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苏云金杆菌菌株分离筛选及防效研究
1
作者 刘佳 王永芳 +2 位作者 张立娇 王孟泉 林永岭 《农业灾害研究》 2025年第3期28-30,共3页
玉米鳞翅目害虫会影响玉米的产量和品质安全,生防药剂安全、高效,是杀灭此类害虫的防控药剂。对采集自生产田玉米穗部棉铃虫死亡虫体进行苏云金杆菌菌株分离,经室内生测筛选出2株高活力菌株,利用其发酵液连续两年进行大田生防试验。结... 玉米鳞翅目害虫会影响玉米的产量和品质安全,生防药剂安全、高效,是杀灭此类害虫的防控药剂。对采集自生产田玉米穗部棉铃虫死亡虫体进行苏云金杆菌菌株分离,经室内生测筛选出2株高活力菌株,利用其发酵液连续两年进行大田生防试验。结果表明:2023年和2024年Bt-7菌株对玉米鳞翅目害虫被害株防效分别为86.32%和86.81%,穗腐防效分别为87.64%和89.41%,与苏云金杆菌商品制剂“耕田人”的防效相当。2023年和2024年Bt-2菌株对玉米鳞翅目害虫被害株防效分别为63.16%和63.74%,穗腐防效分别为67.42%和67.06%,与化学药剂防效相当。两年生防试验示范效果稳定,说明Bt-7菌株和Bt-2菌株是具有鳞翅目害虫生防开发潜力的2个菌株。 展开更多
关键词 玉米 鳞翅目害虫 苏云金杆菌 分离筛选防效
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粉被虫草(Cordyceps pruinosa Petch)无性型对苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis subsp.galleria Heimpel)抗紫外辐射的保护效应 被引量：18
2
作者 黄建忠 梁宗琦 刘爱英 《西南农业学报》 CSCD 1992年第2期63-67,共5页
本文首次报道了粉被虫草的无性型粉被马利娅霉(Mariannaea PruinosaLiang)对苏云金杆菌抗紫外辐射的保护作用,建立了粉被马利娅霉抗紫外辐射物质的苏云金杆菌检测法。用粉被马利娅霉的培养液、菌丝体浸提液及孢梗束浸提液所培养的苏云... 本文首次报道了粉被虫草的无性型粉被马利娅霉(Mariannaea PruinosaLiang)对苏云金杆菌抗紫外辐射的保护作用,建立了粉被马利娅霉抗紫外辐射物质的苏云金杆菌检测法。用粉被马利娅霉的培养液、菌丝体浸提液及孢梗束浸提液所培养的苏云金杆菌经紫外辐射后,活菌数依次比对照提高26.3％、138.6％、187.8％。揭示了抗辐射物质的含量是孢梗束高,菌丝体次之,培养液最低的趋势。不同来源的粉被马利娅霉菌株抗紫外辐射物质的含量是有差异的。 展开更多
关键词 粉被虫草 苏云金杆菌 辐射 虫草
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苏云金芽胞杆菌可视化快速表达载体的构建与特性分析
3
作者 张静安 胡孝龙 +5 位作者 曹蓓蓓 廖敏 束长龙 张杰 王奎 操海群 《生物技术通报》 北大核心 2025年第1期95-102,共8页
【目的】构建可以快速高效表达苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫基因的表达载体,提高Bt杀虫基因发掘及功能研究效率。【方法】以pUC18载体为基础,构建一个以cry1Ac基因启动子p1Ac指导、融合绿色荧光蛋白GFP的可视化快速... 【目的】构建可以快速高效表达苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫基因的表达载体,提高Bt杀虫基因发掘及功能研究效率。【方法】以pUC18载体为基础,构建一个以cry1Ac基因启动子p1Ac指导、融合绿色荧光蛋白GFP的可视化快速表达载体p1Ac-GFP,并从生物活性、碱溶性、抗胰蛋白酶稳定性、培养条件等方面对其进行分析。【结果】p1Ac-GFP在大肠杆菌中指导表达的Cry1Ac蛋白与Bt来源的蛋白在杀虫活性方面无明显差异。同时,p1Ac-GFP表达的Cry1Ac蛋白能够溶解于50 mmol/L Na_(2)CO_(3)溶液中,可溶性组分可被胰蛋白酶消化为60 kD大小的核心活性片段。此外,p1Ac-GFP大肠杆菌宿主菌株可以发出绿色荧光,培养菌液荧光强度与所表达的Bt蛋白浓度呈较好的线性关系。培养条件优化结果显示,37℃、培养液与装瓶体积比为5/5、48 h的培养时间最适合p1Ac-GFP表达Bt Cry1Ac蛋白。【结论】p1Ac-GFP表达Bt蛋白时可以直接使用菌液荧光强度作为生物活性测定的浓度指示依据,有助于Bt基因杀虫活性功能的快速批量筛选。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 杀虫基因 cry1Ac启动子 大肠杆菌 表达载体
