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流体剪应力对人脐静脉内皮细胞葡萄糖调节蛋白78和C/EBP同源蛋白表达的影响
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作者 张森 王先伟 +3 位作者 黄家明 张昊然 李梅 陈东 《中国脑血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期388-395,共8页
目的探索流体剪应力对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)表达的影响。方法以HUVECs作为实验细胞,设计并构建流体动力学模拟实验系统,控制流体动力学模拟实验系统中灌流液的流速,以实现对实验细胞... 目的探索流体剪应力对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)表达的影响。方法以HUVECs作为实验细胞,设计并构建流体动力学模拟实验系统,控制流体动力学模拟实验系统中灌流液的流速,以实现对实验细胞施加不同的流体剪应力。按实验细胞在实验系统中所承受的不同流体剪应力,将实验细胞分为低剪应力组(A组;0.4 Pa)、中剪应力组(B组;0.8 Pa)和高剪应力组(C组;1.2 Pa)。每组HUVECs包含3个细胞玻片,每个玻片经实验系统灌流液反复循环流经12 h。采用蛋白质印迹法对各组细胞中GRP78和CHOP蛋白水平进行检测,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术测定各组细胞GRP78和CHOP蛋白及其信使RNA(mRNA)相对水平。应用GraphPad Prism 8.0软件对数据进行统计学分析。结果(1)A、B、C组HUVECs中GRP78蛋白相对表达水平分别为1.33±0.46、0.93±0.34、0.64±0.30;多组间比较差异有统计学意义(F=36.17,P<0.05)。A组GRP78蛋白相对表达水平高于B组、C组(均P<0.01),B组GRP78蛋白相对表达水平高于C组(P=0.0013)。3组HUVECs中CHOP蛋白相对表达水平分别为:A组1.29±0.38,B组0.90±0.34,C组0.59±0.29;多组间比较差异有统计学意义(F=41.27,P<0.05)。A组CHOP蛋白相对表达水平高于B组、C组(均P<0.01),B组CHOP蛋白相对表达水平高于C组(P=0.0004)。(2)A、B、C组HUVECs中GRP78 mRNA相对表达水平分别为18.3±3.4、11.3±1.8、5.4±2.2;多组间比较差异有统计学意义(F=189.20,P<0.05)。A组GRP78 mRNA相对表达水平高于B组、C组(均P<0.01),B组GRP78 mRNA相对表达水平高于C组(P<0.01)。3组HUVECs中CHOP mRNA相对表达水平分别为:A组20.4±3.8,B组14.2±2.1,C组7.8±1.3;多组间比较差异有统计学意义(F=171.80,P<0.05)。A组CHOP mRNA相对表达水平高于B组、C组(均P<0.01),B组CHOP mRNA相对表达水平高于C组(P<0.01)。结论低流体剪应力可能增加HUVECs中GRP78、CHOP的蛋白及其mRNA表达水平。 展开更多
关键词 血流动力学 人脐静脉内皮细胞 内质网应激 流体剪应力 葡萄糖调节蛋白78 C/EBP同源蛋白
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葡萄糖调节蛋白78在大鼠非酒精性脂肪性肝炎中的表达及意义 被引量:20
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作者 闵敏 陈东风 +3 位作者 王军 艾正琳 樊丽琳 严丽丽 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期79-81,共3页
目的观察高脂饮食诱导大鼠非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)过程中内质网应激标志物葡萄糖调节蛋白78的表达变化,探讨内质网应激在NASH发病机制中的作用。方法建立大鼠高脂饮食诱导NASH模型,检测血清ALT、AST、FF... 目的观察高脂饮食诱导大鼠非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)过程中内质网应激标志物葡萄糖调节蛋白78的表达变化,探讨内质网应激在NASH发病机制中的作用。方法建立大鼠高脂饮食诱导NASH模型,检测血清ALT、AST、FFA、TG和肝组织MDA的变化,用RT-PCR与Western blot方法检测NASH形成过程中肝组织GRP78在基因和蛋白水平的表达变化。结果NASH组大鼠血清ALT、AST、FFA、TG和肝组织MDA水平均较对照组有不同程度的升高。肝组织GRP78基因和蛋白表达也随NASH加重而增强,16周时升高最为显著(P<0.01)。结论高脂饮食可诱导GRP78表达增强,启动内质网应激,导致脂质异常沉积,其可能与NASH的发病机制密切相关。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝炎 内质网应激 葡萄糖调节蛋白78
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糖尿病肾病肾组织足细胞损伤与葡萄糖调节蛋白78表达及蛋白尿间的相关性 被引量:9
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作者 刘迎九 文煜冰 +6 位作者 陶建瓴 李金红 苏颖 叶葳 李航 李雪梅 李学旺 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期359-363,共5页
