硼对大白菜谷氨酰胺合成酶家族基因影响研究 被引量：1

1

作者 冯德玉 徐卫红 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期17-30,共14页

大白菜(Brassica pekinensis(Lour.)Rupr.)对硼的需求量较高且对低硼胁迫很敏感,常出现硼缺乏症.目前国内外对硼调控蔬菜风味品质的研究较为缺乏.采用盆栽试验研究了不同硼肥用量对大白菜生长发育、风味以及谷氨酰胺合成酶(Glutamine Sy... 大白菜(Brassica pekinensis(Lour.)Rupr.)对硼的需求量较高且对低硼胁迫很敏感,常出现硼缺乏症.目前国内外对硼调控蔬菜风味品质的研究较为缺乏.采用盆栽试验研究了不同硼肥用量对大白菜生长发育、风味以及谷氨酰胺合成酶(Glutamine Synthetase,GLN)家族基因表达的影响,初步探讨了硼对大白菜风味品质的调控机理.结果显示,施用硼肥提高了大白菜必需氨基酸占氨基酸总量的比例.主成分分析表明,蛋氨酸和半胱氨酸是大白菜的第一限制氨基酸,鲜味氨基酸中的天门冬氨酸和谷氨酸对大白菜风味贡献最大.施用硼肥后大白菜根GLN1.2和GLN2的表达量上调,GLN1.1和GLN1.4的表达量下调.‘华良早5号’叶柄GLN1.1和GLN1.4的表达量上调,‘脆甜白2号’叶柄GLN2表达量上调,GLN1.2表达量下调;叶片GLN家族基因表达量总体上调.大白菜地上部半胱氨酸质量分数与叶柄GLN1.4极显著正相关,酪氨酸质量分数与叶片GLN1.4显著负相关.不同大白菜品种对高硼的耐受能力存在差异,‘脆甜白2号’对高硼的耐受能力强于‘华良早5号’. 展开更多

关键词 硼 大白菜 品质调控 氨基酸组分 谷氨酰胺合成酶家族基因

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小麦谷氨酰胺合成酶基因克隆与其表达特性分析 被引量：6

2

作者 王小纯 张同勋 +3 位作者 李高飞 程振云 刘宁 马新明 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期487-492,共6页

为了研究小麦谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)的功能,利用RACE及RT-PCR技术克隆了小麦GS1(GenBank登录号:HQ840647)和GS2(GenBank登录号:JF894116)基因的全长cDNA.小麦GS1的cDNA全长为1 494 bp,GS2的cDNA全长为1 631 bp,并利... 为了研究小麦谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)的功能,利用RACE及RT-PCR技术克隆了小麦GS1(GenBank登录号:HQ840647)和GS2(GenBank登录号:JF894116)基因的全长cDNA.小麦GS1的cDNA全长为1 494 bp,GS2的cDNA全长为1 631 bp,并利用生物信息软件对GS1和GS2的基因序列以及所表达的蛋白特性进行了分析.利用半定量PCR和Western-bolt技术分别分析了小麦苗期叶片发育过程中GS同工酶基因转录和表达特点,结果表明,GS1在叶片开始衰老时转录和表达水平较高,GS2从叶片伸长期到定长期转录和表达水平最高. 展开更多

关键词 小麦 谷氨酰胺合成酶 基因克隆 基因转录 基因表达

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谷氨酰胺合成酶及其在植物基因工程中应用研究进展 被引量：5

3

作者 赵凯琴 罗延青 +2 位作者 俎峰 李劲峰 王敬乔 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期435-438,共4页

植物谷氨酰胺合成酶不仅是植物氨同化的关键酶,也是影响植物抗逆性及作物产量的重要因素之一。文章对植物谷氨酰胺合成酶的种类、结构、基因、基因表达及其在植物基因工程中的应用进行综述,认为植物对不同氮源吸收及运输的机制、谷氨酰... 植物谷氨酰胺合成酶不仅是植物氨同化的关键酶,也是影响植物抗逆性及作物产量的重要因素之一。文章对植物谷氨酰胺合成酶的种类、结构、基因、基因表达及其在植物基因工程中的应用进行综述,认为植物对不同氮源吸收及运输的机制、谷氨酰胺合成酶等关键酶不同异构体在植物生长繁育涉及的生理反应中的作用及其调节机制、谷氨酰胺合成酶在利用雄性不育进行杂交育种中可能的应用等仍待进一步研究。 展开更多

