花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子在转基因棉花中的表达 被引量：17

1

作者 焦改丽 孟钊红 +7 位作者 聂安全 南芝润 张换样 李俊峰 王娇娟 赵俊侠 李燕娥 郭三堆 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1135-1139,共5页

利用GUS作为报告基因 ,通过GUS组织化学定位法检测棉花转化愈伤组织、体细胞胚 ,R0 代棉花根、茎、叶、花器官以及正在发育的胚GUS基因表达情况 ,详细阐述了CaMV 3 5S启动子在棉花细胞中的表达轮廓。结果表明 ,在愈伤组织细胞有丝分裂... 利用GUS作为报告基因 ,通过GUS组织化学定位法检测棉花转化愈伤组织、体细胞胚 ,R0 代棉花根、茎、叶、花器官以及正在发育的胚GUS基因表达情况 ,详细阐述了CaMV 3 5S启动子在棉花细胞中的表达轮廓。结果表明 ,在愈伤组织细胞有丝分裂和增殖过程中GUS基因能稳定表达并遗传给后代细胞 ;在根、茎、叶细胞中检测到GUS表达活性。在胚胎发育过程中 ,最早检测到GUS表达活性的为开花 1 1d的鱼雷胚和胚乳。随着胚胎的发育 ,GUS表达活性逐渐增强并扩展到子叶微管组织 ,表明CaMV 3 5S启动子是随着胚胎发育进程被逐渐调节的。在花粉和特殊的纤维细胞中 ,也检测到GUS的表达活性。资料证明 ,该启动子在棉花不同发育时期的大部分组织和细胞中都是表达的。 展开更多

关键词 GUs基因 花椰菜花叶病毒(camv)35s启动子 转基因棉花 胚胎发育 表皮细胞

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GeneScan试剂盒法快速定量检测玉米中CaMV35S启动子

2

作者 朱飞宇 黄宇飞 +3 位作者 高梅莹 刘佳 刘丹 铁晓威 《现代农业科技》 2025年第14期121-124,130,共5页

针对玉米中转入的CaMV35S启动子,开展了一种新型试剂盒[GMO Quant(LR)35S Screen corn]荧光定量PCR检测方法试验,建立新的转基因玉米中含有CaMV35S启动子标记基因的定量检测方法。选用3个玉米品种先玉1321、裕丰303和先玉335进行了CaMV... 针对玉米中转入的CaMV35S启动子,开展了一种新型试剂盒[GMO Quant(LR)35S Screen corn]荧光定量PCR检测方法试验,建立新的转基因玉米中含有CaMV35S启动子标记基因的定量检测方法。选用3个玉米品种先玉1321、裕丰303和先玉335进行了CaMV35S启动子荧光定量PCR检测,标准偏差分别为0.15%、0.39%和0.61%,标准曲线相关系数均在0.98以上,扩增效率为90%~110%,试剂盒中配有1%MON863玉米基因组DNA(已知CaMV35S启动子含量在0.5%左右)作为对照材料,试验结果符合荧光定量PCR检测试验要求,确认此方法准确有效。此方法具有高度的特异性、高效性,是一种新型高效定量检测CaMV35S启动子的方法。 展开更多

关键词 荧光定量PCR camv35s启动子 转基因玉米 定量检测 Genescan试剂盒法

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电化学DNA传感器制备及用于花椰菜花叶病毒35S启动子快速检测

