期刊文献+
共找到92篇文章
< 1 2 5 >
每页显示 20 50 100
PCI对急性心肌梗死患者血小板生成素及受体基因水平的影响
1
作者 丁汀 马晓英 +4 位作者 王利波 江帆 陈兆军 蒋挺英 王应贵 《实用医学杂志》 CAS 2005年第15期1642-1643,共2页
目的:探讨冠状动脉介入治疗(percutaneouscoronoty intervention,PCI)对急性心肌梗死(AMI)患者血小板生成素(Tpo)及受体基因(C-mpLmRNA)水平的影响。方法:采用酶联免疫吸附法(ELLSA)和半定量逆转录聚合酶(RT-PCR)方法测定34例AMI患者Tpo... 目的:探讨冠状动脉介入治疗(percutaneouscoronoty intervention,PCI)对急性心肌梗死(AMI)患者血小板生成素(Tpo)及受体基因(C-mpLmRNA)水平的影响。方法:采用酶联免疫吸附法(ELLSA)和半定量逆转录聚合酶(RT-PCR)方法测定34例AMI患者Tpo及C-mpLmRNA水平,其中行PCI手术18例,16例未行介入治疗,比较两组各项指标。结果:与正常对照组比较,AMI患者血浆Tpo及C-mpLmRNA发病后逐渐升高,持续3~5d,24h左右最高,3~5d后已下降。发病时Tpo及C-mpLmRNA与心肌酶呈正相关。结论:Tpo及C-mpLmRNA与AMI发病正相关,可反映病程变化。介入治疗可引起Tpo及C-mpLmRNA水平增高。 展开更多
关键词 PCI 急性心肌梗死 血小板生成素 受体基因
在线阅读 下载PDF
麝香保心丸对多发性骨髓瘤血小板生成素及其受体水平的影响 被引量:4
2
作者 丁汀 金国美 +1 位作者 闫春兰 陈峪 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第B12期70-72,共3页
目的探讨麝香保心丸对多发性骨髓瘤合并冠心病患者血小板生成素(Thrombopoient)及受体基因(CMPLmRNA)的影响及其意义。方法34例多发性骨髓瘤合并冠心病患者随机分成麝香保心丸组(A组),安慰剂对照组(B组),另设立单纯冠心病组(C组)和正常... 目的探讨麝香保心丸对多发性骨髓瘤合并冠心病患者血小板生成素(Thrombopoient)及受体基因(CMPLmRNA)的影响及其意义。方法34例多发性骨髓瘤合并冠心病患者随机分成麝香保心丸组(A组),安慰剂对照组(B组),另设立单纯冠心病组(C组)和正常组(D组)为对照组。用药前和用药6周后,用夹心酶联免疫吸附法(ELLSA)和半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法检测TPO及Cmpl基因表达水平。结果A组和B组细胞TPO及CmplmRNA表达明显高于C组和D组(P<0.05);A组与B组无显著差异。结论麝香保心丸不影响多发性骨髓瘤的病理性血管新生。 展开更多
关键词 麝香保心丸 血小板生成素及受体基因 多发性骨髓瘤 冠心病
在线阅读 下载PDF
c-mpl原癌基因编码促血小板生成素受体
3
作者 郭树华 贺福初 吴祖泽 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第1期92-92,共1页
c-mpl原癌基因编码促血小板生成素受体郭树华,贺福初,吴祖泽(北京放射医学研究所,北京100850)c-mpl原癌基因是v-mpl(myeloProliferativeleukemiavirus,MPLV)的正常细... c-mpl原癌基因编码促血小板生成素受体郭树华,贺福初,吴祖泽(北京放射医学研究所,北京100850)c-mpl原癌基因是v-mpl(myeloProliferativeleukemiavirus,MPLV)的正常细胞的对应物.人的全长c-mplcD... 展开更多
关键词 原癌基因 C-MPL 血小板生成素 受体
在线阅读 下载PDF
TPO内含子Ⅴ可显著增强人血小板生成素基因在乳腺细胞中的表达 被引量:4
