葡萄糖神经酰胺合成酶基因在人耐多柔比星乳腺癌细胞株MCF-7／ADR中的表达及意义

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作者 胡萍萍 陈同钰 +2 位作者 田波 罗光华 魏江 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2008年第4期267-270,共4页

背景与目的:多药耐药是肿瘤化疗失败的主要原因,近年来神经酰胺的糖基化水平增高与多药耐药的关系引起了广泛关注。本研究旨在探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)基因在人乳腺癌细胞株MCF-7和人耐多柔比星(阿霉素)乳腺癌细胞株MCF-7/ADR中... 背景与目的:多药耐药是肿瘤化疗失败的主要原因,近年来神经酰胺的糖基化水平增高与多药耐药的关系引起了广泛关注。本研究旨在探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)基因在人乳腺癌细胞株MCF-7和人耐多柔比星(阿霉素)乳腺癌细胞株MCF-7/ADR中的表达及意义。方法:采用四氮唑盐(MTT)法检测多柔比星对MCF-7/ADR和MCF-7的抑制率和IC50,用浓度为5、10、20μmol/L的GCS抑制剂D,L-threo-1-phenyl-2-decanoyl-amino-3-morpholino-1-propanol(PDMP)预处理MCF-7/ADR24、48h后检测抑制率和IC50;应用实时荧光定量PCR(real time PCR)检测MCF-7、MCF-7/ADR以及PDMP预处理后MCF-7/ADR中GCS mRNA的表达。结果:MCF-7/ADR对MCF-7的耐药倍数为22.69倍,PDMP作用后多柔比星对MCF-7/ADR的抑制率升高,IC50从(19.0±0.5)μg/ml下降到(5.6±0.6)μg/ml。MCF-7/ADR中GCS mRNA的表达高于MCF-7(P<0.01),PDMP使MCF-7/ADR中GCS mRNA的表达水平GCSN(48±17)下降到(21±4)。结论:GCS可能参与乳腺癌的发生过程,并在MCF-7/ADR多药耐药中起重要作用。 展开更多

关键词 葡萄糖神经酰胺合成酶 乳腺癌细胞株 多药耐药

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葡萄糖神经酰胺合成酶抑制剂PDMP对K562/A02细胞柔红霉素耐药逆转的研究 被引量：3

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作者 殷莉 陈宝安 +13 位作者 程坚 丁家华 高冲 孙耘玉 王骏 赵刚 高峰 宋慧慧 鲍文 吴玮玮 王飞 梁艺琼 夏国华 王雪梅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期79-84,共6页

本研究旨在探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)抑制剂D,L-threo-1-phenyl-2-decanoylamino-3-morpholino-1-propanol(PDMP)hydrochloride对K562/A02细胞株柔红霉素(daunorubicin,DNR)耐药的逆转作用及其逆转机制... 本研究旨在探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)抑制剂D,L-threo-1-phenyl-2-decanoylamino-3-morpholino-1-propanol(PDMP)hydrochloride对K562/A02细胞株柔红霉素(daunorubicin,DNR)耐药的逆转作用及其逆转机制。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度PDMP对K562细胞和K562/A02细胞的增殖抑制效应及其对K562/A02细胞DNR耐药逆转作用;用流式细胞术检测PDMP对K562/A02细胞内DNR浓度及细胞凋亡率的影响;半定量RT-PCR和Western blot方法检测K562及K562/A02细胞mdr1、GCS基因的表达以及PDMP对K562/A02细胞两种基因表达的影响。结果表明:DNR对K562和K562/A02细胞的IC50分别为0.23±0.02和7.15±0.24μg/ml,当PDMP≤20μmol/L时,对K562及K562/A02细胞株无明显生长抑制作用;20μmol/L和10μmol/L PDMP均能增加K562/A02细胞对DNR的敏感性,其耐药逆转倍数分别为2.59和1.69;两种浓度PDMP作用于耐药株48小时后能增加细胞内DNR浓度(p<0.05)和细胞凋亡率(p<0.01)。20μmol/L PDMP处理K562/A02细胞48小时后可在mRNA和蛋白水平下调GCS和mdr1基因的表达(p<0.01)。结论:PDMP可以增强K562/A02细胞对DNR的敏感性,其机制可能与增加细胞内药物浓度及细胞凋亡率、下调GCS和mdr1基因表达有关。 展开更多

