芜菁花叶病毒外壳蛋白基因的克隆与序列分析 被引量：3

1

作者 庄木 王晓武 +3 位作者 李艳双 刘玉梅 张扬勇 方智远 《中国蔬菜》 北大核心 2006年第3期6-8,共3页

将来自北京地区甘蓝和芥菜上的TuMV外壳蛋白基因片段分别克隆到pMD18-T载体中，测序并进行序列分析。结果表明：两者CP基因序列长度均为867个核苷酸，编码288个氨基酸，它们的核苷酸同源性为97．2％，氨基酸同源性为97．6％；两者与GenB... 将来自北京地区甘蓝和芥菜上的TuMV外壳蛋白基因片段分别克隆到pMD18-T载体中，测序并进行序列分析。结果表明：两者CP基因序列长度均为867个核苷酸，编码288个氨基酸，它们的核苷酸同源性为97．2％，氨基酸同源性为97．6％；两者与GenBank中的部分CP基因序列的核苷酸同源性在87．8％～97．8％之间，氨基酸同源性在91．7％～99．0％之间；分子进化树分析两者可归属World-B组。 展开更多

关键词 芜菁花叶病毒 外壳蛋白基因 序列分析

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芜菁花叶病毒外壳蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量：1

2

作者 许建平 徐平 +1 位作者 陈集双 李德葆 《浙江农业大学学报》 CSCD 1994年第4期363-368,共6页

本文报道采用反转录酶—聚合酶链式反应，体外扩增芜菁花叶病毒（ＴｕＭＶ）外壳蛋白基因及其克隆，并在大肠杆菌中获得表达的结果；从抗州市郊区感病的油菜上分离到一株致病力极强的芜菁花叶病毒分离物，提纯后，经５０ｎｇ／ｍＬ蛋白... 本文报道采用反转录酶—聚合酶链式反应，体外扩增芜菁花叶病毒（ＴｕＭＶ）外壳蛋白基因及其克隆，并在大肠杆菌中获得表达的结果；从抗州市郊区感病的油菜上分离到一株致病力极强的芜菁花叶病毒分离物，提纯后，经５０ｎｇ／ｍＬ蛋白酶Ｋ和０．５％ＳＤＳ处理，苯酚／氯仿和氯仿抽提两次，酒精沉淀，获得了纯化的病毒ＲＮＡ，该ＲＮＡ与ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）＿（１５）退火后，在ＡＭＶ反转录酶的作用下合成了单链ｃＤＮＡ，然后加入用以扩增ＴｕＭＶ－ＣＰ基因的上下游引物，３５个循环后，得到了一条长约０．８５ｋｂ的片段，将该片段克隆到ｐＵＣ１８质粒的ＳａｌⅠ限制性酶切位点，分析了限制性酶切图谱，分析表明该片段含有ＥｃｏＲⅠ和ＸｂａⅠ以及引物设计时带人的ＭｃｏⅠ三个酶切位点，该片段克隆到大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）原核表达载体ｐＫＫ２３３－２质粒的ＮｃｏⅠ和ＨｉｎｄⅡ位点后，经ＩＰＴＧ诱导，以该病毒的抗血清为第一抗体，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测该基因的表达产物，结果表明该基因的表达产物为ＴｕＭＶ－ＣＰ蛋白，因而认为所获得的扩增片段确为芜菁花叶病毒外壳蛋白基因。 展开更多

