用荧光定量法检测Caspase-3的活性 被引量：14

1

作者 张勇 沈佰华 +3 位作者 余奇文 马安伦 李宁丽 张冬青 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期188-190,共3页

目的通过检测Caspase3的活性反映Jurkat细胞凋亡。方法用放线菌素D诱导Jurkat细胞8h,裂解细胞,荧光分光光度计测定Caspase3的活性。同时,用Hoechst法进行检测,并进行平行的方法学比较。结果Ju-rkat细胞经不同浓度50μmol/L和100μmo... 目的通过检测Caspase3的活性反映Jurkat细胞凋亡。方法用放线菌素D诱导Jurkat细胞8h,裂解细胞,荧光分光光度计测定Caspase3的活性。同时,用Hoechst法进行检测,并进行平行的方法学比较。结果Ju-rkat细胞经不同浓度50μmol/L和100μmol/L的放线菌素D诱导后,Caspase3的活性显著增高,倍增值分别为10.091和10.818,相应的Caspase3活性单位为0.641和0.659;而未经诱导的Jurkat细胞仅为0.061。加入Cas-pase3抑制剂后,倍增值分别为0.101和0.119,Caspase3的活性单位为0.006和0.007。而用Hoechst法染色时,可见Jurkat细胞仅出现早期凋亡的形态学改变。结论荧光定量法是一种良好的定量检测Caspase3的方法,可用于检测早期的细胞凋亡。 展开更多

关键词 CASPASE-3 荧光定量法 细胞凋亡 检测 JURKAT细胞

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荧光定量法测量平滑肌细胞内钙离子浓度的探讨 被引量：1

2

作者 王水云 晏芳 +2 位作者 彭贺新 郑昌东 柏承文 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第4期450-452,共3页

目的研究平滑肌细胞内Ca2+浓度的动力学变化,建立一种定量测量细胞内Ca2+浓度的方法。方法分离肠系膜细动脉血管平滑肌(ASMC)细胞,用荧光探针Indo-1和激光扫描共聚焦显微成像技术测定单个平滑肌细胞Ca2+浓度的动力学变化;首先在37 ℃环... 目的研究平滑肌细胞内Ca2+浓度的动力学变化,建立一种定量测量细胞内Ca2+浓度的方法。方法分离肠系膜细动脉血管平滑肌(ASMC)细胞,用荧光探针Indo-1和激光扫描共聚焦显微成像技术测定单个平滑肌细胞Ca2+浓度的动力学变化;首先在37 ℃环境下标定Ca2+ 探针indo-1的解离常数Kd值,根据荧光-浓度换算公式将测量的荧光强度值换算成Ca2+ 浓度值。结果激光扫描共聚焦显微成像技术测量的细胞荧光图像分析显示,平滑肌细胞[Ca2+]i 在地塞米松的刺激下显著上升,有时会出现自发钙波的现象,并且细胞内出现钙超载的现象(细胞荧光图像呈现白色)。通过测量得到的Kd值结合荧光强度-浓度换算公式可准确地测量细胞内[Ca2+]i 。结论荧光定量法结合共聚焦显微成像技术可以简易、快捷地监测细胞内钙离子的动力学变化,不失为一种定量测量细胞内钙离子的方法。 展开更多

关键词 荧光定量法 测量 平滑肌细胞 钙离子 浓度

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甘精胰岛素生物学活性定量免疫荧光测定法和胰岛素生物测定法的等效性研究 被引量：1

3

作者 高益敏 张红梅 +3 位作者 何开勇 尹登科 孙备 许雷鸣 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2193-2199,共7页

目的建立甘精胰岛素基于转基因细胞CHO-INSRB 1284的定量免疫荧光生物学活性测定法(In-Cell Western,ICW),并将其与《中国药典》胰岛素生物测定法进行等效性研究。方法CHO-INSRB 1284细胞以1.5×10^(8) L^(-1)细胞密度铺板,1500μmo... 目的建立甘精胰岛素基于转基因细胞CHO-INSRB 1284的定量免疫荧光生物学活性测定法(In-Cell Western,ICW),并将其与《中国药典》胰岛素生物测定法进行等效性研究。方法CHO-INSRB 1284细胞以1.5×10^(8) L^(-1)细胞密度铺板,1500μmol·L^(-1)甘精胰岛素稀释25倍后再进行3倍系列梯度稀释,在微孔板刺激细胞20 min,经固定、透化及抗体孵育步骤,利用odyssey双色红外荧光成像系统,进行定量免疫荧光生物学活性检测。结果ICW中甘精胰岛素的浓度与相对效价具有良好的量效关系;方法专属性好,相对准确度、中间精密度及线性均符合要求;7批甘精胰岛素样品采用两种方法测定的生物学活性结果相对偏差低于10%,用SPSS软件和SAS软件分析,表明方法具有相关性及等效性。结论建立的甘精胰岛素生物学活性定量免疫荧光测定法,方法专属性好,准确度及精密度高,与体内胰岛素生物测定法具有相关性和等效性,可用于甘精胰岛素的体外药效评价和质量控制。 展开更多