关键词 谷氨酰胺合成酶 植物基因工程 应用 研究进展

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水稻谷氨酰胺合成酶同工型基因转录表达量与启动子结构关系分析 被引量：6

4

作者 金正勋 李丹 +6 位作者 李明月 同拉嘎 潘冬 张玉磊 王海微 韩云飞 张忠臣 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1-10,共10页

研究选用籽粒蛋白质含量差异显著的5个品种(系),比较分析品种间GS同工型基因在灌浆过程中籽粒和叶片表达特性及启动子序列与结构特点。结果表明,不同品种间OsGS同工型基因表达量差异显著;OsGS1;1和OsGS1;2基因在籽粒和叶片中大量表达;Os... 研究选用籽粒蛋白质含量差异显著的5个品种(系),比较分析品种间GS同工型基因在灌浆过程中籽粒和叶片表达特性及启动子序列与结构特点。结果表明,不同品种间OsGS同工型基因表达量差异显著;OsGS1;1和OsGS1;2基因在籽粒和叶片中大量表达;OsGS1;3和OsGS2基因分别仅在籽粒和叶片中大量表达;在灌浆过程中籽粒和叶片中OsGS同工型基因m RNA表达量均呈单峰曲线变化,灌浆前期m RNA表达量平稳升高,中期出现峰值,后期快速降低,且高蛋白质含量品种m RNA表达量高于低蛋白质含量品种。籽粒蛋白质含量差异显著品种间OsGS同工型基因启动子序列同源性高达99%以上;品种间有性杂交子代OsGS同工型基因启动子序列可发生碱基变化,但启动子核心元件无变化。在调控元件数量和功能上OsGS同工型基因启动子保守性很强,启动子在结构和功能上不易发生遗传变异,籽粒OsGS同工型基因m RNA表达量变化受OsGS基因启动子调控影响较小。 展开更多

关键词 水稻 超亲变异系 谷氨酰胺合成酶基因 转录表达 启动子序列

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耐热嗜酸古细菌谷氨酰胺合成酶基因的克隆、诱导表达和活性测定 被引量：4

5

作者 殷志敏 闫淑珍 +2 位作者 戴谷 吴一凡 张双全 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第5期745-749,共5页

采用DEAE Sepharose及SephacrylS 30 0柱分离纯化了耐热嗜酸古细菌Sulfolobusacidocaldarius谷氨酰胺合成酶 (E 6 .3.1.2 ,Sac GS) .SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测分子质量为 5 3ku的单一条带 .测定其N端氨基酸序列为PGLPKNEHEALEFLKSNNIK... 采用DEAE Sepharose及SephacrylS 30 0柱分离纯化了耐热嗜酸古细菌Sulfolobusacidocaldarius谷氨酰胺合成酶 (E 6 .3.1.2 ,Sac GS) .SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测分子质量为 5 3ku的单一条带 .测定其N端氨基酸序列为PGLPKNEHEALEFLKSNNIKWVDLQ ,与其他古细菌谷氨酰胺合成酶的氨基酸序列进行比较后 ,发现均存在ATP结合保守序列TFMPKP (I/L/F) (F/P/Y) (G/R) .采用碱基的简并性设计出一对简并引物 ,以Sulfolobusacidocaldarius的基因组DNA为模板进行PCR扩增 ,获得 780bp的DNA片段 ,经克隆测序后确定为谷氨酰胺合成酶基因片段 ,以地高辛标记的该片段为探针 ,将Sulfolobusacidocaldarius基因组DNA用不同的限制性内切酶分别进行单双酶组合切割 ,然后进行DNA印迹分析 ,选出了 2 4kb的BamHⅠ /HindⅢ双酶切片段 ,并克隆到pBluescriptKS+ 质粒中 ,通过菌落原位杂交获得阳性克隆 ,进行DNA全序列测定后 ,得到完整的1 5kb的谷氨酰胺合成酶全基因序列 ,再将其克隆到 pET3c载体中 ,在大肠杆菌BL2 1中进行诱导表达并进行相应的活性测定 ,其酶活力的最适温度为 90℃ . 展开更多

关键词 耐热嗜酸古细菌 谷氨酰胺合成酶基因 基因克隆 诱导表达 活性测定

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不同氮素水平下大麦谷氨酰胺合成酶基因(HvGS1)表达及其与籽粒氮素积累的关系 被引量：1

