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黄曲条跳甲谷氨酸门控氯离子通道(GluCl)基因序列特征及表达分析 被引量：2
1
作者 宾淑英 贺华良 +2 位作者 廖泓之 吴仲真 林进添 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期233-240,共8页
氯离子通道与农业害虫的抗药性发生有密切关联。本研究结合转录组测序及荧光定量PCR技术,鉴定和分析黄曲条跳甲Phyllotreta striolata(Fabricius)谷氨酸门控氯离子通道(GluCl)的基因序列特征、功能及基因表达谱。结果表明:本研究所获得... 氯离子通道与农业害虫的抗药性发生有密切关联。本研究结合转录组测序及荧光定量PCR技术,鉴定和分析黄曲条跳甲Phyllotreta striolata(Fabricius)谷氨酸门控氯离子通道(GluCl)的基因序列特征、功能及基因表达谱。结果表明:本研究所获得的GluCl cDNA序列长度为1430bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)长为1344bp,编码447个氨基酸残基。其推测蛋白分子主要含神经递质分子胞外结合域和胞内跨膜域两大功能域,其亲水的胞外结合域又含有2个由半胱氨酸二硫键形成的氨基酸残基桥环,表现出GluClα亚基的典型特征。cDNA序列的系统发育分析表明,该GluCl与其他昆虫的GluClα高度同源,而在脊椎动物中则与γ-GABA或甘氨酸配体门控氯离子通道同源。荧光定量PCR分析表明,该GluCl基因在黄曲条跳甲雌雄成虫的不同部位中都有表达,但是在头部的表达量非常高,如雄虫头部的表达量是其精巢的65.7倍、是其中肠的227.5倍,揭示GluCl基因在中枢神经组织中具有重要作用。本研究为进一步研究GluCl介导的黄曲条跳甲抗药性的发生及其分子机理奠定了基础。 展开更多
关键词 黄曲条跳甲 抗药性 谷氨酸门控氯离子通道 Α亚基 荧光定量PCR
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耐伊维菌素捻转血矛线虫谷氨酸门控氯离子通道gbr-2基因分析 被引量：2
2
作者 李斌 冯伊莉 +3 位作者 杨晓野 杨莲茹 刘鑫远 王瑞 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第1期11-13,共3页
为了解谷氨酸门控氯离子通道（Glucl）gbr-2基因在捻转血矛线虫抗伊维菌素虫株是否存在突变,以及变异情况如何,本试验以捻转血矛线虫耐伊维菌素虫株作研究对象,提取基因组DNA后以特异性引物扩增gbr-2基因,并对扩增产物进行测序和分析.... 为了解谷氨酸门控氯离子通道（Glucl）gbr-2基因在捻转血矛线虫抗伊维菌素虫株是否存在突变,以及变异情况如何,本试验以捻转血矛线虫耐伊维菌素虫株作研究对象,提取基因组DNA后以特异性引物扩增gbr-2基因,并对扩增产物进行测序和分析.同时以敏感株虫体作对照.试验结果表明,与对照组相比,耐药株的基因序列发生了突变,在80～170 bp处出现多处突变;在192～207 bp处的碱基发生丢失.两者同源性为88.9％.试验结果说明,捻转血矛线虫抗伊维菌素虫株的谷氨酸门控氯离子通道gbr-2基因确实存在突变,为进一步了解捻转血矛线虫抗伊维菌素虫株的耐药性分子机制,以及筛选耐药性检测的分子标记,建立耐药性的早期检测手段提供重要数据. 展开更多
关键词 捻转血矛线虫 耐药性 伊维菌素 谷氨酸门控氯离子通道 gbr-2基因
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朱砂叶螨谷氨酸门控氯离子通道GluCl1基因的克隆与序列特征分析 被引量：1
3
作者 云彩虹 陈青 +2 位作者 卜春亚 王有年 师光禄 《农学学报》 2013年第6期20-26,30,共8页