关键词 生物学活性 甘精胰岛素 定量免疫荧光测定法 转基因细胞 方法学验证 等效性评价

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牛奶β-乳球蛋白质实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：12

4

作者 贾敏 张银志 +1 位作者 张亦凡 孙秀兰 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期605-612,共8页

建立一种快速、特异、灵敏的Taqman实时荧光定量PCR（real-time PCR）方法,用于牛奶主要过敏原β-乳球蛋白质的检测。根据Gen Bank登录的牛β-乳球蛋白质的DNA序列设计,合成一对特异性引物和探针。将扩增产物连接到p MD19-T载体上,制备... 建立一种快速、特异、灵敏的Taqman实时荧光定量PCR（real-time PCR）方法,用于牛奶主要过敏原β-乳球蛋白质的检测。根据Gen Bank登录的牛β-乳球蛋白质的DNA序列设计,合成一对特异性引物和探针。将扩增产物连接到p MD19-T载体上,制备质粒标准品并测序鉴定,10倍梯度稀释含有β-乳球蛋白质基因的重组质粒,进行实时荧光定量PCR扩增,绘制标准曲线,检测该方法的特异性、稳定性、灵敏性,同时将建立的方法用于10种市售食品的检测。成功建立了β-乳球蛋白质的实时荧光定量PCR检测方法,标准曲线的Ct值与模板浓度在3.18×103~3.18×107copies范围内线性关系良好,R2值为0.997 8;检测灵敏度高（318 copies/μL）;特异性强,对羊奶、豆浆DNA均无扩增反应;稳定性好,组内、组间的变异系数均在5%以内。对10种食品牛奶过敏原的检测结果与标签相符。表明所建立的实时荧光定量PCR方法可应用于食品中牛奶过敏原β-乳球蛋白质的检测并可推广到其它过敏原的检测。 展开更多

关键词 牛奶过敏原质 β-乳球蛋白质 Taqman实时荧光定量PCR法 检测

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牛冠状病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：10

5

作者 王莎莎 王吉 岳秉飞 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期69-73,共5页

目的建立特异灵敏的牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCV)荧光定量PCR检测方法,并对牛源性样本进行筛查。方法根据Genbank中登录的BCV的N基因序列设计Taq Man引物探针,建立基于Taq Man探针法的BCV PCR检测方法,对收集到的牛源样本进行BC... 目的建立特异灵敏的牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCV)荧光定量PCR检测方法,并对牛源性样本进行筛查。方法根据Genbank中登录的BCV的N基因序列设计Taq Man引物探针,建立基于Taq Man探针法的BCV PCR检测方法,对收集到的牛源样本进行BCV筛查,并对部分阳性样本的PCR产物进行测序鉴定。结果建立了能够特异检测BCV的Taq Man探针法荧光定量PCR检测方法,其标准曲线相关系数Slope为-3.417,相关系数r2为0.999,,扩增效率Eff为96.195%。该方法检测BCV的敏感度为40 copies。使用该方法检测64份牛肛拭子样本检出率为1.5%,检测33份牛源生物制品检出率为6%,部分阳性样本的PCR产物经测序比对为BCV核酸序列,说明BCV在国内牛群中流行,牛源相关生物制品中有感染BCV的潜在风险。结论经测序验证,建立的方法能够灵敏的检测样本中的BCV核酸,应加强牛源相关生物制品中BCV的监测,避免人感染BCV的潜在风险。 展开更多

