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角质细胞生长因子2对细胞生长、移行及创伤愈合的作用 被引量:10
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作者 陈霞 胡炜 +4 位作者 魏万贵 沈雁 陈燕 杨胜利 龚毅 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第7期854-862,共9页
角质细胞生长因子2(KGF-2)是成纤维细胞生长因子超家族的一员,由间质细胞合成并分泌,能特异促进上皮细胞增殖、分化与迁移,对脊椎动物多种组织和器官的发育起重要调控作用.通过PCR从人的肾组织cDNA文库中克隆分离获得了KGF-2的cDNA,表... 角质细胞生长因子2(KGF-2)是成纤维细胞生长因子超家族的一员,由间质细胞合成并分泌,能特异促进上皮细胞增殖、分化与迁移,对脊椎动物多种组织和器官的发育起重要调控作用.通过PCR从人的肾组织cDNA文库中克隆分离获得了KGF-2的cDNA,表明该因子在成人肾中有表达.采用大肠杆菌表达并纯化重组蛋白用于生物学功能研究的结果显示:KGF-2在体外不仅能够促进角质细胞的生长和增殖,而且对其凋亡具有抑制作用,还对细胞的移行具有影响.在动物实验中,KGF-2能促进皮肤切除产生的伤口愈合,提示该蛋白质可以作为创伤治疗或辅助用药的候选分子. 展开更多
关键词 角质细胞生长因子2 细胞生长 细胞凋亡 细胞移行 伤口愈合 治疗应用
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重组人角质细胞生长因子2对辽宁绒山羊血清KGF-2浓度的影响 被引量:1
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作者 孙亚波 朱延旭 +5 位作者 冀红芹 贾富勃 王春艳 吉尚雷 全治国 刘媛缘 《现代畜牧兽医》 2022年第6期11-17,共7页
研究旨在探讨不同处理方式给药后羊血清角质细胞生长因子2 (KGF-2)的浓度变化趋势,为重组人角质细胞生长因子2 (rhKGF-2)调控羊绒生长筛选合适的处理方法和剂量提供参考。试验选择24只5~7月龄、体重为(25.76±1.94) kg的辽宁绒山羊... 研究旨在探讨不同处理方式给药后羊血清角质细胞生长因子2 (KGF-2)的浓度变化趋势,为重组人角质细胞生长因子2 (rhKGF-2)调控羊绒生长筛选合适的处理方法和剂量提供参考。试验选择24只5~7月龄、体重为(25.76±1.94) kg的辽宁绒山羊,公、母各半,随机分为4组,每组6个重复,每个重复1只羊。以皮下注射方式,试验1组注射rhKGF-2胶原蛋白溶液,试验2组注射rhKGF-2温敏感凝胶溶液,试验3组注射rhKGF-2生理盐水溶液,试验4组为对照组,不做rhKGF-2处理。共设3个试验周期,每个周期18 d;依次设置低、中、高(10、20、30μg/kg)等3个剂量,每个周期开始时一次性注射18 d用量;研究不同给药方式和剂量对注射后血清KGF-2浓度变化的影响,探讨适宜的给药方式和剂量。结果显示:以胶原蛋白溶液和温敏感凝胶溶液形式皮下注射rhKGF-2后,血清KGF-2浓度先增加后降低,呈近似抛物线形式变化;以生理盐水溶液形式给药后,血清KGF-2浓度迅速升高达到峰值后断崖式直线下降。随着处理剂量增加,3个试验组血清KGF-2浓度峰值出现的时间均向后延迟,KGF-2高浓度维持时间延长;在30μg/kg的剂量时,试验1组的上述两个时间参数为90和426 h,试验2组为138和426 h,试验3组为42和138 h。对于同一种处理方式,剂量增加可使血清KGF-2浓度绝对值增加。研究表明,通过外源供给方式给绒山羊补充KGF-2,增加供给剂量能够提高血清KGF-2绝对浓度、延迟峰值出现时间、延长高浓度维持时间;以胶原蛋白溶液和温敏感凝胶的方式补充KGF-2效果相近,但考虑到可操作性,以前者的效果更好。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子2 辽宁绒山羊 重组人角质细胞生长因子2
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角质细胞生长因子2的优化表达及纯化研究 被引量:3
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作者 林来兴妹 孟晓静 +5 位作者 王小宁 吉程程 罗林 亦伟 龙滨 张钧 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第S1期11-13,共3页