3

作者 刘亚倩 刘克勤 +2 位作者 高娇娜 操小栋 叶永康 《安徽农业科学》 CAS 2018年第17期183-186,共4页

[目的]构建一种新型DNA电化学传感器,并用于花椰菜花叶病毒35S启动子片段检测。[方法]通过使用氨基化多壁碳纳米管对玻碳电极进行修饰,利用氨基化多壁碳纳米管对硫堇-金纳米粒子-DNA纳米复合物的吸附固定得到用于识别目标DNA的捕获界面... [目的]构建一种新型DNA电化学传感器,并用于花椰菜花叶病毒35S启动子片段检测。[方法]通过使用氨基化多壁碳纳米管对玻碳电极进行修饰,利用氨基化多壁碳纳米管对硫堇-金纳米粒子-DNA纳米复合物的吸附固定得到用于识别目标DNA的捕获界面,并将亲和素-辣根过氧化物酶修饰的金纳米粒子作为结构末端的信号分子,完成夹心结构传感器组装。试验采用循环伏安法对辣根过氧化物酶催化过氧化氢得到的还原电流进行测试。[结果]该传感器可实现对目标DNA定量检测,线性范围为1×10-18~1×10^(-11)mol/L,检测限低至6.95×10^(-20)mol/L,可特异性识别错配序列,并且表现出良好的重现性和稳定性。[结论]该传感器在转基因食品的检测方面有良好的应用前景。 展开更多

关键词 电化学DNA生物传感 花椰菜花叶病毒35s启动子 多壁碳纳米管 硫堇 辣根过氧化物酶

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转基因大豆外源基因CaMV35S启动子测定不确定度分析 被引量：5

4

作者 王东 宋君 +5 位作者 郭灵安 雷绍荣 刘文娟 常丽娟 尹全 张富丽 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期40-45,共6页

为了了解转基因成分定量分析结果不确定度的主要贡献因素,提高转基因成分定量检测质量,本文对转基因大豆GTS40-3-2粉末样品进行了CaMV35S启动子(参数)含量测定,对其测量不确定度进行了初步估算。CaMV35S启动子测量不确定度评定结果:A类... 为了了解转基因成分定量分析结果不确定度的主要贡献因素,提高转基因成分定量检测质量,本文对转基因大豆GTS40-3-2粉末样品进行了CaMV35S启动子(参数)含量测定,对其测量不确定度进行了初步估算。CaMV35S启动子测量不确定度评定结果:A类不确定度(uA)为0.0004,B类不确定度(uB)为0.002,合成不确定度(uc)为0.002;在置信水准(p)95%时,包含因子(k)取1.96,扩展不确定度(U)为0.004。本次测量结果(C)为0.028±0.004,接近约定真值(0.03),测量不确定度相对较小,检测质量较高。不确定度评估表明试验中的微量液体转移偏差是本次测量不确定度的主要贡献者,在以后的检测中应重点注意降低微量液体转移的偏差,提高检测质量。 展开更多

关键词 转基因大豆 camv35s启动子含量 不确定度 评估

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CaMV35S启动子及其在转基因作物中的应用和检测 被引量：11

5

作者 汤婷 谢实龙 +3 位作者 祝旋 徐俊锋 唐俊 汪小福 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期161-170,共10页

花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV35S)是植物基因工程中应用最广泛的启动子之一,它在转基因植物的安全评价及检测研究中具有重要意义。了解CaMV35S启动子的起源及其发展情况,是开展转基因安全评价和检测的前提。文章对CaMV35S启动子的发展... 花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV35S)是植物基因工程中应用最广泛的启动子之一,它在转基因植物的安全评价及检测研究中具有重要意义。了解CaMV35S启动子的起源及其发展情况,是开展转基因安全评价和检测的前提。文章对CaMV35S启动子的发展历史及其结构、功能作了简要描述,分析总结了CaMV35S启动子在转基因作物中的应用情况和目前对其相应的检测方法。针对目前在转基因作物中检测CaMV35S启动子存在的问题,认为今后转基因相关作物的序列信息及检测数据需要交流和共享,同时各个检测机构或实验室之间需要展开数据共享与共同验证,从而建立针对CaMV35S启动子的相对统一的标准检测方法。 展开更多

关键词 camv35s启动子 转基因作物 增强子 PCR

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转基因产品CaMV 35S启动子基因实时荧光PCR检测方法中引物探针序列特征及影响 被引量：2

