淫羊藿素通过调控黏着斑激酶及下游细胞外信号调节激酶/细胞周期蛋白D1和蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素蛋白信号通路抑制肝癌细胞增殖的作用机制研究

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作者 李珍 高寒 +4 位作者 赵永康 王梓萱 王婧筱 王伽伯 宋鑫华 《环球中医药》 CAS 2023年第12期2401-2407,共7页

目的探究淫羊藿素(icaritin,ICA)抑制肝癌细胞增殖的作用机制。方法以Huh7肝癌细胞为研究对象并在体外培养;设置200、100、50、20、10、5、2、1、0.5μmol/L不同浓度的ICA给药干预72小时之后,采用0.5%结晶紫染色分析ICA对Huh7肝癌细胞... 目的探究淫羊藿素(icaritin,ICA)抑制肝癌细胞增殖的作用机制。方法以Huh7肝癌细胞为研究对象并在体外培养;设置200、100、50、20、10、5、2、1、0.5μmol/L不同浓度的ICA给药干预72小时之后,采用0.5%结晶紫染色分析ICA对Huh7肝癌细胞生存的影响;将Huh7肝癌细胞给与ICA高(10μmol/L)、中(5μmol/L)、低(2.5μmol/L)三个浓度,每个浓度设置三个复孔,通过克隆形成实验检测ICA对Huh7肝癌细胞增殖能力的影响;Huh7肝癌细胞给与ICA IC 50值浓度,对照孔及ICA给药孔分别在0、6、12、24小时在倒置显微镜下拍照,通过细胞划痕分析ICA对肝癌细胞迁移能力的影响;并且用流式细胞术对细胞周期进行分析。另外,通过蛋白印迹对增殖相关蛋白,如增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、磷酸化黏着斑激酶(phosphorylated focal adhesion kinase,p-FAK)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated protein kinase,p-ERK)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-mTOR)等蛋白的表达水平进行分析。结果ICA可以明显抑制肝癌细胞的增殖及迁移能力,并且使肝癌细胞的细胞周期在G1期发生阻滞(P<0.05)。另外,研究发现ICA可以下调p-FAK及其下游调节蛋白p-ERK、cyclin D1以及p-Akt、p-mTOR、p-S6的表达水平。结论ICA可能通过调控FAK及下游ERK/cyclin D1和Akt/mTOR信号通路从而抑制肝癌细胞的增殖生长。 展开更多

关键词 肝细胞癌 淫羊藿素 黏着斑激酶 细胞外信号调节激酶 细胞周期蛋白D1 蛋白激酶B 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

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汉黄芩苷抑制PI3K/AKT/mTOR/p70S6K信号通路对肝星状细胞活化的影响

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作者 王咸春 曹国森 +1 位作者 朱正道 郑小妹 《解剖学杂志》 2024年第6期506-511,共6页

目的:探讨汉黄芩苷对人肝星状细胞活化的影响及作用机制。方法:体外培养人肝星状细胞LX-2,使用5μg/L转化生长因子β1(TGF-β1)诱导LX-2细胞建立肝星状细胞活化模型,使用2~32μmol/L的汉黄芩苷分别处理TGF-β1诱导的LX-2细胞,MTT法检测... 目的:探讨汉黄芩苷对人肝星状细胞活化的影响及作用机制。方法:体外培养人肝星状细胞LX-2,使用5μg/L转化生长因子β1(TGF-β1)诱导LX-2细胞建立肝星状细胞活化模型,使用2~32μmol/L的汉黄芩苷分别处理TGF-β1诱导的LX-2细胞,MTT法检测细胞增殖确定最佳给药浓度。将LX-2细胞分为对照组、TGF-β1组、汉黄芩苷药物组(浓度分别为4.0、8.0、16.0μmol/L)、汉黄芩苷+PI3K激活剂组(16.0μmol/L汉黄芩苷+P740Y-P),分别检测LX-2细胞凋亡及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原及磷酸化磷酸肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、磷酸化p70核糖体蛋白S6激酶(p-p70S6K)蛋白表达。结果:4~32μmol/L的汉黄芩苷可显著抑制TGF-β1诱导的LX-2细胞增殖。与对照组比较,TGF-β1组α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-p70S6K蛋白表达水平显著升高;与TGF-β1组比较,汉黄芩苷浓度为4.0、8.0、16.0μmol/L处理的LX-2细胞凋亡率显著升高,α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、p-p70S6K蛋白表达水平显著降低,且呈药物浓度依赖性;P740Y-P可部分逆转汉黄芩苷对TGF-β1诱导LX-2细胞活化的抑制作用。结论:汉黄芩苷通过抑制PI3K/AKT/mTOR/p70S6K通路,抑制人肝星状细胞活化与增殖。 展开更多

关键词 汉黄芩苷 磷酸肌醇3-激酶 蛋白激酶B 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 p70核糖体蛋白S6激酶信号通路 肝星状细胞 活化

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黄芩苷对慢性心肌衰竭大鼠心肌细胞凋亡及相关信号通路表达的影响 被引量：7

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作者 刘宇 高玲 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第6期577-581,共5页

