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脂滴在病毒感染中的功能研究进展
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作者 毛亚楠 高铭 +3 位作者 周欣霓 尤冬雪 彭本群 王松 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期513-522,共10页
脂滴是从内质网膜形成的一种独特的动态细胞器,主要负责细胞内中性脂质的储存。脂滴还与其它细胞器相互作用,参与脂质代谢、膜生物合成、细胞信号转导、免疫反应等生物学过程。近年来越来越多的研究表明,脂滴在病原微生物感染,尤其是病... 脂滴是从内质网膜形成的一种独特的动态细胞器,主要负责细胞内中性脂质的储存。脂滴还与其它细胞器相互作用,参与脂质代谢、膜生物合成、细胞信号转导、免疫反应等生物学过程。近年来越来越多的研究表明,脂滴在病原微生物感染,尤其是病毒感染过程中发挥着重要作用。本文综述了脂滴与病毒之间的相互作用,包括脂滴对病毒复制周期的影响以及脂滴在调节抗病毒免疫反应中发挥的作用。了解脂滴在病毒感染中的功能对于深入揭示病毒的致病机制、研发新型抗病毒药物以及预防病毒传播具有重要意义。 展开更多
关键词 脂滴 病毒 感染 复制 天然免疫
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人参皂苷Rb_(1)脂质体的制备及对脂肪细胞中脂滴积聚的抑制作用 被引量:1
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作者 尤晓颜 刘慧 +1 位作者 段续 陈玥 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2024年第7期1-6,80,共7页
[目的]制备β-谷甾醇修饰的人参皂苷Rb_(1)脂质体(β-Rb_(1)-Lip),减少Rb_(1)降解并增强人参皂苷Rb_(1)降脂效果。[方法]采用薄膜水和法制备了β-谷甾醇修饰的人参皂苷Rb_(1)脂质体,利用MTT法评估脂质体的生物安全性,借助油红O染色试验... [目的]制备β-谷甾醇修饰的人参皂苷Rb_(1)脂质体(β-Rb_(1)-Lip),减少Rb_(1)降解并增强人参皂苷Rb_(1)降脂效果。[方法]采用薄膜水和法制备了β-谷甾醇修饰的人参皂苷Rb_(1)脂质体,利用MTT法评估脂质体的生物安全性,借助油红O染色试验和酶标仪测量TG含量,考察了脂质体β-Rb_(1)-Lip对脂肪细胞3T3-L1的脂滴积聚抑制作用。[结果]制备的β-Rb_(1)-Lip脂质体的包封率为83.74%,平均粒径为198 nm,β-Rb_(1)-Lip在12 h内Rb_(1)释放率约为80%,表现出良好的缓释效果。对于降脂活性,50μmol/L的β-Rb_(1)-Lip表现出显著的细胞内脂滴抑制率,与同浓度Rb_(1)单体相比,β-Rb_(1)-Lip对3T3-L1细胞内脂滴的抑制效果更为显著,且对细胞没有毒副作用。[结论]β-Rb_(1)-Lip具有包封率高、粒径小和缓释效果明显的特征,能够持续释放活性成分人参皂苷Rb_(1),增强其降脂功效并减少用量。 展开更多
关键词 人参皂苷Rb_(1) Β-谷甾醇 3T3-L1前肪细胞 脂滴积聚 质体
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miR-525-5p、围脂滴蛋白3的表达与胶质瘤预后的关系研究
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作者 鲁永织 万诗扬 +2 位作者 韩真真 张亮 孙炜 《中国医药导报》 CAS 2024年第8期23-27,共5页