4
作者 宁云山 李妍 +3 位作者 周明乾 周宏伟 王小宁 曾溢滔 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期537-541,共5页
人血小板生成素(thrombopoietin,TPO)基因组包括6个外显子和5个内含子,内含子在其表达过程中可能扮演着重要作用.为了研究人TPO基因组中不同内含子对TPO表达的影响,构建可在转基因动物乳腺中高水平表达人TPO的乳腺特异性表达质粒.本研究... 人血小板生成素(thrombopoietin,TPO)基因组包括6个外显子和5个内含子,内含子在其表达过程中可能扮演着重要作用.为了研究人TPO基因组中不同内含子对TPO表达的影响,构建可在转基因动物乳腺中高水平表达人TPO的乳腺特异性表达质粒.本研究以65kb的山羊β-casein启动子为调控元件,构建了包括人TPOcDNA(pTPOA)、TPOintronⅠ-TPOcDNA(pTPOB)、ΔTPOintronⅠ-TPOcDNA(pTPOC)、TPOintronⅤ-TPOcDNA(pTPOD)和TPOgDNA(pTPOE)等5种TPO乳腺特异性表达质粒,并在人乳腺细胞HC-11细胞上进行了瞬间表达研究.在转染48h后,通过双抗体夹心的ELISA方法定量分析上述质粒在HC-11细胞上的表达水平.结果表明,含有内含子Ⅴ的pTPOD的表达量最高,而含有整个基因组TPO的pTPOE表达水平最低.为了进一步证实pTPOD可在乳腺细胞中高水平表达,将pTPOD经脂质体包埋后注射到泌乳期山羊的乳腺中.结果显示,在山羊乳汁中可连续14d检测到人TPO的表达.上述实验证实,人TPO基因组中的内含子V可显著提高TPO在HC-11细胞内的表达水平,并提示内含子Ⅴ中可能含有特殊的调控序列. 展开更多
关键词 血小板生成素 内含子 基因表达 山羊β-casein
在线阅读 下载PDF
内含子和5'非翻译区对人血小板生成素基因表达的影响 被引量:3
5
作者 宁云山 李妍 +3 位作者 周明乾 李明 曾溢滔 王小宁 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第9期991-994,共4页
目的观察人血小板生成素(TPO)基因组中内含子及5'非翻译区对TPO表达的影响。方法分别构建含TPO基因组中不同内含子的各类TPO 真核表达质粒,在cos-1细胞中进行了瞬间表达,并采用高灵敏定量试剂盒检测培养上清中人血小板生成素的含量... 目的观察人血小板生成素(TPO)基因组中内含子及5'非翻译区对TPO表达的影响。方法分别构建含TPO基因组中不同内含子的各类TPO 真核表达质粒,在cos-1细胞中进行了瞬间表达,并采用高灵敏定量试剂盒检测培养上清中人血小板生成素的含量。结果在转染48 h后,各类TPO重组质粒在cos-1细胞中表达顺序为:TPO intron v> TPOcDNA>ΔTPO intron I> TPO intron I> TPO gDNA。结论在TPO基因组中,最后一个内含子可显著提高TPO的表达水平,表明其可能含有特殊的增强序列;同时进一步证实,在TPO基因组中可能存在抑制TPO高水平表达的结构元件,造成TPO基因组在细胞中不表达或低水平表达。 展开更多
关键词 血小板生成素 内含子 基因表达
在线阅读 下载PDF
分子克隆人血小板生成素基因 被引量:6
6
作者 侯纬敏 陆爱丽 +1 位作者 岱美茹 董冬生 《北京医科大学学报》 CSCD 1996年第1期1-3,共3页
目的:克隆人血小板生成素基因,方法:采用RT一PCR的方法。结果:从人胎肝中克隆出全长的血小板生成素(TPO)基因,并亚克隆至PUCll8载体中。该cDNA全长1062BP,编码353个氨基酸,经序列测定与Bartl... 目的:克隆人血小板生成素基因,方法:采用RT一PCR的方法。结果:从人胎肝中克隆出全长的血小板生成素(TPO)基因,并亚克隆至PUCll8载体中。该cDNA全长1062BP,编码353个氨基酸,经序列测定与Bartley等人报道的完全一致[1]。结论:已获得人血小板生成素基因,此项工作为基因工程生产TPO奠定了良好基础。 展开更多