目的慢性心力衰竭仍是未能攻克的课题,中药治疗是我们探讨的重要方向。文章旨在研究黄芩苷对慢性心肌衰竭大鼠心肌细胞凋亡及Akt/AMPK/mTOR信号通路表达影响。方法SPF级雄性SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、阳性对照组和实验组,每组... 目的慢性心力衰竭仍是未能攻克的课题,中药治疗是我们探讨的重要方向。文章旨在研究黄芩苷对慢性心肌衰竭大鼠心肌细胞凋亡及Akt/AMPK/mTOR信号通路表达影响。方法SPF级雄性SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、阳性对照组和实验组,每组各15只。阳性对照组给予氯沙坦40 mg/kg灌胃,1次/d;实验组给予黄芩苷50 mg/kg灌胃,1次/d;正常组和模型组灌胃等剂量等渗盐水,1次/d。各组连续灌胃4周。HE染色观察心肌细胞病理形态学;心肌组织细胞指数(CAI)以原位末端标记法检测;心肌Bax、Bcl⁃2蛋白表达以免疫组化法检测;心功能以心脏超声检测;Akt、AMPK、mTOR mRNA表达以RT⁃PCR反应测定。结果与正常组CAI(1.27±0.21)比较,模型组、阳性对照组和实验组(65.38±7.89、23.69±7.53、25.05±8.91)升高(P<0.05);而阳性对照组和实验组较模型组降低(P<0.05)。与正常组Bcl⁃2蛋白表达(149.83±14.32)比较,模型组、阳性对照组和实验组(102.64±8.98、133.73±12.10、135.62±10.87)下降(P<0.05);而阳性对照组和实验组较模型组升高(P<0.05)。与正常组Bax蛋白表达(134.25±18.97)比较,模型组、阳性对照组和实验组(218.73±15.42、163.29±23.15、162.10±27.36)增加(P<0.05);阳性对照组和实验组Bax蛋白表达较模型组下降(P<0.05)。与正常组LVEF(50.83±2.14)比较,模型组、阳性对照组和实验组(34.25±2.87、39.25±2.01、42.34±1.90)明显下降P<0.05);阳性对照组和实验组LVEF较模型组升高(P<0.05)。模型组、阳性对照组和实验组(1.39±0.16、1.15±0.14、0.93±0.10)较正常组LVD(0.74±0.13)增加(P<0.05);阳性对照组和实验组LVD和LVS较模型组下降(P<0.05)。模型组、阳性对照组和实验组(0.96±0.12、0.78±0.10、0.69±0.12)正常组LVS(0.57±0.13)增加(P<0.05);阳性对照组和实验组LVS较模型组下降(P<0.05)。与正常组比较,模型组、阳性对照组和实验组Akt、AMPK、mTOR mRNA表达降低(P<0.05);阳性对照组和实验组Akt、AMPK、mTOR mRNA表达较模型组上升(P<0.05);而阳性对照组和实验组Akt、AMPK、mTOR mRNA表达比较无明显差异(P>0.05)。结论黄芩苷可减轻慢性心肌衰竭大鼠心肌损伤,其作用机制可能与上调Akt/AMPK/mTOR信号通路表达有关。 展开更多

关键词 黄芩苷 慢性心肌衰竭 心肌细胞凋亡 AKT 腺苷酸活化蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

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槐耳颗粒对MDA-MB-231细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路表达的影响 被引量：2

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作者 杨臻瑞 史晓光 +5 位作者 汪唐顺 左禧萌 刘洁丽 冯雪 王玉坤 陆叶丽 《环球中医药》 CAS 2022年第3期396-400,共5页

目的探讨槐耳颗粒对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞磷脂酰肌醇3-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路表达的影响。方法将三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞用含不同浓度的槐耳颗粒的DMEM高糖培养基(分组为0、2、4、8 mg/mL)进行培养,采用... 目的探讨槐耳颗粒对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞磷脂酰肌醇3-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路表达的影响。方法将三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞用含不同浓度的槐耳颗粒的DMEM高糖培养基(分组为0、2、4、8 mg/mL)进行培养,采用细胞计数试剂法检测24小时、48小时、72小时的细胞活性,原位末端转移酶标记技术法细胞爬片染色检测干预48小时后的细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法测定细胞内磷脂酰肌醇3、蛋白激酶B、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白表达情况。结果(1)与空白对照组(0 mg/mL)相比,槐耳颗粒(2、4、8 mg/mL)组的MDA-MB-231细胞均出现活力下降,且呈时间及浓度依赖性,具有统计学意义(P<0.05);(2)与空白对照组相比,槐耳颗粒组的MDA-MB-231细胞凋亡增高,呈浓度依赖,且具有统计学意义(P<0.05);(3)与空白对照组相比,经槐耳颗粒处理的MDA-MB-231细胞磷脂酰肌醇3、蛋白激酶B、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的表达均出现不同程度下降,具有统计学意义(P<0.05)。结论槐耳颗粒具有针对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的抗肿瘤作用,且具浓度及时间依赖性,其机制可能与对磷脂酰肌醇3-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路的抑制有关。 展开更多

关键词 三阴性乳腺癌 磷脂酰肌醇3-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 槐耳颗粒 磷脂酰肌醇3 p85亚基 蛋白激酶B

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PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制剂在肾癌治疗中的应用进展

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作者 花靖棋 沈华 邓君鹏 《山东医药》 CAS 2023年第36期107-111,共5页

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路是细胞内重要的信号转导通路之一,可以调节细胞生长、分化、迁移、存活、血管生成和代谢,并参与多种恶性肿瘤的发生发展。肾癌(RCC)作为泌尿系统常见的恶性肿... 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路是细胞内重要的信号转导通路之一,可以调节细胞生长、分化、迁移、存活、血管生成和代谢,并参与多种恶性肿瘤的发生发展。肾癌(RCC)作为泌尿系统常见的恶性肿瘤,有较高的转移率,且对放化疗具有明显的耐受性,随着肿瘤分子生物学的发展,肾癌靶向生物治疗逐渐成为研究的热点。PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制剂对RCC的疗效显著,以该信号通路为靶点的RCC药物主要为PI3K抑制剂,Akt抑制剂和mTOR抑制剂,这些药物可通过抑制信号通路的异常激活,阻断肿瘤细胞的增殖和生长,诱导细胞凋亡,并抑制肿瘤的侵袭和血管生成。而PI3K、mTOR双重抑制剂虽然处于临床试验阶段,但是其在RCC治疗的研究中表现出更可靠的前景性。 展开更多