关键词 葡萄糖神经酰胺合成酶抑制剂 PDMP K562/A02细胞 多药耐药

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胃癌中葡萄糖神经酰胺合成酶和P-gp的表达及意义 被引量：2

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作者 胡萍萍 房栋 +2 位作者 陈淼 陈谦 范钦和 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期145-149,共5页

目的分析葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)和P-糖蛋白(P glycoprotein,P-gp)在胃癌组织中的表达及相关性,及二者与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测132例胃癌组织及癌旁组织中GCS和P-gp蛋白的表达;应... 目的分析葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)和P-糖蛋白(P glycoprotein,P-gp)在胃癌组织中的表达及相关性,及二者与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测132例胃癌组织及癌旁组织中GCS和P-gp蛋白的表达;应用实时荧光定量PCR技术检测胃癌组织中GCS和P-gp mRNA的表达。结果 (1)胃癌组织中GCS、P-gp阳性率均高于癌旁组织(P<0.01)。(2)胃癌组织中GCS与P-gp表达呈正相关(P<0.001)。(3)胃癌组织中GCS和P-gp mRNA表达呈正相关(P<0.01)。(4)胃癌中GCS阳性率与肿瘤浸润深度、淋巴结转移以及TNM分期有关(P<0.05);P-gp阳性率与肿瘤大小、分化程度、浸润深度以及TNM分期有关(P<0.05)。结论胃癌组织中GCS不仅和P-gp与多药耐药有关,且可提示肿瘤的浸润、转移。 展开更多

关键词 胃肿瘤 葡萄糖神经酰胺合成酶 P-糖蛋白 免疫组织化学

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四氢异喹啉类化合物HZ08通过降低白血病细胞的葡萄糖神经酰胺合成酶和MDR1表达水平逆转耐药作用 被引量：2

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作者 杨煜 岑娟 +4 位作者 朱艺林 朱君荣 李运曼 陶宜富 黄文龙 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期359-364,共6页

通过对比K562/A02细胞株和耐药白血病临床样本的实验结果,探讨四氢异喹啉类化合物HZ08对多药耐药的逆转作用和逆转机制。将阿霉素与10μmol/L HZ08合用,MTT法测得阿霉素对临床耐药的白血病细胞的IC50为0.60μmol/L,对K562/A02细胞的IC50... 通过对比K562/A02细胞株和耐药白血病临床样本的实验结果,探讨四氢异喹啉类化合物HZ08对多药耐药的逆转作用和逆转机制。将阿霉素与10μmol/L HZ08合用,MTT法测得阿霉素对临床耐药的白血病细胞的IC50为0.60μmol/L,对K562/A02细胞的IC50为0.83μmol/L,逆转倍数分别为27.87和20.49。使用免疫印迹法检测细胞内葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)表达水平,荧光实时定量聚合酶链反应检测MDR1的mRNA表达水平。结果显示:各浓度的HZ08(15,20,25μmol/L)与阿霉素合用均能降低GCS的表达,与单用阿霉素组相比,阿霉素与HZ08合用可显著降低MDR1的mRNA表达(P<0.01)至空白组水平。结果表明,HZ08与阿霉素合用给药,对K562/A02细胞株和耐药的临床耐药白血病细胞均有较强的逆转作用,其机制可能与降低细胞内GCS蛋白的表达和MDR1 mRNA的表达有关。 展开更多

关键词 多药耐药 葡萄糖神经酰胺合成酶 K562/A02细胞 慢性粒细胞性白血病

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葡萄糖神经酰胺合成酶siRNA表达载体的构建 被引量：1

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作者 张艳 周慧聪 +4 位作者 陈辉 乐晓萍 夏彬 陈香红 张钦宪 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第3期467-470,共4页

目的构建针对葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)mRNA的siRNA表达载体,并观察其对转染细胞中GCS表达的影响。方法根据人GCSmRNA编码序列,设计并合成3对针对GCS的发卡状RNA的寡核苷酸,各64个碱基,退火后插入pSUPEREGFP载体重组构建RNAi质粒,进行... 目的构建针对葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)mRNA的siRNA表达载体,并观察其对转染细胞中GCS表达的影响。方法根据人GCSmRNA编码序列,设计并合成3对针对GCS的发卡状RNA的寡核苷酸,各64个碱基,退火后插入pSUPEREGFP载体重组构建RNAi质粒,进行双酶切及测序鉴定。重组质粒用脂质体包裹转染入SGC7901/VCR细胞,采用RT-PCR检测GCSmRNA表达水平的变化。结果重组构建的载体经酶切鉴定与测序分析,显示特定位点靶序列与设计序列完全一致。转染SGC7901/VCR细胞后,GCSmRNA表达明显降低。结论GCSsiRNA表达载体构建成功,并可有效抑制人胃癌耐药SGC7901/VCR细胞中GCS的表达,为后续研究及肿瘤的基因治疗奠定了基础。 展开更多