关键词 牛冠状病毒 TAQ Man探针法荧光定量PCR方法 检测和初步应用

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实时荧光定量PCR法快速测定水中微囊藻 被引量：1

6

作者 李继影 吴昕贤 +2 位作者 徐恒省 刘孟宇 景明 《环境监测管理与技术》 2013年第6期47-51,共5页

以铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)16S rRNA基因片段为靶序列设计一对特异性引物,采用Real-time PCR法,对铜绿微囊藻进行定性、定量检测。试验表明,仅含铜绿微囊藻DNA模板的样品有特异性扩增,扩增产物熔解曲线平稳,峰尖且窄,熔解温... 以铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)16S rRNA基因片段为靶序列设计一对特异性引物,采用Real-time PCR法,对铜绿微囊藻进行定性、定量检测。试验表明,仅含铜绿微囊藻DNA模板的样品有特异性扩增,扩增产物熔解曲线平稳,峰尖且窄,熔解温度为(87±1)℃。以重组质粒pMD-18T-16S为标准品,检测区间为1.1×102copies/mL～1.1×108copies/mL,所得标准曲线符合制备实时定量PCR标准曲线的要求,对标准品进行测定,方法检出限为11 copies/mL。用该标准曲线对实验室培养获得的铜绿微囊藻DNA样品进行定量检测,与显微镜计数结果基本一致。 展开更多

关键词 微囊藻 实时荧光定量PCR法 16S RRNA 水质

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实时荧光定量PCR法测定禽蛋中沙门氏菌 被引量：5

7

作者 张波 汪永信 《现代农业科技》 2012年第10期333-335,337,共4页

为建立禽蛋中沙门氏菌的荧光PCR法检测方法,根据invA基因序列设计实时荧光定量PCR引物和探针,常规方法提取菌体DNA,以55℃为退火温度进行荧光PCR扩增,并进行方法学考察。结果表明:阳性对照品和沙门氏菌为模板的样品有明显扩增曲线,其他... 为建立禽蛋中沙门氏菌的荧光PCR法检测方法,根据invA基因序列设计实时荧光定量PCR引物和探针,常规方法提取菌体DNA,以55℃为退火温度进行荧光PCR扩增,并进行方法学考察。结果表明:阳性对照品和沙门氏菌为模板的样品有明显扩增曲线,其他菌株为模板的样品无扩增曲线,特异性、灵敏度和重现性考察提示实时荧光定量PCR方法符合检测方法学要求。实时荧光定量PCR法的应用,提高了禽蛋制品中沙门氏菌检测的灵敏度、缩短了检测时间、简化了检测流程。 展开更多

关键词 实时荧光定量聚合酶链式反应法 沙门氏菌 禽蛋

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猪瘟石门系强毒株SYBR Green-Ⅰ染料法实时荧光定量PCR方法的建立 被引量：4

8

作者 王伟 邹月红 +6 位作者 李雪松 陈欣 郎越坤 田华斌 符芳 李曦 李集临 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第3期104-107,共4页

为了能快速、准确地诊断猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)石门系强毒,根据登录在GenBank上23株Shimen毒株的全基因组序列,利用DNASIS软件进行序列分析,设计1对特异的荧光定量引物。建立猪瘟石门系强毒株SYBR Green-Ⅰ染料法... 为了能快速、准确地诊断猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)石门系强毒,根据登录在GenBank上23株Shimen毒株的全基因组序列,利用DNASIS软件进行序列分析,设计1对特异的荧光定量引物。建立猪瘟石门系强毒株SYBR Green-Ⅰ染料法实时荧光定量PCR快速检测方法。试验结果表明,本方法最低可检测到的Shimen病毒cDNA含量为100拷贝/μL,敏感度至少是普通PCR的100倍;猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、牛流行腹泻病毒Ⅰ型(BVDV-1)和猪瘟病毒C株均无特异性扩增,证明本方法具有很强的特异性;通过批内和批间重复试验,其变异系数<0.7%,结果显示本方法具有很好的重复性。本研究建立了猪瘟石门系强毒株SYBR Green-Ⅰ染料法实时荧光定量PCR快速检测方法,为猪瘟的预防与控制提供了有效的技术手段,并为猪瘟强毒试剂盒的研发奠定了基础。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 Shimen毒株 SYBRGreen-Ⅰ染料法实时荧光定量PCR

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荧光定量PCR法检测乙肝病毒的临床意义 被引量：18

9

作者 钱宇 潘钰卿 高睛 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2001年第4期372-373,共2页