目的 探讨微核糖核酸-525-5p(mi R-525-5p)、围脂滴蛋白3(PLIN3)的表达与胶质瘤预后的关系。方法选取2018年2月至2020年7月青岛市市立医院收治的102例胶质瘤患者,收集术中部分瘤组织和瘤旁组织采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测mi R-5... 目的 探讨微核糖核酸-525-5p(mi R-525-5p)、围脂滴蛋白3(PLIN3)的表达与胶质瘤预后的关系。方法选取2018年2月至2020年7月青岛市市立医院收治的102例胶质瘤患者,收集术中部分瘤组织和瘤旁组织采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测mi R-525-5p、PLIN3 m RNA表达,免疫组织化学染色法检测PLIN3表达。通过Target Scan数据库预测mi R-525-5p与PLIN3的结合位点,分析二者在胶质瘤组织中表达的相关性。根据胶质瘤组织中PLIN3 m RNA表达均值分为高表达组和低表达组,采用Kaplan-Meier法绘制高/低PLIN3 m RNA表达胶质瘤患者生存曲线,多因素Cox回归分析胶质瘤患者预后影响因素。结果 与瘤旁组织比较,胶质瘤组织中mi R-525-5p表达降低,PLIN3 m RNA表达升高(P<0.05)。与瘤旁组织比较,胶质瘤组织中PLIN3阳性率升高(P<0.05)。mi R-525-5p与PLIN3存在结合位点。mi R-525-5p与PLIN3 m RNA表达在胶质瘤组织中呈负相关(P<0.05)。PLIN3 m RNA高表达组3年总生存率低于低表达组(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,低分化、世界卫生组织中枢神经系统肿瘤分级Ⅲ~Ⅳ级、PLIN3 m RNA≥1.86为胶质瘤患者死亡的独立危险因素(HR>1,P<0.05)。结论 胶质瘤组织中mi R-525-5p低表达和PLIN3 m RNA高表达,二者表达呈负相关,PLIN3 m RNA高表达与胶质瘤患者预后不良有关。 展开更多
关键词 胶质瘤 微核糖核酸-525-5p 脂滴蛋白3 预后
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脂噬对奶牛乳腺上皮细胞脂滴大小的调控研究
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作者 康方圆 刘镇滔 +5 位作者 吴奎显 倪晗 钟凯 李和平 杨国宇 韩立强 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1095-1101,共7页
脂噬是一种新的自噬形式,可以选择性识别脂滴并将其降解,在维持细胞内脂质稳态等过程中发挥着重要的作用。本研究旨在探讨奶牛乳腺上皮细胞经饥饿诱导脂噬后对细胞脂滴大小的调控作用。试验用100μmol·L^(-1)的亚油酸处理细胞24 h... 脂噬是一种新的自噬形式,可以选择性识别脂滴并将其降解,在维持细胞内脂质稳态等过程中发挥着重要的作用。本研究旨在探讨奶牛乳腺上皮细胞经饥饿诱导脂噬后对细胞脂滴大小的调控作用。试验用100μmol·L^(-1)的亚油酸处理细胞24 h,刺激细胞脂滴蓄积,然后分别饥饿诱导细胞0、6、12、24、48 h,油红O染色观察细胞内脂滴的尺寸和数量随饥饿时间的变化情况,随后饥饿诱导24 h通过免疫荧光观察脂滴和自噬蛋白LC3的共定位,蛋白免疫印迹检测细胞内自噬蛋白LC3和P62的表达,透射电镜观察脂滴自噬情况。结果发现:随着饥饿处理时间的延长,脂滴直径从1.57μm显著增加到2.12μm,每个细胞的脂滴数量显著减少,从39个·cell^(-1)减少到24个·cell^(-1),大脂滴比例显著增加,小脂滴比例显著减少(P<0.05),免疫荧光发现LC3与脂滴发生共定位,透射电镜观察发现自噬溶酶体包裹着脂滴,饥饿处理24 h后LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白的比值显著增加1倍,P62蛋白表达显著下降(P<0.05)。以上结果表明,脂噬对奶牛乳腺上皮细胞脂滴的大小发挥调控作用。 展开更多
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 脂滴