关键词 分子克隆 基因 血小板生成素
在线阅读 下载PDF
人血小板生成素基因cDNA和基因组DNA的克隆和序列测定 被引量:2
7
作者 宁云山 周宏伟 +4 位作者 周明乾 陈泽洪 方向东 富宁 王小宁 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第12期881-884,共4页
目的研究内含子和5'非翻译区对血小板生成素(TPO)基因表达的影响.方法以中国人胎肝mRNA为模板,应用RT-PCR和长距离PCR(LD-PCR)技术扩增了约1.1kb的全长人TPO cDNA.6.2 kb的TPO基因组DNA和TPO基因组中的内含子I,内含子Ⅱ~Ⅳ和内含子Ⅴ... 目的研究内含子和5'非翻译区对血小板生成素(TPO)基因表达的影响.方法以中国人胎肝mRNA为模板,应用RT-PCR和长距离PCR(LD-PCR)技术扩增了约1.1kb的全长人TPO cDNA.6.2 kb的TPO基因组DNA和TPO基因组中的内含子I,内含子Ⅱ~Ⅳ和内含子Ⅴ.结果全序列分析表明,全部的编码序列、所有的内含子/外显子剪切部位序列同已知一致,个别差异发生在内含子中.结论通过PCR扩增技术,成功地从中国人胎肝组织中克隆了全长人TPO cDNA、TPO基因组DNA及其全部的内含子. 展开更多
关键词 血小板生成素 基因组DNA 内含子 聚合酶链反应 PCR 克隆 序列分析
在线阅读 下载PDF
血小板生成素基因的克隆及在原核细胞的表达 被引量:1
8
作者 王怀宇 刘陕西 +1 位作者 郑树 陈念祖 《西安医科大学学报》 CAS CSCD 2000年第6期509-511,共3页
目的 克隆人血小板生成素 (hTPO)基因 ,并使其在原核细胞中获得表达。方法 先从人胚胎肝脏中提取总RNA ,进行RT -PCR获得编码氨基端 1 95个氨基酸残基的hTPO1 95cDNA。将该片段亚克隆至pGEM -Teasy克隆质粒中 ,以双脱氧链末端终止法... 目的 克隆人血小板生成素 (hTPO)基因 ,并使其在原核细胞中获得表达。方法 先从人胚胎肝脏中提取总RNA ,进行RT -PCR获得编码氨基端 1 95个氨基酸残基的hTPO1 95cDNA。将该片段亚克隆至pGEM -Teasy克隆质粒中 ,以双脱氧链末端终止法对克隆质粒直接测序。接着将hTPO1 95cDNA插入到原核表达质粒 pET2 8-a中 ,转化大肠杆菌BLR2 1 (DE3) ,进行诱导表达 ,以SDS -PAGE方法及免疫印迹法进行检测。结果 得到的hTPO1 95cDNA与文献报道的序列完全一致。经诱导后hTPO基因在大肠杆菌中获得表达 ,目的蛋白占总菌体蛋白约 1 0 % ,以免疫印迹法证实表达产物正确。结论 得到hTPO1 95cDNA ,并在原核细胞中获得表达 ,得到截短形式的rhT PO1 95。 展开更多
关键词 血小板生成素 基因表达 分子克隆 血小板减少
在线阅读 下载PDF
细胞因子对血小板生成素及其受体的调控
9
作者 张晓泉 唐军民 +4 位作者 冯军 陆爱丽 侯纬敏 王申五 王德炳 《北京医科大学学报》 CSCD 1998年第5期392-394,共3页
目的:探讨细胞因子对血小板生成素(thrombopoietin,TPO)及其受体表达水平的调控方式。方法:Feulgen染色结合图像分析测定HEL细胞DNA含量的变化,细胞传感器检测TPO与其受体MPL的特异结合,非... 目的:探讨细胞因子对血小板生成素(thrombopoietin,TPO)及其受体表达水平的调控方式。方法:Feulgen染色结合图像分析测定HEL细胞DNA含量的变化,细胞传感器检测TPO与其受体MPL的特异结合,非放射性同位素细胞原位杂交法检测cmpl,tpomRNA。结果:rhTPO使cmplmRNA下调,IL3使cmplmRNA上调,EPO(erythropoietin)使cmplmRNA下调;未发现rhTPO、IL3、GMCSF、EPO影响tpomRNA的转录。 展开更多