目的探讨荧光定量PCR法检测乙肝病毒的临床意义。　方法荧光定量PCR法检测 15 4例患者的乙肝病毒量 ,研究其与乙肝病毒抗体 ,谷丙转氨酶 (ALT)及反映肝纤维化指标的透明质酸酶 (HA)与层粘蛋白 (LN)的关系。　结果免疫荧光定量PCR方法直... 目的探讨荧光定量PCR法检测乙肝病毒的临床意义。　方法荧光定量PCR法检测 15 4例患者的乙肝病毒量 ,研究其与乙肝病毒抗体 ,谷丙转氨酶 (ALT)及反映肝纤维化指标的透明质酸酶 (HA)与层粘蛋白 (LN)的关系。　结果免疫荧光定量PCR方法直接测定病毒量 ,明确反映病毒感染程度 ,其测定值与ALT呈一定程度正相关 ,与肝炎轻、中、重程度及肝纤维化程度成反比。 展开更多

关键词 慢性乙型肝炎 免疫荧光定量PCR法 诊断 聚合酶链反应

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荧光定量PCR法和基因芯片分型法检测人乳头瘤病毒应用对照研究 被引量：2

10

作者 席雅娟 肖海燕 李靖 《海南医学院学报》 CAS 2013年第5期696-698,701,共4页

目的:探讨荧光定量PCR法和基因芯片分型法对人乳头瘤病毒(HPV)的各自检测效果。方法:选择生殖系病变患者208例,采集其病变组织进行冻存,使用基因芯片分型法进行HPV的检查,并同时对使用基因芯片分型法检查阳性的182例患者的分泌物使用荧... 目的:探讨荧光定量PCR法和基因芯片分型法对人乳头瘤病毒(HPV)的各自检测效果。方法:选择生殖系病变患者208例,采集其病变组织进行冻存,使用基因芯片分型法进行HPV的检查,并同时对使用基因芯片分型法检查阳性的182例患者的分泌物使用荧光定量PCR法对HPV16,18型进行检测。结果:使用基因芯片分型法检查出的HPV阳性率为87.5%,荧光定量法对HPV18,18型的阳性检查率为79.67%,具有统计学差异;阳性检出率均以22～40岁的患者最多,且在宫颈癌患者中的阳性检出率最高。结论:基因芯片检查法对HPV具有高度的敏感性,荧光定量PCR法对HPV的敏感度较基因芯片检查法低。HPV阳性多发生于22～40岁及宫颈癌患者。 展开更多

关键词 荧光定量PCR法 基因芯片分型法 HPV

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金黄色葡萄球菌荧光定量PCR法与国标培养法的比较 被引量：1

11

作者 黄小真 林磊 +1 位作者 张鑫桐 林清荷 《农村科学实验》 2019年第2期81-82,共2页

目的比较荧光定量PCR法、Baird-Parker平板计数法、MPN计数法,探索荧光定量PCR快速筛检金黄色葡萄球菌方法的灵敏性和可行性,为缩短食品中金黄色葡萄球菌的检测时效提供参考。方法以金黄色葡萄球菌定量检测能力验证样本、年糕、调理肉... 目的比较荧光定量PCR法、Baird-Parker平板计数法、MPN计数法,探索荧光定量PCR快速筛检金黄色葡萄球菌方法的灵敏性和可行性,为缩短食品中金黄色葡萄球菌的检测时效提供参考。方法以金黄色葡萄球菌定量检测能力验证样本、年糕、调理肉制品、酱卤肉、方便米饭为试验样品,针对三种检测方法设计灵敏性试验和人工污染试验。结果灵敏性试验三种方法在浓度105CFU/ml均有阳性检出,MPN计数法灵敏性略好,人工污染试验符合预期。结论荧光定量PCR法可为食品中金黄色葡萄球菌应急检测提供依据。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 荧光定量PCR法 Baird-Parker平板计数法 MPN计数法

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动力学模型在荧光定量PCR数据处理中的优势 被引量：2

12

作者 刘彦礼 李旭 +2 位作者 苏振成 徐明恺 张惠文 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期157-162,共6页

