的表达;采用实时荧光定量PCR检测CCL20、CCR6 mRNA的表达,采用蛋白质印迹(Western blot)法检测CCL20、CCR6蛋白的表达。结果 CCL20在肺腺癌组织中主要表达于细胞膜和细胞质,CCR6在肺腺癌组织中主要表达于细胞质,二者在肺腺癌癌旁组织中均无明显表达。复发组CCL20、CCR6高表达率〔CCL20:38(76.0%)比9(8.0%);CCR6:33(66.0%)比7(6.3%)〕和染色指数〔CCL20:(150.4±10.2)比(62.5±8.5);CCR6:(134.4±11.3)比(58.0±9.5)〕均高于非复发组,差异有统计学意义(P<0.05)。复发组CCL20、CCR6 mRNA表达较非复发组分别增加82.3%、56.4%,CCL20、CCR6蛋白表达较非复发组分别增加292.0%、188.0%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CCL20和CCR6在肺腺癌组织中呈高表达,且与肺腺癌的发生发展相关。 展开更多
关键词 肺肿瘤 趋化因子CCL2O 受体 ccr6 复发 肿瘤转移
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甲状腺乳头状癌中趋化因子受体CCR7的表达 被引量：3
14
作者 宝荣 王佾 +4 位作者 张薇 廖开友 宋传伟 刘兆琳 关海霞 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第14期1586-1587,共2页
关键词 甲状腺乳头状癌 趋化因子受体 ccr7
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趋化因子CCR5、CCR2和SDF1基因多态性与HBV感染相关性初步研究 被引量：2
15
作者 洪卫国 王福生 +3 位作者 金磊 刘明旭 刘士敬 雷周云 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2003年第1期22-22,共1页
HBV引起的肝损伤和机体的免疫应答状态有关,由基因决定的免疫应答能力可以影响感染的持续性、临床症状和结局.
关键词 乙型肝炎病毒 趋化因子 ccr5 ccr2 SDF1 基因多态性 相关性
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骨癌痛大鼠脊髓背角趋化因子受体5的表达变化 被引量：4
16
作者 杭黎华 束薇薇 +3 位作者 罗红 陈远丰 陈正 邵东华 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2015年第7期495-498,共4页
目的：探讨骨癌痛大鼠脊髓背角趋化因子受体5（CC chemokine receptor 5,CCR5）表达的变化。方法：雌性SD大鼠32只,体重150～180 g,采用随机数字表法,将其分为2组（n=16）：对照组（C组）和骨癌痛组（BCP组）。采用左胫骨骨髓腔内注入Wa... 目的：探讨骨癌痛大鼠脊髓背角趋化因子受体5（CC chemokine receptor 5,CCR5）表达的变化。方法：雌性SD大鼠32只,体重150～180 g,采用随机数字表法,将其分为2组（n=16）：对照组（C组）和骨癌痛组（BCP组）。采用左胫骨骨髓腔内注入Walker 256细胞的方法制备胫骨癌痛模型。行为学（n=8）：于术前1 d和术后1、3、6、9、12、15 d测定各组大鼠左后肢压爪缩爪阈值（paw withdrawal pressure threshold,PWPT）;于术前1 d及术后15 d,行大鼠左胫骨X线摄片检查。Real-time PCR（n=4）：术前1 d和术后15 d,测定各组大鼠左侧脊髓背角CCR5 m RNA的表达。Western blot（n=4）：术前1 d和术后15 d,测定各组大鼠左侧脊髓背角CCR5蛋白的表达。结果：行为学：与C组相比,术后6～15 d BCP组PWPT明显降低;与术前1 d比较,BCP组术后6～15 d PWPT呈进行性降低。与术前1 d比较,术后15 d BCP大鼠左胫骨X线检查显示有明显的骨皮质破坏及骨小梁缺损。Real-time PCR：与术前1 d及C组比较,BCP组术后15 d左侧脊髓背角CCR5 m RNA表达明显增加。Western blot：与术前1 d及C组比较,BCP组术后15 d左侧脊髓背角CCR5蛋白的表达也显著增加。结论：骨癌痛大鼠脊髓背角CCR5 m RNA及蛋白的表达上调,该变化可能参与了骨癌痛的形成和维持。 展开更多
关键词 骨癌痛 趋化因子受体5 脊髓
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窄谱中波紫外线对寻常性银屑病患者趋化因子受体CCR6 mRNA水平的影响 被引量：2
17
作者 张玉杰 商福民 +6 位作者 于娟 李建华 舒春梅 高昱 王忠永 李海英 魏义花 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期467-469,共3页
目的:探讨窄谱中波紫外线(NB-UVB)对银屑病患者趋化因子受体CCR6 mRNA水平的影响。方法:分别记录30例寻常性银屑病患者NB-UVB照射治疗前后患者皮损面积和严重程度指数(PASI)评分。应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测其前后外周血单... 目的:探讨窄谱中波紫外线(NB-UVB)对银屑病患者趋化因子受体CCR6 mRNA水平的影响。方法:分别记录30例寻常性银屑病患者NB-UVB照射治疗前后患者皮损面积和严重程度指数(PASI)评分。应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测其前后外周血单一核细胞CCR6 mRNA的表达水平,并与30例正常对照比较。结果:30例寻常性银屑病患者光疗1 5次后PASI分值显著降低(P<0.01)。银屑病患者CCR6 mRNA的表达水平显著高于正常对照(P<0.01),而光疗后CCR6 mRNA的表达水平显著降低(P<0.01)。结论:降低CCR6水平可能是NB-UVB治疗银屑病的机制之一。 展开更多
关键词 银屑病 窄谱中波紫外线 受体 趋化因子 ccr6