朱砂叶螨是一种分布广泛、危害极大、难以防治和易产生抗性的农业害螨。为了研究朱砂叶螨杀螨剂神经靶标谷氨酸门控氯离子通道,进一步确定阿维菌素对朱砂叶螨的抗性机理,采用同源基因克隆以及RACE技术,克隆朱砂叶螨杀螨剂靶标谷氨酸门... 朱砂叶螨是一种分布广泛、危害极大、难以防治和易产生抗性的农业害螨。为了研究朱砂叶螨杀螨剂神经靶标谷氨酸门控氯离子通道,进一步确定阿维菌素对朱砂叶螨的抗性机理,采用同源基因克隆以及RACE技术,克隆朱砂叶螨杀螨剂靶标谷氨酸门控氯离子通道(GluCl1)基因全长,分析其序列特征。结果表明,GluCl1基因序列全长为1856bp,其中开放阅读框(ORF)为1338bp,编码455个氨基酸,N端含25个氨基酸的信号肽,有4个跨膜结构域,GenBank登陆号为KC543353。同源比对分析表明,朱砂叶螨与其他蜱螨目GluCl基因有高度的同源性,特别与二斑叶螨的相似度最高。研究还发现朱砂叶螨敏感品系GluCl1第3个跨膜区的G314,与二斑叶螨敏感品系相应位点的氨基酸G323一致,而二斑叶螨抗性品系相应位点突变为D323。本研究进一步证实了G323突变为D323和二斑叶螨对阿维菌素产生抗性有关。本研究为今后建立以朱砂叶螨谷氨酸门控氯离子通道为靶点的选择性杀螨剂体外筛选体系奠定坚实基础。 展开更多
关键词 朱砂叶螨 基因克隆 谷氨酸门控氯离子通道
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昆虫谷氨酸门控氯离子通道研究进展 被引量：1
4
作者 孟祥坤 杨雪梅 +1 位作者 戈惠臣 王建军 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期23-29,共7页
谷氨酸门控氯离子通道(GluCls)介导快速抑制性神经传导,目前只发现于无脊椎动物中,是开发新型杀虫剂的理想作用靶标。GluCls属于半胱氨酸环超家族的配体门控离子通道,在昆虫中只发现有1个α亚基,但可以通过选择性剪接生成多种亚基剪接... 谷氨酸门控氯离子通道(GluCls)介导快速抑制性神经传导,目前只发现于无脊椎动物中,是开发新型杀虫剂的理想作用靶标。GluCls属于半胱氨酸环超家族的配体门控离子通道,在昆虫中只发现有1个α亚基,但可以通过选择性剪接生成多种亚基剪接变体并且能够形成功能性受体。除了典型的神经传导功能外,GluCls还参与调控昆虫保幼激素合成及生长发育等生理功能。GluCls的氨基酸突变和表达量变化是导致昆虫对杀虫剂产生抗药性的部分原因。本文主要从GluCls的分子特征、选择性剪接、药理学性质、生理功能和昆虫的抗药性5个方面对昆虫GluCls的研究进展作一综述,为新型杀虫剂的研发提供理论基础。 展开更多
关键词 谷氨酸门控氯离子通道 分子特征 选择性剪接 药理学性质 生理学功能 昆虫抗药性
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国家自然科学基金面上项目《高选择性谷氨酸门控氯离子通道筛选体系研究与应用》通过验收
5
《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期108-108,共1页
由向文胜为项目主持人的国家自然科学基金面上项目《高选择性谷氨酸门控氯离子通道筛选体系研究与应用》通过验收。获得安全，环境友好的新农药化合物，是新农药创制的迫切任务，而建立对靶生物与人畜、鱼鸟等高选择性筛选体系，是创制... 由向文胜为项目主持人的国家自然科学基金面上项目《高选择性谷氨酸门控氯离子通道筛选体系研究与应用》通过验收。获得安全，环境友好的新农药化合物，是新农药创制的迫切任务，而建立对靶生物与人畜、鱼鸟等高选择性筛选体系，是创制绿色农药的重要基础。 展开更多
关键词 国家自然科学基金 氯离子通道 筛选体系 高选择性 谷氨酸 应用 门控 新农药化合物
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乙酰胆碱门控氯离子通道受体突变影响秀丽线虫运动学和运动状态转换 被引量：1
