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甘蔗DELLA蛋白GAI基因的蛋白表达及纯化
1
作者
方金兰
柴哲
+1 位作者
陈保善
张木清
《中国糖料》
2020年第1期1-5,共5页
赤霉素是开花植物生长发育过程中一个重要的激素,调控种子萌发、茎伸长、叶片扩张、花器官发育,参与各种生物胁迫等多种途径;DELLA蛋白是赤霉素信号途径的抑制因子,DELLA蛋白通过与其他蛋白互作进行相关调控。为研究甘蔗蛋白调控机制,...
赤霉素是开花植物生长发育过程中一个重要的激素,调控种子萌发、茎伸长、叶片扩张、花器官发育,参与各种生物胁迫等多种途径;DELLA蛋白是赤霉素信号途径的抑制因子,DELLA蛋白通过与其他蛋白互作进行相关调控。为研究甘蔗蛋白调控机制,本研究利用原核表达技术体外诱导进行表达。结果表明,ScGAI蛋白全长不表达,但ScGAI-C在pET-28a(+MBP)中能够有效表达,大量诱导蛋白表达后经镍柱纯化,Western blot分析验证ScGAI蛋白被成功诱导出来。
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关键词
甘蔗
DELLA
蛋白
ScGAI基因
蛋白表达及纯化
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职称材料
粗糙脉孢菌ERG-11蛋白抗原的原核表达、纯化及其多克隆抗体制备
被引量：
2
2
作者
刘雁霞
李少杰
樊振川
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第9期216-222,共7页
构建p ET-28a(+)-ERG-11重组质粒,表达6×His-ERG-11融合蛋白,制备ERG-11多克隆抗体。采用PCR技术扩增目的片段,插入p ET-28a(+)原核表达载体,并转入E.coli BL21(DE3)感受态表达融合蛋白,融合蛋白经亲和纯化及分子筛纯化后免疫新西...
构建p ET-28a(+)-ERG-11重组质粒,表达6×His-ERG-11融合蛋白,制备ERG-11多克隆抗体。采用PCR技术扩增目的片段,插入p ET-28a(+)原核表达载体,并转入E.coli BL21(DE3)感受态表达融合蛋白,融合蛋白经亲和纯化及分子筛纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,取血清后,采用间接ELISA法和Western blot法检测多克隆抗体的效价及特异性。成功构建了p ET-28a(+)-ERG-11表达载体,SDS-PAGE电泳显示成功诱导出以包涵体形式存在的6×His-ERG-11融合蛋白,两步纯化后得到纯度较高的抗原,间接ELISA法显示制备的多克隆抗体效价达到1∶512 000,Western blot显示具有较高特异性。成功实现了粗超脉孢菌ERG-11蛋白的原核表达,制备出一支兔抗粗超脉孢菌ERG-11的多克隆抗体。
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关键词
粗超脉孢菌ERG-11基因
克隆
蛋白表达及纯化
多克隆抗体
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职称材料
题名
甘蔗DELLA蛋白GAI基因的蛋白表达及纯化
1
作者
方金兰
柴哲
陈保善
张木清
机构
广西大学生命科学与技术学院
亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室
广西生物学重点实验室
出处
《中国糖料》
2020年第1期1-5,共5页
基金
国家自然科学基金“机械收获甘蔗品种的表型组学分析及其选育”(3166100105)
广西重大科技项目“甘蔗关键共性技术的研发与产业化示范”(桂科AD17129002)联合资助
文摘
赤霉素是开花植物生长发育过程中一个重要的激素,调控种子萌发、茎伸长、叶片扩张、花器官发育,参与各种生物胁迫等多种途径;DELLA蛋白是赤霉素信号途径的抑制因子,DELLA蛋白通过与其他蛋白互作进行相关调控。为研究甘蔗蛋白调控机制,本研究利用原核表达技术体外诱导进行表达。结果表明,ScGAI蛋白全长不表达,但ScGAI-C在pET-28a(+MBP)中能够有效表达,大量诱导蛋白表达后经镍柱纯化,Western blot分析验证ScGAI蛋白被成功诱导出来。
关键词
甘蔗
DELLA
蛋白
ScGAI基因
蛋白表达及纯化
Keywords
sugarcane
DELLA protein
ScGAI gene
protein expression and purification
分类号
S566.1 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
粗糙脉孢菌ERG-11蛋白抗原的原核表达、纯化及其多克隆抗体制备
被引量：
2
2
作者
刘雁霞
李少杰
樊振川
机构
天津科技大学大健康生物技术研究所天津市大健康生物技术国际联合研究中心天津科技大学食品工程与生物技术学院
中国科学院微生物研究所真菌学国家重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第9期216-222,共7页
基金
国际遗传工程与生物技术中心联合研究项目(CRP/CHN15-01)
文摘
构建p ET-28a(+)-ERG-11重组质粒,表达6×His-ERG-11融合蛋白,制备ERG-11多克隆抗体。采用PCR技术扩增目的片段,插入p ET-28a(+)原核表达载体,并转入E.coli BL21(DE3)感受态表达融合蛋白,融合蛋白经亲和纯化及分子筛纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,取血清后,采用间接ELISA法和Western blot法检测多克隆抗体的效价及特异性。成功构建了p ET-28a(+)-ERG-11表达载体,SDS-PAGE电泳显示成功诱导出以包涵体形式存在的6×His-ERG-11融合蛋白,两步纯化后得到纯度较高的抗原,间接ELISA法显示制备的多克隆抗体效价达到1∶512 000,Western blot显示具有较高特异性。成功实现了粗超脉孢菌ERG-11蛋白的原核表达,制备出一支兔抗粗超脉孢菌ERG-11的多克隆抗体。
关键词
粗超脉孢菌ERG-11基因
克隆
蛋白表达及纯化
多克隆抗体
Keywords
Neurospora crassa ERG-11
cloning
protein expression and purification
polyclonal antibody
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
甘蔗DELLA蛋白GAI基因的蛋白表达及纯化
方金兰
柴哲
陈保善
张木清
《中国糖料》
2020
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
粗糙脉孢菌ERG-11蛋白抗原的原核表达、纯化及其多克隆抗体制备
刘雁霞
李少杰
樊振川
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
2
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