6

作者 徐寿军 刘志萍 +7 位作者 郭呈宇 吕二锁 董永义 张继星 薛海楠 王磊 李国兴 德木其格 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期11-19,共9页

为探讨大麦(Hordeum vulgare L.)叶片谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase)基因(HvGS1)表达对氮素水平的响应及对籽粒氮素积累的影响,以蒙啤1号、蒙啤3号、甘啤4号和垦啤7号4个大麦品种为试验材料,设置0、90、180和270 kg·hm^(-2)... 为探讨大麦(Hordeum vulgare L.)叶片谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase)基因(HvGS1)表达对氮素水平的响应及对籽粒氮素积累的影响,以蒙啤1号、蒙啤3号、甘啤4号和垦啤7号4个大麦品种为试验材料,设置0、90、180和270 kg·hm^(-2)4个施氮水平,分析灌浆期间不同供氮水平下大麦叶片HvGS1相对表达量的变化及其与籽粒氮积累的相关性。结果表明,随着施氮水平的增加,大麦叶片中HvGS1相对表达量上调;在灌浆期间,HvGS1相对表达量与供氮水平和籽粒氮含量均呈极显著正相关;随着灌浆进程推移,HvGS1相对表达量呈逐渐升高的趋势,直到花后28 d叶片开始衰老时仍维持较高的表达水平;成熟期籽粒氮含量与灌浆时期叶片HvGS1相对表达量呈极显著正相关。通径分析结果显示,对成熟期籽粒氮含量影响最大的是花后28 d HvGS1表达水平,其直接通径系数为0.4906。这说明施氮会促进HvGS1上调表达,进而增加籽粒氮素积累量。 展开更多

关键词 大麦 氮素 谷氨酰胺合成酶基因 表达 相关

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谷氨酰胺合成酶基因的过量表达有效提高谷氨酸棒杆菌中L-谷氨酰胺产量 被引量：1

7

作者 郑强 阮红 +1 位作者 徐志南 杨卫军 《浙江大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期678-683,共6页

以谷氨酸棒杆菌Corynebacterium glutamicum ATCC13032基因组为模板,通过PCR扩增,得到大小为1434bp的谷氨酰胺合成酶基因glnA.以大肠杆菌/谷氨酸棒杆菌穿梭质粒pXMJ19为载体,将扩增得到的目的基因片段克隆至C.glutamicum Res167,获得重... 以谷氨酸棒杆菌Corynebacterium glutamicum ATCC13032基因组为模板,通过PCR扩增,得到大小为1434bp的谷氨酰胺合成酶基因glnA.以大肠杆菌/谷氨酸棒杆菌穿梭质粒pXMJ19为载体,将扩增得到的目的基因片段克隆至C.glutamicum Res167,获得重组菌株C.glutamicum Res167/pXMJ19-glnA.在摇瓶发酵水平上,通过IPTG诱导glnA基因的表达,并采用反相高效液相色谱方法测定了发酵液中的L-谷氨酰胺含量.结果显示,与未经诱导的对照菌相比,诱导后的重组菌发酵液中的L-谷氨酰胺产量提高了1.8倍,最高产量达1.54g·L-1. 展开更多

关键词 谷氨酸棒杆菌 谷氨酰胺合成酶基因 过量表达 L-谷氨酰胺

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斜茎黄芪根瘤菌谷氨酰胺合成酶基因多样性研究 被引量：2

8

作者 高俊莲 孙建光 陈文新 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第1期124-127,共4页

研究了22株代表性斜茎黄芪根瘤菌的谷氨酰胺合成酶基因多样性。首先对供试菌株进行了谷氨酰胺合成酶glnA和glnII基因扩增,结果显示从来自Mesorhizobium和Rhizobium属的多数代表菌株都可以扩增到约1kp、大小一致的glnA基因产物,而从Agrob... 研究了22株代表性斜茎黄芪根瘤菌的谷氨酰胺合成酶基因多样性。首先对供试菌株进行了谷氨酰胺合成酶glnA和glnII基因扩增,结果显示从来自Mesorhizobium和Rhizobium属的多数代表菌株都可以扩增到约1kp、大小一致的glnA基因产物,而从Agrobacterium sp.的4株代表菌株未能得到glnA PCR扩增产物。基因glnII的扩增结果显示几乎从所有测试菌株都能够得到基因产物,来自Mesorhizobium septentrionale、M.temperatum和Mesorhizobium spp.的代表菌株都得到了单一的、大小约400bp～500bp的glnII PCR扩增产物,而从Agrobacterium sp.的4株代表菌株扩增得到的glnII PCR扩增产物明显不同于其它斜茎黄芪根瘤菌代表菌,它们都有一条约1 kb的特征PCR扩增产物条带,SDW052和R084还出现了另外2～3个扩增产物条带。此外,基因glnA的RFLP分析结果与我们先前的16S rRNA基因分析结果具有很好的一致性,这些结果都进一步证实了这些根瘤菌的染色体基因多样性。 展开更多