目的优化工程菌的表达,比较肝素亲和层析、离子交换层析两种方法的角质细胞生长因子2(keratinocyte growthfactor,KGF-2)的纯化产量及纯度,以获取高效的提纯工艺。方法工程菌分别进行生长密度和诱导时间的实验,并将细茵裂解液上两种... 目的优化工程菌的表达,比较肝素亲和层析、离子交换层析两种方法的角质细胞生长因子2(keratinocyte growthfactor,KGF-2)的纯化产量及纯度,以获取高效的提纯工艺。方法工程菌分别进行生长密度和诱导时间的实验,并将细茵裂解液上两种层析柱进行分步洗脱,收集目标蛋白,进行电泳分析。结果获得高表达KGF-2工程菌,表达率为29%;用两种层析方法获得电泳纯KGF-2。结论 离子交换层析在纯化过程中具有一定优势。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子2 纯化
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不同物理和化学因素对重组人角质细胞生长因子2稳定性的影响 被引量:2
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作者 周鑫 王晓杰 +5 位作者 田海山 唐禄 焦悦 朱家楠 王莘 李校堃 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期518-522,共5页
目的:研究重组人角质细胞生长因子2(rhKGF-2)在不同保存条件下的稳定性,阐明温度、pH值、缓冲溶液及反复冻融因素对rhKGF-2稳定性的影响作用。方法:rhKGF-2在不同温度(-20℃、4℃、25℃、40℃)、pH值(pH4~9)、缓冲溶液(柠檬酸钠-柠檬... 目的:研究重组人角质细胞生长因子2(rhKGF-2)在不同保存条件下的稳定性,阐明温度、pH值、缓冲溶液及反复冻融因素对rhKGF-2稳定性的影响作用。方法:rhKGF-2在不同温度(-20℃、4℃、25℃、40℃)、pH值(pH4~9)、缓冲溶液(柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、磷酸盐缓冲液、吉斐氏缓冲溶液)及反复冻融条件下分别保存,采用RP-HPLC法检测rhKGF-2纯度,同时观察外观性状。结果:-20℃、4℃分别保存时,rhKGF-2的各项性质在观察期内都无明显变化;25℃时,rhKGF-2存放28d纯度较0h(100.00%)下降至(68.20±0.14)%;40℃时,rhKGF-2存放9h纯度较0h(100.00%)下降至(4.80±0.39)%。rhKGF-2(pH6.0)在25℃条件下保存90d纯度较0h(100.00%)下降至(79.20±0.12)%,与对照组(0h)比较差异有显著性(P<0.05);pH值为4.0、9.0的rhKGF-2液体在25℃条件下分别保存120h纯度较0h(100.00%)下降至(15.60±0.30)%和(67.30±0.10)%,与对照组(0h)比较差异有显著性(P<0.01)。rhKGF-2在柠檬酸缓冲液中25℃条件下保存60d纯度较0h(100.00%)下降至(79.20±0.15)%,与对照组(0h)比较差异有显著性(P<0.01)。rhKGF-2原液反复冻融后其纯度变化差异无显著性(P>0.05)。结论:rhKGF-2在低温和pH6.0~7.0中性条件下稳定。高温、偏酸性和偏碱性条件下均不利于rhKGF-2稳定。柠檬酸缓冲液有利于rhKGF-2稳定。反复冻融对rhKGF-2稳定性影响不明显。 展开更多
关键词 重组人角质细胞生长因子-2 纯度 稳定性
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角质细胞生长因子2研究进展 被引量:1
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作者 王金凤 徐东刚 王嘉玺 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第6期918-918,共1页
关键词 角质细胞生长因子-2 成纤维细胞生长因子 受体 发育
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重组人角质细胞生长因子-2基因克隆、表达、纯化与活性分析 被引量:13
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作者 马雁冰 李擎 +4 位作者 谢天宏 李鸿钧 冮宏映 戴长柏 孙茂盛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期761-765,共5页