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脂滴发育中代谢相关的结构蛋白研究进展 被引量:4
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作者 雒诚龙 邵伟 +1 位作者 赵艳坤 余雄 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第5期1321-1328,共8页
一般认为脂滴是脂肪细胞中甘油三酯的贮存器,但近来研究发现细胞中脂肪的运输贮存与动员分解都是以脂滴为核心完成的,种种现象揭示了脂滴在细胞内并不仅仅是一个简单的能量贮存器,而更多地扮演着一个多功能细胞器的角色。通过对脂滴结... 一般认为脂滴是脂肪细胞中甘油三酯的贮存器,但近来研究发现细胞中脂肪的运输贮存与动员分解都是以脂滴为核心完成的,种种现象揭示了脂滴在细胞内并不仅仅是一个简单的能量贮存器,而更多地扮演着一个多功能细胞器的角色。通过对脂滴结构进行分析发现,脂滴以中性脂肪为核心,表面覆盖单层磷脂结构并镶嵌多种功能蛋白,即脂滴相关蛋白。脂滴相关蛋白以不同形式协同脂滴参与调控脂代谢、膜转运及信号转导等多个生理过程。根据蛋白承载功能的不同,可大致将其分为三大类:脂滴结构蛋白、脂滴代谢相关蛋白与脂滴转运蛋白。其中,结构蛋白如PAT家族蛋白、CIDE家族蛋白等在脂滴发育代谢的调控与信息传递介导中发挥着重要作用,此外,还有激素敏感脂肪酶、脂肪甘油三酯水解酶与Rab蛋白等代谢与转运蛋白通过不同形式参与脂滴发育。目前,脂滴相关蛋白新种类与具体作用机制仍在不断探索中。作者就细胞中脂滴与脂代谢及脂滴相关蛋白的研究进展做一综述。 展开更多
关键词 脂滴 代谢 脂滴相关蛋白
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罗非鱼肠系脂滴及相关蛋白提取过程分析 被引量:1
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作者 李劼 黄卉 +5 位作者 相欢 岑剑伟 魏涯 赵永强 郝淑贤 李来好 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期119-128,共10页
动植物中的脂质以脂滴(Lipid droplet,LD)的形式存在。掌握脂滴及脂滴相关蛋白(Lipid droplet related protein,LDRP)的提纯方法,对解析鱼类脂质变化及影响机制,寻求适宜的调控途径至关重要。以罗非鱼(Oreochromis niloticus)的肠系脂... 动植物中的脂质以脂滴(Lipid droplet,LD)的形式存在。掌握脂滴及脂滴相关蛋白(Lipid droplet related protein,LDRP)的提纯方法,对解析鱼类脂质变化及影响机制,寻求适宜的调控途径至关重要。以罗非鱼(Oreochromis niloticus)的肠系脂肪组织为原料,利用离心、重悬及增溶等处理手段分离纯化脂滴及LDRP,并结合SDS-PAGE和质量浓度变化分析提纯效果。结果表明,肠系脂肪组织经3次离心和3次重悬可有效去除杂质,获得较为纯净的脂滴。虽然溶解剂增溶提取的LDRP蛋白浓度较高,但电泳条带存在明显拖尾现象,说明脂质脱除效果不佳,影响了LDRP提取纯度。脱脂增溶需经4组有机溶剂联合处理才可获得纯度高、复溶效果好的LDRP提取样品。离心、干燥方式及脂滴冷冻对LDRP增溶影响差异不显著。 展开更多
关键词 罗非鱼 脂滴 脂滴相关蛋白 提取
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肉鸡鸡胚肝脏中脂滴的发育研究 被引量:3
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作者 余燕 马艺源 +4 位作者 吴世秀 陶立奎 张艳红 徐之勇 马金友 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第3期692-697,共6页