关键词 葡萄糖神经酰胺合成酶 SIRNA 表达载体 胃肿瘤

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人结肠癌细胞HCT-8/V及HCT-8中葡萄糖神经酰胺合成酶的表达 被引量：1

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作者 孟黎鹰 田芳 +1 位作者 臧卫东 宋敏 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第1期22-25,共4页

目的:观察人结肠癌HCT-8细胞和其耐药细胞株HCT-8/V中葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)的表达及意义。方法:体外培养HCT-8细胞和HCT-8/V,采用CCK8法检测2种细胞对长春新碱(VCR)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)及顺铂(DDP)的耐药性,计算IC50。采用免疫细胞... 目的:观察人结肠癌HCT-8细胞和其耐药细胞株HCT-8/V中葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)的表达及意义。方法:体外培养HCT-8细胞和HCT-8/V,采用CCK8法检测2种细胞对长春新碱(VCR)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)及顺铂(DDP)的耐药性,计算IC50。采用免疫细胞化学法和RT-PCR法检测2种细胞中GCS蛋白及mRNA的表达。结果:HCT-8/VCR细胞对VCR、5-Fu和DDP的IC50均高于HCT-8细胞[(25.42±0.03)vs(0.63±0.02),t=1190.873,P<0.001;(18.25±0.02)vs(0.87±0.01),t=1346.249,P<0.001;(37.12±0.01)vs(1.59±0.03),t=1946.058,P<0.001)];HCT-8/V细胞中GCS蛋白阳性区平均积分光密度值(119.40±1.59)高于HCT-8细胞的(90.59±1.12),HCT-8/V细胞中GCSmRNA的表达(0.79±0.06)高于HCT-8细胞的(0.33±0.04),差异均有统计学意义(t=25.658,2.776,P均<0.05)。结论:GCS的高表达可能参与了人结肠癌多药耐药的形成。 展开更多

关键词 人 结肠癌 葡萄糖神经酰胺合成酶 多药耐药

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体外HBV感染的人肝癌Huh7细胞系中葡萄糖神经酰胺合成酶活性的变化 被引量：1

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作者 甘建 杨睿 +6 位作者 雷程程 杨亚婷 闫力婷 田爱平 毛小荣 王莉莉 李俊峰 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2021年第4期829-833,共5页

目的探索糖鞘脂代谢合成关键酶葡萄糖神经酰胺(GCS)在体外HBV感染Huh7细胞中的活性变化。方法收集2019年6月—8月就诊于兰州大学第一医院感染科的9例初治急性乙型肝炎患者的血液标本,另选7例健康体检者的血液标本作为对照。利用HBV感染... 目的探索糖鞘脂代谢合成关键酶葡萄糖神经酰胺(GCS)在体外HBV感染Huh7细胞中的活性变化。方法收集2019年6月—8月就诊于兰州大学第一医院感染科的9例初治急性乙型肝炎患者的血液标本,另选7例健康体检者的血液标本作为对照。利用HBV感染者血清中高拷贝HBV颗粒(>9.9×10^(7) IU/ml)接种Huh7细胞系(感染组),对照组用健康体检者的血清共培养。检测HBV感染细胞胞浆中HBsAg和HBV DNA的表达量以及GCS的活性变化与病毒的相关性。计量资料多组间数据比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。相关性分析采用Pearson检验。结果感染组细胞较同期对照组细胞数量明显减少、细胞体积肿胀和细胞膜破碎。感染组:感染4 h、8 h、2 d和5 d后胞浆中HBsAg表达量均高于感染前(P<0.05);与感染4 h(16.67±11.55)IU/ml相比,感染8 h(112.01±25.94)IU/ml、2 d(328.01±103.50)IU/ml和5 d(101.60±49.84)IU/ml后胞浆中HBV DNA表达量呈明显升高趋势(P值均<0.001),并在感染2 d时HBV DNA表达量达到最高。在HBV感染期间,随着病毒复制的增加,GCS活性呈现出增高的特点,从感染4 h(126.21±9.59)IU/ml开始逐渐升高,并于感染2 d时(226.53±36.27)IU/ml达到高峰,感染2 d时与对照组(136.50±15.44)IU/ml比较,差异有统计学意义(t=3.956,P=0.0167)。GCS活性与HBV DNA水平存在显著正相关(r=0.5768,P=0.0471)。结论HBV感染者血清中高拷贝HBV颗粒能成功感染Huh7细胞系,并在一定程度上模拟了HBV感染的体外特点。GCS活性可能与HBV的感染有关,表明糖鞘脂合成代谢与HBV可能存在密切的联系。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 葡萄糖神经酰胺合成酶 体外培养技术