近年来荧光定量PCR技术凭借其基因定量的优势而得到了广泛应用,上游技术的发展保障了原始数据的精确性,但定量结果的可靠性仍取决于PCR扩增效率和所采用的数据处理模型,基于不同数学模型对原始数据处理后的结果会有较大差异。试验通过... 近年来荧光定量PCR技术凭借其基因定量的优势而得到了广泛应用,上游技术的发展保障了原始数据的精确性,但定量结果的可靠性仍取决于PCR扩增效率和所采用的数据处理模型,基于不同数学模型对原始数据处理后的结果会有较大差异。试验通过对样品进行5倍梯度稀释后获得相应梯度的荧光定量PCR原始数据,并应用2-△△Ct法、相对标准曲线法和动力学模型处理原始数据,所得定量结果(x-±s)依次为1.76±0.70、0.89±0.14和0.99975±0.06,与理论值1比较表明,动力学模型在定量结果的可靠性、方便性及经费节约方面都具有良好应用前景。 展开更多

关键词 荧光定量PCR2-△△Ct法 相对标准曲线法 动力学模型

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TaqMan荧光定量PCR在饲料沙门氏菌检测中的应用评估 被引量：3

13

作者 佘容 罗丹 +2 位作者 刘耀敏 范秀丽 颜其贵 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期947-951,共5页

为评估Taq Man荧光定量PCR应用于饲料沙门氏菌检测的可行性,本研究以沙门氏菌JEO402-1基因为靶基因,并采用已建立的沙门氏菌Taq Man荧光定量PCR检测方法,进行了特异性、灵敏度、检测限等相关方法学验证。结果显示:Taq Man荧光定量PCR法... 为评估Taq Man荧光定量PCR应用于饲料沙门氏菌检测的可行性,本研究以沙门氏菌JEO402-1基因为靶基因,并采用已建立的沙门氏菌Taq Man荧光定量PCR检测方法,进行了特异性、灵敏度、检测限等相关方法学验证。结果显示:Taq Man荧光定量PCR法特异性良好,在饲料加标样本检测中的最低检测限为2×10^(-1)cfu/m L。重复性试验表明,在不同浓度样本中的变异系数均低于1.0%,具有较高的重复性和稳定性。利用该方法和传统培养法对72份饲料样本进行检测,结果显示两种方法检测结果符合率为65.3%,Taq Man荧光定量PCR法阳性检出率比传统培养法高34.7%;传统培养法检测阳性样本,PCR法检测结果均为阳性。以上结果表明,本研究建立的Taq Man荧光定量PCR法可以应用于饲料样本的沙门氏菌检测。 展开更多

关键词 沙门氏菌 TaqMan荧光定量PCR法 检测限

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种子类中药材油脂过氧化值的荧光半定量检测 被引量：1

14

作者 叶廷秀 罗红元 +3 位作者 范晓萱 米燕 余亚选 陈曦 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1188-1193,共6页

该文基于油脂中的过氧化物与9-十八烯基碘化胺(OAmI)发生氧化还原反应,以及OAmI中的碘离子易与铯铅溴钙钛矿纳米晶(CsPbBr3 NCs)中的溴离子发生卤素交换并引起CsPbBr3 NCs荧光发射波长及荧光颜色改变的原理,建立了一种利用荧光发射波长... 该文基于油脂中的过氧化物与9-十八烯基碘化胺(OAmI)发生氧化还原反应,以及OAmI中的碘离子易与铯铅溴钙钛矿纳米晶(CsPbBr3 NCs)中的溴离子发生卤素交换并引起CsPbBr3 NCs荧光发射波长及荧光颜色改变的原理,建立了一种利用荧光发射波长移动检测富含油脂的种子类中药材过氧化值(PON)的方法,并根据钙钛矿纳米晶颜色变化初步制作了荧光半定量比色卡。结果表明,对比国家标准方法,该荧光发射波长移动法检测PON的相对误差在10%左右;通过颜色变化,可快速判断中药材油脂的氧化程度,实现苦杏仁、桃仁等种子类中药材油脂氧化程度的荧光半定量检测。 展开更多

关键词 种子类中药材 油脂氧化 过氧化值 荧光半定量法

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盐酸克伦特罗荧光定量检测试剂盒质量的评价 被引量：4

15

作者 葛怀礼 王莲 +4 位作者 李金卿 郑百芹 李爱军 张建民 董李学 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第10期285-289,共5页