目的研究糖尿病肾病(DN)患者肾组织足细胞损伤和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及尿蛋白量之间的关系。方法回顾性分析48例经肾活检确诊为DN患者的临床资料,根据尿蛋白量将患者分为>3.5 g/d组(n=31)和<3.5 g/d组(n=17)。对肾组织行威廉... 目的研究糖尿病肾病(DN)患者肾组织足细胞损伤和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及尿蛋白量之间的关系。方法回顾性分析48例经肾活检确诊为DN患者的临床资料,根据尿蛋白量将患者分为>3.5 g/d组(n=31)和<3.5 g/d组(n=17)。对肾组织行威廉姆斯肿瘤蛋白-1(WT-1)免疫组织化学染色,冰冻肾组织行synap-topodin、GRP78免疫荧光双染色,在激光共聚焦显微镜下观察。结果尿蛋白量>3.5 g/d组的足细胞密度为0.10个/μm2,明显低于尿蛋白量<3.5 g/d组的0.15个/μm2(P=0.003),足细胞密度与尿蛋白量呈负显著相关(P=0.005)。肾小球Synaptopodin及GRP78表达呈线样或颗粒状沿基底膜排列,尿蛋白量与synaptopodin(P=0.004)和GRP78(P=0.001)表达具有显著负相关。结论随着尿蛋白量增加,DN患者的足细胞损伤程度随之加重,伴有内质网应激适应性调节能力下降。 展开更多
关键词 足细胞 糖尿病肾病 SYNAPTOPODIN 葡萄糖调节蛋白78
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葡萄糖调节蛋白GRP78和GRP94在小鼠脑发育过程中的差异表达 被引量:6
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作者 李波 王大鹏 +1 位作者 方文刚 陈誉华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第7期641-646,共6页
为探讨葡萄糖调节蛋白GRP78和GRP94在小鼠脑发育过程中的生物学意义,利用蛋白质免疫印迹、免疫荧光及RNA印迹技术,检测了发育不同时期小鼠脑组织中GRP78、GRP94的表达及分布情况.结果显示:小鼠脑发育过程中GRP78、GRP94的表达在时间和... 为探讨葡萄糖调节蛋白GRP78和GRP94在小鼠脑发育过程中的生物学意义,利用蛋白质免疫印迹、免疫荧光及RNA印迹技术,检测了发育不同时期小鼠脑组织中GRP78、GRP94的表达及分布情况.结果显示:小鼠脑发育过程中GRP78、GRP94的表达在时间和空间上呈现出显著差异,在脑发育的早中期GRP78表达水平高于GRP94,随发育的进程GRP78不断下降而GRP94逐渐升高,至胚胎发育晚期GRP94表达水平高于GRP78.在E16.5的不同脑区,GRP78的表达呈现出从端脑到后脑逐渐递减的“浓度梯度”分布,而GRP94在不同脑区中表达相同.小鼠出生后,二者作为应激蛋白在脑组织中的表达没有明显的差异性.免疫荧光结果显示,GRP78和GRP94在大脑组织中的分布基本相同,神经细胞和神经胶质细胞的细胞质均有分布.这些观察得到的结果提示,GRP78和GRP94与神经细胞分化和脑的形态建成有关,它们分别在脑发育的不同时期起作用. 展开更多
关键词 葡萄糖调节蛋白 GRP78 GRP94 脑发育 内质网 分子伴侣
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葡萄糖调节蛋白78研究进展 被引量:23
5
作者 吴逸园 杨业鹏 李载权 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期135-141,共7页
葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78kD,GRP78)又称免疫球蛋白重链结合蛋白(immunoglobulin heavy chain binding protein,Bip),是位于内质网上重要的分子伴侣,属热休克蛋白70家族的一员,GRP78分子及其DNA分子序列结构在许... 葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78kD,GRP78)又称免疫球蛋白重链结合蛋白(immunoglobulin heavy chain binding protein,Bip),是位于内质网上重要的分子伴侣,属热休克蛋白70家族的一员,GRP78分子及其DNA分子序列结构在许多生物物种中高度保守。GRP78在内质网中参与阻止内质网新生肽聚集、调节内质网钙稳态、抗内质网相关性细胞凋亡,以及启动未折叠蛋白反应等细胞生命过程。GRP78基因启动子上存在内质网应激反应元件(ERSE)和cAMP反应元件(CRE)等特殊的顺式作用元件,特异性转录因子ATF6等与GRP78启动子上顺式作用元件发生动态结合,从而调节GRP78基础性或诱导性转录表达。近年来发现,GRP78与脂肪肝、肿瘤和神经系统等疾病的发生发展密切相关,GRP78生物学功能的研究已经引起生物学家们的广泛重视。 展开更多
关键词 葡萄糖调节蛋白78 GRP78-ERdj3循环 甲基化酶依赖单启动子分析
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siRNA沉默葡萄糖调节蛋白78可增强乳腺癌细胞对顺铂的敏感性 被引量:4
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作者 浦龙健 黄莹莹 +4 位作者 李阳 徐锦程 蒋琛琛 刘浩 蒋志文 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期44-47,共4页