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八字地老虎高毒力苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)菌株的筛选 被引量：4
4
作者 于洪春 王雨薇 +2 位作者 宋龙腾 邓佳佳 许国庆 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期128-133,共6页
摘要：苏云金杆菌是应用最广泛的昆虫病原微生物。文章采用叶片浸渍法，室内用50株Bt菌株对4～5日龄八字地老虎幼虫进行生物测定。结果表明，菌株Btl5、Bt43、Bt47、Bt65、Bt66对八字地老虎幼虫有较高毒力，其中以茵株Btl5毒力最高，其... 摘要：苏云金杆菌是应用最广泛的昆虫病原微生物。文章采用叶片浸渍法，室内用50株Bt菌株对4～5日龄八字地老虎幼虫进行生物测定。结果表明，菌株Btl5、Bt43、Bt47、Bt65、Bt66对八字地老虎幼虫有较高毒力，其中以茵株Btl5毒力最高，其对低龄八字地老虎幼虫杀虫效果可达90％~X上，在第5、7、10天毒力回归方程分别为产28．61353x一177．58825（,-=0．944799），y=37．42650x一226．25199（r=0．983670），y=36．72547x一206．81374（r=0．931267）；其中Lcso分别为9~10’、2．4~10’、0．98~10’efu·mL～。在5×10。、1~10。efu·mL。浓度下，其LT50、u、，o和u、，0分别为2．23、2．75、3．73d；4．28、6．19、10．55d。表明该菌株是一株对八字地老虎有很好生物防治应用前景的Bt菌株。 展开更多
关键词 八字地老虎 苏云金杆菌 生物测定 毒力 致死中浓度 致死时间
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宿主中肠对苏云金芽胞杆菌杀虫蛋白的防御反应
5
作者 李思睿 杨焱超 +1 位作者 吴国星 王泽宇 《中国生物防治学报》 北大核心 2025年第2期492-500,共9页
苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis是一种对多种农业害虫、线虫具有特异性杀虫活性的病原微生物,主要通过产生杀虫蛋白破坏靶标害虫中肠上皮细胞,造成细胞内渗透压失衡,最终导致害虫死亡。中肠上皮细胞是昆虫内部和外部环境之间的... 苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis是一种对多种农业害虫、线虫具有特异性杀虫活性的病原微生物,主要通过产生杀虫蛋白破坏靶标害虫中肠上皮细胞,造成细胞内渗透压失衡,最终导致害虫死亡。中肠上皮细胞是昆虫内部和外部环境之间的保护性屏障,它能够有效阻止病原微生物及其产生的杀虫蛋白对昆虫造成的不利影响,在防御病原微生物方面发挥着关键作用。当苏云金芽胞杆菌及其产生的杀虫蛋白作用于靶标害虫中肠时,中肠上皮细胞防御反应也会被激活以维持上皮细胞结构的完整性,从而降低杀虫蛋白对自身的损伤。这些中肠防御反应的产生显著影响了苏云金芽胞杆菌杀虫蛋白对靶标害虫的杀虫活性,甚至导致靶标害虫产生抗性。因此,本文将以靶标害虫-苏云金芽胞杆菌为模型,讨论苏云金芽胞杆菌诱导的靶标害虫上皮细胞防御机制,包括中肠上皮细胞囊泡运输、自噬、细胞凋亡、细胞脱落与再生等防御反应及上皮细胞内防御信号通路等,以期为提高苏云金芽胞杆菌杀虫作用,延缓靶标抗性的研究提供理论支撑。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 杀虫蛋白 中肠细胞 防御反应 害虫 线虫
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苏云金杆菌制剂中违禁添加高效氯氟氰菊酯的红外光谱快速定量方法研究
6
作者 陈月飞 夏静静 +4 位作者 韦芸 徐惟馨 毛欣然 闵顺耕 熊艳梅 《光谱学与光谱分析》 北大核心 2025年第5期1348-1354,共7页