6

作者 杨杰 李兰 +3 位作者 戴莉 张江国 莫善明 徐新龙 《安徽农业科学》 CAS 2019年第24期192-195,共4页

[目的]分析不同标准方法中CaMV 35S启动子基因筛查方法中引物探针位置关系,讨论以引物探针序列重组为阳性对照样品的可行性。[方法]收集国内标准方法中CaMV 35S启动子基因检测引物探针序列与CaMV参考序列比较,确定其引物探针位置特点。... [目的]分析不同标准方法中CaMV 35S启动子基因筛查方法中引物探针位置关系,讨论以引物探针序列重组为阳性对照样品的可行性。[方法]收集国内标准方法中CaMV 35S启动子基因检测引物探针序列与CaMV参考序列比较,确定其引物探针位置特点。设计不同长度间隔序列的串联引物探针重组序列,检测其结果差别。[结果]CaMV 35S启动子基因实时荧光PCR检测方法中引物与探针区间隔序列对扩增结果影响甚微。[结论]通过将引物探针序列顺序串联合成重组序列可以作为特定实时荧光PCR检测方法的阳性对照。 展开更多

关键词 转基因 camv 35s启动子 实时荧光PCR 阳性样品

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多重荧光PCR同时检测转基因成分35S和Nos方法的建立 被引量：33

7

作者 刘光明 李庆阁 +4 位作者 王群力 梁基选 陈伟铃 栾国彦 苏文金 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期493-497,共5页

根据商品化转基因作物中常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 35S)和根癌农杆菌终止子 (Nos)的序列特点 ,设计并合成了两对引物和相对应的荧光双链探针 ,建立一种应用荧光双链探针的多重荧光PCR同时检测转基因成分 35S启动子和Nos终止子... 根据商品化转基因作物中常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 35S)和根癌农杆菌终止子 (Nos)的序列特点 ,设计并合成了两对引物和相对应的荧光双链探针 ,建立一种应用荧光双链探针的多重荧光PCR同时检测转基因成分 35S启动子和Nos终止子的方法 .并利用该方法对马铃薯、大豆、玉米、甜椒、番茄等 11份实物样品进行了检测 ,其中有 5份样品结果阳性 .结果表明所建立的多重荧光PCR方法能同时检测出 35S和Nos双组分 ,较常规PCR技术更为简便、快速、准确 ,有很好的应用前景 . 展开更多

关键词 多重荧光PCR 35s NOs 转基因作物 荧光双链探针 花椰菜花叶病毒启动子 极癌农杆菌终止子 检测方法

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大豆抗病相关基因SR1正反义植物表达载体的构建及遗传转化研究 被引量：3

8

作者 林世锋 张淑珍 +3 位作者 杨秀红 陈庆山 杨庆凯 李文滨 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期90-94,共5页

实验构建了CaMV35S启动子控制下的大豆抗病相关基因SR1的正反义植物双元表达载体pBISR1(+)和pBISR1(-)。通过根癌农杆菌叶盘转化法,将正义和反义SR1 基因导入烟草Ha vana 425,经卡那霉素筛选,获得了抗性植株。经PCR和PCR-Southern印迹分... 实验构建了CaMV35S启动子控制下的大豆抗病相关基因SR1的正反义植物双元表达载体pBISR1(+)和pBISR1(-)。通过根癌农杆菌叶盘转化法,将正义和反义SR1 基因导入烟草Ha vana 425,经卡那霉素筛选,获得了抗性植株。经PCR和PCR-Southern印迹分析,证明抗性植株中整和了SR1基因,RT-PCR分析进一步表明正义和反义基因皆能转录为完整的mRNA,经疫霉根腐接种及抗病性鉴定表明,转反义基因株系和未转基因株系均轻微感病,而转正义基因株系始终没有出现感病症状。 展开更多

关键词 抗病相关基因 反义植物表达载体 遗传转化 构建 大豆 双元表达载体 35s启动子 抗性植株 反义基因 PCR分析 抗病性鉴定 camv 基因导入 卡那霉素 mRNA 正义基因 转化法 株系 转基因 感病 根癌 烟草 接种 根腐 疫霉

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进口转基因抗Basta^(TM)除草剂油菜籽检测方法研究 被引量：23

9

作者 潘良文 沈禹飞 +2 位作者 陈家华 胡永强 陶军 《粮食与油脂》 2001年第5期36-37,共2页

建立了从油菜籽中提取总ＤＮＡ和用ＰＣＲ技术检测外源基因的方法，用该方法从进口油 菜籽中检出外源的草丁膦乙酰转移酶基因（ＰＡＴ）、新霉素磷酸转移酶基因（ＮｐｔＩＩ）、花椰 菜花叶病毒３５Ｓ启动子（ＣａＭＶ ３５Ｓ）。

