期刊文献+
共找到29篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
新多肽配体GE11与表皮生长因子受体的结合能力分析 被引量:3
1
作者 郭妍 李宗海 +1 位作者 顾健人 徐宇虹 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1318-1321,共4页
应用亲和毛细管电泳(ACE)分析方法,对表皮生长因子受体(EGFR)和新多肽配体GE11之间的结合能力进行分析。结果表明,EGFR与多肽配体GE11之间存在特异性相互作用,考察EGFR在不同浓度GE11溶液中的迁移情况,采用非线性、双倒数、Y-倒数和X-倒... 应用亲和毛细管电泳(ACE)分析方法,对表皮生长因子受体(EGFR)和新多肽配体GE11之间的结合能力进行分析。结果表明,EGFR与多肽配体GE11之间存在特异性相互作用,考察EGFR在不同浓度GE11溶液中的迁移情况,采用非线性、双倒数、Y-倒数和X-倒数4个数据处理方法得到较好的数据拟合,并测得结合常数。该文为筛选多肽配体以及测定受体与多肽配体之间的结合常数提供了简便的方法,将有力推动肿瘤靶向药物输送的研究。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 配体 亲和毛细管电泳 结合常数
在线阅读 下载PDF
靶向表皮生长因子受体的小分子RNA干扰抑制人脑胶质瘤Notch1表达的实验研究 被引量:1
2
作者 裘明哲 浦佩玉 +4 位作者 康春生 张志勇 王广秀 贾志凡 江荣才 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2006年第3期198-202,共5页
目的探讨RNA干扰表皮生长因子受体后Notch1在人脑胶质瘤中的表达变化。方法应用免疫组织化学方法检测不同级别脑胶质瘤组织标本中Notch1的表达水平,并进行相关分析。选择人表皮生长因子受体的两个RNA干扰靶序列构建靶向表皮生长因子受体... 目的探讨RNA干扰表皮生长因子受体后Notch1在人脑胶质瘤中的表达变化。方法应用免疫组织化学方法检测不同级别脑胶质瘤组织标本中Notch1的表达水平,并进行相关分析。选择人表皮生长因子受体的两个RNA干扰靶序列构建靶向表皮生长因子受体的RNA干扰表达质粒,进行脂质体介导的TJ905人脑恶性胶质瘤细胞系表达;应用荧光定量逆转录-聚合酶链反应仪观察RNA干扰表皮生长因子受体后TJ905人脑恶性胶质瘤细胞系Notch1的表达变化。结果免疫组织化学检测显示,在不同级别胶质瘤组织标本中Notch1的阳性表达率分别为Ⅳ级93.33%(14/15);Ⅲ级92.31%(12/13);Ⅱ级68.42%(13/19)。Ⅱ级阳性表达程度较Ⅲ、Ⅳ级弱,组间差异有高度统计学意义(H=6.944,P<0.01),提示高级别胶质瘤Notch1阳性表达率高于低级别。RNA干扰表皮生长因子受体后,Notch1在TJ905胶质母细胞瘤细胞系中的表达下降(F=578.728,P<0.01):TJ905组与TJ905+空载组相比,差异无统计学意义(P>0.05);TJ905+空载组与TJ905+516组相比,差异有统计学意义(q=6.359,P<0.05);TJ905+516组与TJ905+2400组比较,差异有统计学意义(q=4.501,P<0.05);TJ905组与TJ905+2400组相比差异亦有统计学意义(q=10.015,P<0.05)。责任基因相对表达量,TJ905组和TJ905+空载组均为2.48×10-5,TJ905+516组为6.64×10-6,TJ905+2400组为2.08×10-7。结论表皮生长因子受体与Notch1关系密切,对二者关系的进一步研究可为胶质瘤的基因治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 RNA 信使 RNA干扰 受体 表皮生长因子 脑肿瘤 神经胶质瘤
在线阅读 下载PDF
RNA干扰表皮生长因子受体对骨肉瘤细胞凋亡的影响 被引量:1
3
作者 赵成利 李祖国 +1 位作者 匡斌 郭爱林 《实用医学杂志》 CAS 2007年第19期2972-2974,共3页
目的:探讨小发夹RNA载体介导抑制骨肉瘤细胞中表皮生长因子受体(EGFR)的表达和对骨肉瘤细胞增殖与凋亡的影响。方法:构建pSilencer-EGFR短发夹状小干扰RNA(siRNA)真核基因表达载体,采用脂质体介导的方法将其转染到骨肉瘤细胞中,用Wester... 目的:探讨小发夹RNA载体介导抑制骨肉瘤细胞中表皮生长因子受体(EGFR)的表达和对骨肉瘤细胞增殖与凋亡的影响。方法:构建pSilencer-EGFR短发夹状小干扰RNA(siRNA)真核基因表达载体,采用脂质体介导的方法将其转染到骨肉瘤细胞中,用Western印迹法、RT-PCR检测EGFR基因在骨肉瘤细胞中的表达;通过原位末端标记(TUNEL)法,DNA片段化检测观察其对骨肉瘤细胞凋亡的影响。结果:成功构建pSilencer-EGFR短发夹状siRNA真核基因表达载体,转染特异性小发夹RNA质粒表达载体的骨肉瘤细胞中EGFR基因表达显著抑制(60%)。与对照组比较,pSilencer-EGFR转染组骨肉瘤细胞培养48h后,DNA片段化检测出"DNA ladder"和TUNEL法显示细胞典型凋亡特征。结论:EGFR小发夹RNA质粒载体可显著抑制骨肉瘤细胞中EGFR基因的表达,促进骨肉瘤细胞凋亡,EGFR基因具有抑制凋亡的作用。 展开更多