目的探讨siRNA沉默葡萄糖调节蛋白78(GRP78)增强顺铂对乳腺癌细胞凋亡的敏感性,以期为乳腺癌的临床治疗提供新的靶点。方法 MTT法检测不同浓度(0、1、2、4、8、16μmol/L)顺铂对乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖抑制作用;PI/AnnexinV双染检... 目的探讨siRNA沉默葡萄糖调节蛋白78(GRP78)增强顺铂对乳腺癌细胞凋亡的敏感性,以期为乳腺癌的临床治疗提供新的靶点。方法 MTT法检测不同浓度(0、1、2、4、8、16μmol/L)顺铂对乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖抑制作用;PI/AnnexinV双染检测顺铂(8μmol/L)对siRNA转染沉默GRP78乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡的影响,同时将未转染和转染空质粒乳腺癌细胞MDA-MB-231作为空白和阴性对照;Western blot检测顺铂(8μmol/L)处理乳腺癌细胞MDA-MB-231不同时间(0、6、16、24 h)GRP78的表达以及siRNA转染沉默GRP78乳腺癌细胞MDA-MB-231中GRP78的表达。结果 8μmol/L顺铂作用于乳腺癌细胞MDA-MB-231 24、48、72 h细胞存活率分别为83.13%、54.22%、35.79%,但24 h细胞凋亡率仅为10.8%。将GRP78沉默后,细胞的凋亡率为24.6%,沉默GRP78并合用顺铂进行刺激,细胞的凋亡率为48.9%,明显高于单用顺铂组。用顺铂刺激乳腺癌细胞MDA-MB-231 GRP78表达先上调后有减弱趋势,而siRNA转染沉默GRP78后,GRP78表达明显下降。结论抑制GRP78的表达可以增加乳腺癌细胞的凋亡率,为乳腺癌的临床治疗提供了新的靶点。 展开更多
关键词 乳腺癌 葡萄糖调节蛋白78 小干扰RNA 顺铂 凋亡
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葡萄糖调节蛋白78在复合致病因素诱导的大鼠肝肺综合征中的作用 被引量:8
7
作者 贾建桃 张慧英 +8 位作者 田小霞 冀菁荃 张丽丽 吕敏丽 王黎敏 封明 赵中夫 韩德五 CHENG Ji 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1580-1585,共6页
目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在大鼠肝肺综合征发病中的作用及其与肠源性内毒素血症的关系。方法:Wistar大鼠被随机分为4周组、6周组和8周组3个时点,采用复合致病因素法制备大鼠肝硬化合并肝肺综合征(HPS)模型,并设标准饮食的正常... 目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在大鼠肝肺综合征发病中的作用及其与肠源性内毒素血症的关系。方法:Wistar大鼠被随机分为4周组、6周组和8周组3个时点,采用复合致病因素法制备大鼠肝硬化合并肝肺综合征(HPS)模型,并设标准饮食的正常大鼠作为对照组。采用HE染色观察肺组织病理变化;测定血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、内毒素、TNF-α和肺组织匀浆中的TNF-α、丙二醛(MDA)的含量。Western blotting和RT-PCR法检测肺组织标本中GRP78蛋白和mRNA表达水平。结果:模型组动物血浆内毒素含量随病程进展逐渐增高;肺组织中GRP78蛋白和mRNA的表达随HPS进展逐步增高,且各时点间的表达有显著差异(P<0.05);血浆内毒素与升高的GRP78蛋白水平间呈高度正相关(P<0.01)。血浆ALT和TNF-α含量以及肺组织匀浆中TNF-α和MDA含量随病程进展逐渐增高;血浆内毒素含量以及肺组织中GRP78蛋白分别与血浆TNF-α和肺组织中TNF-α、MDA的含量呈高度正相关(P<0.01)。在各时点,模型组动物血浆TNF-α含量、肺组织匀浆TNF-α、GRP78蛋白及mRNA均显著高于正常对照组(P<0.05)。在第6周和第8周,模型组动物血浆内毒素和ALT的含量以及肺组织匀浆中MDA的含量均显著高于正常对照组(P<0.05)。结论:肝硬化时形成的肠源性内毒素血症作为内质网应激的重要应激原,通过氧化应激激活肺组织的内质网应激反应导致GRP78表达增高,很可能是HPS发病的重要机制。 展开更多
关键词 肝肺综合征 调节蛋白78 内质网应激 肠源性内毒素血症
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胃癌中葡萄糖调节蛋白78和葡萄糖调节蛋白94表达的临床意义及与预后的相关性 被引量:6
8
作者 魏华 景红 +1 位作者 吴江 张东航 《首都医科大学学报》 CAS 2014年第4期501-506,共6页