关键词 油菜籽 草丁膦乙酰转移酶基因 新霉素磷酸转移酶基因 camv35s启动子 外源基因 检测方法 进口农产品

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电化学发光PCR技术检测转基因植物 被引量：18

10

作者 刘晋峰 邢达 +1 位作者 沈行燕 朱德斌 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第4期375-378,共4页

随着转基因植物种类的增多 ,转基因植物的检测也成了当今的热门话题 .电化学发光法是将电化学与化学发光两种高灵敏度方法相结合 ,实现了检测的高效、准确、无毒害 .电化学发光PCR法首次将电化学发光技术、PCR技术和双探针杂交技术结合... 随着转基因植物种类的增多 ,转基因植物的检测也成了当今的热门话题 .电化学发光法是将电化学与化学发光两种高灵敏度方法相结合 ,实现了检测的高效、准确、无毒害 .电化学发光PCR法首次将电化学发光技术、PCR技术和双探针杂交技术结合起来 ,用于检测CaMV (cauliflowermosaicvirus) 35S启动子 ,从而判断其是否含有转基因成分 .PCR产物与生物素标记的探针杂交 ,可以起到筛选的作用 ;与三联吡啶钌标记的探针杂交则可用于电化学发光检测 .两种探针同时与转基因样品PCR产物杂交 ,使结果避免假阳性的影响而更加准确 .实验表明 :此方法可以准确地检测到 35S启动子的存在 .该方法灵敏度高 ,可靠性强 ,操作简便 ,结果准确 ,有望成为一种高效的转基因检测方法 . 展开更多

关键词 转基因植物 电化学发光 PCR技术 camv35 s启动子 蛋白质

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转基因大豆中外源基因的二重PCR检测 被引量：1

11

作者 邵碧英 陈文炳 +1 位作者 江树勋 李寿崧 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2005年第4期483-487,共5页

用CTAB法提取转基因大豆(Roundup Ready品系)的总DNA.根据行业标准SN/T 1195-2003,合成用于扩增花椰菜花叶病毒(Cauliflowerm osaic viru,s CaMV)35S启动子的引物S1和S2、根癌农杆菌(Agrobacterium tum efaciens)CP4菌株EPSPS基因的引... 用CTAB法提取转基因大豆(Roundup Ready品系)的总DNA.根据行业标准SN/T 1195-2003,合成用于扩增花椰菜花叶病毒(Cauliflowerm osaic viru,s CaMV)35S启动子的引物S1和S2、根癌农杆菌(Agrobacterium tum efaciens)CP4菌株EPSPS基因的引物Ea、ER和Eb.应用这5条(2组)引物对转基因大豆进行二重PCR检测时,扩增得到2个新片段,分别与片段S1ER、S1Eb大小一致.将片段S1ER、S1Eb进行克隆并测序,序列已在GenBank上登录,接受号分别为AY592954和AY596948.序列分析结果表明,片段S1ER含有CaMV 35S启动子和矮牵牛叶绿体转运肽序列(CTP)的部分序列,片段S1Eb含有CaMV 35S启动子部分序列、CTP和CP4 EPSPS基因的部分序列,原用于扩增CP4 EPSPS基因的引物中,仅引物Eb位于CP4 EPSPS基因中.重新合成扩增CP4 EPSPS基因的引物E1和E2,建立的二重PCR方法不仅适合于转基因RoundupReady大豆,还适合于其它植物中的CaMV 35S启动子和CP4 EPSPS基因的同时检测. 展开更多

关键词 大豆 camv 35s启动子 CP4 EPsPs基因 二重PCR

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Kringle5的真核植物细胞穿梭表达载体的构建 被引量：1

12

作者 郑合明 薛乐勋 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2002年第2期156-159,共4页