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葡萄糖神经酰胺合酶基因在多药耐药肿瘤细胞株KBV_(200)的表达及其与肿瘤多药耐药性的关系 被引量：4

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作者 杨泉 张健 +1 位作者 汪森明 张积仁 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第7期779-783,共5页

目的 观察葡萄糖神经酰胺合酶(glucosylcerarnide synthase,GCS)基因在人口腔表皮样癌多药耐药细胞株KBV_(200)的表达及其与肿瘤多药耐药性(MDR)的关系。方法 采用RT-PCR分析KBV_(200)及其亲本KB细胞株GCS基因表达的差异,运用MTT法分析K... 目的 观察葡萄糖神经酰胺合酶(glucosylcerarnide synthase,GCS)基因在人口腔表皮样癌多药耐药细胞株KBV_(200)的表达及其与肿瘤多药耐药性(MDR)的关系。方法 采用RT-PCR分析KBV_(200)及其亲本KB细胞株GCS基因表达的差异,运用MTT法分析KBV_(200)经糖脂合成酶抑制剂苯基棕榈酰胺吗啡丙醇(DL-PPMP)及钙离子通道阻滞剂异搏定处理前后细胞MDR的变化,应用RT-PCR技术检测KBV_(200)细胞耐药逆转后GCS及mdrl基因的表达。结果 KBV_(200)细胞GCS和mdrl基因的表达明显强于KB细胞,而KB细胞mdrl基因表达为阴性。5～25μmol/L DL-PPMP均可抑制KBV_(200)GCS mRNA表达,25 μmol/L时抑制强度最大;10 μmol/L异搏定即可抑制KBV_(200)GCS mRNA表达,15 μmol/L时抑制作用明显。DL-PPMP和异搏定均可抑制mdrl基因的表达,KBV_(200)经25μmol/L DL-PPMP作用48h后细胞内mdrl表达为阴性。结论 异搏定和DL-PPMP对GCS和marl基因表达的抑制调节呈浓度依赖性,它们可通过抑制GCS和mdrl基因表达,逆转KBV_(200)对长春新碱的耐药。KBV_(200)GCS基因的表达与MDR存在正相关,GCS基因可能在肿瘤的多药耐药过程中起着重要作用。 展开更多

关键词 基因表达/药物作用 肿瘤多药耐药 葡萄糖神经酰胺合酶基因 异搏定

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糖基化神经酰胺相关代谢酶与动脉粥样硬化

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作者 谭欣 魏强 +1 位作者 廖园红 陆景坤 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第6期1005-1010,共6页

动脉粥样硬化是一种涉及脂质代谢异常和炎症反应的动脉病变,是许多心脑血管疾病的始动因素。糖基化神经酰胺是指神经酰胺分子上附加了糖基化基团的衍生物,其不仅影响细胞膜的结构完整性,还调控细胞凋亡、炎症及脂质代谢,糖基化神经酰胺... 动脉粥样硬化是一种涉及脂质代谢异常和炎症反应的动脉病变,是许多心脑血管疾病的始动因素。糖基化神经酰胺是指神经酰胺分子上附加了糖基化基团的衍生物,其不仅影响细胞膜的结构完整性,还调控细胞凋亡、炎症及脂质代谢,糖基化神经酰胺代谢紊乱与动脉粥样硬化发生、发展密切相关。该文主要探讨了糖基化神经酰胺相关的代谢酶——葡萄糖神经酰胺合成酶、葡萄糖脑苷酶、乳糖神经酰胺合成酶、半乳糖苷酶等在动脉粥样硬化中的具体功能,以及其对动脉粥样硬化发展的影响。同时,该文综述了这些代谢酶的靶向治疗策略、相关药物开发及在动脉粥样硬化防治中的重大潜力。 展开更多