关键词 血小板生成素 细胞因子 受体 调控 造血细胞
在线阅读 下载PDF
血小板生成素基因在体内的表达及对造血祖细胞增殖活性的影响 被引量:5
10
作者 赵建增 刘丽 +1 位作者 陈惠仁 梅英杰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期117-121,共5页
探讨了从肌肉组织植入的人血小板生成素(TPO)基因在小鼠体内的表达规律,以及对造血祖细胞增殖活性的影响.基因在导入后的24小时内就开始转录,先于血小板、血液TPO浓度、及造血祖细胞的变化.所表达的TPO在血液中的聚积... 探讨了从肌肉组织植入的人血小板生成素(TPO)基因在小鼠体内的表达规律,以及对造血祖细胞增殖活性的影响.基因在导入后的24小时内就开始转录,先于血小板、血液TPO浓度、及造血祖细胞的变化.所表达的TPO在血液中的聚积可持续4周以上.巨核祖细胞,粒系祖细胞都出现2周左右的增殖增长,长于血小板计数的升高,但红系祖细胞的变化不明显.这些结果显示,基因治疗过程中血小板计数等变化源于TPO的表达及刺激,而在此期间一些调控机制被激活,对血小板形成的平衡发挥作用. 展开更多
关键词 血小板生成素 基因治疗 造血祖细胞 细胞增殖
在线阅读 下载PDF
血小板生成素及其受体共表达的意义 被引量:2
11
作者 张晓泉 杨耀明 +1 位作者 王申五 王德炳 《北京医科大学学报》 CSCD 1998年第2期184-184,共1页
血小板生成素及其受体共表达的意义张晓泉杨耀明王申五王德炳(北京医科大学人民医院血液病研究所,北京100044)血小板生成素(thrombopoietin,TPO)是生理性血小板生成的调节因子[1,2]。TPO分布很广... 血小板生成素及其受体共表达的意义张晓泉杨耀明王申五王德炳(北京医科大学人民医院血液病研究所,北京100044)血小板生成素(thrombopoietin,TPO)是生理性血小板生成的调节因子[1,2]。TPO分布很广泛,而其受体MPL分布仅限于CD3... 展开更多
关键词 血小板生成素 受体 表达
在线阅读 下载PDF
人血小板生成素基因的克隆及CHO稳定细胞系的建立 被引量:1
12
作者 马倩倩 宋玲玲 +3 位作者 王红梅 方永志 王立群 何洪彬 《家畜生态学报》 北大核心 2013年第2期15-18,共4页
以人肝cDNA为模板克隆了人血小板生成素(Human Thrombopoietin,hTPO)基因,利用基因重组技术构建了带有新霉素抗性基因(neo)筛选标记的pcDNA3.1(+)-hTPO真核表达载体,将重组质粒瞬时转染293T细胞,用鼠抗人TPO单抗Western blot检测TPO蛋... 以人肝cDNA为模板克隆了人血小板生成素(Human Thrombopoietin,hTPO)基因,利用基因重组技术构建了带有新霉素抗性基因(neo)筛选标记的pcDNA3.1(+)-hTPO真核表达载体,将重组质粒瞬时转染293T细胞,用鼠抗人TPO单抗Western blot检测TPO蛋白的瞬时表达;再将重组质粒转染中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO),应用400μg/mL的G418筛选克隆,经PCR及Western blot验证,获得了3株hTPO蛋白表达水平不同的CHO细胞系,为获得大量蛋白并进行活性功能试验及临床应用奠定基础。 展开更多
关键词 血小板生成素 基因克隆 CHO稳定细胞系 WESTERN BLOT
在线阅读 下载PDF
含重组人血小板生成素基因的小鼠成纤维细胞的克隆筛选与鉴定 被引量:3
13
作者 韩安平 陆爱丽 +2 位作者 王申五 侯纬敏 王德炳 《北京医科大学学报》 CSCD 1999年第2期110-112,123,共4页