为了探索鸡胚肝脏脂滴的发育规律,选取120枚受精蛋,分别在孵化的第7~21天(E7~E21)每天随机选取6枚蛋,收集鸡胚,采集鸡胚肝脏,采用冰冻切片、苏丹Ⅲ染色观察鸡胚肝脏脂滴的形成和发育特点。结果发现:1鸡胚发育到E9胚龄,肝细胞内开始出现... 为了探索鸡胚肝脏脂滴的发育规律,选取120枚受精蛋,分别在孵化的第7~21天(E7~E21)每天随机选取6枚蛋,收集鸡胚,采集鸡胚肝脏,采用冰冻切片、苏丹Ⅲ染色观察鸡胚肝脏脂滴的形成和发育特点。结果发现:1鸡胚发育到E9胚龄,肝细胞内开始出现脂滴,且随着胚龄增加,脂滴的数量不断增多,脂滴的大小不断增大;2E18胚龄以前,肝脏脂滴的分布从中央静脉开始沿肝索到肝小叶边缘数量逐渐减少,E18胚龄以后,肝脏边缘脂滴数量较肝脏中央的多;3肝脏脂滴的发育分为E9~E14、E15~E17和E18~E21 3个阶段,而且后一个阶段脂滴的数量和体积均显著大于前一个阶段(P<0.05),脂滴的平均大小在E9~E14、E15~E17和E18~E21 3个阶段分别为3.2、5.7和10.8μm,平均数量分别为67、327、397个/mm2。以上结果表明,随着鸡胚的发育,肝细胞内脂滴数量增加、体积变大。 展开更多
关键词 肉鸡鸡胚 脂滴 肝脏 发育
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缺氧诱导脂滴相关蛋白在糖尿病合并腹主动脉瘤中的表达 被引量:4
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作者 田丽 杨柳 +6 位作者 刘肖 叶春芳 孟宪杰 李会 张丽华 张瑾瑾 马冬 《中华老年多器官疾病杂志》 2021年第6期453-458,共6页
目的通过生物信息学方法,寻找糖尿病合并腹主动脉瘤(AAA)患者中差异表达的基因,明确其功能,探讨发病机制。方法从Gene Expression Omnibus(GEO)数据库中下载人糖尿病GSE21321和人腹主动脉瘤GSE7084数据集,以P<0.05及表达变化>2.0... 目的通过生物信息学方法,寻找糖尿病合并腹主动脉瘤(AAA)患者中差异表达的基因,明确其功能,探讨发病机制。方法从Gene Expression Omnibus(GEO)数据库中下载人糖尿病GSE21321和人腹主动脉瘤GSE7084数据集,以P<0.05及表达变化>2.0倍标准筛选差异基因。联合运用Gencript数据库和predictprotein平台分析蛋白质亚细胞定位,并通过荧光共定位实验进行验证;STRING数据库分析缺氧诱导脂滴相关蛋白(HILPDA)的相互作用。采用SPSS 13.0软件进行数据分析,计量资料差异比较采用方差分析。结果筛选出HILPDA基因(在2型糖尿病中上调11.35倍,腹主动脉瘤中上调6.4倍);亚细胞定位结果预测HILPDA多分布于细胞核和线粒体中,荧光染色共定位分析证实了HILPDA在血管平滑肌细胞的细胞核和线粒体中有较高的表达;蛋白质互作网络分析证实HILPDA相关蛋白与细胞对缺氧的反应、脂质滴相关。与瘤旁动脉组织(对照组)比较,在糖尿病合并AAA患者组织中HILPDA蛋白的高表达更为显著[(47.2±5.6)%和(71.5±4.7)%,(P<0.01)]。结论HILPDA基因对糖尿病合并腹主动脉瘤的诊断和治疗的临床研究可能具有潜在的指导价值。 展开更多
关键词 糖尿病 2型 腹主动脉瘤 缺氧诱导脂滴相关蛋白
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饥饿诱发成脂分化C2C12细胞中脂滴形态重塑
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作者 刘哲 闫峻 +1 位作者 刘仲昊 穆淑琴 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第11期3460-3466,共7页