关键词 糖基化神经酰胺 动脉粥样硬化 葡萄糖神经酰胺合成酶 葡萄糖脑苷酶 乳糖神经酰胺合成酶 半乳糖苷酶

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葡萄糖神经酰胺合酶与白血病细胞耐药的关系 被引量：4

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作者 谢平 葛素梅 +3 位作者 沈云峰 顾中华 穆会君 张滨 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第5期900-902,共3页

本研究旨在观察葡萄糖神经酰胺合酶(glucosylceramide synthase,GCS)基因及其蛋白在人白血病细胞的表达及其与肿瘤多药耐药的关系。首先以β-actin基因为内参照物,采用RT-PCR方法分析了53例耐药/非耐药白血病患者外周血标本,并对药物敏... 本研究旨在观察葡萄糖神经酰胺合酶(glucosylceramide synthase,GCS)基因及其蛋白在人白血病细胞的表达及其与肿瘤多药耐药的关系。首先以β-actin基因为内参照物,采用RT-PCR方法分析了53例耐药/非耐药白血病患者外周血标本,并对药物敏感的HL-60细胞株和对阿霉素耐药的HL-60/ADR细胞株中GCS基因的表达水平进行检测,同时与多药耐药基因(mdr1)的表达进行比较。继而采用Westernblot法分析HL-60细胞株及HL-60/ADR细胞株中GCS蛋白及P-gp蛋白的表达情况。结果表明:白血病患者耐药组临床标本中的GCS基因扩增条带光密度相对比值明显高于非耐药组(P<0.05),且GCS基因扩增条带光密度值显著增强时往往伴有mdr1基因的高表达,两者呈正相关(P<0.01、r=0.6)。HL-60/ADR细胞株GCSmRNA及蛋白均过度表达,且明显高于HL-60细胞株,与此同时,HL-60/ADR细胞株的mdr1mRNA和P-gp的表达亦显著增高。结论:GCS可能在白血病多药耐药中起着重要作用。 展开更多

关键词 葡萄糖神经酰胺合成酶 多药耐药 白血病 HL-60细胞 HL-60/ADR细胞

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米非司酮调控卵巢癌细胞表达葡萄糖神经酰氨合成酶并逆转其多药耐药性 被引量：6

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作者 刘颖 王丽莉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1727-1730,共4页

目的观察米非司酮体外逆转COC1/DDP细胞对顺铂的多药耐药性(MDR)以及对细胞葡萄糖神经酰氨合成酶(GCS)表达的影响,初步探讨其增敏机制。方法以米非司酮为MDR修饰剂,MTT法检测米非司酮对COC1/DDP的增敏效应。RT-PCR技术分析耐药株COC1/DD... 目的观察米非司酮体外逆转COC1/DDP细胞对顺铂的多药耐药性(MDR)以及对细胞葡萄糖神经酰氨合成酶(GCS)表达的影响,初步探讨其增敏机制。方法以米非司酮为MDR修饰剂,MTT法检测米非司酮对COC1/DDP的增敏效应。RT-PCR技术分析耐药株COC1/DDP的MDR逆转前后以及亲本株COC1细胞的GCS在mRNA水平的表达。结果米非司酮增强COC1/DDP细胞对DDP敏感性;与COC1相比,COC1/DDP细胞的GCS在mRNA水平的表达增强;米非司酮使GCS表达降低,效应呈剂量依赖关系。结论无毒性剂量米非司酮可以在体外增加卵巢癌COC1/DDP细胞对DDP的敏感性,作用机制与抑制GCS mRNA表达有关。 展开更多

关键词 米非司酮 卵巢肿瘤 葡萄糖神经酰胺合成酶 多药耐药

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小麦胚乳淀粉合成酶基因研究进展 被引量：7

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作者 余春梅 陈佩度 季本华 《麦类作物学报》 CAS CSCD 2004年第4期123-128,共6页