关键词 芜菁花叶病毒 外壳蛋白 基因表达

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芜菁花叶病毒杭州分离株外壳蛋白基因序列分析 被引量：2

3

作者 徐平 许建平 +1 位作者 薛朝阳 李德葆 《浙江农业大学学报》 CSCD 1994年第5期451-456,共6页

从杭州郊区分离出一个ＴｕＭＶ强毒株系，利用分子克隆和Ｓａｎｇｅｒ双脱氢测序方法分析了其外壳蛋白基因的ＤＮＡ序列．该序列与已报道的其他４种ＴｕＭＶ分离物都具有较高的同源性，最高达９７．６％，最低达８９．５％，其氨基酸序... 从杭州郊区分离出一个ＴｕＭＶ强毒株系，利用分子克隆和Ｓａｎｇｅｒ双脱氢测序方法分析了其外壳蛋白基因的ＤＮＡ序列．该序列与已报道的其他４种ＴｕＭＶ分离物都具有较高的同源性，最高达９７．６％，最低达８９．５％，其氨基酸序列的同源性更高，最高达９７．９％，最低达９４．５％。本文分析了该序列中ＡＴ和ＧＣ含量，计算了４种核苷酸在有意义链中和在密码子不同位置上的出现频率，同时还分析了该病毒外壳蛋白氨基酸遗传密码的使用频率。 展开更多

关键词 芜菁 花叶病毒 外壳蛋白 DNA

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黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因克隆及在病毒检测中的应用 被引量：9

4

作者 刘勇 张德咏 +2 位作者 王小平 周雪平 李德葆 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1999年第5期361-365,共5页

根据已经发表的黄瓜花叶病毒(CMV)外壳蛋白基因的序列,人工合成引物,通过反转录和PCR扩增并克隆了黄瓜花叶病毒辣椒分离物P33(CMV-P33)的外壳蛋白基因,构建到质粒PBS的Hinc位点.重组质粒经Sma酶切后,在0.8%低熔点琼脂糖上电泳,回收克隆... 根据已经发表的黄瓜花叶病毒(CMV)外壳蛋白基因的序列,人工合成引物,通过反转录和PCR扩增并克隆了黄瓜花叶病毒辣椒分离物P33(CMV-P33)的外壳蛋白基因,构建到质粒PBS的Hinc位点.重组质粒经Sma酶切后,在0.8%低熔点琼脂糖上电泳,回收克隆的CP基因片段(约0.7kb),用切口平移的方法进行α-32PdATP标记.以此为探针,通过点杂交技术检测提纯的病毒CMV-P33和R1株系、CMV-P33的RNA,及受CMV侵染的辣椒叶片汁液,结果表明:提纯的CMV-P33和R1株系的最低检出量分别为1ng和4ng,CMV-P33的RNA为0.1ng.检测受CMV侵染的辣椒叶片汁液时,最大稀释倍数为100倍.其次,用该探针检测健康辣椒和受烟草花叶病毒(TMV)、马铃薯Y病毒侵染的烟叶汁液时,检测反应均为阴性. 展开更多

关键词 黄瓜花叶病毒 外壳蛋白基因 克隆 检测

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黄瓜绿斑驳花叶病毒山西西瓜分离物外壳蛋白基因序列分析 被引量：5

5

作者 杜江 成媛媛 +1 位作者 牛二波 牛颜冰 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期142-145,148,共5页

通过病毒dsRNA分离技术、非序列依赖性PCR扩增(sequence-independent amplification,SIA)技术和RTPCR等手段对采自山西太谷的西瓜病样进行了检测与鉴定,确定其为黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)所侵染。... 通过病毒dsRNA分离技术、非序列依赖性PCR扩增(sequence-independent amplification,SIA)技术和RTPCR等手段对采自山西太谷的西瓜病样进行了检测与鉴定,确定其为黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)所侵染。为明确CGMMV西瓜分离物(CGMMV-SXTG)的分类地位,本研究进一步克隆了CGMMV-SXTG的外壳蛋白基因(coat protein,CP)全序列并进行序列分析,系统进化树分析显示该分离物与亚洲分离物亲缘关系较近,而与欧洲分离物亲缘关系较远,表明该病毒的不同分离物在分组上可能与地域有一定的关系;接着对不同分离物的CP基因核苷酸序列和氨基酸序列进行同源性比对分析,结果表明该分离物与中国山东分离物(TANG)同源性最高,分别达到99.8%和99.6%。 展开更多