利用衰减全反射傅里叶变换红外光谱(ATR-FTIR)结合偏最小二乘法(PLS)对苏云金杆菌制剂中违禁添加的高效氯氟氰菊酯含量进行了快速定量检测。在3种不同来源的苏云金杆菌制剂中加入不同质量的95%(w/w)高效氯氟氰菊酯原药,配制成浓度为0.00... 利用衰减全反射傅里叶变换红外光谱(ATR-FTIR)结合偏最小二乘法(PLS)对苏云金杆菌制剂中违禁添加的高效氯氟氰菊酯含量进行了快速定量检测。在3种不同来源的苏云金杆菌制剂中加入不同质量的95%(w/w)高效氯氟氰菊酯原药,配制成浓度为0.00%~5.00%的混合样品153个,乙腈作为萃取剂,选用较少萃取剂用量提高隐性成分在萃取液中浓度以增强红外吸收。选择3种预处理方法:平滑法(smooth)、标准正态变换法(SNV)和多元散射校正法(MSC)以及6种变量选择算法:无信息变量消除法(UVE)、区间偏最小二乘法(iPLS)、移动窗口偏最小二乘法(MWPLS)、竞争性自适应重加权采样(CARS)、自助软收缩法(BOSS)、区间组合优化(ICO),考察了不同预处理方法及变量选择方法对模型结果的影响。其中,MSC预处理结合BOSS算法获得最优的模型效果:交叉验证均方根误差(RMSECV)为1.18×10^(-3),交叉验证集决定系数(R2cv)为9.94×10^(-1),预测均方根误差(RMSEP)为1.01×10^(-3),预测集决定系数(R2pre)为9.93×10^(-1)。对于高效氯氟氰菊酯含量范围在0.10%~5.00%的样品,外部检验样品预测平均相对误差为4.44%,含量范围在2.00%~5.00%的样品,外部检验样品平均相对误差仅2.64%。该方法可应用于苏云金杆菌制剂中违禁添加高效氯氟氰菊酯的快速检测。 展开更多
关键词 红外光谱 偏最小二乘法 变量选择 高效氯氟氰菊酯 苏云金杆菌
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苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)与球孢白僵菌(Beauveria bassiana)复配对小菜蛾幼虫(Plutella xylostella)的影响研究 被引量：6
7
作者 张爽 杨佳利 +3 位作者 马军 吴云飞 张跃华 缪天琳 《生物灾害科学》 2017年第4期288-291,共4页
研究不同浓度苏云金杆菌与球孢白僵菌复配混合剂对佳木斯地区小菜蛾幼虫死亡率的影响。用PBS缓冲液将苏云金杆菌与球孢白僵菌稀释成不同浓度梯度的菌悬液,采用正交分析法对苏云金杆菌及球孢白僵菌复配成7种不同浓度梯度的混合剂,并测定... 研究不同浓度苏云金杆菌与球孢白僵菌复配混合剂对佳木斯地区小菜蛾幼虫死亡率的影响。用PBS缓冲液将苏云金杆菌与球孢白僵菌稀释成不同浓度梯度的菌悬液,采用正交分析法对苏云金杆菌及球孢白僵菌复配成7种不同浓度梯度的混合剂,并测定不同浓度混合剂对小菜蛾幼虫的死亡率,从而筛选出较适幼虫死亡的LD_(50)的比例及其浓度。经观察分析,在96 h内苏云金杆菌与球孢白僵菌复配为3:1时,小菜蛾幼虫的死亡率达到72%,其中在1×10^(-1)~1×10^(-6) g/mL浓度下幼虫死亡率较高。各混合液对小菜蛾幼虫致死效果不一,其中当苏云金杆菌与球孢白僵菌复配比例为3:1且浓度在1×10^(-1)~1×10^(-6) g/mL时,对昆虫幼虫致死效果明显。 展开更多
关键词 苏云金杆菌 球孢白僵菌 复配 小菜蛾
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耐硒菌株Bacillus cereus ZJ2的筛选及四种碳源对其合成纳米硒稳定性的影响
8
作者 何嘉丽 刘梦绮 +3 位作者 钟文怡 何毅 王璋倩 程水源 《湖北农业科学》 2025年第5期25-32,48,共9页
为更好地利用微生物进行环境生物修复、降低土壤中硒污染和合理利用硒资源等,从湖北省恩施市鱼塘坝富硒土壤中筛选到1株耐硒的菌株ZJ2,经分子生物学鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),该菌株对亚硒酸钠具有较高的耐受能力和还原能力... 为更好地利用微生物进行环境生物修复、降低土壤中硒污染和合理利用硒资源等,从湖北省恩施市鱼塘坝富硒土壤中筛选到1株耐硒的菌株ZJ2,经分子生物学鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),该菌株对亚硒酸钠具有较高的耐受能力和还原能力,能将亚硒酸钠还原成稳定的生物纳米硒,并研究了4种碳源对菌株ZJ2的亚硒酸钠还原能力及其合成纳米硒稳定性的影响。结果表明,菌株ZJ2对5 mmol/L亚硒酸钠还原能力达92%。该菌株合成的生物纳米硒为球形颗粒,平均粒径为(188.42±2.63)nm,Zeta电位为(-41.17±1.77)mV。鼠李糖和葡萄糖的添加对菌株ZJ2还原亚硒酸钠具有显著的促进作用,还原率分别提高37.48个百分点和39.53个百分点,且鼠李糖对菌株合成稳定的纳米硒具有良好的促进作用。通过对ZJ2亚硒酸钠还原能力、纳米硒表征及稳定性等方面的综合评分,可知鼠李糖的添加能明显促进Bacillus cereus ZJ2高效合成更为稳定的生物源纳米硒。 展开更多
关键词 耐硒菌株 蜡样芽孢杆菌(bacillus cereus) 纳米硒 还原率 稳定性 碳源
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苏云金芽孢杆菌固体发酵油茶粕制备微生物农药的工艺优化