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人趋化因子受体CCR4的克隆与表达 被引量：2
18
作者 王应 韩文玲 +2 位作者 张颖妹 杨田 马大龙 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期123-124,129,共3页
目的 :建立pcDI CCR4稳定转染并具有CCR4功能性表达的细胞株 ,为深入研究CCR4配体提供基础。方法 :利用RT PCR技术进行人CCR4的cDNA克隆化。通过基因转染技术获得稳定转染细胞株 ,利用趋化实验、钙流实验证实稳定转染细胞株能有效表达C... 目的 :建立pcDI CCR4稳定转染并具有CCR4功能性表达的细胞株 ,为深入研究CCR4配体提供基础。方法 :利用RT PCR技术进行人CCR4的cDNA克隆化。通过基因转染技术获得稳定转染细胞株 ,利用趋化实验、钙流实验证实稳定转染细胞株能有效表达CCR4并具有生物功能。结果 :成功地将CCR4cDNA克隆于真核表达质粒pcDI,转染HEK2 93细胞获得稳定表达CCR4的HEK2 93细胞 ,可被RANTES诱导产生趋化反应和钙内流反应。结论 :建立的pcDI 展开更多
关键词 ccr4转染 HEK293细胞 人趋化因子受体 克隆
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系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞CCR6、CCR8趋化因子受体mRNA的表达 被引量：1
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作者 李遇梅 姚煦 +4 位作者 陈敏 李安生 高建明 杨桂兰 陈志强 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期287-290,共4页
目的:探讨趋化因子受体CCR6及CCR8在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)中的表达及与疾病的相关性。方法:收集93例确诊的SLE患者和30例正常对照者的PBMC,提取RNA。应用RT-PCR方法检测研究对象CCR6、CCR8 mRNA表达水平。记... 目的:探讨趋化因子受体CCR6及CCR8在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单一核细胞(PBMC)中的表达及与疾病的相关性。方法:收集93例确诊的SLE患者和30例正常对照者的PBMC,提取RNA。应用RT-PCR方法检测研究对象CCR6、CCR8 mRNA表达水平。记录患者临床表现及实验室检查结果。结果:①CCR6 mRNA在PBMC中表达水平:活动期组(0.985±0.257)与对照组(0.229±0.041)相比,两者差异有统计学意义(t=2.910,P=0.006)。活动期组与非活动期组(0.306±0.034)、非活动期组与对照组、患者组(0.641±0.179)与对照组,3组间差异均无统计学意义(P>0.05)。CCR8 mRNA在PBMC中表达水平:活动期组(0.703±0.285)与非活动期组(0.219±0.031)及对照组(0.120±0.018)间比较,差异无统计学意义(P>0.05);非活动期组与对照组、患者组(0.549±0.663)与对照组,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。②患者组CCR6 mRNA水平与疾病活动度评分关系:SLE患者组PBMC中CCR6 mRNA表达水平与SLE疾病活动程度指数(SLEDAI)分别作直线相关性分析,CCR6 mRNA水平与SLEDAI(r=0.457,t=4.513,P<0.001)呈正相关。③患者分为两个亚组:具有某些临床表现的与不具临床表现的CCR6mRNA及CCR8 mRNA表达,差异无统计学意义。结论:CCR6 mRNA表达水平在活动期SLE患者比非活动期及对照组增高,与SLEDAI呈正相关。CCR8 mRNA表达水平在SLE患者组与正常对照组差异无统计学意义。CCR6可能参与SLE的发生。 展开更多
关键词 红斑狼疮 系统性 趋化因子受体 ccr6 ccr8
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融合表达β趋化因子受体5NH_2端膜外第一襻及其特异抗体F(ab′)_2的制备 被引量：2
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作者 郭葆玉 张淑英 +2 位作者 程振球 汪建斌 松岛纲治 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期142-145,共4页
目的：研究β趋化因子受体５（ＣＣＲ５）ＮＨ２端膜外第一襻结构域的功能及其特异抗体Ｆ（ａｂ′）２的制备。方法：计算机分析趋化因子超基因家族，定位超基因家族中同源顺序最低的结构域ＮＨ２端膜外结构域，ＰＣＲ扩增出该结构域１... 目的：研究β趋化因子受体５（ＣＣＲ５）ＮＨ２端膜外第一襻结构域的功能及其特异抗体Ｆ（ａｂ′）２的制备。方法：计算机分析趋化因子超基因家族，定位超基因家族中同源顺序最低的结构域ＮＨ２端膜外结构域，ＰＣＲ扩增出该结构域１１４个核苷酸序列。构建融合表达载体ｐＧＥＸ－ＩＮ／ＮＲ５，经测序鉴定正确后，在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达，经纯化后免疫新西兰兔。蛋白Ａ亲和层析和胰蛋白酶消化ＩｇＧ，经Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ－１２柱层析制备Ｆ（ａｂ′）２。结果：经还原和非还原聚丙烯酰胺凝胶电泳和ＦＡＸ分析证明得到抗ＣＣＲ５ＮＨ２端的特异性抗体。结论：本方法为一简捷快速的特定功能结构域抗体Ｆ（ａｂ′）２制备方法，对研究该基因在体内的表达及生物学功能提供了重要的实验材料，同时也对超基因家族中亚家族特异抗体研制提供了一种研究思路和方法。 展开更多
关键词 融合蛋白 抗体 β趋化因子 ccr5 NH2端膜
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