目的确定葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94,GRP94)与胃癌(gastric cancer,GC)临床病理特征及预后的相关性。方法应用Western blotting和免疫组织化学方法检测GC... 目的确定葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94,GRP94)与胃癌(gastric cancer,GC)临床病理特征及预后的相关性。方法应用Western blotting和免疫组织化学方法检测GC和切缘组织中GRP78和GRP94的表达;Kaplan-Meier或卡方检验GRP78、GRP94和临床病理资料与GC术后整体生存期相关性。结果 GRP78和GRP94蛋白主要表达于胃癌细胞的胞质及胞膜,其阳性表达与淋巴结转移、TNM分期呈负相关,与分化程度正相关(P<0.05);GRP78、GRP94高表达及低表达GC患者术后平均生存时间分别为(23.51±2.32)个月和(37.54±3.24)个月、(21.31±1.46)个月和(40.02±2.19)个月,5年整体生存率分别为21.23%和41.42%、20.73%和43.86%(log-rank test,P<0.01),TNM分期、GRP78和GRP94是影响GC预后的独立因素。结论 GRP78和GRP94高表达可能是GC预后不良的分子标志物之一。 展开更多
关键词 胃癌 葡萄糖调节蛋白78 葡萄糖调节蛋白94 生物标志物 预后
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葡萄糖调节蛋白78和基质金属蛋白酶在口腔鳞状细胞癌中的表达 被引量:3
9
作者 王波 汲坤 +3 位作者 张丽艳 尚德志 侯君妍 华正伟 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期786-789,共4页
目的探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和基质金属蛋白酶(MMPs)在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及意义,阐明GRP78在口腔鳞状细胞癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测26例口腔鳞状细胞癌组织和10例正常口腔组织中GRP78蛋白的表... 目的探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和基质金属蛋白酶(MMPs)在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及意义,阐明GRP78在口腔鳞状细胞癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测26例口腔鳞状细胞癌组织和10例正常口腔组织中GRP78蛋白的表达;采用逆转录PCR检测正常口腔组织和口腔鳞状细胞癌组织中GRP78 m RNA的表达;采用免疫组织化学方法检测26例口腔鳞状细胞癌组织中MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结果 GRP78蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中的阳性表达率为100%(26/26),在正常口腔组织中的阳性表达率为20%(2/10),两者比较差异有统计学意义(P<0.01);与高分化和中分化口腔鳞状细胞癌组织比较,低分化口腔鳞状细胞癌组织中的GRP78蛋白阳性表达强度明显增高(P<0.05)。与正常口腔组织比较,GRP78 m RNA表达水平在口腔鳞状细胞癌组织中的表达增高(P<0.05)。MMP-2和MMP-9蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中的阳性表达率均为100%(26/26)。结论 GRP78和MMPs在口腔鳞状细胞癌组织中表达明显升高,提示口腔鳞状细胞癌中GRP78蛋白的表达可能与肿瘤的侵袭和转移相关。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 葡萄糖调节蛋白78 基质金属蛋白
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葡萄糖调节蛋白78在卵巢癌细胞衰老过程中的作用 被引量:2
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作者 李伟 李双 +5 位作者 李莉 贾瑶 杨洁 栗妍 汪辉 马丁 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期391-394,共4页
目的拟了解葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在卵巢癌细胞衰老过程中所发挥的作用,并初步进行相关机制探讨。方法亚凋亡剂量顺铂诱导卵巢癌A2780细胞衰老,并继续培养至出现衰老逃脱现象;衰老相关的!-半乳糖苷酶检测细胞衰老情况;流式细胞仪分析... 目的拟了解葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在卵巢癌细胞衰老过程中所发挥的作用,并初步进行相关机制探讨。方法亚凋亡剂量顺铂诱导卵巢癌A2780细胞衰老,并继续培养至出现衰老逃脱现象;衰老相关的!-半乳糖苷酶检测细胞衰老情况;流式细胞仪分析细胞周期情况;Western blot检测GRP78及相关蛋白表达情况。siRNA反义抑制GRP78的表达,观察衰老逃脱细胞克隆形成情况。结果亚凋亡剂量顺铂作用A2780细胞后发生明显G2/M期阻滞,细胞衰老染色阳性。继续培养3周后出现衰老逃脱细胞克隆的形成,并可被顺铂再次诱导进入衰老状态。GRP78蛋白在衰老的A2780细胞及再次被顺铂诱导进入衰老状态的衰老逃脱细胞中均呈低表达,而在衰老逃脱细胞中重新恢复其高表达。反义抑制A2780细胞中GRP78蛋白表达后P53及Cyclin B1蛋白表达均明显升高,Cdc2蛋白表达明显下降,同时伴有细胞衰老逃脱能力的明显降低。结论 GRP78在顺铂诱导卵巢癌细胞衰老过程中起到抵抗衰老的作用。 展开更多
关键词 葡萄糖调节蛋白78 卵巢癌 衰老逃脱细胞 P53