从人胚肺二倍体细胞KMB17中抽提总RNA ,经RT PCR扩增获得编码人角质细胞生长因子 2 (keratinocytegrowthfactor 2 ,KGF 2 )的cDNA .克隆于硫氧环蛋白表达载体pThioHisA ,序列分析表明与文献报道一致 .经IPTG诱导 ,在大肠杆菌BL2 1中实... 从人胚肺二倍体细胞KMB17中抽提总RNA ,经RT PCR扩增获得编码人角质细胞生长因子 2 (keratinocytegrowthfactor 2 ,KGF 2 )的cDNA .克隆于硫氧环蛋白表达载体pThioHisA ,序列分析表明与文献报道一致 .经IPTG诱导 ,在大肠杆菌BL2 1中实现高效表达 ,表达量可达菌体总蛋白 10 %~15 % .菌体超声破碎 ,上清经CM SepharoseFF阳离子交换 ,Heparin Sepharose亲和层析 ,Superdex 75凝胶过滤层析纯化得到重组人KGF 2 ,纯度高于 95 % .生物活性分析表明 ,它能够促进成纤维细胞NIH 3T3的增殖 ,诱导鸡胚背根神经结神经轴突的生长 ,促进鸡胚尿囊膜血管生成 .研究结果表明 ,获得了 95 %纯度的具有生物学活性的重组人KGF 2 。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 基因克隆 表达 纯化 活性分析
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重组人角质细胞生长因子-2对兔碱烧伤模型角膜上皮损伤的治疗作用 被引量:7
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作者 王晓杰 周鑫 +6 位作者 田海山 马吉胜 焦悦 张睿 蔡敏倩 钱焕文 李校堃 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期625-628,F0002,共5页
目的:研究外用旋滴重组人角质细胞生长因子-2(KGF-2)对兔碱烧伤模型角膜上皮损伤的治疗作用,为角膜上皮损伤的早期治疗探索新方法。方法:制备兔角膜碱烧伤模型,60只日本大耳白兔随机分为碱烧伤对照组和KGF-2组(25mg·mL-1)(n=30);... 目的:研究外用旋滴重组人角质细胞生长因子-2(KGF-2)对兔碱烧伤模型角膜上皮损伤的治疗作用,为角膜上皮损伤的早期治疗探索新方法。方法:制备兔角膜碱烧伤模型,60只日本大耳白兔随机分为碱烧伤对照组和KGF-2组(25mg·mL-1)(n=30);各组日本大耳白兔于造模后以50μL药物滴眼,每日3次。7和14d裂隙灯观察角膜烧伤面积以及角膜新生血管的形成,MTT法检测角膜上皮细胞活性,免疫组化方法进行病理组织学检查。结果:碱烧伤后7和14d,KGF-2组角膜烧伤面积小于碱烧伤对照组,差异有显著性(P<0.01)。碱烧伤对照组7d角膜新生血管发生率为17.50%,KGF-2组为7.32%;碱烧伤对照组14d角膜新生血管发生率为41.67%,KGF-2组为32.50%。MTT检测结果显示:碱烧伤后7和14d,KGF-2组492nm吸光度与碱烧伤对照组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。碱烧伤后7和14d,病理切片HE染色显示:对照组角膜基质水肿,板层纤维排列松散、紊乱,炎症反应反复出现,角膜上皮层变薄,部分脱落,角膜内皮层内侧有大量成纤维细胞增生;KGF-2组碱烧伤后7d,角膜上皮细胞生长良好,基质轻度增厚,无明显的炎症反应;碱烧伤后14d,未出现炎症复发,角膜上皮细胞生长良好,排列整齐,角膜基质仅有轻度增厚。结论:外用旋滴25mg·mL-1KGF-2可加速角膜上皮损伤的恢复,减轻角膜烧伤的各种炎症反应症状;减轻角膜基质水肿和纤维化,同时KGF-2亦表现出显著的抑制角膜新生血管形成的作用;KGF-2有可能成为另一个对角膜上皮损伤具有重要调控作用的生长因子。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 角膜 上皮 损伤修复
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重组人角质细胞生长因子-2对实验秃毛大鼠的毛发再生作用 被引量:9
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作者 王泽 黄鹏煌 +3 位作者 赵海洋 李海燕 田海山 李校堃 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1741-1746,共6页