关键词 黄瓜绿斑驳花叶病毒 序列分析 外壳蛋白基因

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黄瓜花叶病毒山东分离物外壳蛋白基因的克隆及序列分析 被引量：12

6

作者 崔连民 张福进 +1 位作者 朱常香 刘学春 《山东农业科学》 2005年第4期3-6,共4页

对侵染烟草的黄瓜花叶病毒(CMV)山东分离物(SD1)的外壳蛋白(CP)基因进行克隆和序列分析.根据已报道的黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因序列合成两条寡聚核苷酸引物,用免疫捕捉PCR的方法对黄瓜花叶病毒的外壳蛋白基因进行了扩增.将所得的PCR产... 对侵染烟草的黄瓜花叶病毒(CMV)山东分离物(SD1)的外壳蛋白(CP)基因进行克隆和序列分析.根据已报道的黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因序列合成两条寡聚核苷酸引物,用免疫捕捉PCR的方法对黄瓜花叶病毒的外壳蛋白基因进行了扩增.将所得的PCR产物通过T4DNA连接酶连接到pET-22b(+)载体上,并转化大肠杆菌DH5a.序列分析表明:CMV-SD1的CP基因全长657bp,编码218个氨基酸;其核苷酸序列与黄瓜花叶病毒亚组Ⅰ的分离物有极高的同源性,达92.7%～94.9%;与亚组Ⅱ的同源性仅为59.3%～59.5%;由此将CMV-SD1分离物归属于CMV亚组Ⅰ. 展开更多

关键词 黄瓜花叶病毒 外壳蛋白基因 序列分析 CMV亚组Ⅰ

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黄瓜绿斑驳花叶病毒外壳蛋白基因原核表达及抗血清制备 被引量：3

7

作者 刘锦 李亦晴 +3 位作者 黄显德 房乐 李向东 田延平 《山东农业科学》 2017年第5期10-13,共4页

将黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因克隆到原核表达载体pEHISTEV上获得pEHISTEV-CGMMV-CP,转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导,表达出分子量为19.5 kD的CGMMV CP融合蛋白。... 将黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因克隆到原核表达载体pEHISTEV上获得pEHISTEV-CGMMV-CP,转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导,表达出分子量为19.5 kD的CGMMV CP融合蛋白。切胶回收诱导表达的CGMMV CP免疫家兔,制备抗血清。Western Blotting检测发现,制备的抗血清能与CGMMV CP发生特异性免疫反应,与同属的烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)无反应。琼脂双扩散试验测定,制备抗血清的效价为1∶16,ELISA测定效价为1∶1024。该血清特异性强、效价高,可用于CGMMV的检测。 展开更多

关键词 黄瓜绿斑驳花叶病毒 外壳蛋白基因 原核表达 抗血清

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从豆科植物上分离的黄瓜花叶病毒两株系外壳蛋白基因的序列比较 被引量：1

8

作者 周雪平 刘勇 《浙江农业大学学报》 CSCD 北大核心 1998年第5期556-556,共1页

关键词 黄瓜花叶病毒 外壳蛋白基因 序列

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黄瓜绿斑驳花叶病毒山东南瓜分离物外壳蛋白基因序列分析 被引量：5

9

作者 李晓颖 江蓓蓓 +3 位作者 王迅 景茂峰 公娇芬 竺晓平 《山东农业科学》 2010年第7期1-4,共4页

通过RT-PCR扩增得到了黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber Green Mottle Mosaic Virus,CGMMV)山东泰安南瓜分离物(CGMMV-TANG)的外壳蛋白基因,经过序列分析,该分离物外壳蛋白(CP)基因全长486个核苷酸,由161个氨基酸组成。对CP基因核苷酸序列... 通过RT-PCR扩增得到了黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber Green Mottle Mosaic Virus,CGMMV)山东泰安南瓜分离物(CGMMV-TANG)的外壳蛋白基因,经过序列分析,该分离物外壳蛋白(CP)基因全长486个核苷酸,由161个氨基酸组成。对CP基因核苷酸序列进行同源性比较和构建系统进化树,并结合寄主来源及地域来源进行分析,结果表明该病毒的不同分离物在分组上与地域有一定的关系。 展开更多