试验旨在探究短期饥饿处理对成脂分化C2C12细胞中脂滴生长发育的影响,为阐释及利用补偿生长机制奠定基础。通过胰岛素等激素混合物诱导C2C12细胞成脂分化,将成脂分化12 d的C2C12细胞分为两组:对照组(Control),高糖培养24 h;饥饿处理组(F... 试验旨在探究短期饥饿处理对成脂分化C2C12细胞中脂滴生长发育的影响,为阐释及利用补偿生长机制奠定基础。通过胰岛素等激素混合物诱导C2C12细胞成脂分化,将成脂分化12 d的C2C12细胞分为两组:对照组(Control),高糖培养24 h;饥饿处理组(FAST),无血清低糖培养24 h。通过BODIPY染色和甘油三酯测定观察脂滴形态变化,并使用Western blotting方法测定脂滴表面结构蛋白perilipin1-5表达量的变化。结果显示,C2C12细胞成脂诱导12 d,可以使细胞达到较好的充脂状态。通过无血清低糖饥饿处理后,成脂分化C2C12细胞中甘油三酯含量极显著下降(P<0.01);脂滴平均尺寸极显著减小(P<0.01),脂滴平均数量极显著增多(P<0.01);脂滴表面结构蛋白出现变化,perilipin2、perilipin5表达极显著上调(P<0.01)、perilipin3表达显著上调(P<0.05)。综上,无血清低糖处理可以诱发脂滴形态重塑,改变脂滴表面结构蛋白的表达。 展开更多
关键词 分化 C2C12细胞 脂滴 脂滴重塑 饥饿
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油酸和硬脂酸对奶牛乳腺上皮细胞中脂肪酸结合蛋白3表达和脂滴分泌的影响 被引量:4
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作者 梁梦瑶 高学军 +1 位作者 侯晓明 李庆章 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第5期137-141,共5页
为确定外源添加长链脂肪酸油酸和硬脂酸对奶牛乳腺上皮细胞中脂肪酸结合蛋白3(FABP3)表达的影响,本试验采用荧光定量RT-PCR检测乳脂合成相关基因的表达情况,确定油酸和硬脂酸的最佳浓度和培养时间分别为75μmol/L 12h和100μmol/L 36h... 为确定外源添加长链脂肪酸油酸和硬脂酸对奶牛乳腺上皮细胞中脂肪酸结合蛋白3(FABP3)表达的影响,本试验采用荧光定量RT-PCR检测乳脂合成相关基因的表达情况,确定油酸和硬脂酸的最佳浓度和培养时间分别为75μmol/L 12h和100μmol/L 36h。采用Western blotting和免疫荧光法检测添加油酸和硬脂酸后FABP3表达和脂滴分泌的情况,为进一步揭示FABP3在乳脂合成信号转导通路中的作用提供理论依据。 展开更多
关键词 油酸 乳腺上皮细胞 肪酸结合蛋白3 脂滴
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GB/T8026—2014《石油蜡和石油脂滴熔点测定法》修订解读
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作者 赵彬 耿晨晨 《石油商技》 2015年第3期70-72,共3页
本文介绍了GB/T 8026—2014《石油蜡和石油脂滴熔点测定法》标准的修订背景、与修订前标准GB/T 8026—1987及修改采用的ASTM D127-08《石油蜡(包括石油脂)滴熔点测定法》的主要差异。考察了部分试验条件对滴熔点测定结果影响,进行了... 本文介绍了GB/T 8026—2014《石油蜡和石油脂滴熔点测定法》标准的修订背景、与修订前标准GB/T 8026—1987及修改采用的ASTM D127-08《石油蜡(包括石油脂)滴熔点测定法》的主要差异。考察了部分试验条件对滴熔点测定结果影响,进行了方法重复性精密度验证试验,同时考察了修订前后标准试验结果的差别。滴熔点是石油蜡和石油脂的重要质量指标,各国都很重视石油蜡和石油脂的滴熔点测定方法。 展开更多
关键词 熔点测定 GB/T8026 脂滴 方法重复性 试验结果 修订背景 标准修订 规范性引用文件 验证试验
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EGCG通过激活AMPK、抑制PPARγ调控3T3-L1脂肪细胞中脂滴蓄积 被引量:8