关键词 斜茎黄芪根瘤菌 谷氨酰胺合成酶基因 PCR-RFLP 基因多样性

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高等植物谷氨酰胺合成酶基因的研究进展 被引量：6

9

作者 于瑶 张汉尧 杜建伟 《山东农业科学》 2012年第4期15-19,共5页

氮是植物生长的一个重要营养元素,但外源无机氮必须经氮同化转化为有机氮才能为植物所利用。谷氨酰胺合成酶(GS)是参与氮同化过程的关键酶,本文从GS种类、功能、理化和分子生物学性质及基因表达调控等方面介绍了其研究进展。

关键词 谷氨酰胺合成酶(GS) 基因工程 研究进展

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3′RACE法扩增谷氨酰胺合成酶基因及其生物信息学分析

10

作者 张志灯 罗土炎 +2 位作者 饶秋华 曹治云 郑腾 《福建农业学报》 CAS 2012年第9期919-923,共5页

以抽提得到的黑曲霉mRNA为模板,根据GenBank上检索的谷氨酰胺合成酶基因mRNA序列,设计特异性引物,进行3′RACE PCR扩增,并在NCBI网站进行生物信息学分析。结果扩增得到长约1kb的DNA片段,测序结果表明,所获得的DNA序列与gene bank上检索... 以抽提得到的黑曲霉mRNA为模板,根据GenBank上检索的谷氨酰胺合成酶基因mRNA序列,设计特异性引物,进行3′RACE PCR扩增,并在NCBI网站进行生物信息学分析。结果扩增得到长约1kb的DNA片段,测序结果表明,所获得的DNA序列与gene bank上检索到黑曲霉产谷氨酰胺合成酶基因的同源性大于97%,与其他曲霉产谷氨酰胺合成酶的基因同源性大于50%。经开放阅读框软件分析发现其具有2个外显子,其中1个外显子的氨基酸序列与黑曲霉产GS同源性为100%。 展开更多

关键词 谷氨酰胺合成酶基因 3′RACE 生物信息学

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小麦谷氨酰胺合成酶前体Ⅱ基因的克隆与分析 被引量：4

11

作者 韩娜 葛荣朝 +2 位作者 赵宝存 沈银柱 黄占景 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1756-1758,共3页

采用RACE方法,从小麦耐盐突变体RH8706-49的转录产物中获得谷氨酰胺合成酶Ⅱ(GS2)前体基因的全长cDNA序列,共包含1 690 bp,其中ORF区1 284 bp,编码427氨基酸。该基因已提交GenBank(登录号:DQ103756)。经Blast比对,该基因与大麦、水稻、... 采用RACE方法,从小麦耐盐突变体RH8706-49的转录产物中获得谷氨酰胺合成酶Ⅱ(GS2)前体基因的全长cDNA序列,共包含1 690 bp,其中ORF区1 284 bp,编码427氨基酸。该基因已提交GenBank(登录号:DQ103756)。经Blast比对,该基因与大麦、水稻、玉米GS2的同源性分别达94.6%、87.0%和90.4%。经Northern blotting分析,发现GS2基因在小麦耐盐突变体RH8706-49和其同属”一粒传”后代的敏盐突变体H8706-34中盐胁迫前后均有表达,但前者高于后者。盐胁迫后二者的表达量均有所下降,不过在敏盐突变体中下降的更为明显,说明GS2基因是盐抑制基因,属于转录水平上的调控,且与小麦耐盐性密切相关。 展开更多

关键词 耐盐 小麦 谷氨酰胺合成酶 RACE 基因克隆

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西伯利亚蓼谷氨酰胺合成酶基因的克隆及碱性盐胁迫下的表达 被引量：2