关键词 黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV) 核苷酸序列 外壳蛋白基因 序列分析

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芜菁花叶病毒CP基因反向重复植物表达载体的构建及遗传转化 被引量：2

10

作者 罗静 陈伟 +6 位作者 庄木 李艳红 王晓武 刘玉梅 杨丽梅 张扬勇 方智远 《中国蔬菜》 北大核心 2007年第2期10-12,共3页

针对芜菁花叶病毒外壳蛋白基因构建反向重复表达载体,利用农杆菌介导法将其导入四九菜心,PCR检测共获得13个阳性转化株,遗传转化效率为2%。

关键词 芜菁花叶病毒 外壳蛋白基因 反向重复 遗传转化

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侵染贵州甘蓝的芜菁花叶病毒CP基因序列分析 被引量：1

11

作者 刘学辉 李淳 +2 位作者 陈小均 何海永 王莉爽 《广东农业科学》 CAS 2020年第4期99-105,共7页

【目的】明确贵州省甘蓝芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)的发生分布,为科学防控提供指导。【方法】在贵州省安顺市、威宁县和修文县采集甘蓝病毒病样品,采用酶联免疫吸附试验法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和RT-... 【目的】明确贵州省甘蓝芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)的发生分布,为科学防控提供指导。【方法】在贵州省安顺市、威宁县和修文县采集甘蓝病毒病样品,采用酶联免疫吸附试验法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和RT-PCR对病样进行TuMV检测,利用相关生物学软件分析TuMV CP基因序列的一致性,并构建系统进化树。【结果】152份甘蓝样品中66份检测出阳性,检出率为43.42%;测序的15个TuMV CP基因核苷酸同源性为88.70%~100%,与已报道TuMV 6个组的分离物构建系统进化树发现,14个分离物属于basal-BR,1个分离物属于world-B组。【结论】TuMV在贵州省甘蓝不同种植区普遍发生,且basal-BR为感染甘蓝的优势毒源。 展开更多

关键词 甘蓝 芜菁花叶病毒 外壳蛋白(CP) 分子变异

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十字花科蔬菜芜菁花叶病毒的RT-PCR快速检测 被引量：10

12

作者 庄木 王晓武 +2 位作者 郑文光 娄平 方智远 《中国蔬菜》 北大核心 2002年第5期10-11,共2页

利用RT PCR技术 ,建立了一种简便、快速、准确地检测十字花科蔬菜芜菁花叶病毒的方法。应用该方法 ,不需复杂的提取、纯化病毒RNA过程 ,直接对田间病样简单处理后进行RT PCR检测。通过获得包含该病毒CP基因的cDNA片段 。

关键词 十字花科蔬菜 芜菁 花叶病毒 RT-PCR快速检测 反转录-聚合酶链式反应 外壳蛋白基因

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侵染葫芦的黄瓜绿斑驳花叶病毒广西分离物分子鉴定 被引量：14

13

作者 秦碧霞 蔡健和 +3 位作者 刘志明 魏源文 谢玲 朱桂宁 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期116-118,共3页

从广西南宁市郊温室大棚中的葫芦[Lagenaria siceraria(Molina)Stand.]上采集到一个表现脉绿、花叶症状的病毒样品,ELISA检测表明,该样品与黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)有密切的血清学关系,利用RT-PC... 从广西南宁市郊温室大棚中的葫芦[Lagenaria siceraria(Molina)Stand.]上采集到一个表现脉绿、花叶症状的病毒样品,ELISA检测表明,该样品与黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)有密切的血清学关系,利用RT-PCR方法从样品中扩增获得约500bp的DNA片段,序列分析表明,该片段是CGMMV的外壳蛋白基因,暂将该病毒分离物定名为GX-BG。外壳蛋白基因核苷酸序列系统进化树分析表明,已报道的CGMMV主要分为3大群体,GX-BG与中国辽宁分离物(CGMMV-LN)分别属于不同的群体。 展开更多