目的建立实验秃毛大鼠模型,研究重组人角质细胞生长因子-2(recombinant human keratinocyte growth factor-2,rhKGF-2)对实验秃毛大鼠的毛发再生作用。方法对大鼠背部以脱毛膏拔毛,随机分为7个组,即正常对照组、5%米诺地尔组、aFGF组、r... 目的建立实验秃毛大鼠模型,研究重组人角质细胞生长因子-2(recombinant human keratinocyte growth factor-2,rhKGF-2)对实验秃毛大鼠的毛发再生作用。方法对大鼠背部以脱毛膏拔毛,随机分为7个组,即正常对照组、5%米诺地尔组、aFGF组、rhKGF2高、中、低剂量组、0.9%生理盐水组。造模次日皮肤涂抹给药,以给药第1、5、9、14天为观察时间点,记录实验大鼠的体重、实验区毛长、实验区毛发生长状况。于第14天处死实验大鼠,取实验区皮肤进行组织病理学检查。结果体重方面:在第1、5、9、14天,与正常对照组相比,各组差异无显著性(P>0.05);毛长方面:与0.9%生理盐水组相比,在第5、9天,rhKGF2高、中剂量组存在显著性差异(P<0.05,P<0.01)。在第14天,高、中、低剂量组差异有显著性(P<0.05,P<0.01,P<0.05);毛重方面:在第14天,与0.9%生理盐水组相比,各组(正常对照组除外)差异有显著性(P<0.01);病理检查结果显示:rhKGF2具有促进实验秃毛大鼠毛囊新生与成熟的作用。结论 rh-KGF2具有促进实验秃毛大鼠毛发再生的作用。rhKGF2具有很好的临床应用前景。 展开更多
关键词 重组人角质细胞生长因子-2 秃毛大鼠 毛发再生作用 毛囊 临床应用
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ERK1/2信号通路在角质细胞生长因子-2诱导角膜基质细胞增殖中的作用 被引量:5
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作者 高丽昌 李婷婷 +4 位作者 李富勇 唐禄 李海燕 王晓杰 李校堃 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1405-1408,共4页
目的观察角质细胞生长因子(keratinocyte growthfactor-2,KGF-2)对角膜基质细胞的增殖作用及ERK1/2信号在角膜基质细胞增殖中的调控作用,探讨KGF-2对角膜基质细胞增殖的可能机制。方法体外培养角膜基质细胞,MTT法检测细胞增殖,Western b... 目的观察角质细胞生长因子(keratinocyte growthfactor-2,KGF-2)对角膜基质细胞的增殖作用及ERK1/2信号在角膜基质细胞增殖中的调控作用,探讨KGF-2对角膜基质细胞增殖的可能机制。方法体外培养角膜基质细胞,MTT法检测细胞增殖,Western blot检测磷酸化ERK1/2表达水平。结果 KGF-2在1~100 mg·L-1对角膜基质细胞有明显的促进增殖作用且呈现剂量-效应关系;100 mg·L-1 KGF-2处理角膜基质细胞,5、15、30 min后ERK1/2磷酸化表达水平明显升高,60、90、120、180 min后ERK1/2磷酸化表达水平逐渐减弱;20μmol.L-1 ERK1/2抑制剂PD98059可抑制KGF-2对角膜基质细胞的促增殖作用。结论 KGF-2激活ERK1/2信号通路,提高细胞增殖率,可被抑制剂PD98059阻断;ERK1/2信号通路调控角膜基质细胞的增殖,在角膜基质细胞损伤中发挥作用。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 ERK1/2 PERK1/2 信号通路 角膜基质细胞 细胞增殖
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乳糖诱导角质细胞生长因子-2在大肠杆菌中的表达 被引量:3
10
作者 田海山 唐禄 +5 位作者 王晓杰 王会岩 刘笑菊 冯秀萍 王一 李校堃 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期262-266,共5页
目的:研究用乳糖替代IPTG作为诱导剂进行角质细胞生长因子-2(KGF-2)基因重组蛋白的表达,探讨工程化生产的可能性。方法:分别比较乳糖诱导浓度、诱导时机、诱导时间及诱导温度对重组表达产物的影响,并以IPTG诱导作为对照,确定较为优化的... 目的:研究用乳糖替代IPTG作为诱导剂进行角质细胞生长因子-2(KGF-2)基因重组蛋白的表达,探讨工程化生产的可能性。方法:分别比较乳糖诱导浓度、诱导时机、诱导时间及诱导温度对重组表达产物的影响,并以IPTG诱导作为对照,确定较为优化的乳糖诱导条件。结果:对于重组目的产物,乳糖作为诱导剂也可以起到良好效果,以乳糖为诱导剂的A600值较IPTG高,诱导产物的表达量与IPTG诱导产物相当。以终浓度为10g.L-1乳糖在33℃下诱导6h,可以达到良好的诱导效果,并且具有较好的可溶性和促细胞生长活性。结论:乳糖可替代IPTG诱导角质细胞生长因子基因表达,并取得良好效果,为工程化生产提供了良好的实验依据。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 乳糖诱导 IPTG