本研究使用盐酸克伦特罗荧光定量检测试剂盒,基于免疫荧光层析原理,实现对猪尿中所含克伦特罗的定量检测,并对试纸条的灵敏度、准确度与精密度、特异性、稳定性等进行了初步的性能评价。结果表明,以四参数法对定量曲线进行拟合,线性系数... 本研究使用盐酸克伦特罗荧光定量检测试剂盒,基于免疫荧光层析原理,实现对猪尿中所含克伦特罗的定量检测,并对试纸条的灵敏度、准确度与精密度、特异性、稳定性等进行了初步的性能评价。结果表明,以四参数法对定量曲线进行拟合,线性系数为R2=0.99972;检测限达到0.1μg/L;对3个不同浓度的添加回收试验,测得其回收率为80%~120%;批内变异系数分别为12.2%、11.1%、15.2%;与4种β-肾上腺素受体激动剂和8种常用的抗生素交叉反应率均低于0.01%;同时验证了本试剂盒在1年的保存期限有效。整个检测过程只需15min。 展开更多

关键词 盐酸克伦特罗 荧光定量免疫层析法 检测

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鼠痘病毒FQ-PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：1

16

作者 王莎莎 付瑞 +1 位作者 王吉 岳秉飞 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第1期101-105,共5页

目的建立鼠痘病毒(ECTV)的Taq Man探针法荧光定量PCR检测方法,并对实验室保存的裸鼹鼠组织样本、小鼠组织样本以及黄鼠组织样本进行检测。方法根据Gen Bank中鼠痘病毒的crm D基因序列设计引物探针,建立ECTV的FQ-PCR检测方法,对保存的样... 目的建立鼠痘病毒(ECTV)的Taq Man探针法荧光定量PCR检测方法,并对实验室保存的裸鼹鼠组织样本、小鼠组织样本以及黄鼠组织样本进行检测。方法根据Gen Bank中鼠痘病毒的crm D基因序列设计引物探针,建立ECTV的FQ-PCR检测方法,对保存的样本进行筛查,并对部分阳性样本进行测序鉴定。结果建立的ECTV FQ-PCR检测方法灵敏度高、特异性强,最低能检测到ECTV核酸浓度为10 copies/μL的样本,方法的标准曲线相关参数符合标准。使用该方法检测实验室63份裸鼹鼠脾组织样本和22份小鼠脾组织样本,结果全为阴性,检测4只黄鼠组织样本,结果阳性率为50%。阳性样本进行PCR检测后测序比对为ECTV核酸序列。结论经验证,建立的ECTV FQ-PCR检测方法能够灵敏特异的对样本中的ECTV进行筛查,实验室小鼠的日常监测不应忽视ECTV污染的潜在风险。 展开更多

关键词 鼠痘病毒 TaqMan探针法荧光定量PCR方法 裸鼹鼠 黄鼠

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慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡与血清HBVDNA定量关系的研究

17

作者 陈志伟 叶晓光 +3 位作者 苏杭 郭海波 黄远明 卓树洪 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2004年第6期337-338,共2页

探讨慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡与血清HBVDNA定量的关系。分别采用流式细胞计数仪和荧光定量PCR法检测慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡率与血清HBVDNA。慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡率明显高于正常对照组 ,且与血清... 探讨慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡与血清HBVDNA定量的关系。分别采用流式细胞计数仪和荧光定量PCR法检测慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡率与血清HBVDNA。慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞凋亡率明显高于正常对照组 ,且与血清HBVDNA水平呈正相关。 展开更多