9
作者 权婷婷 刘芳 +3 位作者 吴红渠 洪传礼 桂南才 方伟 《中南农业科技》 2025年第4期1-6,共6页
为高值化利用油茶粕,优化固体发酵油茶粕制备微生物农药的工艺,对其固体发酵产物对小菜蛾室内生测活性和田间药效进行了研究。结果显示,从215株苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)中筛选得到高适应油茶粕基质菌株Bt-YCP-128。通过... 为高值化利用油茶粕,优化固体发酵油茶粕制备微生物农药的工艺,对其固体发酵产物对小菜蛾室内生测活性和田间药效进行了研究。结果显示,从215株苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)中筛选得到高适应油茶粕基质菌株Bt-YCP-128。通过单因素试验优化Bt-YCP-128固体发酵油茶粕制备微生物农药的培养基配方和培养条件,确定最佳工艺为麸皮∶玉米粉∶油茶粕4∶1∶5(质量比)、无机盐1%KH2PO4、料水比1.0∶0.5(质量比)、初始pH 7.0、堆料厚度4 cm、接种量3%、发酵温度30℃。在最佳发酵工艺条件下,5 d固体发酵产物芽孢产量达8.49×10^(9)CFU/g。对小菜蛾室内生测,其LC50为0.28 mg/g。此工艺提升了油茶粕的利用价值,为以油茶粕为基质制备微生物农药的开发和应用提供理论基础。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌(bacillus thuringiensis) 油茶粕 固体发酵 微生物农药 工艺优化
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外加钙源对菌株Bacillus thuringiensis WH2去除Pb、Cd和Cr的影响
10
作者 肖旭 初诗禹 +4 位作者 黎再权 徐涛 王梦平 王慧 蒋科 《金属矿山》 北大核心 2025年第4期284-291,共8页
为探究微生物修复法对水中重金属离子的去除效率及机制,试验以Bacillus thuringiensis WH2为供试菌株,对不同浓度的重金属离子(Pb(Ⅱ)、Cd(Ⅱ)和Cr(Ⅵ))进行了去除率研究,并对生物沉淀物进行了SEM-EDS、FT-IR、XRD表征分析。结果表明,... 为探究微生物修复法对水中重金属离子的去除效率及机制,试验以Bacillus thuringiensis WH2为供试菌株,对不同浓度的重金属离子(Pb(Ⅱ)、Cd(Ⅱ)和Cr(Ⅵ))进行了去除率研究,并对生物沉淀物进行了SEM-EDS、FT-IR、XRD表征分析。结果表明,外加钙源后,菌株对初始浓度为150 mg/L的Pb(Ⅱ)、30 mg/L的Cd(Ⅱ)和500 mg/L的Cr(Ⅵ)的去除率分别从95.5%、90.5%和10.8%提高至98.6%、93.1%和54.3%。WH2通过其表面的羟基、胺基、酰胺基、羰基和烷基将Pb(Ⅱ)矿化成白铅矿PbCO_(3)、钙镁橄榄石Pb_(2)OCO_(3)和水白铅矿Pb_(3)(CO_(3))_(2)(OH)_(2),Cd(Ⅱ)的去除主要通过羟基、胺基、酰胺基和烷基作用,推测其去除机理以胞内吸附为主,而Cr(Ⅵ)的还原作用可能是羧基和氨基与Cr(Ⅲ)配位,导致形成的Cr(Ⅲ)被吸附到细胞表面。研究表明,Bacillus thuringiensis WH2对环境中Pb(Ⅱ)、Cd(Ⅱ)和Cr(Ⅵ)具有一定的生物修复能力。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 生物修复 重金属 钙源
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1种新型苏云金杆菌以色列亚种沉降型颗粒剂的制备及其对红裸须摇蚊的防治研究
11
作者 李洁 张淼 +4 位作者 田娟娟 韩衍飞 吴晓辰 沈峰 刘文彬 《安徽农业科学》 2025年第7期75-79,85,共6页
近年间摇蚊婚飞扰民现象频现,其幼虫“红虫”属于底栖动物,世界卫生组织及主要国家的水生昆虫防治经验表明:孳生地水源处理是根本的防治手段,而孳生地药剂处理是其重要的组成部分。苏云金杆菌以色列亚种[Bacillus thuringrensis var.isr... 近年间摇蚊婚飞扰民现象频现,其幼虫“红虫”属于底栖动物,世界卫生组织及主要国家的水生昆虫防治经验表明:孳生地水源处理是根本的防治手段,而孳生地药剂处理是其重要的组成部分。苏云金杆菌以色列亚种[Bacillus thuringrensis var.israelesis](Bti)生物药剂已被证实能够用于摇蚊防控,但现有剂型难以迅速沉降作用于底泥,或沉降过程中已经被水溶解分散。以沸石粉为载体,采用湿法包衣制成Bti沉降型颗粒剂,该颗粒剂密度大易沉降。