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作者 管巧丽 吴晓云 +1 位作者 李芳 盛军 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第23期152-161,共10页
研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对3T3-L1成熟脂肪细胞脂滴蓄积的影响。通过体外诱导分化培养3T3-L1前脂肪细胞,经EGCG处理后,脂肪细胞脂滴大小减小,并表现为时间和浓度依赖性;不会引起成熟脂肪细胞的凋... 研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对3T3-L1成熟脂肪细胞脂滴蓄积的影响。通过体外诱导分化培养3T3-L1前脂肪细胞,经EGCG处理后,脂肪细胞脂滴大小减小,并表现为时间和浓度依赖性;不会引起成熟脂肪细胞的凋亡。与对照组相比,EGCG处理组显著降低与脂代谢、转运和吸收相关基因的mRNA的表达水平;EGCG处理可以显著降低过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferators-activated receptor-γ,PPARγ)的表达并激活腺苷一磷酸(adenosine monophosphate,AMP)活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)。使用AMPK抑制剂Dorsomorphin处理成熟脂肪细胞,发现与单独抑制剂组相比,EGCG能提高磷酸化-AMPK的表达水平,并抑制PPARγ的表达。结论:EGCG可能通过激活AMPK从而抑制PPARγ的表达并显著降低与脂代谢、转运和吸收相关基因的mRNA的表达水平,从而减少3T3-L1成熟脂肪细胞的脂滴蓄积。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 3T3-L1肪细胞 AMP活化蛋白激酶 过氧化物酶体增殖物激活受体 脂滴蓄积
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小檗碱对猪卵巢卵母细胞体外成熟及其脂滴含量和分布的影响 被引量:3
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作者 罗晓霏 王俊丽 +5 位作者 武丽 黄小萌 刘兵 曹安 曹素英 高建明 《北京农学院学报》 2016年第4期40-45,共6页
【目的】探明不同形态的猪卵巢中卵母细胞体外成熟效果与脂滴的相关性,以及小檗碱对其的影响。【方法】将卵泡型卵巢GV期和黄体型卵巢GV期卵母细胞分别用添加小檗碱的成熟液体外成熟,观察体外成熟效果;用尼罗红染色的方法测定成熟前后... 【目的】探明不同形态的猪卵巢中卵母细胞体外成熟效果与脂滴的相关性,以及小檗碱对其的影响。【方法】将卵泡型卵巢GV期和黄体型卵巢GV期卵母细胞分别用添加小檗碱的成熟液体外成熟,观察体外成熟效果;用尼罗红染色的方法测定成熟前后的卵母细胞的脂滴含量,并观察成熟后各组卵母细胞脂滴的分布。【结果】卵泡型卵母细胞的颗粒细胞扩散率和第一极体排出率均显著高于黄体型卵母细胞(P<0.05),小檗碱(Berberine,Ber)组卵母细胞的颗粒细胞扩散率显著高于对照组(P<0.05),第一极体排出率极显著高于对照组(P<0.01);体外成熟后,对照组卵母细胞中脂滴含量显著降低(P<0.05),小檗碱组极显著降低(P<0.01),且极显著低于对照组(P<0.01)。黄体型卵母细胞的脂滴含量则显著低于卵泡型(P<0.05)。猪卵母细胞成熟后的脂滴分布为分散型、外围型和不规则型,卵泡型卵母细胞脂滴主要呈分散分布,黄体型卵母细胞脂滴主要呈外围分布,并且黄体型卵母细胞脂滴呈不规则分布多于卵泡型。【结论】小檗碱能明显促进猪卵母细胞体外成熟,且卵泡型成熟效果显著好于黄体型;体外成熟后,卵母细胞脂滴逐渐减少,小檗碱组脂滴含量极显著减少,且黄体型卵母细胞脂滴含量明显减少;猪卵母细胞内脂滴的分布与卵巢所处的时期有关。 展开更多
关键词 小檗碱 卵巢形态 卵母细胞 体外成熟 脂滴