关键词 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 PI3K/Akt/mTOR信号通路 肾癌

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Vaspin通过AMPK/mTOR自噬信号通路影响2型糖尿病大鼠胰岛β细胞功能 被引量：4

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作者 魏姣姣 刘师伟 +2 位作者 段瑞雪 李楠 王江娜 《协和医学杂志》 CSCD 2023年第3期543-552,共10页

目的 探究内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(visceral adipose tissue-derived serpin, Vaspin)改善2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)大鼠胰岛β细胞功能的作用机制。方法 采用高脂高糖喂养联合腹腔注射链脲佐菌素的方式建立... 目的 探究内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(visceral adipose tissue-derived serpin, Vaspin)改善2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)大鼠胰岛β细胞功能的作用机制。方法 采用高脂高糖喂养联合腹腔注射链脲佐菌素的方式建立T2DM大鼠模型,并随机分为T2DM组(n=10)、Vaspin组(n=10),以同周龄正常饲料喂养的SD大鼠为正常对照组(n=10)。记录造模前及Vaspin干预前、干预4周和干预8周时3组大鼠体质量和空腹血糖(fasting blood-glucose, FBG)。Vaspin干预8周时,测定3组大鼠空腹胰岛素(fasting insulin, FINS)、糖耐量与胰岛素敏感性、胰岛β细胞功能及自噬相关蛋白表达水平,观察胰腺组织病理学形态。结果 与正常对照组比较,T2DM组与Vaspin组干预前、干预4周、干预8周时体质量均下降,FBG均升高(P均<0.05);与T2DM组比较,Vaspin组干预8周时大鼠体质量增高,FBG下降(P均<0.05)。组织病理示,正常对照组大鼠胰腺组织正常,胰岛细胞排列均匀、整齐,形态规则;T2DM组大鼠胰岛结构明显破坏,细胞分布不均匀、形状不规则;Vaspin组大鼠胰岛结构损伤、胰岛细胞形态破坏均较T2DM组减轻。干预8周时,与正常对照组比较,T2DM组及Vaspin组FINS降低,腹腔葡萄糖耐量试验(intraperitoneal glucose tolerance test, IPGTT)及腹腔胰岛素耐量试验(intraperitoneal insulin tolerance test, IPITT)血糖曲线下面积均升高(P均<0.05);与T2DM组比较,Vaspin组FINS升高,IPGTT与IPITT血糖曲线下面积均降低(P均<0.05)。高葡萄糖钳夹试验示,干预8周时,Vaspin组葡萄糖输注速率、第一时相及第二时相胰岛素分泌量虽低于正常对照组,但各指标均较T2DM组升高(P均<0.05)。免疫组化及Western blot结果示,干预8周时,与正常对照组比较,T2DM组大鼠胰腺组织中胰岛素表达水平及磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin, p-mTOR)/mTOR比值均降低,P62、微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein1 light chain3, LC3)蛋白水平、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase, p-AMPK)/AMPK比值、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均升高(P均<0.05);与T2DM组比较,Vaspin组大鼠胰腺组织中胰岛素、LC3蛋白水平、p-AMPK/AMPK比值及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均升高,p-mTOR/mTOR比值及P62蛋白表达水平均降低(P均<0.05)。结论 Vaspin可通过AMPK/mTOR自噬信号通路增强T2DM大鼠胰岛β细胞自噬能力,进而改善胰岛β细胞功能。 展开更多

关键词 内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂 2型糖尿病 腺苷酸活化蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 自噬 胰岛Β细胞功能

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AMPK/mTOR信号通路在肿瘤发生、发展中作用的研究进展

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作者 蒋碧佳 《当代医药论丛》 2022年第16期30-32,共3页

腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)是维持细胞能量稳态的重要介质,活化的AMPK具有抑制细胞增殖、促进细胞凋亡、干扰细胞周期及促进细胞自噬等功能。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是AMPK下游重要的信号分子,它维持着正常细胞的生长增殖,同时它... 腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)是维持细胞能量稳态的重要介质,活化的AMPK具有抑制细胞增殖、促进细胞凋亡、干扰细胞周期及促进细胞自噬等功能。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是AMPK下游重要的信号分子,它维持着正常细胞的生长增殖,同时它也与肿瘤细胞的生长增殖密切相关。AMPK/mTOR信号通路可对细胞能量维持及氧化还原平衡起到调节作用。上述平衡机制如果被打破,就有可能引发肿瘤,同时也可能导致的肿瘤侵袭、转移、耐药。本文主要是对AMPK/mTOR信号通路在肿瘤发生、发展中的作用进行探讨和研究。 展开更多

关键词 腺苷酸活化蛋白激酶 雷帕霉素靶蛋白 信号通路 肿瘤 凋亡 转移 自噬

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姜黄素复合有氧运动对非酒精性脂肪肝大鼠肝功能的改善作用

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作者 胡戈 秦菲 +3 位作者 曹建民 吉喆 周绮云 周海涛 《食品科学》 北大核心 2025年第10期178-187,共10页