通过室内防治试验、模拟现场和现场试验,分别测定该颗粒剂对红裸须摇蚊(Propsilocerus akamusi)的防治效果。室内防治试验结果表明:生物活性单位为7000 ITU/mg和1200 ITU/mg 2种Bti沉降型颗粒剂均能起到很好的防治作用,但7000 ITU/mg颗粒剂致死率过高,不符合保留摇蚊幼虫生态功能的要求,故而舍弃;将有效成分为1200 ITU/mg的颗粒剂投入2.4 L蒸馏水中,含量10%投入量0.6g时矫正死亡率为85.89%,含量20%投入量0.3 g时矫正死亡率为86.90%。这2种颗粒剂经过模拟生境试验验证防治率无显著差异。综合考虑防治效果、物资成本及生态效益,选取10%1200 ITU/mg Bti沉降型颗粒剂进行现场试验。经过与对照区比对,施药2次对红裸须摇蚊的防治率为75.53%,同期对比防治效果为80.63%。实践证明,Bti沉降型颗粒剂能够有效降低婚飞摇蚊种群密度,为城市湿地、公园景区防控摇蚊提供了标本兼治的方法。 展开更多
关键词 苏云金杆菌以色列亚种 沉降型颗粒剂 红裸须摇蚊 沸石粉 生物防治
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传统发酵食品臭鳜鱼中分离的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis 29.118)的毒理学评价（英文） 被引量：5
12
作者 杨培周 朱星星 +3 位作者 操丽丽 郑志 程杰顺 姜绍通 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第3期186-193,共8页
参与臭鳜鱼特色风味物质形成的微生物菌群源自环境,该微生物菌群的安全性正引起消费者和社会的关注。苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis 29.118)是从臭鳜鱼发酵菌群中分离的一种主要微生物,但其毒性仍不清楚。通过急性经口毒性、... 参与臭鳜鱼特色风味物质形成的微生物菌群源自环境,该微生物菌群的安全性正引起消费者和社会的关注。苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis 29.118)是从臭鳜鱼发酵菌群中分离的一种主要微生物,但其毒性仍不清楚。通过急性经口毒性、遗传毒性实验、30 d喂养以及结肠显微观察评估其毒性。结果表明:小鼠口服半数致死量大于4 000 mg/kg mb,剂量2 000 mg/kg mb未引起急性毒性症状,苏云金芽孢杆菌29.118对小鼠没有明显的遗传毒性症状;30日粮后小鼠生长良好;7项血清指标和3项肝指标均无显著差异(P>0.05);结肠和肝脏组织没有表现出明显的病理症状。实验采用的苏云金芽孢杆菌29.118的剂量远高于现实存在的剂量,因此,菌株苏云金芽孢杆菌29.118在毒理学上是安全的。 展开更多
关键词 臭鳜鱼 苏云金芽孢杆菌 毒性评估 安全评价 发酵
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蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)污染及其对食品安全的影响 被引量：62
13
作者 周帼萍 袁志明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期357-361,共5页
蜡状芽孢杆菌是常见的食品污染菌,在工业化社会中正成为日益重要的食物病原菌。它能产生一种呕吐毒素和多种肠毒素,主要引发呕吐和腹泻型食物中毒。与蜡状芽孢杆菌同属的苏云金杆菌也能产生类似的肠毒素,近来发现它可能与食品中毒有关... 蜡状芽孢杆菌是常见的食品污染菌,在工业化社会中正成为日益重要的食物病原菌。它能产生一种呕吐毒素和多种肠毒素,主要引发呕吐和腹泻型食物中毒。与蜡状芽孢杆菌同属的苏云金杆菌也能产生类似的肠毒素,近来发现它可能与食品中毒有关。我国应当加强对蜡状芽孢杆菌的监测和研究。 展开更多
关键词 蜡状芽孢杆菌 苏云金杆菌 食物安全 食物中毒 毒素
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苏云金芽孢杆菌Cry1A.301-Vip3A融合杀虫蛋白原核表达及生物活性分析
14
作者 杨小艳 韩垚 +2 位作者 吴红 雷开荣 谢树章 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期3046-3055,共10页