6
作者 玛伊拜尔·普拉提 熊荣康 +1 位作者 霍菁 温泉 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1381-1390,共10页
目的 乙酰胆碱作为一种高度保守的神经递质,在动物的运动行为调控中起着至关重要的作用。乙酰胆碱信号转导异常可导致多种运动功能障碍。然而,乙酰胆碱在运动行为中的抑制性调控机制尚未完全清楚。本文以秀丽隐杆线虫为研究对象,探究乙... 目的 乙酰胆碱作为一种高度保守的神经递质,在动物的运动行为调控中起着至关重要的作用。乙酰胆碱信号转导异常可导致多种运动功能障碍。然而,乙酰胆碱在运动行为中的抑制性调控机制尚未完全清楚。本文以秀丽隐杆线虫为研究对象,探究乙酰胆碱门控氯离子通道受体亚基(ACC-1、ACC-2、ACC-3、ACC-4)在运动行为中的调控作用。方法 通过将运动追踪、分子遗传学和光遗传学技术相结合,对乙酰胆碱门控氯离子通道受体亚基突变线虫的运动进行分析。结果 研究发现,这些亚基突变会影响线虫前进、后退和转向运动的运动学特征,并且前进过程中线虫身体弯曲幅度也发生了变化。在这些突变线虫的后退过程中光激活RIB中间神经元会导致后退运动延迟终止。结论 这些结果提示,乙酰胆碱门控氯离子通道亚基的调控作用对于维持和调节秀丽隐杆线虫运动状态是必需的。同时,这些亚基可能参与介导RIB中间神经元在秀丽隐杆线虫后退运动中的抑制性调控。本研究为理解乙酰胆碱门控抑制性受体在运动行为中的调控机制提供了新的思路。 展开更多
关键词 秀丽隐杆线虫 乙酰胆碱门控氯离子通道受体 运动追踪 运动状态调控
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小菜蛾GluCl受体α亚基cDNA基因克隆和序列分析 被引量：3
7
作者 梁延坡 吴青君 +3 位作者 刘长仲 张友军 王少丽 徐宝云 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期49-54,共6页
利用RT-PCR和RACE技术对小菜蛾[Plutella xylostella(L.)]4龄幼虫谷氨酸门控的氯离子通道(GluCl)受体cDNA全长进行了克隆和序列分析。通过设计简并性上、下游引物扩增出小菜蛾GluCl受体α亚基基因192bp的cDNA片段,根据得到的片段序列设... 利用RT-PCR和RACE技术对小菜蛾[Plutella xylostella(L.)]4龄幼虫谷氨酸门控的氯离子通道(GluCl)受体cDNA全长进行了克隆和序列分析。通过设计简并性上、下游引物扩增出小菜蛾GluCl受体α亚基基因192bp的cDNA片段,根据得到的片段序列设计3′和5′特异性引物采用RACE技术进行3′和5′末端的克隆,获得了小菜蛾GluCl受体的cDNA的完整序列,GenBank登录号为GQ221939。该基因全长2144bp,其开放阅读框(ORF)1344bp,编码447个氨基酸。相似性分析表明:它与果蝇和赤拟谷盗的相似性均为73%,与埃及伊蚊的相似性为75%,与东亚飞蝗的相似性为79%;氨基酸分析后显示它具有GluClα亚基的典型特征,表明克隆的cDNA序列是小菜蛾GluClα亚基基因的序列。 展开更多
关键词 小菜蛾 谷氨酸门控的氯离子通道受体 反转录-多聚酶链式反应 RACE 序列分析
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苹果园二斑叶螨对常用杀螨剂的抗性水平及抗性基因突变频率检测
8
作者 张国才 张宁宁 +4 位作者 张鹏九 杨静 刘中芳 禾丽菲 高越 《中国果树》 2024年第12期97-101,共5页
