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几种超分辨率荧光显微技术的原理和近期进展 被引量:20
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作者 吕志坚 陆敬泽 +1 位作者 吴雅琼 陈良怡 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1626-1634,共9页
在生命科学领域,人们常常需要在细胞内精确定位特定的蛋白质以研究其位置与功能的关系.多年来,宽场/共聚焦荧光显微镜的分辨率受限于光的阿贝/瑞利极限,不能分辨出200nm以下的结构.近年来,随着新的荧光探针和成像理论的出现,研究者开发... 在生命科学领域,人们常常需要在细胞内精确定位特定的蛋白质以研究其位置与功能的关系.多年来,宽场/共聚焦荧光显微镜的分辨率受限于光的阿贝/瑞利极限,不能分辨出200nm以下的结构.近年来,随着新的荧光探针和成像理论的出现,研究者开发了多种实现超出普通共聚焦显微镜分辨率的三维超分辨率成像方法.主要介绍这些方法的原理、近期进展和发展趋势.介绍了光源的点扩散函数(point spread function,PSF)的概念和传统分辨率的定义,阐述了提高xy平面分辨率的方法.通过介绍单分子荧光成像技术,引入了单分子成像定位精度的概念,介绍了基于单分子成像的超分辨率显微成像方法,包括光激活定位显微技术(photoactivated localization microscopy,PALM)和随机光学重构显微技术(stochastic optical reconstruction microscopy,STORM).介绍了两大类通过改造光源的点扩散函数来提高成像分辨率的方法,分别是受激发射损耗显微技术(stimulated emission depletion,STED)和饱和结构照明显微技术(saturated structure illumination microscopy,SSIM).比较了不同的z轴提取信息的方法,并阐述了这些方法与xy平面上的超分辨率显微成像技术相结合所得到的各种三维超分辨率显微成像技术的优劣.探讨了目前超分辨率显微成像的发展极限和方向. 展开更多
关键词 分辨率荧光技术 点扩散函数 PALM STORM STED SSIM
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膨胀显微技术的发展及应用 被引量:3
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作者 裴媛 张晓琳 +3 位作者 李慧艳 魏恒勇 刘占军 吴振刚 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期224-231,共8页
普通光学显微镜受光源衍射现象导致分辨率受限,难以对生物样本进行高分辨率成像。近些年来,发展了一种利用光学显微镜结合膨胀水凝胶的超分辨率光学显微技术——膨胀显微技术(expansion microscopy,ExM)。该技术采用可膨胀的水凝胶均匀... 普通光学显微镜受光源衍射现象导致分辨率受限,难以对生物样本进行高分辨率成像。近些年来,发展了一种利用光学显微镜结合膨胀水凝胶的超分辨率光学显微技术——膨胀显微技术(expansion microscopy,ExM)。该技术采用可膨胀的水凝胶均匀地物理拓展生物样本来实现超分辨率。ExM允许在常规光学显微镜下对生物样品进行纳米级成像,包括成功可视化蛋白质、核酸等生物分子,并具有用于临床样本进行病理检查的潜力。在本综述中介绍了ExM的各种方案及其在生物医学领域的应用。 展开更多
关键词 膨胀技术 超分辨率显微技术 蛋白质 RNA 病理学
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