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葡萄糖调节蛋白78在子痫前期胎盘滋养细胞中的表达及意义 被引量:5
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作者 王耸 瓮占平 纪向虹 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期45-48,共4页
目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在子痫前期孕妇胎盘组织中表达及其与子痫前期发病机制的关系。方法:选择2009年1~12月在青岛市市立医院及青岛市第八人民医院住院的子痫前期孕妇120例,其中早发型轻度子痫前期孕妇30例(早发轻度组),... 目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在子痫前期孕妇胎盘组织中表达及其与子痫前期发病机制的关系。方法:选择2009年1~12月在青岛市市立医院及青岛市第八人民医院住院的子痫前期孕妇120例,其中早发型轻度子痫前期孕妇30例(早发轻度组),晚发型轻度子痫前期孕妇30例(晚发轻度组),早发型重度子痫前期孕妇30例(早发重度组),晚发型重度子痫前期孕妇30例(晚发重度组);另选同期健康孕妇30例为健康孕妇组。采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测胎盘组织中GRP78 mRNA相对表达量;采用免疫组织化学方法、Western-Blotting检测胎盘组织GRP78蛋白的表达。结果:①子痫前期各组胎盘组织中GRP78 mRNA表达水平均高于健康孕妇组,差异有统计学意义(P<0.05);但子痫前期各组间分别比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②子痫前期各组和健康孕妇组胎盘组织中都有GRP78蛋白表达,主要表达于细胞质,呈棕黄色染色。Western-Blotting检测结果显示,子痫前期各组胎盘组织中GRP78蛋白表达水平均高于健康孕妇组,差异有统计学意义(P<0.05);但子痫前期各组间分别比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:GRP78在子痫前期胎盘组织中表达升高,GRP78的表达水平变化可能与子痫前期发病有关。 展开更多
关键词 子痫前期 葡萄糖调节蛋白78 胎盘滋养细胞
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葡萄糖调节蛋白78在大鼠肝肺综合征肺微血管重构中的作用 被引量:2
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作者 贾建桃 张慧英 +8 位作者 郭建红 李晨 吕敏丽 张丽丽 张翠英 李宝红 赵中夫 韩德五 CHENG Ji 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期493-498,共6页
目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)引发大鼠肝肺综合征(HPS)肺微血管重构的机制。方法:Wistar大鼠被随机分为4周组、6周组和8周组3个时点,采用复合致病因素法制备大鼠肝硬化合并HPS模型,并设标准饮食的正常大鼠作为对照组。免疫组化染... 目的:探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)引发大鼠肝肺综合征(HPS)肺微血管重构的机制。方法:Wistar大鼠被随机分为4周组、6周组和8周组3个时点,采用复合致病因素法制备大鼠肝硬化合并HPS模型,并设标准饮食的正常大鼠作为对照组。免疫组化染色法观察肺组织GRP78、Ⅷ因子相关抗原(FⅧ-RAg)C/EBP同源蛋白(CHOP)/生长阻滞及DNA损伤诱导蛋白153(GADD153)、caspase-12、Bcl-2和核因子(nuclear factor,NF)-κB的表达。RT-PCR和Western blotting法检测肺组织血管内皮生长因子(VEGF)mRNA和蛋白表达水平。结果:模型组动物肺组织中GRP78、FⅧ-RAg及VEGF蛋白的表达随HPS进展逐步增高,CHOP/GADD153及caspase-12的表达随HPS进展逐步降低,Bcl-2和NF-κB随病程进展表达逐渐增加,NF-κB尤以胞核表达增高明显。GRP78与FⅧ-RAg及VEGF蛋白水平呈明显正相关(P<0.01),而与CHOP/GADD153及caspase-12的表达呈明显负相关(P<0.01)。在各时点,模型组动物肺组织GRP78和FⅧ-RAg显著高于正常对照组;VEGF蛋白和mRNA均显著高于正常对照组;而CHOP/GADD153及caspase-12的表达均低于正常对照组(P<0.05)。结论:GRP78可能通过促进血管内皮细胞增殖和抑制其凋亡,促进肺微血管重构,导致HPS的发病。 展开更多
关键词 肝硬化 肝肺综合征 葡萄糖调节蛋白78 微血管重构
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沉默葡萄糖调节蛋白78基因增强高氧诱导的肺泡上皮细胞凋亡 被引量:2
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作者 卢红艳 高楚楚 +1 位作者 唐炜 张婷 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1247-1250,共4页