关键词 骨肉瘤 RNA干扰 表皮生长因子受体 凋亡
在线阅读 下载PDF
RNA干扰下调不同肿瘤细胞表皮生长因子受体表达及其意义
4
作者 祝蓉 白莉 +1 位作者 白春学 张新 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2007年第4期278-282,共5页
背景与目的:表皮生长因子受体在多种上皮源性肿瘤中过表达,与肿瘤的发生、发展密切相关,是肿瘤治疗的重要靶点。本研究采用针对EGFR的小干扰RNA(siRNA),探讨其在不同类型肿瘤细胞A431、HeLa、SPC-A-1中的RNA干扰效应。方法:化学合成针对... 背景与目的:表皮生长因子受体在多种上皮源性肿瘤中过表达,与肿瘤的发生、发展密切相关,是肿瘤治疗的重要靶点。本研究采用针对EGFR的小干扰RNA(siRNA),探讨其在不同类型肿瘤细胞A431、HeLa、SPC-A-1中的RNA干扰效应。方法:化学合成针对EGFR的siRNA,转染A431、HeLa、SPC-A-1细胞,通过定量RT-PCR、免疫荧光染色和流式细胞仪检测EGFR表达;通过集落形成实验观察细胞集落形成能力,分析不同类型肿瘤细胞的RNA干扰效应。结果:转染siRNA-EGFR后,3种肿瘤细胞的EGFR表达均明显下调。在A431细胞,其mRNA水平下调73.9%,蛋白水平下调77.0%。在HeLa和SPC-A-1细胞,mRNA水平的下调分别为44.6%和57.7%,蛋白水平下调61.3%和65.2%。EGFR下调后细胞集落形成能力均出现抑制,A431、HeLa和SPC-A-1的集落形成抑制率分别为27.2%、53.9%和59.1%。结论:siRNA-EGFR可在不同类型肿瘤细胞中产生RNA干扰效应,抑制细胞集落形成能力。RNA干扰技术在开发广谱抗肿瘤靶向治疗药物中具有应用价值。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 RNA干扰 肿瘤靶向治疗
在线阅读 下载PDF
RNAi抑制鼻咽癌细胞表皮生长因子受体表达对细胞生长的影响 被引量:9
5
作者 翁德胜 吴正蓉 +1 位作者 王爽 丁彦青 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期71-74,共4页
目的利用RNAi技术抑制鼻咽癌细胞5-8F表皮生长因子受体(EGFR)表达,观察细胞生长变化,探讨EGFR与鼻咽癌发生发展之间的相关性。方法利用体外转录法合成EGFR特异性siRNA,将其瞬时转染5-8F,收集转染后细胞总RNA和蛋白,利用RT-PCR和Westernb... 目的利用RNAi技术抑制鼻咽癌细胞5-8F表皮生长因子受体(EGFR)表达,观察细胞生长变化,探讨EGFR与鼻咽癌发生发展之间的相关性。方法利用体外转录法合成EGFR特异性siRNA,将其瞬时转染5-8F,收集转染后细胞总RNA和蛋白,利用RT-PCR和Westernblot法测定EGFR表达水平的变化,并检测EGFR表达抑制后细胞生长速度和生长周期的变化。结果合成的3对siRNA中,有一对使EGFRmRNA表达下降67.5%,蛋白表达下降77%。EGFR表达抑制后5-8F生长速度减慢,并诱导细胞周期停止在G1期。结论RNAi沉默EGFR表达可抑制鼻咽癌细胞生长,并诱导癌细胞停止在G1期.RNAi可作为探索鼻咽癌发生发展机制和基因治疗的有效工具。 展开更多
关键词 RNA干扰 表皮生长因子受体 鼻咽癌 基因沉默
在线阅读 下载PDF
双位点小干扰RNA靶向抑制表皮生长因子受体促大肠癌细胞凋亡和5-氟尿嘧啶化疗增效的实验研究 被引量:1
6
作者 吴相柏 陶凯雄 王国斌 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期668-668,共1页
为观察针对单位点与双位点的RNA干扰技术抑制大肠癌LoVo细胞表皮生长因子受体(EGFR)的表达,诱导细胞凋亡以及对5-氟尿嘧啶(5-Fu)敏感性的差异。构建质粒表达载体pU6-EGFR-shRNA-1和pU6-EGFR-shRNA-2,脂质体转染人大肠癌LoVo细胞,... 为观察针对单位点与双位点的RNA干扰技术抑制大肠癌LoVo细胞表皮生长因子受体(EGFR)的表达,诱导细胞凋亡以及对5-氟尿嘧啶(5-Fu)敏感性的差异。构建质粒表达载体pU6-EGFR-shRNA-1和pU6-EGFR-shRNA-2,脂质体转染人大肠癌LoVo细胞,G418筛选4周,分5组:1组为LoVo细胞,2组为对照质粒载体HK,3组为pU6-EGFR-shRNA-1,4组为pU6-EGFR-shRNA-2,5组为pU6-EGFR-shRNA-1和pU6-EGFR-shRNA-2各半量,实时荧光定量PCR和Western blot检测mRNA和蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率,细胞增殖分析试剂CCK-8(Cell CountingKit-8)测定5-FU不同浓度和时间对LoVo细胞的抑制率和半数抑制浓度(IC50)。 展开更多