12

作者 赵淑婷 曲春浦 +2 位作者 许志茹 李扬 刘关君 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期252-257,共6页

根据西伯利亚蓼(Polygonum sibiricum Laxm.)地下茎抑制消减文库(SSH)中获得的谷氨酰胺合成酶基因(Glutamin synthetase,GS)EST序列,应用RACE技术克隆了具有Poly A的全长cDNA序列,以下简称为PsGS基因。该序列全长1 273 bp,其5'非翻... 根据西伯利亚蓼(Polygonum sibiricum Laxm.)地下茎抑制消减文库(SSH)中获得的谷氨酰胺合成酶基因(Glutamin synthetase,GS)EST序列,应用RACE技术克隆了具有Poly A的全长cDNA序列,以下简称为PsGS基因。该序列全长1 273 bp,其5'非翻译区178 bp,3'非翻译区24 bp,开放阅读框编码356个氨基酸残基;根据与其他植物谷氨酰胺合成酶的氨基酸序列的比对以及系统进化分析的结果,确定此基因为谷氨酰胺合成酶基因家族成员;经过SignalP3.0预测该蛋白没有信号肽,无切割位点,为非分泌蛋白。经过ProtParam计算该蛋白的理论等电点为5.55,分子量为39.2 kD,不稳定系数为43.82%,为非稳定蛋白。实时定量PCR分析表明,PsGS在西伯利亚蓼叶、茎、地下茎中均有表达。在3%NaHCO3诱导下,该基因在叶和茎中表达升高,在地下茎中表达受到抑制,推测该基因在抵御碱性盐迫时具有重要作用。 展开更多

关键词 西伯利亚蓼 谷氨酰胺合成酶基因 碱性盐胁迫 基因克隆 实时定量PCR

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谷氨酰胺合成酶植物基因工程应用研究进展 被引量：3

13

作者 潘丽峰 李昆志 陈丽梅 《广东农业科学》 CAS CSCD 2007年第1期106-109,共4页

简要概述了通过植物遗传操作分别增强细胞质型谷氨酰胺合成酶(GS1)和叶绿体型谷氨酰胺合成酶(GS2)在植物叶片叶肉细胞的细胞质和叶绿体中的表达水平以提高植物氮素利用率的应用研究进展。

关键词 谷氨酰胺合成酶 氮素营养 基因工程 转基因植物

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转PnAlaAT3基因可提高低氮条件下杨树上位叶谷氨酰胺合成酶活力

14

作者 张国壁 马静 +4 位作者 左壮 许志茹 杨成君 刘关君 曲春浦 《江苏农业科学》 2020年第3期86-90,共5页

谷氨酸氨基转移酶又称谷丙转氨酶,在植物氮同化中起到关键作用。本试验以小黑杨为试材构建pROKⅡ-PnAlaAT3植物表达载体,通过农杆菌介导法转化小黑杨,获得转基因植株,发现5号转基因株系叶片中PnAlaAT3基因表达量升高,但根中表达量却显... 谷氨酸氨基转移酶又称谷丙转氨酶,在植物氮同化中起到关键作用。本试验以小黑杨为试材构建pROKⅡ-PnAlaAT3植物表达载体,通过农杆菌介导法转化小黑杨,获得转基因植株,发现5号转基因株系叶片中PnAlaAT3基因表达量升高,但根中表达量却显著降低。对野生型和PnAlaAT35号转基因株系的谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酰胺-α-酮戊二酸氨基转移酶(GOGAT)活性检测结果发现,在低氮条件下,PnAlaAT3转基因株系上位叶GS活LT较野生型植株有显著增加。结果表明,PnAlaAT3基因可以提高小黑杨上位叶中GS活力。 展开更多

关键词 谷丙转氨酶基因 杨树 转基因 氮素同化 谷氨酰胺合成酶活性

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玉米谷氨酰胺合成酶c-DNA导入根癌农杆菌15955 被引量：1