【目的】对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)的杀虫蛋白基因(Cry1A.301和Vip3A)进行原核融合表达及生物活性分析,为玉米抗虫基因资源发掘和品种创制提供科学参考。【方法】利用连接肽构建不同杀虫机理的Cry1A.301和Vip3A融合... 【目的】对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)的杀虫蛋白基因(Cry1A.301和Vip3A)进行原核融合表达及生物活性分析,为玉米抗虫基因资源发掘和品种创制提供科学参考。【方法】利用连接肽构建不同杀虫机理的Cry1A.301和Vip3A融合基因,构建其原核表达载体,在大肠杆菌中进行诱导表达,对融合蛋白进行理化性质和结构域预测分析及定量检测,并采用人工饲料混合饲喂法测定融合蛋白对亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)、棉铃虫(Helicoverpaarmigera)和草地贪夜蛾(Spodopterafrugiperda)的杀虫活性。【结果】构建的融合基因基本骨架为5'-Cry1A.301-Vip3A-3',中间由编码连接肽(8个氨基酸)的核苷酸序列(TCCACCTGCTCCACCTGCTCCACC)组装而成,经诱导表达形成融合蛋白Cry1A.301-Vip3A。该融合蛋白含有1409个氨基酸,分子量约为157 kD,为稳定的酸性蛋白,包含Cry1A.301和Vip3A蛋白家族的4个特征结构域。Cry1A.301-Vip3A融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)细胞中成功表达,且Cry1A.301和Vip3A蛋白的表达量无显著差异(P>0.05,下同)。饲喂Cry1A.301-Vip3A融合蛋白7 d后,亚洲玉米螟、草地贪夜蛾和棉铃虫幼虫校正死亡率达100.00%。Cry1A.301-Vip3A融合蛋白与Cry1A.301蛋白对亚洲玉米螟的杀虫活性无显著差异,均显著高于Vip3A蛋白(P<0.05,下同)。Cry1A.301-Vip3A融合蛋白、Vip3A蛋白和Cry1A.301蛋白对棉铃虫的杀虫活性无显著差异。Cry1A.301-Vip3A融合蛋白和Vip3A蛋白对草地贪夜蛾的杀虫活性无显著差异,均显著高于Cry1A.301蛋白。【结论】原核表达的Cry1A.301-Vip3A融合蛋白结构稳定,对亚洲玉米螟、棉铃虫和草地贪夜蛾均具有较好的杀虫活性。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌(Bt) 融合蛋白 原核表达 生物活性
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生防解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)最新研究进展 被引量：9
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作者 李红晓 张殿朋 +1 位作者 卢彩鸽 赵洪新 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2016年第2期87-92,共6页
解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)是与枯草芽胞杆菌相似,可产芽胞、革兰阳性(G+)、具有生防活性的益生细菌。其代谢过程中产生的抗菌物质种类多、抗菌谱广,其抗菌制剂或抗菌提取物具有无毒、无害、无残留、抑菌时效长等优点... 解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)是与枯草芽胞杆菌相似,可产芽胞、革兰阳性(G+)、具有生防活性的益生细菌。其代谢过程中产生的抗菌物质种类多、抗菌谱广,其抗菌制剂或抗菌提取物具有无毒、无害、无残留、抑菌时效长等优点,可广泛应用于果蔬保鲜、果蔬生长期及采后微生物病害的生物防治,是极具开发价值的生防菌。本文从抗菌机理、抗性基因组成、基因工程菌构建、抗性产品开发及对微生物病害防治等几个方面,对解淀粉芽胞杆菌的研究及应用现状进行了归纳和总结,为其在农业生物工程中的规模化安全应用提供参考。 展开更多
关键词 解淀粉芽胞杆菌(bacillus amyloliquefaciens) 抑菌物质 生防效果 抗性基因
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蜡样杆菌(Bacillus cereus)M22 Mn-SOD cDNA片断的克隆 被引量：1
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作者 陈惠芳 尚玉磊 +2 位作者 王琦 王慧敏 梅汝鸿 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2004年第3期8-11,共4页