关键词 黄瓜绿斑驳花叶病毒 外壳蛋白基因 序列分析 鉴定

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黄瓜绿斑驳花叶病毒广东分离物的分子鉴定 被引量：10

14

作者 张卫东 权永兵 +3 位作者 廖力 徐淼锋 迟远丽 陈其文 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第20期73-76,共4页

采用RT-PCR方法,扩增并测定了黄瓜绿斑驳花叶病毒广东分离物(CGMMV-GD-GZ,CGMMV-GD-LZ,CGMMV-GD-LF)的外壳蛋白(coat protein,CP)和运动蛋白(movement protein,MP)基因序列。结果显示,CP基因序列全长486 bp,编码161个氨基酸;MP基因全长7... 采用RT-PCR方法,扩增并测定了黄瓜绿斑驳花叶病毒广东分离物(CGMMV-GD-GZ,CGMMV-GD-LZ,CGMMV-GD-LF)的外壳蛋白(coat protein,CP)和运动蛋白(movement protein,MP)基因序列。结果显示,CP基因序列全长486 bp,编码161个氨基酸;MP基因全长795 bp,编码264个氨基酸。CGMMV广东分离物与其他15个CGMMV分离物之间外壳蛋白基因核苷酸的同源性在90.9%～100%之间,运动蛋白核苷酸同源性为92.7%～100%;与同属其他13种病毒基因组核苷酸序列同源性分别仅为29.5%～56.2%和38.8%～61.8%。基于外壳蛋白和运动蛋白基因序列构建系统发育树显示,CGMMV不同分离物进化为亚洲和欧洲两大群体,3种CGMMV广东分离物与韩国、日本等亚洲分离物同源性极高,可能具有共同的侵染源。 展开更多

关键词 黄瓜绿斑驳花叶病毒 外壳蛋白基因 运动蛋白基因 分子鉴定

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新疆加工番茄上番茄花叶病毒的分子鉴定 被引量：15

15

作者 姜玉霞 向本春 +2 位作者 安仙丽 黄家风 汪铖华 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2008年第3期484-489,共6页

从表现花叶、畸形的加工番茄病株上获得分离物xj124，用1对ToMVCP基因引物进行RT-PCR，扩增得到了689bp的特异性核苷酸片段。将PCR产物插入到克隆载体pMD18-T中再转化到大肠杆菌TOP10。经限制酶酶切鉴定，重组克隆中含有与PCR产物大小... 从表现花叶、畸形的加工番茄病株上获得分离物xj124，用1对ToMVCP基因引物进行RT-PCR，扩增得到了689bp的特异性核苷酸片段。将PCR产物插入到克隆载体pMD18-T中再转化到大肠杆菌TOP10。经限制酶酶切鉴定，重组克隆中含有与PCR产物大小相同的689bp的插入片段。cDNA全序列分析表明，所扩增出的689bpToMVCP基因，含1个480bp开放阅读框架（ORV），编码160氨基酸组成的蛋白，所克隆的基因包含完整的ToMVCP基因。所测得的xj124分离物与国内外已报道的部分ToMV CP基因序列比较。核苷酸同源性高达84．4％-99．8％，氨基酸同源性高达98．7％-100％。因此将该分离物鉴定为番茄病毒病花叶病毒。 展开更多