目的探讨小干扰RNA(siRNA)干扰内质网应激相关因子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)基因表达对高氧诱导肺泡上皮细胞凋亡的影响及作用机制。方法培养人肺腺癌A549细胞,用构建的siRNA片段通过脂质体LipofectamineTM2000转染A549细胞,将细胞分为... 目的探讨小干扰RNA(siRNA)干扰内质网应激相关因子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)基因表达对高氧诱导肺泡上皮细胞凋亡的影响及作用机制。方法培养人肺腺癌A549细胞,用构建的siRNA片段通过脂质体LipofectamineTM2000转染A549细胞,将细胞分为高氧空白组、阴性对照(阴性siRNA)组和实验(GRP78-siRNA)组3组,利用950 mL/L O2建立高氧细胞损伤模型。48 h后通过实时定量PCR检测C/EBP同源蛋白(CHOP)mRNA的表达,Western blot技术检测CHOP蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果应用siRNA抑制GRP78表达后,GRP78 mRNA和蛋白表达下调、CHOP mRNA和蛋白表达上调、A549细胞凋亡增加。结论下调GRP78基因可增强高氧活化的CHOP凋亡途径,诱导肺泡上皮细胞凋亡。 展开更多
关键词 小干扰RNA 葡萄糖调节蛋白78 肺泡上皮细胞 凋亡
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葡萄糖调节蛋白78研究进展 被引量:6
14
作者 徐世文 邵成成 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1-5,共5页
葡萄糖调节蛋白78(Glucose regulated protein 78ku,GRP78)又称免疫球蛋白重链结合蛋白(Immunoglobulin heavy chain binding protein,Bip),是位于内质网上的一种重要分子伴侣,属热休克蛋白70家族的一员,GRP78分子及其DNA分子序列结构... 葡萄糖调节蛋白78(Glucose regulated protein 78ku,GRP78)又称免疫球蛋白重链结合蛋白(Immunoglobulin heavy chain binding protein,Bip),是位于内质网上的一种重要分子伴侣,属热休克蛋白70家族的一员,GRP78分子及其DNA分子序列结构在许多生物物种中高度保守。GRP78在内质网中参与阻止内质网新生肽聚集、调节内质网钙稳态、抗内质网相关性细胞凋亡以及启动未折叠蛋白反应等。近年来发现,GRP78与多种疾病发生发展密切相关,GRP78生物学功能研究已经引起广泛关注。 展开更多
关键词 葡萄糖调节蛋白78 研究进展 序列
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葡萄糖调节蛋白78和钙网蛋白在外阴鳞癌中的表达及意义 被引量:5
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作者 田若阳 武昕 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期678-681,共4页
目的探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和钙网蛋白(CRT)在外阴鳞癌(VSCC)中的表达情况。方法采用免疫组化和Western blot方法检测GRP78和CRT在30例VSCC及15例外阴正常皮肤中的表达情况。结果 GRP78和CRT在VSCC组织中阳性细胞的平均光密度值... 目的探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和钙网蛋白(CRT)在外阴鳞癌(VSCC)中的表达情况。方法采用免疫组化和Western blot方法检测GRP78和CRT在30例VSCC及15例外阴正常皮肤中的表达情况。结果 GRP78和CRT在VSCC组织中阳性细胞的平均光密度值分别为0.358 5±0.006 2和0.296 2±0.012 6,在正常外阴皮肤中分别为0.331 6±0.006 0和0.284 7±0.004 3,比较GRP78和CRT在VSCC和外阴正常皮肤中的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示:GRP78和CRT在VSCC中的表达呈正相关(R2=0.583,P<0.001)。GRP78和CRT在VSCC中的平均灰度值比值分别为0.66±0.21和0.84±0.15,在正常外阴皮肤中分别为0.34±0.11和0.65±0.17,比较两者在VSCC和外阴正常皮肤中的表达水平,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 GRP78和CRT的表达与VSCC的发生发展有关,两者在VSCC中的表达呈正相关。 展开更多
关键词 葡萄糖调节蛋白78 钙网蛋白 外阴鳞癌 免疫组化 免疫印迹
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缺氧、氧化应激对视网膜色素上皮细胞增殖及葡萄糖调节蛋白78表达的影响 被引量:4
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作者 李漫丽 戚卉 吴雅臻 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第9期826-829,共4页