关键词 大肠癌LOVO细胞 表皮生长因子受体 5-氟尿嘧啶 干扰RNA 双位点 癌细胞凋亡 实验研究 化疗增效
在线阅读 下载PDF
靶向表皮生长因子受体psiRNA抑制人脑胶质瘤细胞系U251生长的体外研究 被引量:5
7
作者 韩磊 张安玲 +5 位作者 康春生 许鹏 王广秀 贾志凡 张春智 浦佩玉 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2008年第5期442-448,共7页
目的探讨靶向表皮生长因子受体(EGFR)RNA干扰(RNAi)技术抑制人脑胶质瘤细胞系U251EGFR表达后,在体外对细胞增殖活性和侵袭能力的抑制作用。方法应用流式细胞术、Annexin V法、MTT法、Matrigel细胞外基质生长实验和Transwell细胞侵袭实... 目的探讨靶向表皮生长因子受体(EGFR)RNA干扰(RNAi)技术抑制人脑胶质瘤细胞系U251EGFR表达后,在体外对细胞增殖活性和侵袭能力的抑制作用。方法应用流式细胞术、Annexin V法、MTT法、Matrigel细胞外基质生长实验和Transwell细胞侵袭实验评价由脂质体Lipofectamine 2000介导转染的人脑胶质瘤细胞系U251转染前后细胞增殖活性和侵袭能力的变化;Western blotting检测EGFR和PI3K/Akt信号转导通路中相关蛋白质的表达水平。结果与对照组和psiRNA-scr组比较,psiRNA-EGFR组EGFR以及PI3K/Akt信号转导通路中相关蛋白质表达水平降低(均P=0.000)。转染后,psiRNA-EGFR组细胞阻滞于G0和G1期,S期细胞数目减少(均P=0.000);其细胞凋亡率为(9.60±0.26)%,高于对照组和psiRNA-scr组(均P=0.000);自培养第2天其细胞增殖速率即呈下降趋势,且低于对照组和psiRNA-scr组(均P=0.001)。结论靶向表皮生长因子受体RNAi技术可以序列特异性地抑制人脑胶质瘤细胞系U251细胞表皮生长因子受体表达,在体外对U251细胞生长具有明显抑制作用。靶向表皮生长因子受体psiRNA基因治疗可能成为脑胶质瘤治疗的新策略。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 RNA 小分子干扰 受体 表皮生长因子 转染
在线阅读 下载PDF
RNAi技术抑制乳腺癌细胞表皮生长因子受体表达的在体实验研究 被引量:2
8
作者 吴伟东 方驰华 +1 位作者 杨正心 包佳巾 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期60-64,共5页
目的探讨采用体外化学合成的小干扰RNA(siRNA)结合阳离子脂质体是否能有效在体转染乳腺癌细胞,以期为RNAi的在体实验研究提供实验数据和理论依据。方法(1)建立裸鼠肿瘤动物模型,计算成瘤率。(2)体外转染乳腺癌细胞,常规动物接种,测量肿... 目的探讨采用体外化学合成的小干扰RNA(siRNA)结合阳离子脂质体是否能有效在体转染乳腺癌细胞,以期为RNAi的在体实验研究提供实验数据和理论依据。方法(1)建立裸鼠肿瘤动物模型,计算成瘤率。(2)体外转染乳腺癌细胞,常规动物接种,测量肿瘤体积和动物重量,计算肿瘤抑制率。(3)采用免疫组化和Western blotting技术测定肿瘤组织的表皮生长因子受体蛋白水平,采用Real-time PCR检测表皮生长因子受体基因水平,采用ELISA检测动物血清及肿瘤抽提蛋白中EGF含量。结果MDA-MB-231、ZR-75细胞成瘤率依次为30.00%、88.89%,MDA-MB-231细胞的成瘤能力明显弱于ZR-75细胞。ELISA检测结果证实dsRNA-表皮生长因子受体可将血清及肿瘤组织抽提蛋白中的EGF含量分别降低16.77%、12.59%。Real-time PCR结果表明dsRNA-表皮生长因子受体可将表皮生长因子受体基因表达下调21.05%。结论(1)采用体外化学合成的siRNA结合阳离子脂质体可有效在体转染乳腺癌细胞。(2)在体实验中RNAi效应持续的时间明显长于体外实验。(3)针对表皮生长因子受体基因序列设计的siRNA可作为极具开发前途的抗肿瘤新药,其在体实验中触发RNAi可能的作用机制尚需进一步深入探讨。 展开更多
关键词 RNA干扰 乳腺癌 表皮生长因子受体 干扰RNA 成瘤率 肿瘤抑制率
在线阅读 下载PDF
SiRNA-EGFR对人乳腺癌细胞表皮生长因子受体表达的影响 被引量:1
9
作者 吴伟东 方驰华 +1 位作者 杨正心 包佳巾 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1260-1263,共4页