二斑叶螨是苹果主要农业害螨,每年造成经济损失严重。采用药管浸叶法测定了陕西礼泉、山西运城和云南石林种群对3种常用杀螨剂的抗性水平,采用特异性等位基因PCR(PASA)技术检测了2年田间种群对阿维菌素的抗性基因突变频率。结果表明,3... 二斑叶螨是苹果主要农业害螨,每年造成经济损失严重。采用药管浸叶法测定了陕西礼泉、山西运城和云南石林种群对3种常用杀螨剂的抗性水平,采用特异性等位基因PCR(PASA)技术检测了2年田间种群对阿维菌素的抗性基因突变频率。结果表明,3种杀螨剂的杀螨活性由高到低依次为阿维菌素>乙唑螨腈>联苯肼酯,田间种群对阿维菌素的抗性倍数最高。2019年,二斑叶螨运城、礼泉和石林种群Glu Cl抗性基因突变频率分别为98.94%、97.78%和1.09%;2022年,3个种群Glu Cl抗性基因突变频率分别为100.00%、98.91%和1.06%。秦晋地区二斑叶螨田间种群对阿维菌素抗性风险较高,因此田间防治二斑叶螨应该轮换使用阿维菌素,同时进一步加强田间抗性监测工作。 展开更多
关键词 二斑叶螨 杀螨剂 抗药性 谷氨酸门控氯离子通道
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甜菜夜蛾SeGluCl剪接变异体的敲除及其对杀虫剂敏感性的影响
9
作者 安俊龙 殷旭 +5 位作者 高新培 叶尔那·阿扎题 陈礼钰 裴雅琨 胡兆农 左亚运 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期55-62,共8页
【目的】本研究旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,探索甜菜夜蛾Spodoptera exigua谷氨酸门控氯离子通道(glutamate-gated chloride channels,GluCls)基因不同转录变异体编码的SeGluCls对杀虫剂敏感性是否存在差异。【方法】采用RT-PCR和... 【目的】本研究旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,探索甜菜夜蛾Spodoptera exigua谷氨酸门控氯离子通道(glutamate-gated chloride channels,GluCls)基因不同转录变异体编码的SeGluCls对杀虫剂敏感性是否存在差异。【方法】采用RT-PCR和RACE技术获得甜菜夜蛾SeGluCl的全长cDNA序列,并对其进行生物信息学分析;利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除SeGluCl两个剪接变异体SeGluCl 3a和SeGluCl 3b,并构建甜菜夜蛾敲除品系(3a-KO和3b-KO),生物测定甜菜夜蛾敏感品系WH-S(对照品系)及3a-KO和3b-KO品系的3龄幼虫对阿维菌素、甲维盐和氟虫腈3种杀虫剂敏感性的差异。【结果】获得了甜菜夜蛾SeGluCl全长cDNA序列,并发现其2种剪接变异体(SeGluCl 3a和SeGluCl 3b),SeGluCl 3a(GenBank登录号:OM304353)的开放阅读框(open reading frame,ORF)长1362 bp,编码454个氨基酸,SeGluCl 3b(GenBank登录号:OM304354)的ORF长1365 bp,编码455个氨基酸。两种剪接变异体SeGluCl 3a和SeGluCl 3b编码的SeGluCls都包含4个跨膜区和1个半胱氨酸环。系统发育分析表明,SeGluCl与斜纹夜蛾S.litura和草地贪夜蛾S.frugiperda的GluCl亲缘关系最近。与对照品系WH-S相比,3a-KO和3b-KO敲除品系对阿维菌素、甲维盐和氟虫腈的敏感性无显著差异。【结论】甜菜夜蛾SeGluCl剪接变异体SeGluCl 3a和SeGluCl 3b编码的SeGluCls对阿维菌素、甲维盐和氟虫腈这3种杀虫剂的敏感性无差异。 展开更多
关键词 甜菜夜蛾 剪接变异体 谷氨酸门控氯离子通道 CRISPR/Cas9系统
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