目的:研究姜黄素与有氧运动相结合对非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝功能改善的效果及机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为对照组、NAFLD模型组、有氧运动干预组、姜黄素干预组和姜黄素复合有氧运动干预组... 目的:研究姜黄素与有氧运动相结合对非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝功能改善的效果及机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为对照组、NAFLD模型组、有氧运动干预组、姜黄素干预组和姜黄素复合有氧运动干预组,每组8只。利用全自动生化仪测定大鼠血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartateaminotransferase,AST)活性、总胆固醇(totalcholesterol,TC)、总甘油三酯(total triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇浓度;通过苏木精-伊红、油红O和电子染色法观察大鼠肝组织形态、脂质沉积及超微结构变化;采用实时荧光定量聚合酶链式反应、免疫组化和蛋白免疫印迹法测定大鼠肝腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphateactivated protein kinase,AMPK)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylated adenosine monophosphate-activated proteinkinase,p-AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofrapamycin,mTOR)、Beclin-1、选择性自噬接头蛋白p62、微管相关蛋白1轻链3-I(microtubule-associated protein 1 light chain 3-I,LC3-I)、LC3-II mRNA和蛋白表达水平。结果:8周高脂饮食成功诱导大鼠出现NAFLD;姜黄素和/或有氧运动干预可改善NAFLD大鼠肝超微结构损伤、病理变化及脂质沉积;降低血清TC、TG、LDL-C浓度及AST和ALT活性;上调Beclin-1、LC3-II mRNA表达水平及p-AMPK、Beclin-1、LC3-II蛋白表达水平和p-AMPK/AMPK、LC3-II/LC3-I蛋白表达水平比值,下调m TOR、p62 m RNA表达水平和m TOR、p62蛋白表达水平,提升细胞自噬水平;姜黄素与有氧运动在血清TC和TG浓度、ALT和AST活性、肝m TOR、Beclin-1、p62 m RNA表达水平、p-AMPK、p62、LC3-II蛋白表达水平及LC3-II/LC3-I蛋白表达水平比值间存在交互效应。结论:姜黄素和/或有氧运动干预通过调控AMPK/mTOR信号通路适度增强细胞自噬水平,改善NAFLD大鼠肝脏结构和功能,其中,姜黄素复合有氧运动干预效果最佳。 展开更多

关键词 姜黄素 有氧运动 腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 自噬 非酒精性脂肪肝

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葛根素通过AMPK/mTOR通路激活自噬治疗小鼠高脂血症

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作者 李蕾 金妍伶 +5 位作者 吕碧君 王月 陆芝梅 袁迪芬 吴月滢 袁嘉丽 《陕西科技大学学报》 北大核心 2024年第5期60-66,76,共8页

本研究旨在探讨葛根素(Puerarin, PUE)对高脂血症(Hyperlipidemia, HLP)模型小鼠治疗效果的机制.实验选用C57BL/6J品种小鼠,随机分为空白组(Control)、模型组(Model)以及葛根素低、中、高剂量治疗组(PUE-L、PUE-M、PUE-H).成功构建高脂... 本研究旨在探讨葛根素(Puerarin, PUE)对高脂血症(Hyperlipidemia, HLP)模型小鼠治疗效果的机制.实验选用C57BL/6J品种小鼠,随机分为空白组(Control)、模型组(Model)以及葛根素低、中、高剂量治疗组(PUE-L、PUE-M、PUE-H).成功构建高脂血症模型后,对小鼠进行了为期4周的葛根素干预治疗,并采用试剂盒检测了小鼠血脂谱的变化情况.此外,观察小鼠肝脏组织的病理变化,并通过Western blot方法对肝脏组织中的关键蛋白进行了检测,包括腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)与雷帕霉素哺乳动物靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白、脂质代谢的关键调控蛋白固醇调节元件结合蛋白(SREBP)、以及自噬过程中的微管相关蛋白轻链3(LC3)和自噬底物(P62)的表达水平.进一步使用了定量聚合酶链反应(q-PCR)技术,来检测肝组织中乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)、固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)的mRNA转录水平,以及AMPK/mTOR信号通路相关的mRNA和炎症因子的mRNA的转录水平.相较于模型组,葛根素处理组小鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平明显下降,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的水平则显著上升.肝脏组织中,细胞空泡样变化及脂滴积聚在葛根素干预后明显减少.在给药后,肝组织中的ACC、FAS、SREBP-1c mRNA的相对表达量有所降低,脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)和促炎因子肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)的表达下降,而抗炎因子白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)和白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)的表达水平则有所上升.此外,小鼠肝脏组织中的mTOR、SREBP、P62蛋白水平降低,而AMPK、p-AMPK、LC3蛋白的表达水平则增加.综上所述,实验结果表明,葛根素能够有效改善高脂血症模型小鼠的血脂谱,并降低炎症反应.其作用机制可能与葛根素调节AMPK/mTOR信号通路,促进自噬过程的激活有关.这些发现为高脂血症的治疗提供了新的视角,特别是在利用植物药物治疗的方面. 展开更多

关键词 高脂血症 葛根素 腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/雷帕霉素哺乳靶蛋白(mTOR)信号通路 自噬 炎症

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自身免疫淋巴增生性免疫缺陷病发病机制及靶向治疗进展 被引量：1

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作者 周鹏(综述) 赵晓东(审校) 《儿科药学杂志》 CAS 2020年第7期52-54,共3页

自身免疫淋巴增生性免疫缺陷病部分患儿病情重,预后差,严重威胁患儿生命。该病的发病机制主要分为两类:第一类为FAS通路相关基因突变导致淋巴细胞凋亡障碍,过多未凋亡细胞在淋巴系统聚集形成淋巴增殖表现;第二类是由磷脂酰肌醇3-激酶/... 自身免疫淋巴增生性免疫缺陷病部分患儿病情重,预后差,严重威胁患儿生命。该病的发病机制主要分为两类:第一类为FAS通路相关基因突变导致淋巴细胞凋亡障碍,过多未凋亡细胞在淋巴系统聚集形成淋巴增殖表现;第二类是由磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白[(phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B(PKB/Akt)/mammalian target of rapamycin,PI3K/Akt/mTOR)]、RAS/丝裂原活化蛋白激酶(RAS/mitogen-activated protein kinase,RAS/MAPK)等信号通路过度活化造成淋巴细胞过度活化增殖,增殖的淋巴细胞聚集而引起。 展开更多

关键词 免疫缺陷病 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 自身免疫 丝裂原活化蛋白激酶 活化增殖 过度活化 蛋白激酶B 靶向治疗

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基于PI3K/Akt/mTOR通路探究马钱子总生物碱对类风湿性关节炎大鼠的作用及机制 被引量：5

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作者 孙大芳 牛志尊 +1 位作者 张仕玉 邓奕辉 《中国现代中药》 CAS 2023年第12期2521-2527,共7页