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重组人角质细胞生长因子-2对大鼠皮肤烫伤的治疗作用及其可能机制探讨 被引量:2
11
作者 袁海虹 周薇 +4 位作者 荣征星 廖镇江 张勤 乔亮 陈红专 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第6期639-644,共6页
目的:研究重组人角质细胞生长因子-2(rh-KGF-2)对大鼠皮肤烫伤愈合的影响及其可能的作用机制。方法:建立大鼠深Ⅱ度烫伤模型,每天局部给药1次,连续15d,每4d测量伤口面积并计算愈合率,d16观察新生上皮面积、厚度和上皮细胞迁移距离。体... 目的:研究重组人角质细胞生长因子-2(rh-KGF-2)对大鼠皮肤烫伤愈合的影响及其可能的作用机制。方法:建立大鼠深Ⅱ度烫伤模型,每天局部给药1次,连续15d,每4d测量伤口面积并计算愈合率,d16观察新生上皮面积、厚度和上皮细胞迁移距离。体外培养HaCaT细胞,MTT法检测不同浓度的rhKGF-2对HaCaT细胞增殖率的影响;划痕实验检测rhKGF-2对HaCaT细胞移行的影响。结果:rh-KGF-2对大鼠皮肤深Ⅱ度烫伤的愈合有明显的促进作用,使新生上皮面积、平均厚度和上皮细胞移行距离等明显增加。rhKGF-2可刺激HaCaT细胞增殖,集落形成率增加(P<0.05),且细胞呈明显的增殖形态,形成的集落较大,集落内细胞多呈星状,胞内染色质丰富;rhKGF-2能显著促进创伤周围细胞向创面中央移行(P<0.01)。结论:rhKGF-2能明显加快大鼠烫伤创面愈合,可能作用机理为通过促进表皮细胞增殖和移行,加速创面皮肤再上皮化。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 烫伤 HACAT细胞 增殖 移行
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重组人角质细胞生长因子-2基因的克隆、表达及活性 被引量:2
12
作者 田海山 唐禄 +3 位作者 王晓杰 王艳芳 官丽莉 李校堃 《吉林大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1150-1156,共7页
从人胚肺成纤维细胞中提取总RNA,利用RT-PCR法获得人角质细胞生长因子-2(hKGF-2)cDNA,并通过PCR方法扩增,再与原核表达载体pET3c连接后转化至BL21(DE3)宿主细胞中获得表达菌株.通过流加补料方式和发酵条件的控制,进行高密度培养,并通过I... 从人胚肺成纤维细胞中提取总RNA,利用RT-PCR法获得人角质细胞生长因子-2(hKGF-2)cDNA,并通过PCR方法扩增,再与原核表达载体pET3c连接后转化至BL21(DE3)宿主细胞中获得表达菌株.通过流加补料方式和发酵条件的控制,进行高密度培养,并通过IPTG诱导获得可溶性表达的目的产物.结果表明:目的蛋白占菌体总蛋白的30.0%以上;经阳离子交换层析、肝素亲和层析两步柱层析方法获得的rhKGF-2纯度高于99.0%.建立了利用转受体FGFR2-Ⅲb的BaF3细胞株进行rhKGF-2促增殖作用的活性测定方法,活性测定结果呈典型的S型曲线,并在一定范围内具有剂量依赖性. 展开更多
关键词 重组角质细胞生长因子-2(rhKGF.2) 高密度培养 柱层析 转受体FGFR2-Ⅲb BaF3细胞 生物活性
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转角质细胞生长因子-2基因红花研究 被引量:1
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作者 杨晶 王兰 +8 位作者 黄建 陈玉斌 郭咏昕 易善勇 官丽莉 杜林娜 李海燕 李校堃 姜潮 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2015年第2期210-216,共7页