关键词 外周血淋巴细胞凋亡 慢性乙型肝炎患者 血清HBV DNA定量 荧光定量PCR法 对照组 正常 研究 水平 关联

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BRAF V600突变非小细胞肺癌临床病理特征分析

18

作者 郭雨 王晓敏 《临床与实验病理学杂志》 北大核心 2025年第6期759-764,共6页

目的探讨BRAF V600突变非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的临床病理学特征。方法收集2069例NSCLC样本,使用实时荧光定量PCR法检测BRAF、EGFR、KRAS、HER2、MET基因突变和ALK、ROS1、RET基因融合状态。采用免疫组化法检测... 目的探讨BRAF V600突变非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的临床病理学特征。方法收集2069例NSCLC样本,使用实时荧光定量PCR法检测BRAF、EGFR、KRAS、HER2、MET基因突变和ALK、ROS1、RET基因融合状态。采用免疫组化法检测PD-L1蛋白表达。分析BRAF V600突变阳性与患者年龄、性别、吸烟史、肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期、PD-L1蛋白表达、病理学类型、分化程度等临床病理特征的关系。结果在2069例NSCLC样本中,合计检出BRAF V600突变43例(2.08%),其中女性27例,男性16例,中位年龄64岁(范围47~81岁)。41例BRAF V600突变NSCLC患者的病理类型是腺癌,2例为大细胞癌。有15例患者接受手术治疗,其中4例(26.7%)伴有微乳头成分。临床TNM分期:Ⅰ+Ⅱ期13例,Ⅲ+Ⅳ期30例。BRAF V600突变和EGFR基因双突变者3例。BRAF V600突变者中PD-L1阳性率≥1%者占63.6%(7/11)。NSCLC组织中BRAF V600突变与患者性别、吸烟史、组织学亚型相关。BRAF V600突变患者中有17例患者接受化疗,7例接受BRAF靶向治疗。生存分析显示,BRAF靶向治疗患者的中位无进展生存期长于化疗患者,但差异无统计学意义(13个月vs 11个月,P=0.197)。结论女性、无吸烟史、组织学亚型为实体型和腺泡型的NSCLC患者有更高的BRAF V600突变率。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 BRAF 实时荧光定量PCR法 临床病理特征

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不同地域益智品质差异化相关基因相对表达量分析

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作者 刘嘉褀 贾玉平 +2 位作者 瞿云苹 罗凡 潘坤 《热带农业科学》 2025年第5期1-8,共8页

萜类和黄酮类是药用植物益智果实中的主要药效成分,本课题组前期研究筛选出了其代表性成分圆柚酮和山奈酚生物合成相关的一些基因。为了进一步明确造成地域间这2种物质含量差异显著的相关候选基因,本研究通过实时荧光定量PCR法,对上述... 萜类和黄酮类是药用植物益智果实中的主要药效成分,本课题组前期研究筛选出了其代表性成分圆柚酮和山奈酚生物合成相关的一些基因。为了进一步明确造成地域间这2种物质含量差异显著的相关候选基因,本研究通过实时荧光定量PCR法,对上述相关基因进行定量分析,比较不同地域益智样本中的相对含量差异,筛选出表达量变化与圆柚酮和山奈酚含量相一致的基因作为关键候选基因。结果表明,涉及益智圆柚酮和山奈酚生物合成的相关基因分别为Cluster-27812.24310和Cluster-27812.43619,其表达量在不同地域间存在显著差异,尤其是Cluster-27812.24310的表达量与圆柚酮的含量相一致,因此认为其是圆柚酮生物合成的正向调控基因。本研究结果可为后续研究造成益智品质差异的相关基因功能及其分子机制提供参考。 展开更多

关键词 益智 圆柚酮 山奈酚 候选基因 荧光实时定量法

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实验室2种检测小儿巨细胞病毒方法的比较 被引量：2

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作者 李娇 马洪刚 单风平 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第1期100-103,共4页

比较胶体金法和实时定量PCR法对小儿巨细胞病毒IgM抗体水平检测的敏感性及准确率。收集临床上243例小儿的血液标本,分别采用实时荧光定量PCR法和胶体金法检测这243例患者外周血巨细胞病毒IgM抗体水平,并对这2种检测方法的阳性率和敏感... 比较胶体金法和实时定量PCR法对小儿巨细胞病毒IgM抗体水平检测的敏感性及准确率。收集临床上243例小儿的血液标本,分别采用实时荧光定量PCR法和胶体金法检测这243例患者外周血巨细胞病毒IgM抗体水平,并对这2种检测方法的阳性率和敏感性进行比较分析。实时荧光定量PCR法阳性率为11.93%,胶体金法为6.58%,2者差异有统计学意义(P<0.01)。在HCMV-DNA检测阳性患者中,IgM抗体阳性组HCMV-DNA拷贝数显著高于阴性组(P<0.01),比较这2种检测方法的敏感性,实时荧光定量PCR法的敏感性为72.5%,胶体金法的敏感性为40%,两者差距有统计学意义(P<0.01)。实时荧光定量PCR法与胶体金法相比,对巨细胞病毒IgM抗体检测具有较高的敏感性和准确率,值得临床推广应用。 展开更多

关键词 实时荧光定量PCR法 胶体金法 巨细胞病毒IgM抗体

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