获取稳定表达重组人血小板生成素的NIH3T3成纤维细胞克隆,为开展成纤维细胞介导的TPO基因治疗研究提供细胞学基础。方法:以重组人TPOcDNA为目的基因,构建真核细胞表达重组体pcDNA3/TPO,脂质体将其转染于... 获取稳定表达重组人血小板生成素的NIH3T3成纤维细胞克隆,为开展成纤维细胞介导的TPO基因治疗研究提供细胞学基础。方法:以重组人TPOcDNA为目的基因,构建真核细胞表达重组体pcDNA3/TPO,脂质体将其转染于NIH3T3细胞,经G418筛选,获得稳定表达重组人TPO的细胞克隆,应用PCR,RT-PCR及Western印迹等技术鉴定目的基因的导入及表达。 展开更多
关键词 血小板生成素 成纤维细胞 基因表达 克隆 筛选
在线阅读 下载PDF
重组人血小板生成素基因在COS-7细胞及在小鼠体内的转移与表达
14
作者 臧维苹 魏旭东 +3 位作者 伏爽 王申五 汤健 王德炳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第1期14-17,共4页
为了观察重组血小板生成素 (thrombopoietin ,TPO)基因在COS 7细胞及在小鼠体内的表达 ,应用DNA重组技术构建了含TPO基因的真核表达质粒 pcd2 TPO ,用脂质体法将其转染COS 7细胞 ,用裸质粒DNA直接注射加电脉冲的方法将 pcd2 TPO质粒... 为了观察重组血小板生成素 (thrombopoietin ,TPO)基因在COS 7细胞及在小鼠体内的表达 ,应用DNA重组技术构建了含TPO基因的真核表达质粒 pcd2 TPO ,用脂质体法将其转染COS 7细胞 ,用裸质粒DNA直接注射加电脉冲的方法将 pcd2 TPO质粒转移到小鼠骨骼肌中。用RT PCR及ELISA法检测到TPO基因在COS 7细胞的瞬时表达 ,MTT法显示其有刺激TPO依赖细胞系增殖的活性。RT PCR及免疫组织化学染色可检测到TPO基因在转基因小鼠骨骼肌的表达 ,ELISA法定量检测转基因组小鼠血清TPO浓度为 (1185± 2 64)ng L ,明显高于正常小鼠的TPO浓度 (2 5 0± 76)ng L。本实验实现了TPO基因在小鼠体内和COS 7细胞的转移 。 展开更多
关键词 血小板生成素 COS-7细胞 基因转移 基因表达
在线阅读 下载PDF
RevTet-On系统调控血小板生成素基因表达的研究
15
作者 魏旭东 伏爽 +3 位作者 藏维平 武莎莎 王申五 王德炳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期241-244,共4页
本研究应用RevTet On基因表达系统 ,通过四环素衍生物强力霉素 (doxcycline ,Dox)调控血小板生成素 (TPO)基因在NIH3T3细胞中的表达。首先应用基因重组技术构建含TPO基因的重组质粒 pRevTRE/TPO ,然后将RevTet On基因调控系统的pRevTet... 本研究应用RevTet On基因表达系统 ,通过四环素衍生物强力霉素 (doxcycline ,Dox)调控血小板生成素 (TPO)基因在NIH3T3细胞中的表达。首先应用基因重组技术构建含TPO基因的重组质粒 pRevTRE/TPO ,然后将RevTet On基因调控系统的pRevTet On和 pRevTRE/TPO分别转染PT67细胞 ,从而包装RevTet On和RevTRE/TPO重组逆转录病毒 ,同时将此两种病毒感染NIH3T3细胞 ,建立整合入RevTet On和RevTRE/TPO逆转录病毒的阳性细胞株 (RevTet On3T3/TPO)。通过Dox调节TPO基因在此细胞株中表达 ,培养基中加入 2mg/LDox或不加Dox ,然后用RT PCR ,Western印迹和ELISA方法检测TPO基因表达情况。结果发现 ,RevTet On3T3/TPO当培养基中不加Dox时用RT PCR和Western印迹检测未见TPO表达 ,用ELISA检测表达TPO量低 ;在培养基中加入Dox时 ,RT PCR和Western印迹检测可见TPO表达 ,且TPO表达量高 ,为不加Dox时的 91倍。本实验表明 ,通过建立逆转录病毒整合的NIH3T3细胞株 ,利用四环素及其衍生物Dox调节TPO基因的表达 。 展开更多
