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脆壁克鲁维酵母蛋白二硫化物异构酶KfPDI的结构分析: 1; 作者赵翔包卫国 +2 位作者霍克克李育阳 FukuharaH 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1999年第8期39-43,共5页; 利用ＤＮＡ限制性内切酶图谱分析将一个带有脆壁克鲁维酵母（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｆｒａｇｉｌｉｓ）蛋白二硫化物异构酶基因（ＫｆＰＤＩ）的１０ｋｂ初始克隆缩短为４ｋｂ的亚克隆，并测定了该基因的ＤＮＡ全序列。经... 展开更多; 关键词脆壁克鲁维酵母 PDI KfPDI 序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

人凝血因子IX在脆壁克鲁维酵母中的表达与分泌被引量：1: 2; 作者姚笑迪霍克克 +2 位作者方季戈万忠李育阳《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第6期26-29,共4页; 通过改造人凝血因子IX基因(h-FIX)使其与乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyceslactis)的分泌信号序列(Kss)融合,并置于脆壁克鲁维酵母(K.fragilis)LAC4基因调控型启动子的控制之下,构建成h-FIX基因表达盒。将此表达盒插入克鲁维酵母的整合质粒... 展开更多; 关键词凝血因子脆壁克鲁维酵母血友病分泌信号序列乳酸克鲁维酵母基因调控型启动子基因表达盒 IX蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

脆壁克鲁维酵母KfPDI基因高表达菌株的构建被引量：1: 3; 作者苏燕霍克克 +1 位作者赵翔李育阳《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第9期23-27,共5页; 通过构建脆壁克鲁维酵母 (Kluyveromycesfragilis)蛋白二硫化物异构酶基因KfPDI强表达单元并克隆到不同类型的酵母载体上转化酵母菌株 ,经筛选得到了带有不同拷贝数KfPDI基因的酵母转化子。酶活性测定结果表明这些转化子中的蛋白二硫化... 展开更多; 关键词蛋白二硫化物异构酶 PDI 基因表达脆壁克鲁维酵母 KfPDI 菌株基因工程宿主菌基因拷贝构建; 在线阅读下载PDF 职称材料

脆壁克鲁维酵母乳糖酶的提取与发酵优化被引量：1: 4; 作者李威梁金钟《酿酒》 CAS 2008年第3期46-50,共5页; 通过试验研究了一株脆壁克鲁维酵母胞内乳糖酶的破壁提取及其发酵培养基成分与培养条件优化,确定了该株酵母合适的破壁方法及最佳发酵培养条件。结果表明,采用球磨机对该酵母进行处理可以较好地释放胞内乳糖酶。其发酵生产乳糖酶的最佳... 展开更多; 关键词脆壁克鲁维酵母乳糖酶发酵条件; 在线阅读下载PDF 职称材料

脆壁克鲁维酵母生产乳糖酶发酵条件的优化被引量：1: 5; 作者李威梁金钟《乳业科学与技术》 2008年第2期73-77,共5页; 通过试验研究了一株产乳糖酶脆壁克鲁维酵母的发酵培养基成分及培养条件,最终确定了该株酵母的最佳发酵培养条件。结果表明,此株脆壁克鲁维酵母发酵生产乳糖酶的最佳培养基成分为:乳糖4%,酵母粉3%,MnCl21mmol/mL;最佳培养条件:接种量10%... 展开更多; 关键词脆壁克鲁维酵母乳糖酶发酵条件; 在线阅读下载PDF 职称材料

脆壁克鲁维酵母KfADE5,7基因的克隆及其5’非编码区结构与功能研究: 6; 作者单敬轩霍克克李育阳《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第6期37-42,共6页; 通过补偿乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)KlADE5,7基因突变,从脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis)基因组文库中克隆了KfADE5,7基因。该基因全长4975bp,编码793个氨基酸,氨基酸序列与已知的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)... 展开更多; 关键词脆壁克鲁维酵母基因突变乳酸克鲁维酵母 “KlADE5 7基因” 腺嘌呤核苷氨基酸酿酒酵母启动子转录; 在线阅读下载PDF 职称材料

酵母菌药用乳糖酶制备新方法被引量：4: 7; 作者谭树华高捷 +3 位作者海迪勒尚新燕高向东吴梧桐《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期86-89,共4页; 目的 :建立一种简易的从酵母菌制备克鲁维酵母乳糖酶的方法。方法 :在 3 0L发酵罐中进行发酵 ,用对羟基苯甲酸酯进行细胞破壁 ,用超微过滤方法浓缩破壁液。结果 :乳糖酶的收率可达到每毫升发酵液含11 4ONPG单位。从酵终细胞中释放乳糖... 展开更多; 关键词脆壁克鲁维酵母乳糖酶破壁对羟基苯甲酸酯; 在线阅读下载PDF 职称材料