【目的】构建转角质细胞生长因子-2基因(KGF2)红花,为KGF2药用蛋白的生产奠定了基础。【方法】利用融合PCR方法扩增人源KGF2基因与拟南芥油体蛋白Oleosin基因的融合基因,将融合基因克隆至表达载体pOP上,构建了重组质粒pOP-OL-KGF2,采用... 【目的】构建转角质细胞生长因子-2基因(KGF2)红花,为KGF2药用蛋白的生产奠定了基础。【方法】利用融合PCR方法扩增人源KGF2基因与拟南芥油体蛋白Oleosin基因的融合基因,将融合基因克隆至表达载体pOP上,构建了重组质粒pOP-OL-KGF2,采用冻融法将质粒pOP-OL-KGF2转入根癌农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化红花,采用PCR检测筛选转基因红花阳性植株,SDS-PAGE检测Oleosin-KGF2融合蛋白的表达情况。【结果】成功构建了植物特异表达载体pOP-OL-KGF2,转染后共获得了12株转基因红花植株,其中2株鉴定为阳性,阳性率为17%,对转化植株进行DNA水平检测和蛋白水平检测,可知KGF2基因已经整合进红花基因组中,且有所表达。【结论】成功获得转KGF2基因的红花株系。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 红花 遗传转化
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角质细胞生长因子-2与核糖体蛋白L22相互作用的发现及在哺乳动物细胞中的验证
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作者 白秉学 徐东刚 +3 位作者 王金凤 彭善云 邹民吉 范明 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第10期936-940,共5页
通过聚合酶链式反应从人胎肝cDNA文库中钓取KGF 2cDNA ,构建诱饵蛋白载体 pAS2 1 KGF 2并对其自身转录激活活性进行鉴定 ,利用酵母双杂交系统筛选人胎肝cDNA文库 ,挑选双阳性克隆 .DNA序列分析和同源检索显示 ,所获侯选蛋白为人核糖体... 通过聚合酶链式反应从人胎肝cDNA文库中钓取KGF 2cDNA ,构建诱饵蛋白载体 pAS2 1 KGF 2并对其自身转录激活活性进行鉴定 ,利用酵母双杂交系统筛选人胎肝cDNA文库 ,挑选双阳性克隆 .DNA序列分析和同源检索显示 ,所获侯选蛋白为人核糖体蛋白L2 2 (RPL2 2 ) .将KGF 2和侯选蛋白分别克隆至哺乳动物细胞双杂交的BD、AD质粒中 ,共同转染COS 7细胞 ,通过CAT分析验证了KGF 2和侯选蛋白之间的相互作用 .为阐明KGF 2作用的分子机制提供有益线索 . 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 相互作用蛋白 酵母双杂交 哺乳动物细胞双杂交 核糖体蛋白122
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角质细胞生长因子-2对右旋葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎和肠道黏膜屏障的保护作用 被引量:6
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作者 黄盈瑜 刘红春 +1 位作者 宋元林 冯娜娜 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-8,21,共9页
目的探究角质细胞生长因子-2(keratinocyte growth factor 2,KGF-2)对右旋葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的小鼠结肠炎和肠道黏膜屏障的保护作用及其作用机制。方法 36只C57BL/c雄性小鼠随机分为正常对照组、DSS模型组... 目的探究角质细胞生长因子-2(keratinocyte growth factor 2,KGF-2)对右旋葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的小鼠结肠炎和肠道黏膜屏障的保护作用及其作用机制。方法 36只C57BL/c雄性小鼠随机分为正常对照组、DSS模型组、中剂量KGF-2(5mg/kg)组和高剂量KGF-2(10mg/kg)组。除正常对照组外小鼠饮用水中均添加3.5%DSS,KGF-2组同时腹腔注射相应剂量的KGF-2。