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瘦素对猪原代脂肪细胞脂滴相关基因mRNA表达的影响 被引量:1
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作者 何永江 肖慧 +5 位作者 黄英 杨明华 赵素梅 潘洪彬 刘琛 彭泽琴 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期91-96,共6页
【目的】研究瘦素(LEP)对猪原代脂肪细胞脂滴相关基因FITM2、PLIN1和PLIN2 mRNA表达的影响。【方法】采用不同质量浓度的LEP(0、50、100和150 ng/mL)处理15日龄三元杂交猪(DLY)皮下原代脂肪细胞48 h,试剂盒测定细胞中甘油三酯(TAG)含量,... 【目的】研究瘦素(LEP)对猪原代脂肪细胞脂滴相关基因FITM2、PLIN1和PLIN2 mRNA表达的影响。【方法】采用不同质量浓度的LEP(0、50、100和150 ng/mL)处理15日龄三元杂交猪(DLY)皮下原代脂肪细胞48 h,试剂盒测定细胞中甘油三酯(TAG)含量,qPCR检测脂滴相关基因mRNA表达水平。【结果】与0 ng/mL LEP相比,100 ng/mL LEP可显著增加猪原代脂肪细胞TAG含量以及FITM2和PLIN2 mRNA表达水平(P<0.05),显著下调PLIN1 mRNA表达水平(P<0.05);与50和100 ng/mL LEP相比,150 ng/mL LEP可显著降低脂肪细胞TAG含量(P<0.05),显著上调PLIN1和PLIN2 mRNA表达水平(P<0.05)。【结论】LEP可促进猪原代脂肪细胞FITM2和PLIN2 mRNA表达,可促进或抑制PLIN1 mRNA表达,但LEP对脂滴相关基因表达的促进或抑制存在质量浓度差异性。 展开更多
关键词 猪原代肪细胞 瘦素(LEP) 脂滴相关基因
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小檗碱对玻璃化冷冻猪卵母细胞脂滴含量及胚胎发育的影响 被引量:4
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作者 张紫薇 于博 +4 位作者 戴佳格 武丽 王俊丽 刘兵 高建明 《北京农学院学报》 2020年第1期67-74,共8页
【目的】探讨小檗碱对玻璃化冷冻猪卵母细胞脂滴含量及体外受精胚胎发育效果的影响。【方法】体外成熟液和胚胎培养液中添加小檗碱为Ber组,未添加小檗碱为对照组,MII期卵母细胞进行冷冻液处理为冷冻液处理对照组和冷冻液处理+Ber组;采... 【目的】探讨小檗碱对玻璃化冷冻猪卵母细胞脂滴含量及体外受精胚胎发育效果的影响。【方法】体外成熟液和胚胎培养液中添加小檗碱为Ber组,未添加小檗碱为对照组,MII期卵母细胞进行冷冻液处理为冷冻液处理对照组和冷冻液处理+Ber组;采用开放式拉长塑料细管法对卵母细胞玻璃化冷冻与解冻,试验各组别为GV期冷冻组、GV期冷冻+Ber组、MII期冷冻组、MII期冷冻+Ber组。观察卵母细胞体外成熟效果及其体外受精胚胎体外发育效果;观察卵母细胞冷冻化学损伤存活率及其体外受精胚胎发育率;采用尼罗红染色法观察卵母细胞中脂滴含量,观察卵母细胞玻璃化冷冻解冻后存活率及其体外受精胚胎发育率;利用差异染色法和TUNEL法计数囊胚内细胞团和细胞总数以及细胞凋亡数。【结果】Ber组能够极显著促进猪卵母细胞体外成熟,显著降低猪卵母细胞玻璃化冷冻的化学损伤,促进猪卵母细胞冷冻解冻后的细胞存活率,而猪MII期卵母细胞相对于GV期卵母细胞具有很好的冷冻解冻后的存活率;小檗碱能降低猪卵母细胞玻璃化冷冻后的脂滴含量,MⅡ期卵母细胞冷冻前后脂滴含量均低于GV期冷冻前后;小檗碱能够促进猪GV期卵母细胞玻璃化冷冻解冻后的体外成熟,且有利于猪卵母细胞玻璃化冷冻解冻后早期胚胎的发育,相对于冷冻MII期卵母细胞,冷冻GV期卵母细胞具有更好的体外发育效果;小檗碱能够提高猪卵母细胞玻璃化冷冻解冻后体外发育囊胚内细胞团数与细胞总数,降低其细胞凋亡,有利于提高猪卵母细胞玻璃化冷冻解冻后体外受精胚胎发育至囊胚的质量。而GV期相对MII期则冷冻效果更佳。【结论】小檗碱能够通过降低玻璃化冷冻猪卵母细胞脂滴含量,从而提高其冷冻解冻后体外成熟率和体外受精胚胎发育质量;GV期玻璃化冷冻卵母细胞相对于MII期,在冷冻解冻后其体外受精胚胎发育质量有更好提高。相关机制还有待今后进一步研究。 展开更多