很多研究表明,小麦胚乳淀粉的合成至少需要四类酶——腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶、淀粉合成酶、淀粉分支酶和淀粉去分支酶,这四类酶的基因克隆和特性的研究有重要进展。目前,已从六倍体小麦发育胚乳的cDNA文库中获得AGPase两个亚基、gb... 很多研究表明,小麦胚乳淀粉的合成至少需要四类酶——腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶、淀粉合成酶、淀粉分支酶和淀粉去分支酶,这四类酶的基因克隆和特性的研究有重要进展。目前,已从六倍体小麦发育胚乳的cDNA文库中获得AGPase两个亚基、gbss 、ss 、ss 、ss 、sbe 、sbe 和su1(dbe)等基因的cDNA;从六倍体小麦的D组供体Triticumtauschii基因组文库中获得ss 、ss 、ss 、sbe 和sbe 的gDNAs;从六倍体中只获得野生型和突变型的gbss (wx)基因。除编码AGPase大亚基的基因和su1基因未进行定位外,ss 位于第一群染色体上,sbe 位于2DL上,其余基因均位于第七群染色体上。 展开更多

关键词 淀粉合成酶 胚乳 六倍体小麦 l基因 腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶 亚基 淀粉分支酶 小麦胚 DL 特性

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人工合成六倍体小麦苗期氮、糖代谢关键酶基因的表达

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作者 王霞 徐亚维 于晓明 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第10期4-7,共4页

以人工合成异源六倍体小麦为材料,采用RT-PCR技术,对六倍体小麦多倍化初期氮、糖代谢关键酶基因(GS1、GS2、G6PDH、SPS)的表达情况进行了研究。结果表明,六倍体小麦GS1基因表达水平较其双亲中值(MPV)显著升高,GS2基因表达水平与其亲本... 以人工合成异源六倍体小麦为材料,采用RT-PCR技术,对六倍体小麦多倍化初期氮、糖代谢关键酶基因(GS1、GS2、G6PDH、SPS)的表达情况进行了研究。结果表明,六倍体小麦GS1基因表达水平较其双亲中值(MPV)显著升高,GS2基因表达水平与其亲本基本一致,而G6PDH基因和SPS基因表达水平较其MPV出现了不同程度的降低。 展开更多

关键词 人工合成六倍体小麦 谷氨酰胺合成酶 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 蔗糖磷酸合成酶 基因表达

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GCS基因的表达与急性白血病耐药的相关性探讨 被引量：2

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作者 谢平 葛素梅 +4 位作者 沈云峰 顾中华 王珏 穆会君 张滨 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期253-255,267,共4页

目的:探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)基因的表达与急性白血病患者耐药的相关性。方法:以β-actin基因为内参照物,采用RT-PCR方法分析了36例耐药/非耐药急性白血病患者血标本中GCS基因及经典的多药耐药基因(md... 目的:探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)基因的表达与急性白血病患者耐药的相关性。方法:以β-actin基因为内参照物,采用RT-PCR方法分析了36例耐药/非耐药急性白血病患者血标本中GCS基因及经典的多药耐药基因(mdr1)的表达情况;并同时对标本中的BCL-2基因和BAX基因的表达水平亦进行了检测,以初步探讨GCS基因导致肿瘤细胞耐药的机制。结果:急性白血病耐药组标本的GCS基因及mdr1基因的扩增条带吸光度(A)相对比值均明显高于非耐药组(P<0.001)。耐药组BCL-2基因扩增条带A相对比值同样明显高于非耐药组(P<0.001),而BAX基因的表达则明显低于非耐药组(P<0.01),BCL/BAX比值在耐药及非耐药组之间差异有显著性(P<0.01)。结论:GCS基因在急性白血病细胞耐药的形成过程中可能起重要作用,且GCS促进肿瘤细胞耐药的机制可能与其通过催化神经酰胺糖基化从而影响凋亡相关基因的表达有关。 展开更多

关键词 急性白血病 耐药 葡萄糖神经酰胺合成酶基因 BCL-2基因 BAX基因

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GCS通过MEK/ERK通路调控白血病多药耐药细胞凋亡相关基因bcl-2的表达 被引量：5

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作者 王倩 邹健 +3 位作者 张秀芬 穆会君 殷莹 谢平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期114-118,共5页