目的探讨SiRNA-EGFR对人乳腺癌细胞乳腺癌表皮生长因子受体表达的影响。方法应用RT-PCR测定RNA干扰人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-453S、ZR-75和ZR-75-30后Hyase基因的mRNA的表达变化。结果 SiRNA-EGFR作用于表达不同水平透明质酸酶... 目的探讨SiRNA-EGFR对人乳腺癌细胞乳腺癌表皮生长因子受体表达的影响。方法应用RT-PCR测定RNA干扰人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-453S、ZR-75和ZR-75-30后Hyase基因的mRNA的表达变化。结果 SiRNA-EGFR作用于表达不同水平透明质酸酶的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231、MDA-MB-453S、ZR-75-30和ZR-75后能明显抑制其乳腺癌表皮生长因子受体的mRNA表达水平(P<0.05)。结论 SiRNA-EGFR作用于人乳腺癌细胞后能特异性抑制EGFR的mRNA的表达水平。 展开更多
关键词 人乳腺癌细胞 RNA干扰 表皮生长因子受体
在线阅读 下载PDF
表皮生长因子受体及其变异性质 被引量:1
10
作者 乐飞 周廷冲 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1989年第3期206-209,共4页
EGFR主要由三个结构区域组成,即EGF结合区域、跨膜区域和依赖EGF蛋白激酶区域。EGFR被激活后,不仅能使许多底物蛋白磷酸化,自身也发生磷酸化,这些磷酸化作用在信息传导中有重要作用。EGFR与EGF结合后,其复合体以胞饮方式内容形成受体小... EGFR主要由三个结构区域组成,即EGF结合区域、跨膜区域和依赖EGF蛋白激酶区域。EGFR被激活后,不仅能使许多底物蛋白磷酸化,自身也发生磷酸化,这些磷酸化作用在信息传导中有重要作用。EGFR与EGF结合后,其复合体以胞饮方式内容形成受体小体,除部分被降解外,大部分在高尔基GERL区加工后到达细胞核调节基因表达。本文通过对受体激活模型和用体外遗传变异方法对变异EGFR的研究阐述了EGFR的结构与功能的关系。 展开更多
关键词 表皮生长因子 受体 变异
在线阅读 下载PDF
靶向EGFR的干扰RNA对卵巢癌耐药细胞凋亡的影响 被引量:5
11
作者 张娇 陈爱平 +1 位作者 戚玉言 王斌 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期619-623,共5页
目的:探讨RNA干扰表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达对多药耐药卵巢癌细胞株SKOV3/DDP凋亡的影响。方法:构建携带EGFR小发夹干扰RNA(small hairpin RNA,shRNA)的重组表达载体(pEGFR-shR-NA),脂质体法转染... 目的:探讨RNA干扰表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达对多药耐药卵巢癌细胞株SKOV3/DDP凋亡的影响。方法:构建携带EGFR小发夹干扰RNA(small hairpin RNA,shRNA)的重组表达载体(pEGFR-shR-NA),脂质体法转染入SKOV3/DDP细胞,同时设未转染对照组和非特异性干扰质粒Ctrl-shRNA对照组。RT-PCR和免疫细胞化学法检测转染后SKOV3/DDP细胞内EGFR mRNA和蛋白的表达;流式细胞仪分析EGFR沉默后SKOV3/DDP细胞周期和凋亡率的变化。结果:与转染对照质粒组相比,转染pEGFR-shRNA组细胞EGFR mRNA和蛋白的表达明显受抑制(P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示:顺铂作用24 h后,pEGFR-shRNA转染组细胞周期分布发生明显改变,与对照组和Ctrl-siR-NA组相比,G0/G1期细胞比例和凋亡率明显增加(P<0.01),而S期细胞比例显著降低(P<0.01);凋亡率显著升高。结论:靶向EGFR的干扰RNA可抑制SKOV3/DDP细胞中EGFR的表达,调节耐药细胞周期,促进耐药细胞凋亡。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 RNA干扰 表皮生长因子受体 顺铂
在线阅读 下载PDF
RNA干扰抑制EGFR基因表达对子宫内膜癌细胞上皮间质转化的影响 被引量:3
12
作者 徐玮 王娟 +3 位作者 徐妍力 马莉 艾志红 滕银成 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期415-420,共6页
目的构建针对表皮生长因子受体(EGFR)的shRNA质粒载体,转染人子宫内膜癌Ishikawa细胞株,检测RNA干扰对抑制EGFR基因表达及子宫内膜癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法体外构建针对EGFR的shRNA质粒(pRNAT-EGFRshRNA),脂质体法转染Ishik... 目的构建针对表皮生长因子受体(EGFR)的shRNA质粒载体,转染人子宫内膜癌Ishikawa细胞株,检测RNA干扰对抑制EGFR基因表达及子宫内膜癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法体外构建针对EGFR的shRNA质粒(pRNAT-EGFRshRNA),脂质体法转染Ishikawa细胞。实验设阴性对照组(未经任何转染)、pRNAT-EGFRneg组(空白质粒载体)、pRNAT-EGFR1组、pRNAT-EGFR2组和pRNAT-EGFR3组。