目的 :构建含有目的基因kringle5的真核植物细胞穿梭表达载体。方法 :应用RT PCR方法 ,从正常人肝脏组织中获得kringle 5基因 ,测序后 ,再通过DNA重组技术 ,将kringle 5基因片段克隆到真核植物细胞表达载体pBI12 1和pCAMBIA330 1上。结... 目的 :构建含有目的基因kringle5的真核植物细胞穿梭表达载体。方法 :应用RT PCR方法 ,从正常人肝脏组织中获得kringle 5基因 ,测序后 ,再通过DNA重组技术 ,将kringle 5基因片段克隆到真核植物细胞表达载体pBI12 1和pCAMBIA330 1上。结果 :得到的kringle 5基因序列测定结果与文献相符 ,重组载体pB1k5和pC33k5经酶切鉴定正确 ,含有植物高效表达CaMV35S启动子。结论 :重组载体pB1k5和pC33k5不仅可以在大肠杆菌中稳定复制 。 展开更多

关键词 血管抑素 kringle5基因 穿梭表达载体 反转录PCR 启动子camv35s 真核植物细胞

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大麦核糖体失活蛋白基因与天花粉蛋白基因双价植物表达载体的构建

13

作者 齐岩 李杰 +1 位作者 朱延明 柏锡 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2006年第1期28-32,共5页

大麦核糖体失活蛋白(B-RIP)和天花粉蛋白(TCS)均具有广谱抗病毒作用,研究构建了分别由2×CaMV35S启动子调控的大麦核糖体失活基因(rip)和天花粉蛋白基因(tcs)双价植物表达载体pABTR,其植物选择标记为新霉素磷酸转移酶基因(NPTⅡ),... 大麦核糖体失活蛋白(B-RIP)和天花粉蛋白(TCS)均具有广谱抗病毒作用,研究构建了分别由2×CaMV35S启动子调控的大麦核糖体失活基因(rip)和天花粉蛋白基因(tcs)双价植物表达载体pABTR,其植物选择标记为新霉素磷酸转移酶基因(NPTⅡ),适用于双子叶植物的遗传转化。并通过三亲本杂交法将重组质粒导入根癌农杆菌LBA4404中,为通过农杆菌介导法将双价基因导入植物,培育理想的抗病毒转基因植物奠定基础。 展开更多

关键词 双价植物表达栽体 rip基因 tes基因 2x camv35s启动子

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多聚酶对转基因产品PCR检测的影响分析

14

作者 夏玉平 吴刚 +2 位作者 武玉花 张丽 卢长明 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期110-114,共5页

本文参考出入境检验检疫行业标准中转基因油菜外源基因的PCR检测体系,分析了18种不同DNA聚合酶对定性PCR检测转基因油菜OXY235中的CaMV35S启动子的影响。结果表明,不同DNA聚合酶对CaMV35S启动子定性PCR检测中非特异扩增的产生以及检测... 本文参考出入境检验检疫行业标准中转基因油菜外源基因的PCR检测体系,分析了18种不同DNA聚合酶对定性PCR检测转基因油菜OXY235中的CaMV35S启动子的影响。结果表明,不同DNA聚合酶对CaMV35S启动子定性PCR检测中非特异扩增的产生以及检测灵敏度影响较大。其中热启动Taq酶效果较好,目标条带清晰,检测灵敏度高,而且完全没有非特异性扩增条带,非常适合用于定性PCR检测。对于同样条件下无法有效扩增0.1%DNA样品的Taq酶,则不推荐用于检测途径。 展开更多

关键词 转基因检测 定性PCR camv35s启动子 非特异扩增 灵敏度

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一个新的植物转化用质粒pBG1100的构建和检验

15

作者 高必达 BenJ.C.Cornelissen 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2000年第6期428-431,共4页