目的:探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)是否通过MEK/ERK信号通路调控凋亡相关基因bcl-2的表达,从而诱导人白血病K562/A02细胞多药耐药。方法:用小干扰RNA(siRNA)靶向干扰K562/A02细胞中GCS的表达,real-time PCR、Western blotting检测Bcl-... 目的:探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)是否通过MEK/ERK信号通路调控凋亡相关基因bcl-2的表达,从而诱导人白血病K562/A02细胞多药耐药。方法:用小干扰RNA(siRNA)靶向干扰K562/A02细胞中GCS的表达,real-time PCR、Western blotting检测Bcl-2、磷酸化及总ERK水平;用MEK特异性化学抑制剂U0126抑制MEK/ERK信号通路的活化,real-time PCR与Western blotting技术分别检测Bcl-2 mRNA与蛋白水平;CCK-8试剂盒检测细胞存活情况。结果:与阴性对照组比较,GCS siRNA明显抑制K562/A02细胞GCS和Bcl-2的表达,并抑制MEK/ERK信号通路的活化;U0126使Bcl-2 mRNA及蛋白水平呈浓度依赖性下降,并使K562/A02细胞ADM敏感性增加。结论:GCS通过MEK/ERK信号通路调控K562/A02细胞株中凋亡相关基因bcl-2的表达,从而诱导白血病细胞多药耐药。 展开更多

关键词 葡萄糖神经酰胺合成酶 MEK/ERK信号通路 基因 BCL-2 抗药性 多药

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酿酒酵母中β-葡聚糖生物合成的研究进展

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作者 莫海珍 刘晓永 胡永金 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期358-362,共5页

本文详细地介绍了酵母β-葡聚糖(SCG)的生物合成的有关内容。酵母β-葡聚糖是以尿嘧啶二磷酸葡萄糖(UDP-Glc)为前体物质经葡聚糖合成酶(GS)将葡萄糖转移到葡聚糖主链的非还原端而生成可溶性的SCG,在壳聚糖合成酶Ⅲ(CSⅢ)作用下几丁质还... 本文详细地介绍了酵母β-葡聚糖(SCG)的生物合成的有关内容。酵母β-葡聚糖是以尿嘧啶二磷酸葡萄糖(UDP-Glc)为前体物质经葡聚糖合成酶(GS)将葡萄糖转移到葡聚糖主链的非还原端而生成可溶性的SCG,在壳聚糖合成酶Ⅲ(CSⅢ)作用下几丁质还原端以β-1,4键/β-1,2键的形式与β-1,3葡聚糖链支链的非还原端共价连接,形成了不可溶的SCG。此外,还对葡聚糖合成酶(GS)主要基因学的最新进展进行了阐述,其中FKS1和FKS2编码着β-1,3-葡聚糖酶的基本组分蛋白,RHO1基因则对β-1,3葡聚糖的合成进行调控;对β-1,6葡聚糖合成的基因尚不是很明确,目前已确定:KRE5、KRE6、CWH4p、ROT2和SKN1等基因对β-1,6葡聚糖的含量有着明显的影响。在此基础上,对有关酵母β-葡聚糖的将来研究方向提出了自己的见解。 展开更多

关键词 酵母Β-葡聚糖 生物合成 酿酒酵母 葡聚糖合成酶 磷酸葡萄糖 Β-葡聚糖酶 基因学 β-1

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食品上的应用

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《生物技术通报》 CAS CSCD 1989年第4期91-96,共6页

乳链球菌广泛应用于乳品和其他食品发酵,因此人们有兴趣用重组 DNA 技术进行菌株改良。采用原生质体融合使乳链球菌(Streptococcus lactis)和枯草芽孢杆菌(Baccllus subtilis)之间进行质粒的基因间转移。细胞分别在 M17-glc 或 LB 肉汁... 乳链球菌广泛应用于乳品和其他食品发酵,因此人们有兴趣用重组 DNA 技术进行菌株改良。采用原生质体融合使乳链球菌(Streptococcus lactis)和枯草芽孢杆菌(Baccllus subtilis)之间进行质粒的基因间转移。细胞分别在 M17-glc 或 LB 肉汁中培养,然后收获,并悬浮于 SMMP 和 SMM-M17-glc中。利用40%聚乙二醇6000在SMM 中进行原生质体融合。进行了原生质体再生的选择。 展开更多

关键词 葡萄糖淀粉酶 亲株 突变株 延胡索酸 合成酶基因 原养型 二脂酞甘油 营养缺陷 互补试验 表异构酶

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