采用实时荧光定量RT-PCR和Western blotting技术检测EGFR mRNA及蛋白的表达变化,并检测转染前后Ishikawa细胞中EMT相关指标E-cadherin、α-catenin、N-cadherin和Vimentin的表达变化。结果pRNAT-EGFR2组和pRNAT-EGFR3组细胞EGFR mRNA和蛋白的表达量均明显低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);pRNAT-EGFR1组EGFR mRNA和蛋白的表达量与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。RNA干扰抑制EGFR基因表达后,与阴性对照组比较,pRNAT-EGFR2组和pRNAT-EGFR3组Ishikawa细胞上皮标志物E-cadherin和α-catenin的mRNA及蛋白表达水平均上调(P<0.05),间叶标志物N-cadherin和Vimentin的mRNA及蛋白表达水平则显著下调(P<0.01)。结论抑制EGFR基因表达可部分逆转子宫内膜癌细胞EMT相关基因的表达。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 RNA干扰 子宫内膜癌 上皮间质转化
在线阅读 下载PDF
扇贝(Chlamys farreri)多肽通过EGFR抑制受紫外线B(UVB)诱导的HaCaT细胞凋亡 被引量:4
13
作者 樊洁 王岩 +2 位作者 孙秀萍 韩彦弢 王春波 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期328-334,共7页
利用Hoechst 33258荧光染色法检测紫外线B(UVB)辐射诱导HaCaT细胞凋亡率。结果表明,扇贝多肽(Polypeptide from Chlamys farreri,PCF)可以剂量依赖性抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡;表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂AG1478能明显抑制UVB诱导的... 利用Hoechst 33258荧光染色法检测紫外线B(UVB)辐射诱导HaCaT细胞凋亡率。结果表明,扇贝多肽(Polypeptide from Chlamys farreri,PCF)可以剂量依赖性抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡;表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂AG1478能明显抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡。采用3’-RACE法构建EGFR的cDNA片段,克隆测序检测突变位点。结果表明,UVB照射后EGFR发生碱基突变A→G,A→G,T→C,G→A,G→A;预加入5.69mmol/L的PCF,产生部分抗突变作用,1,2,3突变位点处未发生碱基的突变。 展开更多
关键词 扇贝多(Polypeptide from CHLAMYS farreri PCF) 紫外线B(UVB) 表皮生长因子受体(EGFR) 基因突变 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
靶向EGFR基因RNA干扰对人卵巢癌SKOV_3细胞增殖的抑制作用 被引量:1
14
作者 郭启帅 黄曦 +1 位作者 吴永忠 李少林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第23期2338-2341,共4页
目的利用RNA干扰技术下调表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因的表达,观察其对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响。方法构建针对EGFR基因的siRNA真核表达载体,转染入卵巢癌SKOV3细胞中,并筛选稳定表达siRNA的转化克隆... 目的利用RNA干扰技术下调表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因的表达,观察其对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响。方法构建针对EGFR基因的siRNA真核表达载体,转染入卵巢癌SKOV3细胞中,并筛选稳定表达siRNA的转化克隆,RT-PCR及Western blot分别检测EGFR mRNA和蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,克隆形成实验及MTT法检测细胞克隆形成率及细胞体外的增殖情况。结果成功构建表达质粒pGenSil-HK、pGenSil-EGFR1和pGenSil-EGFR2,并转染SKOV3细胞,通过G418筛选后获得稳定转染克隆,RT-PCR及Western blot分析表明转染pGenSil-EGFR1、pGenSil-EGFR2后的细胞EGFR mRNA和蛋白表达均受到了明显抑制,EGFR mRNA抑制率分别为41.87%和68.07%,蛋白表达抑制率分别为45.21%和70.25%。