目的:分析马钱子总生物碱对类风湿性关节炎(RA)大鼠的作用及对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)通路的影响。方法:50只Wistar大鼠随机分为对照组、RA组、RA+马钱子总生物碱组(100 mg·kg^(-1))、R... 目的:分析马钱子总生物碱对类风湿性关节炎(RA)大鼠的作用及对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)通路的影响。方法:50只Wistar大鼠随机分为对照组、RA组、RA+马钱子总生物碱组(100 mg·kg^(-1))、RA+PI3K抑制剂组(20 mg·mL^(-1)LY294002)、RA+马钱子总生物碱+PI3K激活剂组[100 mg·kg^(-1)马钱子总生物碱+20μg·kg^(-1)胰岛素样生长因子1(IGF-1)],除对照组外,其余各组均构建RA模型并根据剂量给药,计算每只大鼠关节评分,测定大鼠血清抗瓜氨酸化蛋白抗体(ACPA)、丙二醛(MDA)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察评估大鼠膝关节滑膜组织病理,比较各组Mankin评分、炎细胞浸润数、软骨厚度;测定滑膜组织白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核转录因子(NF)-κB受体活化因子配体(RANKL)水平;蛋白免疫印迹(Western blot)测定大鼠滑膜组织PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达。结果:1)对照组大鼠关节软骨组织结构正常,表面光滑完整,腔隙内组织有良好的完整软骨细胞;RA组关节表面广泛侵蚀,形态无规则,软骨细胞明显丢失,炎性细胞大量浸润,关节软骨厚度低,细胞间基质显著丢失,滑膜中单核炎性细胞浸润可见;RA+马钱子总生物碱组、RA+PI3K抑制剂组呈现保护性体征,关节表面侵蚀降低,炎性细胞浸润减轻,关节软骨厚度增加;与RA+马钱子总生物碱组相比,RA+马钱子总生物碱+PI3K激活剂组关节软骨损伤加重。2)与对照组相比,RA组大鼠关节炎症评分、血清ACPA及MDA水平、Mankin评分、炎细胞浸润数、滑膜组织IL-1β、IL-6、TNF-α、RANKL升高(P<0.05),软骨厚度降低(P<0.05);与RA组相比,RA+马钱子总生物碱组、RA+PI3K抑制剂组大鼠关节炎症评分、血清ACPA及MDA水平、Mankin评分、炎细胞浸润数、滑膜组织IL-1β、IL-6、TNF-α、RANKL降低(P<0.05),软骨厚度升高(P<0.05);与RA+马钱子总生物碱组相比,RA+马钱子总生物碱+PI3K激活剂组大鼠关节炎症评分、血清ACPA及MDA水平、Mankin评分、炎细胞浸润数、滑膜组织IL-1β、IL-6、TNF-α、RANKL升高(P<0.05),软骨厚度降低(P<0.05)。3)与对照组相比,RA组大鼠滑膜组织磷酸化(p)-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR升高(P<0.05);与RA组相比,RA+马钱子总生物碱组、RA+PI3K抑制剂组大鼠滑膜组织p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR降低(P<0.05);与RA+马钱子总生物碱组相比,RA+马钱子总生物碱+PI3K激活剂组大鼠滑膜组织p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR升高(P<0.05)。结论:马钱子总生物碱可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路缓解RA大鼠炎症。 展开更多

关键词 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶点通路 马钱子总生物碱 类风湿性关节炎 机制

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过度营养与人体代谢和疾病关系的研究进展 被引量：14

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作者 庞广昌 陈庆森 +1 位作者 胡志和 解军波 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第15期373-396,共24页

为了能够获得足够的营养,机体专门进化出一个营养传感系统,也就是以G蛋白偶联受体(GPCRs)为主体的营养传感系统。GPCRs通过钙离子通道、钠钾泵和植物神经系统对饮食中的营养进行计数,并将这些定量化的信号传递给大脑和相应器官,从而控... 为了能够获得足够的营养,机体专门进化出一个营养传感系统,也就是以G蛋白偶联受体(GPCRs)为主体的营养传感系统。GPCRs通过钙离子通道、钠钾泵和植物神经系统对饮食中的营养进行计数,并将这些定量化的信号传递给大脑和相应器官,从而控制食欲。在营养和食欲控制失调时就会产生过度营养。生物除营养传感、计数和食欲控制系统之外还有一个营养的储存和消费控制系统,这个系统的主体就是mTOR。作为体内的营养传感系统,mTOR对糖、氨基酸和脂肪酸进行传感,从而控制糖、氨基酸和脂肪的合成与分解代谢,糖和脂肪的储存与消费同时控制细胞的周期、生长和增殖。机体从饮食中吸收的营养中的糖类以肝糖原和肌糖原的形式储存;以储脂,特别是皮下脂肪的形式储存脂肪,通过磷酸解和脂肪酸的β-氧化的形式及时满足机体的分解与合成代谢,以及各种生命活动对能量、还原力和中间代谢物的需求。当营养储存超过一定的极限时,mTOR将会激活机体的代谢和细胞增殖,以刺激对储存脂肪和糖元的消费。长期刺激基础代谢会造成多种代谢性疾病,特别是糖尿病、肥胖性炎症和癌症。一个普遍存在的自然现象是:生物的寿命与其代谢活性密切相关,代谢越旺盛的生物寿命越短,相反代谢越缓慢的生物寿命越长。近年来,已经有越来越多的研究结果证明:营养限制会延长寿命,不难推断,过度营养不仅会造成多种疾病,同时也会缩短人的寿命。本文将对这些问题进行综述,希望能引起大众的关注和学术界的进一步研究。 展开更多

关键词 G蛋白偶联受体 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 营养 信号通路 代谢综合征

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迷迭香酸对鼻咽癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制 被引量：8