分析不同种细菌Mn SOD氨基酸序列的保守区域 ,设计一对简并引物进行RT PCR扩增 ,产物经T A载体连接转化大肠杆菌JM 1 0 9,筛选阳性克隆、测序并进行同源性分析 ,得到 4 36bpMn SODcDNA片段。根据此片段设计 5′端特异性引物 ,然后进行 5... 分析不同种细菌Mn SOD氨基酸序列的保守区域 ,设计一对简并引物进行RT PCR扩增 ,产物经T A载体连接转化大肠杆菌JM 1 0 9,筛选阳性克隆、测序并进行同源性分析 ,得到 4 36bpMn SODcDNA片段。根据此片段设计 5′端特异性引物 ,然后进行 5′RACE扩增 ,获得Mn SOD 5′端 387bpcDNA片断。将 2段序列进行拼接获得 5 94bpcDNA片断 ,编码 1 72个氨基酸。对推定氨基酸序列进行BLAST分析 ,结果表明其与炭疽芽孢杆菌 (Bacillusanthracis)同源性为 95 % ,且Gly77,Aly78,Phe86,Gln1 50 和Asp1 51 在已报道的Mn SOD中均存在 ,构成Mn SOD的活性中心。表明该序列为蜡样芽孢杆菌Mn 展开更多
关键词 蜡样芽孢杆菌(bacillus cereus) MN-SOD cDNA 克隆 分析
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苏云金芽胞杆菌G033A对三种赤眼蜂寄生番茄潜叶蛾能力的影响 被引量：2
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作者 蒋正雄 陈恒 +5 位作者 孙英 周顺文 张金龙 陈国华 朱清清 张晓明 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期524-531,共8页
为探究苏云金芽胞杆菌G033A(Bt G033A)对番茄潜叶蛾不同龄期幼虫的毒力大小及对赤眼蜂寄生番茄潜叶蛾能力的影响,本研究采用浸叶法和饲料混毒法分别对番茄潜叶蛾及三种赤眼蜂进行处理,测定了Bt G033A对番茄潜叶蛾不同龄期幼虫和三种赤... 为探究苏云金芽胞杆菌G033A(Bt G033A)对番茄潜叶蛾不同龄期幼虫的毒力大小及对赤眼蜂寄生番茄潜叶蛾能力的影响,本研究采用浸叶法和饲料混毒法分别对番茄潜叶蛾及三种赤眼蜂进行处理,测定了Bt G033A对番茄潜叶蛾不同龄期幼虫和三种赤眼蜂成虫的室内毒力,同时分析Bt G033A对三种赤眼蜂寄生量及功能反应的影响。结果表明,BtG033A对番茄潜叶蛾1龄幼虫、2龄幼虫、3龄幼虫、4龄幼虫的LC50分别为25.381、19.537、17.406和15.772 g/L,而对三种赤眼蜂均为低毒。在Bt G033A田间推荐浓度处理后,虽然玉米螟赤眼蜂、螟黄赤眼蜂、松毛虫赤眼蜂对番茄潜叶蛾卵的寄生功能反应模型仍符合HollingⅡ型,但三种赤眼蜂的寄生能力均有所降低。其中,玉米螟赤眼蜂在药剂对照组的寄生量(25粒/皿:18.600粒)、处理猎物时间(0.012d)、控害效能(84.833)、日寄生上限(83.333粒)和搜寻效应均表明其对番茄潜叶蛾的寄生能力强于螟黄赤眼蜂和松毛虫赤眼蜂。此外,在药剂处理后,玉米螟赤眼蜂各项寄生参数同样优于其他两种赤眼蜂。因此,玉米螟赤眼蜂可作为番茄潜叶蛾的优选寄生性天敌之一,并可联合Bt G033A对番茄潜叶蛾进行协同防控。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 番茄潜叶蛾 赤眼蜂 寄生功能 搜寻效应
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苏云金芽胞杆菌防治草地贪夜蛾的研究和应用进展 被引量：2
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作者 徐国力 王泽宇 +4 位作者 王奎 束长龙 耿丽丽 廖敏 张杰 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2024年第5期1181-1193,共13页
草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda是世界性的重大农业害虫,至今已在全世界126个国家和地区传播,对玉米等多种主要粮食和经济作物造成严重为害。草地贪夜蛾于2019年1月入侵我国,并迅速扩散至26个省(市/自治区)。2022年草地贪夜蛾发生面... 草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda是世界性的重大农业害虫,至今已在全世界126个国家和地区传播,对玉米等多种主要粮食和经济作物造成严重为害。草地贪夜蛾于2019年1月入侵我国,并迅速扩散至26个省(市/自治区)。2022年草地贪夜蛾发生面积超过3500万公顷。苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)是一种用于防治农业害虫的革兰氏阳性细菌,具有对害虫高效专一、环境友好、人畜安全等特点。Bt主要依靠其产生的杀虫蛋白发挥杀虫作用。如今,国际上主要依靠转Bt杀虫基因的抗虫作物以及Bt微生物农药对草地贪夜蛾进行绿色防治。我国目前已开发出Bt天然菌株、基因工程菌株和转基因抗虫作物等多种高效Bt产品用于草地贪夜蛾绿色防治。本文将对国内外Bt防治草地贪夜蛾的最新研究进展进行介绍。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 苏云金芽胞杆菌 生物防治 微生物农药 转基因抗虫作物