15

作者 唐龙飞 刘中柱 董可文 《福建农业学报》 CAS 1998年第1期9-14,共6页

用粘端连接法将构建于ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＦＤＢ２１３菌株中的玉米谷氨酰胺合成酶（ＭＧＳ）ｃ－ＤＮＡ亚克隆于由农杆菌质粒改造的ｐＢＩ１２１载体中。在测定的７２个转化菌中有７株（９．２％）插入ＭＧＳｃ－ＤＮＡ片... 用粘端连接法将构建于ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＦＤＢ２１３菌株中的玉米谷氨酰胺合成酶（ＭＧＳ）ｃ－ＤＮＡ亚克隆于由农杆菌质粒改造的ｐＢＩ１２１载体中。在测定的７２个转化菌中有７株（９．２％）插入ＭＧＳｃ－ＤＮＡ片段。亚克隆后的质粒ＤＮＡ用ＨｉｎｄＩＩ和ＢｓｔｘＩ酶解可确定其ｃ－ＤＮＡ片段的插入方向。结果显示，Ｐ９、Ｐ１５、Ｐ１６与Ｐ１７为正向插入，Ｐ２为反向插入的菌株。Ｐ１６质粒ＤＮＡ进一步用直接基因转化法——冻融法（Ｆｒｅｅｚｅ－ｔｈａｗ）导入农杆菌１５９５５菌株。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法与ＤＮＡ杂交法测定表明，转化菌Ａ１１已携带ＭＧＳｃ－ＤＮＡ片段。 展开更多

关键词 玉米 谷氨酰胺合成酶 基因导入 根癌农杆菌

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水葫芦胞质型谷氨酰胺合成酶EcGS1全长cDNA的克隆及序列分析

16

作者 蒋丽花 傅明辉 +4 位作者 李园枚 严国花 郑李军 陈肖丽 彭进平 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期93-99,共7页

以水葫芦根部总RNA逆转录得到的cDNA为模板,参照其他植物的胞质型谷氨酰胺合成酶(GS1)氨基酸保守序列设计简并引物,进行PCR扩增,以得到的产物为基础,采用RACE技术获得水葫芦胞质型谷氨酰胺合成酶EcGS1全长cDNA。全长为1 434 bp,开放阅... 以水葫芦根部总RNA逆转录得到的cDNA为模板,参照其他植物的胞质型谷氨酰胺合成酶(GS1)氨基酸保守序列设计简并引物,进行PCR扩增,以得到的产物为基础,采用RACE技术获得水葫芦胞质型谷氨酰胺合成酶EcGS1全长cDNA。全长为1 434 bp,开放阅读框为1 071 bp,编码356个氨基酸,分子量为39.3 kD,等电点pI为5.52。序列相似性分析显示,该序列与其他植物的GS1氨基酸序列具有较高的相似性。通过亚细胞定位预测,确定EcGS1为胞质型谷氨酰胺合成酶。 展开更多

关键词 水葫芦 谷氨酰胺合成酶基因 RACE 克隆

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黄河蜜甜瓜1-氨基环丙烷1-羧酸合成酶基因片段的克隆和反义载体的构建 被引量：3

17

作者 张永红 张力群 +1 位作者 杨之为 唐文华 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2004年第2期44-48,共5页

　从伤诱导的黄河蜜甜瓜(Cucumismelocv.Huanghemi)成熟果实的中果皮组织中分离总RNA,经反转录和PCR扩增得到974bp的cDNA片段,克隆到质粒载体pGEM-3zf,经测序与Genbank中甜瓜1-氨基环丙烷1-羧酸合成酶(1-amino-cyclopropane-1-carboxyli... 　从伤诱导的黄河蜜甜瓜(Cucumismelocv.Huanghemi)成熟果实的中果皮组织中分离总RNA,经反转录和PCR扩增得到974bp的cDNA片段,克隆到质粒载体pGEM-3zf,经测序与Genbank中甜瓜1-氨基环丙烷1-羧酸合成酶(1-amino-cyclopropane-1-carboxylieacidsynthase,ACS)基因同源性为99%。克隆片段经双酶切消化,反向插入到植物表达载体pBI121的35S启动子和NOS终止子之间,构建成ACS基因的反义表达载体。 展开更多