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作者 杨沛霖 高玲 +5 位作者 林彩霞 王巍 许立拔 巫玲玲 蒋伟哲 焦爱军 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第36期1-4,113,共5页

目的探讨迷迭香酸对鼻咽癌CNE-1细胞(以下称CNE-1细胞)增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法体外培养CNE-1细胞,取传3代对数生长期CNE-1细胞,随机分为空白对照组及迷迭香酸10、20、30μmol/L组,迷迭香酸各组分别加入含相应浓度迷... 目的探讨迷迭香酸对鼻咽癌CNE-1细胞(以下称CNE-1细胞)增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法体外培养CNE-1细胞,取传3代对数生长期CNE-1细胞,随机分为空白对照组及迷迭香酸10、20、30μmol/L组,迷迭香酸各组分别加入含相应浓度迷迭香酸的培养液,空白对照组加入等量不含迷迭香酸的培养液。采用MTT法检测各组培养24、48、72 h时细胞增殖抑制率。迷迭香酸作用48 h时,其浓度变化与细胞增殖抑制率的线性关系较好,故选择迷迭香酸作用48 h进行后续实验。取各组作用48 h细胞,采用Hochest 33258染色法观察各组细胞形态变化,采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,采用Western blotting法检测各组PTEN、PI3K/Akt/m TOR信号通路相关蛋白表达。结果各组作用48 h时,随着迷迭香酸浓度增加,细胞凋亡特征逐渐明显。迷迭香酸各组细胞凋亡率均高于空白对照组(P均<0.05),迷迭香酸各组间细胞凋亡率比较P均<0.05。与空白对照组比较,迷迭香酸各组PTEN蛋白表达逐渐上升,p-PI3K、p-Akt、p-m TOR蛋白表达逐渐降低,且随着迷迭香酸浓度增加,各蛋白表达变化越明显(P均<0.05)。而各组间PI3K、Akt、m TOR蛋白表达变化不明显(P均>0.05)。结论迷迭香酸能剂量依赖性地抑制CNE-1细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与调控PTEN、PI3K/Akt/m TOR信号通路有关。 展开更多

关键词 鼻咽癌 迷迭香酸 细胞凋亡 细胞增殖 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路

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二甲双胍对人肝癌细胞 HepG2增殖及脂肪酸合酶的影响 被引量：10

14

作者 彭晓韧 刘燕 +1 位作者 邹大进 李娟 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第4期360-364,共5页

目的二甲双胍治疗的糖尿病患者癌症发生风险较其他药物治疗者显著降低。探讨二甲双胍在人肝癌细胞HepG2中的抗肿瘤活性与脂肪酸合酶的关系。方法选取不同浓度(1、5、10、15 mmol/L)二甲双胍处理HepG2细胞24、48、72 h,用CCK-8法检测其... 目的二甲双胍治疗的糖尿病患者癌症发生风险较其他药物治疗者显著降低。探讨二甲双胍在人肝癌细胞HepG2中的抗肿瘤活性与脂肪酸合酶的关系。方法选取不同浓度(1、5、10、15 mmol/L)二甲双胍处理HepG2细胞24、48、72 h,用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响。同时设阳性对照(紫杉醇10μg/m L),阴性对照(二甲双胍0 mmol/L)。设0、5、10、15 mmol/L二甲双胍处理72 h,用Western blot检测腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)、磷酸化AMPK(P-AMPK)、脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FASN)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(P-m TOR)、磷酸化蛋白激酶B(P-Akt)蛋白表达,RT-PCR检测FASN mRNA的表达水平。结果 1、5、10、15 mmol/L二甲双胍干预24、48、72 h,分别随二甲双胍浓度与处理时间的增加,HepG2细胞的增殖抑制作用逐渐增强(P<0.05),且呈时间和浓度依赖性。其中10 mmol/L二甲双胍处理后增殖抑制率在72 h接近50%、15 mmol/L二甲双胍处理后增殖抑制率均>50%。0、5、10、15 mmol/L二甲双胍处理HepG2细胞72 h后,P-AMPK的蛋白表达随药物浓度增高而上调,P-m TOR、FASN的蛋白表达随药物浓度增高而下调,三者在10、15 mmol/L二甲双胍作用后的表达较阴性对照的差异均有统计学意义(P<0.05);而P-Akt蛋白表达在二甲双胍各浓度间差异无统计学意义(P>0.05)。FASN mRNA的表达随药物浓度增加呈下降趋势,5、10、15 mmol/L二甲双胍作用后表达量均较阴性对照显著下降(P<0.05)。结论二甲双胍的的抗肿瘤作用与其激活AMPK、抑制m TOR和FASN有关。二甲双胍虽然抑制了m TOR的活化,但没有造成Akt的反馈性激活。 展开更多

关键词 二甲双胍 肝癌细胞株HEPG2 脂肪酸合酶 腺苷酸活化蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

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Sestrin2抗氧化应激作用在缺血再灌注中的研究进展 被引量：8

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作者 郭明 夏中元 《中国医药导报》 CAS 2017年第17期28-31,共4页

Sestrin2是一种高保守、应激诱导抑制雷帕霉素靶蛋白的重要蛋白分子。作为P53调节哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路抗氧化应激作用的一种重要蛋白分子,Sestrin2可以激活磷酸腺苷依赖蛋白激酶蛋白并磷酸化结节性硬化复合物,进而抑制哺乳... Sestrin2是一种高保守、应激诱导抑制雷帕霉素靶蛋白的重要蛋白分子。作为P53调节哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路抗氧化应激作用的一种重要蛋白分子,Sestrin2可以激活磷酸腺苷依赖蛋白激酶蛋白并磷酸化结节性硬化复合物,进而抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白,可减轻组织因缺血再灌注导致的损伤。近几年,国内外对Sestrin2蛋白分子的研究已有很大的进展,本文就近几年Sestrin2抗氧化应激作用研究进展以及其可能的临床应用进行综述。 展开更多