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苏云金芽胞杆菌4BM1菌株对油菜菌核病的防治潜力
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作者 王美玲 耿丽丽 +2 位作者 房瑜 束长龙 张杰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期260-269,共10页
【目的】前期研究显示苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)4BM1菌株可诱导油菜产生对核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)的系统抗病性。探究其诱导系统抗性机制并分析其生防潜力,为油菜菌核病的生物防治提供菌株资源。【方法】采... 【目的】前期研究显示苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)4BM1菌株可诱导油菜产生对核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)的系统抗病性。探究其诱导系统抗性机制并分析其生防潜力,为油菜菌核病的生物防治提供菌株资源。【方法】采用实时荧光定量PCR和转录组测序技术分析根部施用4BM1菌株后,油菜叶片中防御相关基因的转录水平;结合4BM1菌株全基因组序列和antiSMASH 2.0软件预测其抗病相关次级代谢产物生物合成的基因簇;采用发酵液灌根的方式将4BM1菌株接种至油菜盆栽幼苗,分析其定殖能力和促生效果。【结果】4BM1菌株可激发油菜叶片产生过敏反应;油菜根部施用4BM1菌株,叶片中参与水杨酸、茉莉酸、乙烯信号和油菜素内酯生物合成途径等基因转录水平显著上调;4BM1菌株的染色体上预测到胞外多糖和其他13个抗病相关次级代谢产物合成的基因簇;4BM1菌株在油菜根际定殖的同时可促进油菜苗期植株的生长。【结论】4BM1菌株可作为防控油菜菌核病、促进油菜幼苗生长有潜力的生物防治资源。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 油菜菌核病 诱导系统抗性 生物防治
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枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)降解萘的动力学研究 被引量：3
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作者 方世纯 郝瑞霞 鲁志强 《高校地质学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期682-687,共6页
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HBS-4是从油田中分离出来的一株能高效降解有机物萘的菌株。当萘的初始浓度为100mg时,该菌株在pH为8.0,温度为40℃下具有较好的降解效果,作用69h能降解50%以上的萘。通过HBS-4菌株降解萘的动力学研究,在... 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HBS-4是从油田中分离出来的一株能高效降解有机物萘的菌株。当萘的初始浓度为100mg时,该菌株在pH为8.0,温度为40℃下具有较好的降解效果,作用69h能降解50%以上的萘。通过HBS-4菌株降解萘的动力学研究,在Williams结构模型的基础上建立了HBS-4作用萘的四组分动力学模型,并用此模型解释菌株HBS-4在降解萘的过程中,葡萄糖含量、菌液浓度、pH、Eh随时间的变化特征。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis) 萘 降解 动力学 结构模型
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