关键词 RevTet-On系统 血小板生成素 基因表达 NIH3T3细胞
在线阅读 下载PDF
血小板生成素信号通路的分子机制及对多种细胞的作用 被引量:8
16
作者 肖彬 叶洁瑜 +1 位作者 徐月 杨默 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期254-257,共4页
血小板生成素(TPO)是调控巨核细胞增殖、分化和血小板生成的特异性生长因子,同时对早期造血也具有重要的调节作用。研究已经证明,TPO通过与其受体c-mpl结合并激活多种信号通路从而发挥其生物学作用。这些信号通路主要有Jak/STAT,PI3K/Ak... 血小板生成素(TPO)是调控巨核细胞增殖、分化和血小板生成的特异性生长因子,同时对早期造血也具有重要的调节作用。研究已经证明,TPO通过与其受体c-mpl结合并激活多种信号通路从而发挥其生物学作用。这些信号通路主要有Jak/STAT,PI3K/Akt,Ras/MAPK等。这些信号通路被激活后可以改变一系列下游信号分子的表达水平,例如β-链蛋白、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、骨形态发生蛋白和同源异型框蛋白等。这些信号分子与TPO的生物学效应密切相关。近年来,TPO在体内其他组织和细胞,例如心肌细胞、神经元、血管内皮细胞、成骨细胞和卵巢等组织的作用也受到了关注。本文从TPO生物学作用的分子机制及其对多种细胞的作用进行综述。 展开更多
关键词 血小板生成素 c-mpl受体 信号通路 神经细胞 心肌细胞
在线阅读 下载PDF
黄体生成素受体基因在牦牛发情周期不同阶段生殖系统中的表达模式 被引量:3
17
作者 胡威 崔燕 +4 位作者 潘阳阳 李谷月 何翃闳 熊力 余四九 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期232-237,共6页
旨在检测黄体生成素受体(Luteinizing hormone receptor,LHR)基因在牦牛发情周期不同阶段生殖系统中的表达。实验选取青海健康的处于卵泡期和黄体期的2岁龄雌性牦牛各3头,根据黄牛LHR基因序列5'端和3'端的保守序列设计特异性引... 旨在检测黄体生成素受体(Luteinizing hormone receptor,LHR)基因在牦牛发情周期不同阶段生殖系统中的表达。实验选取青海健康的处于卵泡期和黄体期的2岁龄雌性牦牛各3头,根据黄牛LHR基因序列5'端和3'端的保守序列设计特异性引物,利用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)法分析牦牛发情周期不同阶段,生殖系统中LHR基因的相对表达量。结果显示,LHR基因在牦牛发情周期不同阶段生殖系统中的表达量存在差异,卵巢和输卵管中卵泡期LHR基因的表达量高于黄体期,黄体期子宫中LHR基因的表达量高于卵泡期。研究表明牦牛在发情周期不同阶段生殖系统中LHR基因的表达量存在差异,提示LHR在牦牛的繁殖过程中对生殖系统具有重要的调节作用。 展开更多
关键词 牦牛 黄体生成素受体 生殖系统 实时荧光定量PCR 基因表达
在线阅读 下载PDF
TD-3细胞株体外检测血小板生成素生物活性的方法 被引量:4
18
作者 宋海峰 汤仲明 刘秀文 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期154-157,共4页