与未转染组和pGenSil-HK组相比,pGenSil-EGFR2组细胞凋亡比例显著增加,G1期细胞增多,而S期细胞减少(P<0.05);转染pGenSil-HK组克隆形成率为(0.82±0.03),转染pGenSil-EGFR2组克隆形成率为(0.61±0.04),二者比较差异显著(P<0.05),MTT显示细胞培养36h后,pGenSil-EGFR2组的细胞生长均显著低于未转染组和转染pGenSil-HK组(P<0.05)。结论靶向EGFR基因RNA干扰能够阻抑卵巢癌SKOV3细胞中的EGFR表达,诱导细胞凋亡、调控细胞周期再分布、抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 RNA干扰 表皮生长因子受体 SKOV3细胞 细胞周期 凋亡
在线阅读 下载PDF
RNA干扰技术对SKOV3细胞EGFR表达的抑制作用 被引量:1
15
作者 戴岚 狄文 丁传伟 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期53-56,共4页
目的探讨RNA干扰(RNAi)技术对卵巢腺癌细胞株SKOV3表皮生长因子受体(EGFR)表达的抑制作用。方法体外化学合成EGFR序列特异性双链RNA(dsRNA),用lipofectamin 2000转染SKOV3细胞,采用RT-PCR和Western blotting技术检测EGFR mRNA和蛋白水... 目的探讨RNA干扰(RNAi)技术对卵巢腺癌细胞株SKOV3表皮生长因子受体(EGFR)表达的抑制作用。方法体外化学合成EGFR序列特异性双链RNA(dsRNA),用lipofectamin 2000转染SKOV3细胞,采用RT-PCR和Western blotting技术检测EGFR mRNA和蛋白水平的变化,通过水溶性四唑盐(WST-1)比色法检测细胞增殖力,采用细胞黏附和移动实验检测细胞体外黏附和移动能力,通过细胞侵袭重建基底膜实验检测细胞体外侵袭能力。结果序列特异性dsRNA-EGFR对SKOV3细胞EGFR mRNA和蛋白的抑制率分别为73.65%和58.94%。dsRNA-EGFR组在转染后24、48、72 h细胞增殖抑制率分别为22.54%、35.76%、31.07%;dsRNA-EGFR组在30 min和90 min黏附实验中的黏附率分别下降12.11%和18.66%;转染dsRNA-EGFR后细胞体外移动和侵袭能力的抑制率分别为25.47%和22.08%。结论化学合成的dsRNA可抑制卵巢癌SKOV3细胞EGFR表达,抑制细胞增殖、移动、黏附和侵袭力。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 RNA干扰 卵巢癌 侵袭转移
在线阅读 下载PDF
Fusion of Dual-targeting Peptides with MAP30 Promotes the Apoptosis of MDA-MB-231 Breast Cancer Cells
16
作者 YANG Yi-Xuan WANG Xin-Yi +5 位作者 CHEN Wei-Wei GAN Li SUN Yu LIN Tong ZHAO Wei-Chun ZHU Zhen-Hong 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第2期260-272,共13页
Momordica antiviral protein 30 kD(MAP30)is a type I ribosome-inactivating protein(RIP)with antibacterial,anti-HIV and antitumor activities but lacks the ability to target tumor cells.To increase its tumor-targeting ab... Momordica antiviral protein 30 kD(MAP30)is a type I ribosome-inactivating protein(RIP)with antibacterial,anti-HIV and antitumor activities but lacks the ability to target tumor cells.To increase its tumor-targeting ability,the arginine-glycine-aspartic(RGD)peptide and the epidermal growth factor receptor interference(EGFRi)peptide were fused with MAP30,which was named ELRL-MAP30.The efficiency of targeted therapy for triple-negative breast cancer(TNBC)MDA-MB-231 cells,which lack the expression of