目的观察缺氧、氧化应激对体外培养的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞增殖的影响及GRP78表达的变化。方法体外培养人RPE细胞,采用CoCl2诱发细胞缺氧模型、H2O2诱发氧化应激模型。实验分为量-效关系组:细胞分别经浓... 目的观察缺氧、氧化应激对体外培养的视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞增殖的影响及GRP78表达的变化。方法体外培养人RPE细胞,采用CoCl2诱发细胞缺氧模型、H2O2诱发氧化应激模型。实验分为量-效关系组:细胞分别经浓度为100μmol·L-1、200μmol·L-1、400μmol·L-1、800μmol·L-1的CoCl2、H2O2作用12h,用MTT法检测细胞增殖情况;时-效关系组:在CoCl2浓度为200μmol·L-1、H2O2浓度为400μmol·L-1的基础上,分别选取药物作用8h、12h、16h3个时间点收集细胞,采用免疫细胞化学染色检测GRP78蛋白的表达情况。结果量-效关系组:不同浓度CoCl2组RPE细胞活性与空白对照组相比均明显下降(均为P<0.05);400μmol·L-1及800μmol·L-1 H2O2组细胞存活率较空白对照组均明显下降(均为P<0.05)。时-效关系组:空白对照组GRP78表达阳性细胞率为(5.4±3.0)%;CoCl2作用8h、12h、16h GRP78阳性细胞率分别为(34.2±7.1)%、(54.4±9.1)%、(34.7±6.8)%;H2O2作用8h、12h、16hGRP78阳性细胞率分别为(37.8±7.1)%、(57.4±5.1)%、(42.5±3.9)%。经统计学分析,CoCl2、H2O2处理8h后,RPE细胞中GRP78表达均较空白对照组明显升高(均为P<0.01),作用12h时GRP78的表达量最高,作用16h时GRP78的表达量又有下降。结论 GRP78可以作为RPE细胞缺氧、氧化应激的生化标志物,GRP78的表达变化与细胞应激状态有一定依赖关系。 展开更多
关键词 葡萄糖调节蛋白78 视网膜色素上皮细胞 氯化钴 过氧化氢
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以葡萄糖调节蛋白78(GRP78)为靶向的胰蛋白酶抑制剂抗肠癌效应研究 被引量:1
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作者 赵超 李宗伟 +3 位作者 付荣 赵亚蕊 史通麟 李卓玉 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期148-152,158,共6页
目的构建以肿瘤细胞表面葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)为靶向的重组绿豆胰蛋白酶抑制剂(trypsin inhibitor,TI)活性片段GBP-TI,并探讨其抗肠癌的分子靶向效应。方法用带有GRP78结合肽(GRP78binding peptide,GBP... 目的构建以肿瘤细胞表面葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)为靶向的重组绿豆胰蛋白酶抑制剂(trypsin inhibitor,TI)活性片段GBP-TI,并探讨其抗肠癌的分子靶向效应。方法用带有GRP78结合肽(GRP78binding peptide,GBP)表达序列的引物PCR扩增胰蛋白酶抑制剂活性片段,构建GBP-TI的原核表达载体;采用GST亲和层析柱纯化获得GBP-TI蛋白;激光共聚焦方法检测GBP-TI与GRP78的相互作用;MTT和DAPI细胞核染色方法分别检测GBP-TI对大肠癌细胞存活和凋亡的影响。结果 GBP-TI能够与大肠癌细胞表面的GRP78相互作用;与GST-TI相比,GBP-TI能够剂量依赖性地诱导大肠癌细胞死亡,而对正常细胞生长无明显影响。结论 GBP-TI可以通过结合肿瘤细胞表面GRP78蛋白特异性杀伤肿瘤细胞。本研究为肿瘤靶向治疗提供了一种新的策略。 展开更多
关键词 蛋白酶抑制剂(TI) 葡萄糖调节蛋白78(GRP78) 大肠癌 靶向药物
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葡萄糖调节蛋白78促进肝硬化大鼠心肌细胞凋亡及其机制 被引量:1
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作者 张丽丽 庞慧 +10 位作者 吕敏丽山西医科大学第二医院ICU 张慧英 贾建桃 王黎敏 刘燕 李旭炯 李宝红 张翠英 赵中夫 韩德五 JI Cheng 《中国病理生理杂志》 CSCD 北大核心 2013年第5期941-946,共6页
目的:探讨葡萄糖调节蛋白78/免疫球蛋白重链结合蛋白(GRP78/BiP)是否促进肝硬化大鼠心肌细胞凋亡及其发生机制。方法:采用复合致病因素法建立肝硬化大鼠模型,在4周、6周和8周分别取材。实验1:取心脏称重并测量左室壁厚度,计算左室壁厚... 目的:探讨葡萄糖调节蛋白78/免疫球蛋白重链结合蛋白(GRP78/BiP)是否促进肝硬化大鼠心肌细胞凋亡及其发生机制。方法:采用复合致病因素法建立肝硬化大鼠模型,在4周、6周和8周分别取材。实验1:取心脏称重并测量左室壁厚度,计算左室壁厚度与心脏重量比值及心脏指数。实验2:TUNEL法观察心肌细胞凋亡情况;免疫组化方法检测心肌组织中GRP78/BiP蛋白以及凋亡相关蛋白CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白/生长停滞及DNA诱导蛋白153(CHOP/GADD153)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)、核转录因子κB p65(NF-κB p65)、B细胞淋巴瘤/白血病蛋白2(Bcl-2)的表达。结果:随肝硬化病程进展,左室壁厚度与心脏重量比值以及心脏指数逐渐增加,8周组增加显著(P<0.05);心肌细胞凋亡指数、CHOP/GADD153和caspase-12阳性蛋白表达指数逐渐升高,8周组差异显著(P<0.05);NF-κB p65和Bcl-2阳性蛋白表达指数呈一致性变化,在4周组较其它组明显增高(P<0.05);GRP78/BiP蛋白阳性表达指数与心肌细胞凋亡指数、CHOP/GADD153、caspase-12蛋白阳性表达指数呈显著正相关,CHOP/GADD153与NF-κB p65、Bcl-2蛋白阳性表达指数呈显著负相关。结论:GRP78高表达在内质网应激介导的肝硬化心肌病发病中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 葡萄糖调节蛋白78 内质网应激 肝硬化心肌病 细胞凋亡 内毒素类