检测小鼠体重、疾病活动指数(disease activity index,DAI)、结肠长度缩短、结肠组织病理评分评价KGF-2对结肠炎的保护作用,多功能酶标仪检测血清异硫氰酸荧光素葡聚糖(fluorescein isothiocyanate-dextran,FITC-D)肠道渗透率,免疫组化和Western blot检测结肠组织ZO-1和occludin蛋白的表达,ELISA分析结肠组织匀浆的TNF-α、IL-6、IL-10、TGF-1β、IFN-γ、IL-1β浓度,以探讨KGF-2对肠道屏障功能保护作用机制。结果与DSS模型组相比,高剂量KGF-2组结肠DAI显著下降(P=0.021 1),体重减轻明显改善(P=0.017 6),HE评分显著降低(12.17±1.222vs.7.000±0.632 5,P=0.001 1),FITC-D渗透率显著降低(168.5±27.01 vs.14.62±1.812,P=0.004 7),结肠较长(4.956±0.2583 vs.6.289±0.2157,P=0.001 1);ZO-1(0.158 6±0.010 51 vs.0.387 9±0.028 64,P<0.000 1)和occludin(0.300 5±0.026 56 vs.0.445 0±0.056 62,P=0.043 4)蛋白表达水平显著升高;肠道组织TNF-α表达显著降低(68.93±3.379 vs.40.41±1.576,P<0.000 1),而IL-10(304.0±21.47 vs.521.2±49.40,P=0.002 4)和IL-6(3755±309.8 vs.5 640±418.0,P=0.004 7)的表达显著升高,疗效呈剂量依赖性。结论 KGF-2能够减轻DSS导致的肠道黏膜损伤,修复肠道黏膜屏障。KGF-2对肠道黏膜屏障的保护作用可能与增加ZO-1和occludin等紧密连接蛋白的表达、抑制TNF-α及促进IL-6和IL-10分泌有关。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 炎症性肠病 黏膜屏障 紧密连接蛋白 细胞因子
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KGF-2对COPD小鼠保护性作用的免疫学研究 被引量:3
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作者 张鸽 常美佳 +4 位作者 黄嘉楠 周建 宋元林 白春学 洪群英 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期638-643,共6页
目的研究角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor-2,KGF-2)对慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)模型小鼠肺部炎症及免疫功能的影响。方法取15只6~8周龄(体重20~25 g)的雄性BALB/C小鼠,首先用烟熏加... 目的研究角质细胞生长因子2(keratinocyte growth factor-2,KGF-2)对慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)模型小鼠肺部炎症及免疫功能的影响。方法取15只6~8周龄(体重20~25 g)的雄性BALB/C小鼠,首先用烟熏加气道滴注脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的方法构建COPD模型。KGF-2组于第1天和第14天给予KGF-2,共2次。采用肺组织HE染色及肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)蛋白浓度评价小鼠气道炎症及肺泡壁屏障的破坏。ELISA检测小鼠血浆及BALF中IL-6和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorα,TNF-α)的水平。流式细胞术检测小鼠脾脏中CD4+T细胞及CD8+T细胞的比例及细胞程序性死亡蛋白1(programmed cell death protein 1,PD-1)的表达。结果与COPD组小鼠比较,KGF-2组小鼠肺部炎症细胞浸润减少,肺泡结构相对完整,肺泡灌洗液及血浆中IL-6和TNF-α水平有降低的趋势。与COPD组比较,KGF-2组小鼠脾脏中CD4+T细胞及CD8+T细胞的比例升高(P<0.05),PD-1比例降低(P<0.05)。结论 KGF-2可能具有抑制COPD相关肺组织炎症及增强免疫功能的作用。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子2 慢性阻塞性肺病 慢性炎症 免疫 小鼠
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