中压液相色谱快速分离纯化Kluyveromyces fragilis β-D-半乳糖苷酶被引量：4: 8; 作者刘建福李素芬 +2 位作者陈占洲陈庆森王璋《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期116-119,共4页; 应用AKTA explorer 100型中压液相色谱快速纯化工艺,系统分离纯化了脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis)β-D-半乳糖苷酶。K.fragilis发酵生产的菌体细胞经过破碎、离心后的上清液中含有K.fragilis β-D-半乳糖苷酶。粗酶经过AKTA e... 展开更多; 关键词中压液相色谱脆壁克鲁维酵母 Β-D-半乳糖苷酶分离纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

Kluyveromyces fragilis LFS-8611 β-D-半乳糖苷酶的摇瓶培养条件被引量：5: 9; 作者刘建福王璋许时婴《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》 CSCD 北大核心 2004年第4期82-85,93,共5页; 脆壁克鲁维酵母(Kluyveromycesfragilis)LFS 8611合成的β D 半乳糖苷酶具有较高的催化半乳糖基转移反应活力.脆壁克鲁维酵母(K.fragilis)LFS 8611细胞生长和β D 半乳糖苷酶的合成同步.该菌株生长和产酶的最适碳源为半乳糖,乳糖次之;... 展开更多; 关键词脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis) β-D-半乳糖苷酶合成培养条件; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脆壁克鲁维酵母蛋白二硫化物异构酶KfPDI的结构分析: 1; 作者赵翔包卫国霍克克李育阳 FukuharaH; 机构复旦大学遗传学研究所基因工程国家重点实验室; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1999年第8期39-43,共5页; 基金 863计划资助项目; 文摘利用ＤＮＡ限制性内切酶图谱分析将一个带有脆壁克鲁维酵母（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｆｒａｇｉｌｉｓ）蛋白二硫化物异构酶基因（ＫｆＰＤＩ）的１０ｋｂ初始克隆缩短为４ｋｂ的亚克隆，并测定了该基因的ＤＮＡ全序列。经分析发现：（１）该基因编码产物由５２０个氨基酸残基组成。（２）它与乳酸克鲁维酵母（Ｋ．ｌａｃｔｉｓ）蛋白二硫化物异构酶在氨基酸序列上的同源性为７８。（３）它与其他物种的ＰＤＩ基因在核苷酸和蛋白质水平上的同源性较弱，; 关键词脆壁克鲁维酵母 PDI KfPDI 序列分析; Keywords Kluyveromyces fragilis, Protein disulfide isomerase gene (PDI), Sequence analysis; 分类号 Q550.1 [生物学—生物化学] Q783 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人凝血因子IX在脆壁克鲁维酵母中的表达与分泌被引量：1: 2; 作者姚笑迪霍克克方季戈万忠李育阳; 机构复旦大学生命科学学院遗传学研究所基因工程国家重点实验室; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第6期26-29,共4页; 基金 863计划(2002AA227011)资助项目。; 文摘通过改造人凝血因子IX基因(h-FIX)使其与乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyceslactis)的分泌信号序列(Kss)融合,并置于脆壁克鲁维酵母(K.fragilis)LAC4基因调控型启动子的控制之下,构建成h-FIX基因表达盒。将此表达盒插入克鲁维酵母的整合质粒,得到了一个高稳定的h-FIX基因整合表达载体pHKB202-FP。经摇瓶培养并以半乳糖诱导此表达载体转化的酵母菌株,ELISA检测显示酵母上清液中的人凝血因子IX表达量可达到约200 ng/ml。此结果表明人凝血因子IX蛋白首次成功地在脆壁克鲁维酵母中得到了表达和分泌。这对于促进人凝血因子IX的基因工程产业化具有实际意义。; 关键词凝血因子脆壁克鲁维酵母血友病分泌信号序列乳酸克鲁维酵母基因调控型启动子基因表达盒 IX蛋白; Keywords Human anti-haemophilic factor IX, Kluyveromyces fragilis, Expression, Secretion; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脆壁克鲁维酵母KfPDI基因高表达菌株的构建被引量：1: 3; 作者苏燕霍克克赵翔李育阳; 机构复旦大学生命科学学院遗传学研究所基因工程国家重点实验室; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第9期23-27,共5页; 基金 863计划资助项目 (863 10 2 11 0 2 0 2 ); 文摘通过构建脆壁克鲁维酵母 (Kluyveromycesfragilis)蛋白二硫化物异构酶基因KfPDI强表达单元并克隆到不同类型的酵母载体上转化酵母菌株 ,经筛选得到了带有不同拷贝数KfPDI基因的酵母转化子。