estrogen receptor(ER),Progesterone receptor(PgR)and human epidermal growth factor receptor-2(HER2),is limited.In this study,we focus on exploring the effect and mechanism of ELRL-MAP30 on TNBC MDA-MB-231 cells.First,we discovered that ELRL-MAP30 significantly inhibited the migration and invasion of MDA-MB-231 cells and induced MDA-MB-231 cell apoptosis.Moreover,ELRL-MAP30 treatment resulted in a significant increase in Bax expression and a decrease in Bcl-2 expression.Furthermore,ELRL-MAP30 triggered apoptosis via the Fak/EGFR/Erk and Ilk/Akt signaling pathways.In addition,recombinant ELRL-MAP30 can inhibit chicken embryonic angiogenesis,and also inhibit the tube formation ability of human umbilical vein endothelial cells(HUVECs),indicating its potential therapeutic effects on tumor angiogenesis.Collectively,these results indicate that ELRL-MAP30 has significant tumor-targeting properties in MDA-MB-231 cancer cells and reveals potential therapeutic effects on angiogenesis.These findings indicate the potential role of ELRL-MAP30 in the targeted treatment of the TNBC cell line MDA-MB-231. 展开更多
关键词 arginine-glycine-aspartic peptide(RGD) epidermal growth factor receptor interference peptide(EGFRi) momordica antiviral protein(MAP30) MDA-MB-231 cell tumor targeting APOPTOSIS
在线阅读 下载PDF
靶向EGFR的siRNA有效抑制小鼠肺癌移植瘤的生长 被引量:2
17
作者 汪本助 李艳 +2 位作者 张海燕 王喆 张必良 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期706-713,共8页
采用RNA干扰技术来研究靶向EGFR的siRNA对肺癌皮下移植瘤生长的影响.化学合成了3条针对EGFR的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转染不同的EGFR siRNA后,A549细胞(高表达EGFR)EGFR的mRNA和蛋白表达均有显著降低,其中EGFR siRNA_... 采用RNA干扰技术来研究靶向EGFR的siRNA对肺癌皮下移植瘤生长的影响.化学合成了3条针对EGFR的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),转染不同的EGFR siRNA后,A549细胞(高表达EGFR)EGFR的mRNA和蛋白表达均有显著降低,其中EGFR siRNA_1的沉默效果最为明显.转染EGFR siRNA_1后A549细胞的凋亡率明显增加,增殖活性明显降低.最后,利用稳定表达荧光素酶报告基因的人肺腺癌细胞株(A549-luc)建立裸鼠皮下移植瘤模型,采用活体动物体内光学成像系统实时检测以及通过检测肿瘤体积来检测对照组和EGFR siRNA_1给药组移植瘤的生长情况,结果发现EGFR siRNA_1治疗组肿瘤的生长速度较空白对照组和Notarget siRNA对照组明显变慢,说明干扰EGFR基因表达对肺癌皮下移植瘤的生长具有明显的抑制作用. 展开更多
关键词 RNA干扰 SIRNA A549细胞 表皮生长因子受体 活体动物体内光学成像系统 基因治疗
在线阅读 下载PDF
99mTc-GE11分子探针在荷人肺腺癌裸鼠体内分布及受体显像研究
18
作者 谭祖稳 吴梦雪 +3 位作者 李运洁 雷成明 邓婕 段东 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第14期1350-1356,共7页