关键词 番茄花叶病毒 分子鉴定 克隆外壳蛋白基因 序列分析

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山东省芋花叶病毒病的田间调查及鉴定 被引量：3

16

作者 高利利 姜珊珊 +3 位作者 吴斌 张眉 王升吉 辛相启 《中国蔬菜》 北大核心 2017年第7期68-72,共5页

为明确芋花叶病毒(Dasheen mosaic virus,Ds MV)在山东芋种植区的发生和遗传进化,在山东潍坊、青岛、烟台、日照和临沂等5个芋主栽区进行调查,对采集样品进行病毒病病原鉴定、序列分析和遗传进化分析。结果显示,芋花叶病毒的检出率为55.... 为明确芋花叶病毒(Dasheen mosaic virus,Ds MV)在山东芋种植区的发生和遗传进化,在山东潍坊、青岛、烟台、日照和临沂等5个芋主栽区进行调查,对采集样品进行病毒病病原鉴定、序列分析和遗传进化分析。结果显示,芋花叶病毒的检出率为55.9%,在5个地区皆有分布。5个Ds MV分离物cp基因的核苷酸序列相似性为88.5%~91.9%,氨基酸序列相似性为93.4%~97.5%;与国内外已报道代表性Ds MV分离物cp基因的核苷酸与氨基酸的序列相似性分别为74.8%~99.4%、79.7%~99.1%。遗传进化分析显示,Ds MV山东分离物与日本分离物(Ds23)、中国分离物(ND和ZAN)和美国分离物(Ds MV-U2)亲缘关系较近,聚在同一分支。综上,Ds MV在山东省芋主栽区发生普遍,其cp基因序列之间变异相对较大。 展开更多

关键词 芋花叶病毒 外壳蛋白基因 序列分析

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甘蔗线条花叶病毒RT-LAMP检测方法的建立及应用 被引量：3

17

作者 李战彪 谢慧婷 +2 位作者 崔丽贤 蔡健和 秦碧霞 《广东农业科学》 CAS 2020年第4期92-98,共7页

【目的】建立甘蔗线条花叶病毒(Sugarcane streak mosaic virus,SCSMV)的RT-LAMP检测方法,为SCSMV的检测提供技术支持。【方法】根据甘蔗线条花叶病毒外壳蛋白基因的保守序列设计特异引物,优化RT-LAMP的反应条件,对比分析RT-LAMP的检测... 【目的】建立甘蔗线条花叶病毒(Sugarcane streak mosaic virus,SCSMV)的RT-LAMP检测方法,为SCSMV的检测提供技术支持。【方法】根据甘蔗线条花叶病毒外壳蛋白基因的保守序列设计特异引物,优化RT-LAMP的反应条件,对比分析RT-LAMP的检测灵敏度和特异性;并在RT-LAMP反应产物中加入SYBR GREEN I进行可视化检测,方便快速判定结果。【结果】成功建立了一种用于检测SCSMV的RT-LAMP方法,可在60~63℃下60 min完成对SCSMV的检测,且具有较高的灵敏度,比传统RT-PCR高100倍,最低检测RNA浓度为167.9×10-5 ng。此外,该方法具有较高的特异性,可特异检测SCSMV。【结论】建立了一种灵敏、简便、快速的SCSMV RT-LAMP检测方法并用于田间甘蔗样品的检测。 展开更多

关键词 甘蔗 甘蔗线条花叶病毒(SCSMV) 环介导等温扩增(RT-LAMP) 外壳蛋白基因 田间检测

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农杆菌介导法获得抗病毒病转基因大白菜 被引量：6

18

作者 邢德峰 李新玲 +2 位作者 徐香玲 任南琪 赵阳国 《哈尔滨工业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第5期793-796,共4页

为获得抗芜菁花叶病毒病的大白菜植株,用携带TuMV-cp基因的农杆菌R1000和EHA105转化大白菜子叶和下胚轴,PCR、PCR-Southern检测证实TuMV-cp基因已导入并整合到大白菜的基因组中.RT-PCR检测表明TuMV-cp在转录水平上获得了稳定表达.TuMV-c... 为获得抗芜菁花叶病毒病的大白菜植株,用携带TuMV-cp基因的农杆菌R1000和EHA105转化大白菜子叶和下胚轴,PCR、PCR-Southern检测证实TuMV-cp基因已导入并整合到大白菜的基因组中.RT-PCR检测表明TuMV-cp在转录水平上获得了稳定表达.TuMV-cp基因在转基因植株T1代中获得了稳定的遗传.抗病性鉴定结果表明转基因植株T1代较非转基因植株对TuMV的抗性增强,获得了抗病毒病的转基因大白菜植株. 展开更多