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碱性成纤维细胞生长因子对人卵巢癌CAOV3细胞凋亡及葡萄糖调节蛋白78表达的影响 被引量:1
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作者 叶丽平 温有锋 张莹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期893-897,共5页
目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与人卵巢癌CAOV3细胞凋亡的关系及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达的变化,探讨bFGF促进人卵巢癌CAOV3细胞增殖,抑制凋亡的信号机制。方法:利用无血清饥饿诱导卵巢癌CAOV3细胞凋亡。分为对照组、bFGF... 目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与人卵巢癌CAOV3细胞凋亡的关系及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达的变化,探讨bFGF促进人卵巢癌CAOV3细胞增殖,抑制凋亡的信号机制。方法:利用无血清饥饿诱导卵巢癌CAOV3细胞凋亡。分为对照组、bFGF组、PKB抑制剂组。应用流式细胞术、Annexin V/PI双荧光染色法观察bFGF对CAOV3细胞增殖及凋亡的影响。利用Western blotting、RT-PCR检测bFGF对PKB、GRP78表达的影响。结果:bFGF呈剂量依赖性激活PKB信号通路,呈时间依赖性促进GRP78mRNA及蛋白表达(P<0.01)。与对照组相比,bFGF可加速CAOV3细胞的细胞周期进程,促进细胞增殖,抑制无血清培养诱导的细胞凋亡。PKB特异性抑制剂wortmannin可阻断bFGF的上述作用。结论:bFGF可能通过PKB信号通路上调GRP78的表达,促进细胞增殖,抑制饥饿诱导的卵巢癌CAOV3细胞凋亡。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子2 葡萄糖调节蛋白78 蛋白激酶B 卵巢肿瘤 细胞凋亡
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葡萄糖调节蛋白78在大鼠肠缺血再灌注损伤中的表达及其意义 被引量:2
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作者 徐浩 李洋 +2 位作者 王继见 刘光艺 顾海涛 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期679-682,共4页
目的:观察大鼠肠缺血再灌注损伤(intestine ischemia reperfusion injury,IIRI)过程中肠黏膜的组织损伤和细胞凋亡及内质网(endoplasmic reticulum,ER)分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78 kD,GRP78)的表达变化,并探... 目的:观察大鼠肠缺血再灌注损伤(intestine ischemia reperfusion injury,IIRI)过程中肠黏膜的组织损伤和细胞凋亡及内质网(endoplasmic reticulum,ER)分子伴侣葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78 kD,GRP78)的表达变化,并探讨ER应激在肠IIRI中的作用及机制。方法:45只雄性SD大鼠随机分成9组:缺血再灌注0、1、3、6、12、24、48、72 h组,以及假手术对照组,每组5只。实验组均用无创性动脉夹夹闭肠系膜上动脉1 h后实施再灌注来建立再灌注模型,假手术组仅游离肠系膜上动脉,不夹闭。然后采用HE染色观察肠黏膜变化,TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot和RT-PCR检测GRP78表达。结果:缺血再灌注后,肠黏膜损伤程度及细胞凋亡指数随再灌注时间延长而增加,于再灌注3 h达峰值(与其他组各组比较均P<0.001);再灌注后,GRP78的表达明显增加,于1 h达第1个小高峰(与0 h组和3 h组比较P<0.05),但随再灌注时间的延长,表达量逐步减少,再灌注12 h后开始回升(与6 h组比较P<0.004),于24 h达峰值(与其他各组比较均P<0.05),72 h降至对照组水平(与假手术对照组比较P>0.069)。结论:GRP78在大鼠肠缺血再灌注过程中表达变化,可能与其对肠IIRI保护机制有关。 展开更多
关键词 葡萄糖调节蛋白78 小肠 缺血再灌注 细胞凋亡
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