在一个 10 kb双元载体 p MOG40 2的多克隆酶切位点插入一个 3.2 kb的 Ca MV35 S启动子 / GU S编码区 /NOS终止区融合基因 ,得到一个 13.2 kb的新植物转化载体 p BG110 0 .p BG110 0经三亲交配法或电激法转入农杆菌菌系 EHA10 5 ,再用农... 在一个 10 kb双元载体 p MOG40 2的多克隆酶切位点插入一个 3.2 kb的 Ca MV35 S启动子 / GU S编码区 /NOS终止区融合基因 ,得到一个 13.2 kb的新植物转化载体 p BG110 0 .p BG110 0经三亲交配法或电激法转入农杆菌菌系 EHA10 5 ,再用农杆菌介导法转化番茄 .转基因番茄组成型的强表达 GU S基因 ,在 GU S活性测定时表现出强荧光反应 .该质粒可用于 :1)建立植物转化系统 (如检验新的转化方法或测试新的可转化植物种类 ) ;2 )用某一基因的启动子取代 Ca MV 35 S启动子 ,可研究该基因在植物体内的表达 ;3)将目的基因的编码区取代 GU S区 ,可将目的基因转入植物并使其强表达 . 展开更多

关键词 植物转化 质粒 camv 35s启动子 番茄 育种

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一个新的编码大豆DREB转录因子基因的克隆及鉴定 被引量：4

16

作者 王巧燕 陈明 +4 位作者 邱志刚 程宪国 徐兆师 李连城 马有志 《西南农业学报》 CSCD 2005年第5期625-628,共4页

DREB转录因子是一类可以调控多个与干旱、高盐及低温耐性有关的功能基因表达的转录因子家族。从大豆耐盐品种铁丰8号中克隆了一个新的DREB基因GmDREB5。该基因编码309个氨基酸,具有典型的AP2/EREBP保守结构域,属于AP2/EREBP类转录因子中... DREB转录因子是一类可以调控多个与干旱、高盐及低温耐性有关的功能基因表达的转录因子家族。从大豆耐盐品种铁丰8号中克隆了一个新的DREB基因GmDREB5。该基因编码309个氨基酸,具有典型的AP2/EREBP保守结构域,属于AP2/EREBP类转录因子中的DREB亚族。同源性比较分析表明,GmDREB5基因与Genbank登录的DREB基因同源性不高,属于新基因。酵母转录激活实验证明,该基因可以与DRE顺式作用元件特异结合,并具有转录激活活性;同时采用CaMV35S启动子驱动,构建了植物表达载体pBI35S-GmDREB5,并通过冻融法将重组质粒导入根癌农杆菌EHA105中,再利用叶盘转化法将重组质粒导入烟草品种W38中,获得转基因烟草植株30株。 展开更多

关键词 DREB转录因子 转录激活camv35s启动子 植物表达载体

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番茄果实特异性LYC-B干扰载体的构建及在不同颜色果实中的表达特异性验证 被引量：3

17

作者 王巧丽 梁燕 +3 位作者 张振才 李翠 李云洲 王玲慧 《中国蔬菜》 北大核心 2014年第5期11-18,共8页

为了研究番茄LYC-B 干扰对类胡萝卜素合成主要酶和主要代谢产物的影响,构建了果实特异性的番茄红素β- 环化酶LYC-B 干扰载体,并验证了其在不同颜色番茄果实中的有效性.依据X13437.1 扩增番茄果实特异启动子E8,构建了果实特异性载体E8-p... 为了研究番茄LYC-B 干扰对类胡萝卜素合成主要酶和主要代谢产物的影响,构建了果实特异性的番茄红素β- 环化酶LYC-B 干扰载体,并验证了其在不同颜色番茄果实中的有效性.依据X13437.1 扩增番茄果实特异启动子E8,构建了果实特异性载体E8-pBI121,其在粉色、红色、绿色和紫色的番茄果实中均能表达.依据X86452.1 扩增番茄LYC-B 从61～861bp 间长度为801 bp 的片段LYC-B1 和从 480～781 bp 间长度为302 bp 的片段 LYC-B2,构建了以CaMV 35S 为启动子的LYC-B干扰表达载体pBI121-B1B2,以E8 替换CaMV 35S,构建了果实特异性干扰载体E8-pBI121-B1B2.采用农杆菌注射法分别侵染番茄叶片和果实,GUS 染色显示,pBI121-B1B2 在叶片、果实和种子中均表达,E8-pBI121-B1B2 只在果实和种子中表达. 展开更多

关键词 番茄 类胡萝卜素 E8启动子 camv35s启动子 GUs染色

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对引进的美国大豆品种进行转基因成分的检测 被引量：9

18

作者 宋扬 吴存祥 +1 位作者 侯文胜 韩天富 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期116-120,共5页