为建立体外检测血小板生成素(thrombopoietin,Tpo)生物活性的生物检定方法,采用MTT法观察了转染Mpl受体基因的TD-3细胞株依赖于Tpo浓度的增殖特性。通过观察实验条件对增殖的影响获得了最佳实验条件,比较了TD-3细胞对10种与巨核-血小板... 为建立体外检测血小板生成素(thrombopoietin,Tpo)生物活性的生物检定方法,采用MTT法观察了转染Mpl受体基因的TD-3细胞株依赖于Tpo浓度的增殖特性。通过观察实验条件对增殖的影响获得了最佳实验条件,比较了TD-3细胞对10种与巨核-血小板系造血相关的细胞因子的反应,表明该细胞株仅对Tpo和鼠白细胞介素3(mIL-3)有浓度依赖性的增殖反应,对其它细胞因子均无反应,表现出高度的选择性。检测Tpo的ED_(50)为1-3ng/ml,与文献报道检测Tpo生物活性的MO7e细胞株相近。以上特征表明该细胞株可作为检测Tpo生物活性的工具。 展开更多
关键词 TD-3细胞株 血小板生成素 生物活性检定 Mpl受体
在线阅读 下载PDF
重组人血小板生成素在大肠杆菌中表达的研究 被引量:3
19
作者 赵东 卢柏松 +2 位作者 陈琳 柳晓兰 黄培堂 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第1期19-23,共5页
采用化学法全合成了编码人血小板生成素(thrombopoietin,TPO)成熟肽N端153氨基酸的基因序列,构建基于该合成基因的表达质粒,结果以谷胱甘肽转硫酶-TPO153(GST-TPO153)融合蛋白的方式获得... 采用化学法全合成了编码人血小板生成素(thrombopoietin,TPO)成熟肽N端153氨基酸的基因序列,构建基于该合成基因的表达质粒,结果以谷胱甘肽转硫酶-TPO153(GST-TPO153)融合蛋白的方式获得了占全菌蛋白40%的高效表达.进一步采用PCR方法分别对TPO合成基因及TPOcDNA的翻译起始区(TIR)序列进行定点突变,以降低这一区域的G-C含量.将突变序列分别插入到pBV220表达载体中,重组质粒在转化大肠杆菌JM109后,均获得了表达,其中TIR区突变后的合成基因表达产物约占全菌蛋白的15%.为研究基因下游结构对表达的影响,在不改变氨基酸组成的基础上,构建了TPO合成基因与TPOcDNA的杂合序列表达质粒.研究结果表明翻译起始效率是影响rh-TPO在大肠杆菌中表达的重要因素之一,同时基因下游序列的组成对表达水平也会产生影响. 展开更多
关键词 血小板生成素 大肠杆菌 基因表达
在线阅读 下载PDF
重组人血小板生成素对人红白血病HEL细胞增殖的影响 被引量:1
20
作者 石小玉 李文林 +3 位作者 熊丽霞 关华凤 龙飞 章克萍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1998年第1期11-13,共3页
为了进一步阐明血小板生成素(thrombopoietin,Tpo)的生物学作用,我们研究了rhTpo(recombinant human Tpo)对人红白血病(human erythroleukemia,HEL)细胞增殖的影响。采用血浆凝块集落培养法和5-溴-2’-脱氧尿核苷(5-BrdU)掺入HEL细胞DNA... 为了进一步阐明血小板生成素(thrombopoietin,Tpo)的生物学作用,我们研究了rhTpo(recombinant human Tpo)对人红白血病(human erythroleukemia,HEL)细胞增殖的影响。采用血浆凝块集落培养法和5-溴-2’-脱氧尿核苷(5-BrdU)掺入HEL细胞DNA-ELISA法。培养基中加入rhTpo,HEL细胞集落数量和吸光度值明显高于未加rhTPo对照组。当rhTPo浓度为10,50,100,200ng/ml时,实验组集落数分别是对照组集落数的1.5,2.07,2.34,2.46倍;实验组A值分别是对照组A值的1.28,1.84,2.25,2.31倍。研究结果表明,rhTpo促进HEL细胞增殖和DNA合成。 展开更多
关键词 血小板生成素 HEL细胞 细胞增殖 c-mpl基因
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 5 下一页 到第
使用帮助 返回顶部