酶活性测定结果表明这些转化子中的蛋白二硫化物异构酶表达水平不仅与其KfPDI基因拷贝数有关 ,而且与该基因是否整合入宿主染色体也密切相关。; 关键词蛋白二硫化物异构酶 PDI 基因表达脆壁克鲁维酵母 KfPDI 菌株基因工程宿主菌基因拷贝构建; Keywords Yeast, Protein disulfide isomerase (PDI), Gene expression; 分类号 Q949.326.1 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脆壁克鲁维酵母乳糖酶的提取与发酵优化被引量：1: 4; 作者李威梁金钟; 机构东北林业大学; 出处《酿酒》 CAS 2008年第3期46-50,共5页; 文摘通过试验研究了一株脆壁克鲁维酵母胞内乳糖酶的破壁提取及其发酵培养基成分与培养条件优化,确定了该株酵母合适的破壁方法及最佳发酵培养条件。结果表明,采用球磨机对该酵母进行处理可以较好地释放胞内乳糖酶。其发酵生产乳糖酶的最佳培养基成分为:乳糖4%,酵母粉3%,MnCl21mol/L;最佳培养条件:接种量10%,温度28℃,初始pH7～7.5,摇床转数180r/min,培养时间36h。在此条件下培养,乳糖酶活力达1100U/mL,4140U/g干菌体。; 关键词脆壁克鲁维酵母乳糖酶发酵条件; Keywords Kluyeveromyces.fragilis, Lactase, Fermentation condition; 分类号 TQ925 [轻工技术与工程—发酵工程] TQ920.6 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脆壁克鲁维酵母生产乳糖酶发酵条件的优化被引量：1: 5; 作者李威梁金钟; 机构东北林业大学哈尔滨商业大学; 出处《乳业科学与技术》 2008年第2期73-77,共5页; 文摘通过试验研究了一株产乳糖酶脆壁克鲁维酵母的发酵培养基成分及培养条件,最终确定了该株酵母的最佳发酵培养条件。结果表明,此株脆壁克鲁维酵母发酵生产乳糖酶的最佳培养基成分为:乳糖4%,酵母粉3%,MnCl21mmol/mL;最佳培养条件:接种量10%,温度28℃,初始pH7-7.5,摇床转数180r/min,培养时间36h。在此条件下培养,乳糖酶活力达1100u/mL或4140u/g干菌体。; 关键词脆壁克鲁维酵母乳糖酶发酵条件; Keywords Kluyeveromyces fragilis lactase fermentation condition; 分类号 TS252.1 [轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脆壁克鲁维酵母KfADE5,7基因的克隆及其5’非编码区结构与功能研究: 6; 作者单敬轩霍克克李育阳; 机构复旦大学生命科学学院遗传学研究所基因工程国家重点实验室; 出处《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第6期37-42,共6页; 基金 973规划(2001CB510203) 863 计划(2002AA227011)资助项目。; 文摘通过补偿乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)KlADE5,7基因突变,从脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis)基因组文库中克隆了KfADE5,7基因。该基因全长4975bp,编码793个氨基酸,氨基酸序列与已知的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)ScADE5,7基因编码区有68.3％的同源度。利用KfADE5,7-lacZ融合基因,对5’非编码区进行缺失分析,发现了具有完整启动子功能的区域,在启动子上游还发现了两个增强转录和两个减弱转录的区域。; 关键词脆壁克鲁维酵母基因突变乳酸克鲁维酵母 “KlADE5 7基因” 腺嘌呤核苷氨基酸酿酒酵母启动子转录; Keywords K. fragilis, ADE5,7,5' UTR; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名酵母菌药用乳糖酶制备新方法被引量：4: 7; 作者谭树华高捷海迪勒尚新燕高向东吴梧桐; 机构中国药科大学生命科学与技术学院; 出处《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期86-89,共4页; 文摘目的 :建立一种简易的从酵母菌制备克鲁维酵母乳糖酶的方法。方法 :在 3 0L发酵罐中进行发酵 ,用对羟基苯甲酸酯进行细胞破壁 ,用超微过滤方法浓缩破壁液。结果 :乳糖酶的收率可达到每毫升发酵液含11 4ONPG单位。从酵终细胞中释放乳糖酶可达 70 % ,每毫升牛奶中加入 1 2ONPG单位制备的液态乳糖酶可使牛奶中的乳糖水解率达到 70 %。; 关键词脆壁克鲁维酵母乳糖酶破壁对羟基苯甲酸酯; Keywords Kluyeromyces fragilis\% Lactase Propyl p-h ydroxybenzoate Cell disruption; 分类号 TQ925 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名中压液相色谱快速分离纯化Kluyveromyces fragilis β-D-半乳糖苷酶被引量：4: 8; 作者刘建福李素芬陈占洲陈庆森王璋; 机构天津商学院天津食品生物技术重点实验室河北工程大学农学院江南大学食品学院; 出处《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期116-119,共4页; 文摘应用AKTA explorer 100型中压液相色谱快速纯化工艺,系统分离纯化了脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis)β-D-半乳糖苷酶。