利用田间表型鉴定和PCR检测相结合的方法,对从美国引进的46 个大豆品种进行了转基因成分的检测。实验过程中,首先通过喷洒草甘膦对待测材料进行表型鉴定,然后通过PCR分子检测分析CaMV35S启动子和NOS终止子的有无,初步判定引进材料是否... 利用田间表型鉴定和PCR检测相结合的方法,对从美国引进的46 个大豆品种进行了转基因成分的检测。实验过程中,首先通过喷洒草甘膦对待测材料进行表型鉴定,然后通过PCR分子检测分析CaMV35S启动子和NOS终止子的有无,初步判定引进材料是否为转基因大豆,最后对目的基因CP4-EPSPS进行检测,进一步确定所测材料是否为抗草甘膦转基因大豆。大豆本身的凝集素基因作为PCR检测的内置检测标准,有效排除了由于DNA质量、实验操作等因素对检测结果的影响。结果表明,在所检测的46个引进品种中,5个是抗草甘膦转基因品种,41个是非转基因品种,它们可作为我国大豆新品种选育的亲本材料。 展开更多

关键词 转基因成分 大豆品种 美国 转基因大豆 转基因品种 NOs终止子 35s启动子 抗草甘膦 PCR检测 凝集素基因 新品种选育 实验过程 camv 检测分析 目的基因 检测标准 检测结果 实验操作 引进品种 亲本材料 DNA 鉴定 表型 田间

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利用实时荧光PCR快速筛查玉米中转基因成分 被引量：6

19

作者 张海波 刘冰 +2 位作者 杨娟妮 张田 张英 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期840-848,共9页

玉米是拥有转基因转化体数量最多的作物,多样的转化体增加了玉米中转基因成分筛查的难度。为了建立玉米中转基因成分的快速筛查方法,利用Taqman探针实时荧光PCR方法,通过对玉米样品中CaMV35S启动子(P-35S)和NOS终止子(T-NOS)2个元件组... 玉米是拥有转基因转化体数量最多的作物,多样的转化体增加了玉米中转基因成分筛查的难度。为了建立玉米中转基因成分的快速筛查方法,利用Taqman探针实时荧光PCR方法,通过对玉米样品中CaMV35S启动子(P-35S)和NOS终止子(T-NOS)2个元件组合的检测,完成对现有玉米转化体的筛查。建立的Taqman探针实时荧光PCR方法灵敏度可达到0.1%,检测时间较普通PCR方法缩短1h以上。同时提出了转基因玉米转化体鉴定路线图。该筛查方法可对玉米中的转基因成分进行快速、高灵敏度的筛查。 展开更多

关键词 转基因玉米 Taqman探针实时荧光PCR 快速筛查 camv35s启动子

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rolc基因对开花的影响 被引量：1

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作者 孙国凤 《生物技术通报》 CAS CSCD 1992年第3期11-11,共1页

日本筑波大学生物科学系教授原田宏、副教授镰田博、栗冈百合子发现Ri质粒的rolc基因与多年生草本植物的开花提早、花数增加和开花期延长特性有关。这对观赏花卉的培育可能有用。7月21日在名古屋召开的植物组织培养学会上报告了这个发... 日本筑波大学生物科学系教授原田宏、副教授镰田博、栗冈百合子发现Ri质粒的rolc基因与多年生草本植物的开花提早、花数增加和开花期延长特性有关。这对观赏花卉的培育可能有用。7月21日在名古屋召开的植物组织培养学会上报告了这个发现。此发现也许能促进“试管苗”的发展。镰田通过强化rolc的活性,发现其对植物的影响,在花椰菜花叶病毒(CaMV)的35S启动子的下端连接这种基因片段的cDNA,构建新质粒。以根癌土壤杆菌为载体导入菊苣和颠茄。通过DNA印迹杂交法确认了基因的导入。 展开更多

关键词 植物组织培养 根癌土壤杆菌 camv 日本筑波大学 花椰菜花叶病毒 基因片段 生物科学 ROLC 启动子 百合子

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