目的制备靶向肺腺癌细胞跨膜表达蛋白表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的核素分子探针99mTc-GE11,鉴定其理化性质并探讨其在荷瘤裸鼠体内分布及显像情况。方法采用氯化亚锡氧化还原法对GE11进行99mTc标记,初步... 目的制备靶向肺腺癌细胞跨膜表达蛋白表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的核素分子探针99mTc-GE11,鉴定其理化性质并探讨其在荷瘤裸鼠体内分布及显像情况。方法采用氯化亚锡氧化还原法对GE11进行99mTc标记,初步鉴定其标记率、比活度、放化纯度及稳定性等,并观察多肽标记物在荷瘤裸鼠体内的生物分布及显像情况。结果 99mTc-GE11标记率为(93.12±0.83)%,比活度为(24.21±0.42)TBq/mmol。体外室温放置6、12 h后,其放化纯度仅下降了2.14%、3.11%。Sephadex G50柱层析后,其与血浆蛋白结合率为4.8%;与不同浓度半胱氨酸37℃温育1 h后,未结合99mTc含量无明显变化;脂/水分配系数lgP为(-1.87±0.05);荷瘤裸鼠体内生物分布及SPECT显像示:99mTc-GE11在血液、肾脏中的放射性清除迅速,肿瘤组织可以选择性浓聚99mTc-GE11,在注射1.0 h时,肿瘤/肌肉比值达到最大,且肿瘤组织显影最清晰。结论制备的99mTc-GE11小分子多肽探针理化特性理想,在荷人肺腺癌裸鼠模型中显像较好。 展开更多
关键词 肺腺癌 表皮生长因子受体 GE11 核素分子探针
在线阅读 下载PDF
血清HER-2/neu、TPS、CA15-3和TSGF联合检测在乳腺癌诊断中的价值 被引量:28
19
作者 蒋显勇 易艳军 +4 位作者 梁庄严 袁才佳 李木兰 邹明英 李邓君 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第24期4115-4117,共3页
目的:探究乳腺癌患者血清中人表皮生长因子受体2(HER-2/neu)、组织多肽特异性抗原(TPS)、糖类抗原15-3(CA15-3)和肿瘤特异性生长因子(TSGF)联合检测在乳腺癌诊断中的价值。方法 :采用化学发光免疫分析法检测48例乳腺癌患者、46例良性乳... 目的:探究乳腺癌患者血清中人表皮生长因子受体2(HER-2/neu)、组织多肽特异性抗原(TPS)、糖类抗原15-3(CA15-3)和肿瘤特异性生长因子(TSGF)联合检测在乳腺癌诊断中的价值。方法 :采用化学发光免疫分析法检测48例乳腺癌患者、46例良性乳腺疾病患者以及50例健康女性血清中HER-2/neu、TPS、CA15-3和TSGF水平。结果 :乳腺癌组HER-2/neu、TPS、CA15-3及TSGF水平均显著高于良性疾病组及健康对照组(P<0.01),而良性乳腺疾病组4项肿瘤标志物浓度水平与健康对照组比较均无统计学差异(P>0.05);HER-2/neu、TPS、CA15-3和TSGF联合检测灵敏度明显高于各单项检测灵敏度。结论:单项肿瘤标志物检测在乳腺癌诊断中的应用价值不高,而HER-2/neu、TPS、CA15-3和TSGF联合检测有助于提高乳腺癌的诊断灵敏度,对乳腺癌具有较高的诊断价值。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 人类表皮生长因子受体2 组织多特异性抗原 糖类抗原15-3 肿瘤特 异性生长因子:联合检测
在线阅读 下载PDF
靶向EGFR基因的siRNA表达载体构建及其生物学效应的研究 被引量:9
20
作者 白莉 祝蓉 +3 位作者 陈智鸿 白春学 高磊 张新 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第23期2307-2310,共4页
目的构建靶向表皮生长因子受体(EGFR)基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(pSi-EGFR),并观察其抑制人肺腺癌细胞株A549中EGFR基因表达的效果及生物学效应。方法利用Lipofectamine2000将构建的pSi-EGFR载体转入A549细胞中,应用实时定量荧光PC... 目的构建靶向表皮生长因子受体(EGFR)基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(pSi-EGFR),并观察其抑制人肺腺癌细胞株A549中EGFR基因表达的效果及生物学效应。方法利用Lipofectamine2000将构建的pSi-EGFR载体转入A549细胞中,应用实时定量荧光PCR、免疫荧光和流式细胞仪检测EGFR基因mRNA和蛋白水平的表达,并采用四甲基偶氮唑蓝显色法(MTT)、集落形成实验观察细胞生长变化。结果pSi-EGFR可显著抑制A549细胞中EGFR基因的表达;转染pSi-EGFR细胞生长抑制率为67.8%,集落形成抑制率为59·4%。结论pSi-EGFR载体能够在A549细胞中引发RNA干扰(RNAi)效应下调EGFR基因表达来抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 RNA干扰 肺腺癌 细胞生长 靶向EGFR基因 生物学效应
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部