K.fragilis发酵生产的菌体细胞经过破碎、离心后的上清液中含有K.fragilis β-D-半乳糖苷酶。粗酶经过AKTA explorer 100中压液相色谱的HiprepR16/10 Source 30Q强阴离子交换柱和Hioad26/60 Superdex凝胶过滤色谱连续两步纯化,酶的回收率为27%,纯化倍数为42。纯化的K.fragilis β-D-半乳糖苷酶在垂直板十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)上,呈现一条染色谱带,表明纯化的酶具有较高的纯度。K.fragilisLFS-8611 β-D-半乳糖苷酶相对分子质量约为60000。; 关键词中压液相色谱脆壁克鲁维酵母 Β-D-半乳糖苷酶分离纯化; Keywords medium-pressure liquid chromatography Kluyveromyces fragilis β-D-galactosidase purification; 分类号 TQ920.1 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Kluyveromyces fragilis LFS-8611 β-D-半乳糖苷酶的摇瓶培养条件被引量：5: 9; 作者刘建福王璋许时婴; 机构江南大学食品学院; 出处《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》 CSCD 北大核心 2004年第4期82-85,93,共5页; 文摘脆壁克鲁维酵母(Kluyveromycesfragilis)LFS 8611合成的β D 半乳糖苷酶具有较高的催化半乳糖基转移反应活力.脆壁克鲁维酵母(K.fragilis)LFS 8611细胞生长和β D 半乳糖苷酶的合成同步.该菌株生长和产酶的最适碳源为半乳糖,乳糖次之;最适氮源为蛋白胨F403;最适培养条件为:发酵培养基的初始pH值为7.0,摇床的转速为200r/min.培养基中碳源和氮源质量浓度对菌体生物量和β D 半乳糖苷酶活力有重要影响,以12mg/mL乳糖为碳源,16mg/mL蛋白胨(F403)为氮源,在最适培养条件下培养32h后,菌体生物量和β D 半乳糖苷酶活力分别为7.56g/L和18.83U/mL.; 关键词脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis) β-D-半乳糖苷酶合成培养条件; Keywords Kluyveromyces fragilis β-D-galactosidase synthesis culture conditions; 分类号 TQ925 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	脆壁克鲁维酵母蛋白二硫化物异构酶KfPDI的结构分析	赵翔包卫国霍克克李育阳 FukuharaH	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	1999	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人凝血因子IX在脆壁克鲁维酵母中的表达与分泌	姚笑迪霍克克方季戈万忠李育阳	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	2003	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	脆壁克鲁维酵母KfPDI基因高表达菌株的构建	苏燕霍克克赵翔李育阳	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	2001	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	脆壁克鲁维酵母乳糖酶的提取与发酵优化	李威梁金钟	《酿酒》 CAS	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	脆壁克鲁维酵母生产乳糖酶发酵条件的优化	李威梁金钟	《乳业科学与技术》	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	脆壁克鲁维酵母KfADE5,7基因的克隆及其5’非编码区结构与功能研究	单敬轩霍克克李育阳	《高技术通讯》 EI CAS CSCD	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	酵母菌药用乳糖酶制备新方法	谭树华高捷海迪勒尚新燕高向东吴梧桐	《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2004	4	在线阅读下载PDF 职称材料
8	中压液相色谱快速分离纯化Kluyveromyces fragilis β-D-半乳糖苷酶	刘建福李素芬陈占洲陈庆森王璋	《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	4	在线阅读下载PDF 职称材料
9	Kluyveromyces fragilis LFS-8611 β-D-半乳糖苷酶的摇瓶培养条件	刘建福王璋许时婴	《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》 CSCD 北大核心	2004	5	在线阅读下载PDF 职称材料