关键词 Sestrin2 磷酸腺苷活化蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 氧化应激

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毛细血管瘤患儿增生期和退化期瘤组织中AMPK、mTOR表达对比观察 被引量：1

16

作者 李娟 俞松 +3 位作者 王凯 柳望舒 季一发 甘永桥 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第47期90-91,共2页

目的对比观察增生期和退化期小儿毛细血管瘤组织中磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)表达,探讨AMPK/m TOR通路在小儿毛细血管瘤消退过程中的作用。方法收集50例小儿毛细血管瘤患者的瘤组织标本,按照Mulliken... 目的对比观察增生期和退化期小儿毛细血管瘤组织中磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)表达,探讨AMPK/m TOR通路在小儿毛细血管瘤消退过程中的作用。方法收集50例小儿毛细血管瘤患者的瘤组织标本,按照Mulliken分类法24例患儿瘤组织处于增生期(增生期组),26例患儿瘤组织处于退化期(退化期组),采用免疫组织化学法检测其中AMPK、m TOR的积分光密度。结果增生期组AMPK、m TOR的积分光密度分别为33.94±12.78、182.43±47.10,退化期组分别为85.87±19.53、47.22±44.52。两组毛细血管瘤组织AMPK、m TOR积分光密度相比,P均<0.01。50例小儿毛细血管瘤患者瘤组织AMPK、m TOR积分光密度值呈负相关(r=-0.78,P<0.01)。结论与增生期小儿毛细血管瘤组织相比,消退期小儿血管瘤组织中AMPK表达升高,m TOR表达降低。AMPK/m TOR信号通路参与小儿毛细血管瘤的消退过程。 展开更多

关键词 血管瘤 毛细血管瘤 儿童 5磷酸腺苷活化蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 血管瘤分期

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“通督启神”法电针对APP/PS1双转基因小鼠皮层区AMPK、mTOR表达的影响 被引量：4

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作者 王帅 孙润权 +3 位作者 刘奕志 刘思远 李志刚 王鑫 《环球中医药》 CAS 2022年第11期2064-2070,共7页

目的 观察“通督启神”法电针对阿尔茨海默病(alzheimer’s disease, AD)小鼠空间学习记忆能力和前额叶区腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5’-monophosphate (AMP)-activated protein kinase, AMPK)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian t... 目的 观察“通督启神”法电针对阿尔茨海默病(alzheimer’s disease, AD)小鼠空间学习记忆能力和前额叶区腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5’-monophosphate (AMP)-activated protein kinase, AMPK)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)表达的影响,探讨其在线粒体自噬过程中的作用机制和对AD的治疗作用。方法 将30只6月龄APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、电针组和电针+抑制剂组,以10只相同遗传背景的C57BL/6小鼠作为空白对照组。采用Morris水迷宫观察各组小鼠的行为学变化;免疫组化法观察各组小鼠前额叶区AMPK、mTOR表达情况;蛋白质印迹法(western blot, WB)检测各组小鼠前额叶区AMPK、mTOR表达水平。结果 (1)应用重复测量和组间效应方差分析,在隐蔽平台试验中,电针组逃避潜伏时间低于模型组(P<0.05)和电针+抑制剂组(P<0.05),模型组与电针+抑制剂组比较无明显差异;(2)在空间探索试验中,电针组穿越平台次数,目标象限游泳时间和目标象限游泳时间百分比均高于电针+抑制剂组(P<0.05),但模型组与电针组和电针+抑制剂组比较均无明显统计学差异;(3)免疫组化DAB染色结果表明,AMPK表达情况,电针组多于模型组(P<0.01)和电针+抑制剂组(P<0.05),模型组与电针+抑制剂组比较有明显差异(P<0.01);mTOR表达情况显示,电针组少于模型组和电针+抑制剂组(P<0.01),模型组与电针+抑制剂组比较无明显差异;(4)Western blot检测结果表明,电针组AMPK表达多于电针+抑制剂组(P<0.05)和模型组(P<0.01),电针+抑制剂组AMPK表达略高于模型组(P>0.05);电针组mTOR表达低于电针+抑制剂组(P<0.05)和模型组(P<0.01),电针+抑制剂组低于模型组(P<0.01)。结论 “通督启神”法电针治疗能够提高APP/PS1小鼠的空间学习记忆能力,促进前额叶区AMPK表达,抑制mTOR表达,其作用机理可能与针刺诱导或继发线粒体自噬有关。 展开更多

关键词 通督启神 阿尔茨海默病 电针 腺苷酸活化蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 水迷宫

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Rab1A与肿瘤发生发展的研究进展 被引量：7

18

作者 程正武 王子康 何宋兵 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2018年第1期73-76,共4页

Rab1A是RAB家族的一员,是一种小三磷酸鸟苷(GTP)酶,是哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合体1(mTORC1)的激活因子,已经被证实参与调节内质网至高尔基体的囊泡运输。随着Rab1A研究的不断深入,很多学者发现Rab1A蛋白还参与信号传导、细胞迁移以及... Rab1A是RAB家族的一员,是一种小三磷酸鸟苷(GTP)酶,是哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合体1(mTORC1)的激活因子,已经被证实参与调节内质网至高尔基体的囊泡运输。随着Rab1A研究的不断深入,很多学者发现Rab1A蛋白还参与信号传导、细胞迁移以及自体吞噬的调节。同时Rab1A异常表达也与一些临床疾病的发生发展有关,如帕金森氏病、原发性心肌病及阿司匹林加重性呼吸道疾病等。而近年来人们逐渐开始关注Rab1A在肿瘤发生发展中的作用,在包括舌癌、乳腺癌、肺癌、肝癌、结直肠癌、胃癌及子宫颈癌等多种恶性肿瘤中Rab1A均有不同程度的高表达,且在肿瘤的发生发展中扮演着重要角色。文章就Rab1A在肿瘤发生发展及信号通路等方面的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 Rab1A 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合体1 信号通路 肿瘤