关键词 黄河蜜甜瓜 1-氨基环丙烷 1-羧酸合成酶基因 基因片段 基因克隆 反义载体 基因构建

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用烟草表达类胡萝卜素生物合成酶基因

18

作者 孙国凤 《生物技术通报》 CAS CSCD 1993年第10期11-11,共1页

麒麟啤酒基础技术研究所三泽典彦、池永裕等和德国 Konstanz 大学教授 Gerhard Sandmann 等用烟草表达β胡萝卜素和番茄红素等黄色色素的类胡萝卜素生物合成酶基因获得成功。证实了重组烟草在阻碍类胡萝卜素生物合成的除草剂存在下也能... 麒麟啤酒基础技术研究所三泽典彦、池永裕等和德国 Konstanz 大学教授 Gerhard Sandmann 等用烟草表达β胡萝卜素和番茄红素等黄色色素的类胡萝卜素生物合成酶基因获得成功。证实了重组烟草在阻碍类胡萝卜素生物合成的除草剂存在下也能生长发育,且在叶中蓄积着普通量2倍的β胡萝卜素。三泽等90年就用大肠杆菌表达了 Erwinia uredovona 菌的染色体片段。 展开更多

关键词 合成酶基因 番茄红素 阻碍类 大肠杆菌表达 三泽 ERWINIA 永裕 生物合成 表达类 染色体片段

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枇杷果实蔗糖磷酸合酶基因cDNA片段的克隆及表达分析 被引量：1

19

作者 倪照君 高志红 +3 位作者 顾林平 章镇 黄蕾芳 王秀云 《江西农业学报》 CAS 2010年第9期42-45,共4页

根据GenBank中已登录的多种植物的蔗糖磷酸合成酶基因的保守序列设计引物,采用RT-PCR方法,从枇杷果实中扩增出该基因的cDNA片段并测序,分别为386 bp和383 bp。序列分析表明,枇杷果实蔗糖磷酸合成酶基因与桃果实蔗糖磷酸合成酶基因相似性... 根据GenBank中已登录的多种植物的蔗糖磷酸合成酶基因的保守序列设计引物,采用RT-PCR方法,从枇杷果实中扩增出该基因的cDNA片段并测序,分别为386 bp和383 bp。序列分析表明,枇杷果实蔗糖磷酸合成酶基因与桃果实蔗糖磷酸合成酶基因相似性达91%。半定量RT-PCR分析表明,该基因在枇杷果实生长发育过程中的表达量逐渐增加。所得基因片段已在GenBank中注册,386 bp和383 bp登记号分别为HM122759和HM146926。 展开更多

关键词 枇杷果实 蔗糖 磷酸合成酶基因 合酶基因 CDNA片段 克隆 表达分析 GENBANK 生长发育过程 分析表 RT-PCR分析 RT-PCR方法 保守序列 设计引物 基因片段 多种植物 相似性 桃果实 表达量 半定量

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S组山羊草属Psy1基因片段的克隆与序列分析

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作者 王建武 何心尧 +2 位作者 王辉 夏先春 何中虎 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期429-437,共9页

类胡萝卜素含量是影响小麦面制品色泽的主要因素,而Psy1基因则是类胡萝卜素生物合成中的关键基因。为了了解小麦近缘种S组山羊草的Psy1基因多样性分布规律,以高大山羊草、双角山羊草及西尔斯山羊草为材料,应用同源基因克隆技术对其进行P... 类胡萝卜素含量是影响小麦面制品色泽的主要因素,而Psy1基因则是类胡萝卜素生物合成中的关键基因。为了了解小麦近缘种S组山羊草的Psy1基因多样性分布规律,以高大山羊草、双角山羊草及西尔斯山羊草为材料,应用同源基因克隆技术对其进行Psy1基因克隆。结果表明,利用分子标记YP7B-5检测获得的8个新Psy1-S1等位变异的部分序列覆盖了Psy1基因的第二外显子和第二内含子的全部以及第三外显子93.1%的区域。在与包括来自普通小麦的Psy1-B1d、栽培二粒小麦的Psy1-B1k以及拟斯卑尔脱山羊草的Psy1-S1a、Psy1-S1b、Psy1-S1c对应部分的序列综合分析发现一致性高达93.4%~98.5%,而且编码区序列差异均为同义突变,没有造成编码氨基酸的变化。而第二内含子序列则存在数个SNP及InDel,尤其是Psy1-S1h的161bp大片段插入和Psy1-S1i的177bp大片段缺失,导致与其他Psy1-B1/Psy1-S1等位变异产生较大的长度差异。分析表明,内含子的差异是造成Psy1基因多样性的主要原因。 展开更多

关键词 小麦籽粒黄色素 山羊草 八氢番茄红素合成酶基因Psy1 基因片段克隆

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