关键词 大白菜 农杆菌 芜菁花叶病毒外壳蛋白基因 植株再生 转基因植株

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转CMV CP基因番茄植株的抗病表现 被引量：3

19

作者 施曼玲 薛宝娣 《浙江农业科学》 北大核心 1999年第6期276-279,共4页

转ＣＭＶＣＰ （Ｃｕｃｕｍ ｂｅｒＭｏｓａｉｃ ＣｏａｔＰｒｏｔｅｉｎ） 基因的番茄植株对ＣＭＶ 侵染表现显著的抗性， 温室中接种的植株无症率为： Ｒ１ 代９４％ ， Ｒ２ 代９５１％ ， Ｒ３ 代９５４％ ， Ｒ４ 代９５％ ... 转ＣＭＶＣＰ （Ｃｕｃｕｍ ｂｅｒＭｏｓａｉｃ ＣｏａｔＰｒｏｔｅｉｎ） 基因的番茄植株对ＣＭＶ 侵染表现显著的抗性， 温室中接种的植株无症率为： Ｒ１ 代９４％ ， Ｒ２ 代９５１％ ， Ｒ３ 代９５４％ ， Ｒ４ 代９５％ ； 大田中自然发病的植株无症率为： Ｒ２ 代６５６％ ， Ｒ３ 代７６９％ 。在转基因的番茄植株中， 外源基因ＧＵＳ（βｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄａｓｅ）、ＣＰ和ＮＰＴ Ⅱ（ｎｅｏｍ ｙｃｉｎ ｐｈｏｓｐｈｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ） 基因共同表达，连锁遗传，在后代按３∶１ 或１∶１ 比例进行分离。 展开更多

关键词 黄瓜花叶病毒 外壳蛋白基因 番茄 抗病性

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TMV蚕豆株系CP基因及3′端非编码区序列分析与表达

20

作者 刘勇 周雪平 +1 位作者 李德葆 刘志敏 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1997年第1期1-8,共8页

根据烟草花叶病毒Ｕ１株系ＴＭＶ－Ｕ１序列，人工合成引物，通过ＰＣＲ扩增并克隆了烟草花叶病毒蚕豆株系（ＴＭＶ－Ｂ）的外壳蛋白（ＣＰ）基因和３′端非编码区．ＤＮＡ全序列测定结果表明，外壳蛋白基因全长４５９个碱基，编码１５... 根据烟草花叶病毒Ｕ１株系ＴＭＶ－Ｕ１序列，人工合成引物，通过ＰＣＲ扩增并克隆了烟草花叶病毒蚕豆株系（ＴＭＶ－Ｂ）的外壳蛋白（ＣＰ）基因和３′端非编码区．ＤＮＡ全序列测定结果表明，外壳蛋白基因全长４５９个碱基，编码１５１个氨基酸，３′端非编码区全长２２４个碱基．与ＴＭＶ－Ｕ１株系相比，ＴＭＶ－Ｂ仅在ＣＰ基因上有一个碱基缺失，并导致ＣＰ基因提前终止，使其编码的氨基酸少７个．将ＣＰ基因及３′端非编码区插入ｐＧＥＭＥＸ－１的Ｔ７基因１０中，转入Ｅ．ｃｏｌｉ后诱导表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳分析呈现一特异的蛋白带．Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫检测证明，该特异带与ＴＭＶ抗血清呈阳性反应．将ＣＰ基因正向插入植物表达载体ＰＢⅠ１２１中，置于花椰菜花叶病毒３５Ｓ启动子控制之下。 展开更多

关键词 遗传工程 烟草花叶病毒 外壳蛋白基因 蚕豆

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