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番茄红素对人内皮祖细胞增殖、迁移、成管能力的影响观察及其机制探讨 被引量：1

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作者 陈俊求 蔡洁娜 +1 位作者 刘强 熊龙根 《山东医药》 CAS 2022年第36期20-25,共6页

目的 观察番茄红素(Lyc)对人内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移、成管能力的影响,并探讨其作用机制。方法 取EPCs,培养24 h后分为4组;A组加入含10%胎牛血清的培养基和ox-LDL(10 mg/L)的培养基培养24 h后弃去上清,再加入含10%胎牛血清和Lyc(10 ... 目的 观察番茄红素(Lyc)对人内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移、成管能力的影响,并探讨其作用机制。方法 取EPCs,培养24 h后分为4组;A组加入含10%胎牛血清的培养基和ox-LDL(10 mg/L)的培养基培养24 h后弃去上清,再加入含10%胎牛血清和Lyc(10 mg/L)的培养基培养24 h;B组加入含10%胎牛血清和ox-LDL(100 mg/L)的培养基培养48 h;C组加入含10%胎牛血清和Lyc(10 mg/L)的培养基培养48 h;D组加入含10%胎牛血清的培养基培养48 h;比较各组细胞增殖活力、细胞划痕愈合率、形成小管直径及p62、LC3-Ⅱ、Beclin-1、p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR蛋白相对表达量。另取EPCs,培养24 h后分为4组;E组首先加入含10%胎牛血清和AMPK抑制剂小分子化合物C(CC)的培养基温箱孵育30 min,然后加入含10%胎牛血清和ox-LDL(10 mg/L)的培养基培养24 h后弃去上清,最后再加入含10%胎牛血清和Lyc(10 mg/L)的培养基培养24 h;F组加入含10%胎牛血清的培养基和ox-LDL(10 mg/L)的培养基培养24 h后弃去上清,再加入含10%胎牛血清和Lyc(10 mg/L)的培养基培养24 h;G组加入含10%胎牛血清和ox-LDL(100 mg/L)的培养基培养48 h;H组加入含10%胎牛血清的培养基培养48 h;比较各组细胞增殖活力、细胞划痕愈合率、形成小管直径及p62、LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白相对表达量。结果 与B组比较,A组细胞增殖活力、细胞划痕愈合率、形成小管直径及LC3-Ⅱ、Beclin-1、p-AMPK/AMPK蛋白相对表达量增加,p62、p-mTOR/mTOR蛋白相对表达量减小(P均<0.05);与B组比较,D组细胞增殖活力、细胞划痕愈合率、形成小管直径及p-AMPK/AMPK蛋白相对表达量增加,p62、LC3-Ⅱ、Beclin-1、p-mTOR/mTOR蛋白相对表达量减小(P均<0.05)。与F组比较,E组和G组细胞增殖活力、细胞划痕愈合率、形成小管直径减小(P均<0.05);与G组比较,E组p62蛋白相对表达量增加,E组LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白相对表达量和H组p62、LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白相对表达量减小(P均<0.05)。结论 Lyc可以促进EPCs增殖、迁移和成管能力并增强自噬,其作用机制可能是上调AMPK磷酸化水平,下调mTOR的磷酸化水平,进而抑制mTOR信号通路。 展开更多

关键词 番茄红素 内皮祖细胞 细胞增殖能力 细胞迁移能力 细胞成管能力 磷酸腺苷活化蛋白激酶 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

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莪术醇对胃癌AGS细胞增殖、凋亡的影响及机制研究 被引量：5

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作者 周桂香 邓帅 +2 位作者 班江文 陈雯雯 谭宝 《环球中医药》 CAS 2023年第7期1301-1308,共8页

目的探讨莪术醇对胃癌AGS细胞增殖、凋亡的影响,并探寻可能的信号通路机制。方法选取生长状态良好且无污染的胃癌AGS细胞进行实验,分别设空白对照组、莪术醇低浓度组(12.5μg/mL)、莪术醇中浓度组(25μg/mL)、莪术醇高浓度组(50μg/mL)... 目的探讨莪术醇对胃癌AGS细胞增殖、凋亡的影响,并探寻可能的信号通路机制。方法选取生长状态良好且无污染的胃癌AGS细胞进行实验,分别设空白对照组、莪术醇低浓度组(12.5μg/mL)、莪术醇中浓度组(25μg/mL)、莪术醇高浓度组(50μg/mL)和阳性对照组。细胞贴壁后用药物莪术醇分别干预24、48小时,干预时间结束后采用CCK-8法检测胃癌AGS细胞的增殖抑制率;应用Annexin V-FITC流式细胞术检测药物对胃癌AGS细胞凋亡和周期分布的影响;细胞划痕实验动态观察药物对胃癌AGS细胞迁移能力的影响;蛋白免疫印迹法检测磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(phospho-protein kinase B,p-Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phospho-mammalian target of rapamycin,p-mTOR)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X,Bax)等蛋白的相对表达水平。结果经莪术醇干预后胃癌AGS细胞的增殖抑制率和凋亡率有良好的量效-时效关系;同时能减缓胃癌AGS细胞的迁移和修复能力,诱导胃癌AGS细胞发生G0/G1、G2/M期阻滞,药物干预期间细胞数量减少,形态发生改变。莪术醇作用于胃癌AGS细胞48小时后,PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白的相对表达水平降低,同时Caspase-3和Bax的相对表达也上调,但Bcl-2的相对表达下调,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论莪术醇能够很好地抑制胃癌AGS细胞的增殖,诱导胃癌AGS细胞发生周期阻滞,促进细胞凋亡,其作用的实现可能与PI3K/Akt/mTOR信号通路相关。 展开更多

关键词 莪术醇 AGS细胞 增殖 凋亡 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路

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