关键词 小檗碱 玻璃化冷冻 猪卵母细胞 脂滴含量 体外受精胚胎发育
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脂滴荧光标记原理及其特性的比较分析 被引量:2
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作者 张瑾 贾亚萍 +1 位作者 王众司 王若涵 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期770-778,共9页
脂滴(Lipid droplets,LDs)是细胞内储存中性脂质的细胞器,参与脂质代谢、膜合成转运、信号转导和蛋白质降解等多种重要生理过程。处于动态循环的LDs常与多种细胞器共同行使功能,因此高效的LDs成像技术成为生物学研究及医学病理诊断的有... 脂滴(Lipid droplets,LDs)是细胞内储存中性脂质的细胞器,参与脂质代谢、膜合成转运、信号转导和蛋白质降解等多种重要生理过程。处于动态循环的LDs常与多种细胞器共同行使功能,因此高效的LDs成像技术成为生物学研究及医学病理诊断的有力工具。本文阐述了LDs荧光标记原理,并针对多种荧光染料的特点进行了详细介绍与比较分析,旨在为LDs荧光染料的特异性选用提供参考。 展开更多
关键词 脂滴 标记原理 荧光染料 显微成像
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转化生长因子β相关激酶1抑制剂对人肝癌细胞系HepG2脂滴积累的影响及其机制 被引量:1
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作者 王坤 陈奥 马石楠 《山东医药》 CAS 2020年第24期12-16,共5页
目的观察转化生长因子β相关激酶1(TAK1)抑制剂(NG25)对人肝癌细胞系HepG2脂滴积累的影响,并探讨其作用机制。方法取HepG2细胞并分为两组,处理组细胞加入2μmol/L NG25处理24 h,对照组加入等体积DMSO处理24 h,两组均同时用终浓度为250μ... 目的观察转化生长因子β相关激酶1(TAK1)抑制剂(NG25)对人肝癌细胞系HepG2脂滴积累的影响,并探讨其作用机制。方法取HepG2细胞并分为两组,处理组细胞加入2μmol/L NG25处理24 h,对照组加入等体积DMSO处理24 h,两组均同时用终浓度为250μmol/L脂肪酸(OA、PA各125μmol/L)共同孵育,采用油红O染色观察细胞脂滴积累情况(油红O染色红光强度),荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、诱导细胞凋亡DNA分裂因子样效应因子C(CIDEC)mRNA、蛋白相对表达量,双荧光素酶报告基因检测系统检测细胞荧光素酶活性。另取HepG2细胞并分为3组,恢复组细胞预先转染1μg质粒PPARγ后再加入2μmol/L NG25处理24 h,处理组细胞加入2μmol/L NG25处理24 h,对照组细胞加入等体积DMSO处理24 h,3组同时用终浓度250μmol/L脂肪酸(OA、PA各125μmol/L)共同孵育,荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测细胞CIDEC mRNA、蛋白。结果与对照组比较,处理组油红O染色红光强度弱(P<0.05)。与对照组比较,处理组PPARγ及CIDEC mRNA、蛋白相对表达量和PPARγ启动子荧光素酶活性降低(P均<0.05);与对照组比较,恢复组和处理组CIDEC mRNA和蛋白相对表达量降低(P均<0.05)。结论NG25对HepG2细胞脂滴积累有抑制作用,机制可能是抑制PPARγ的转录,进而下调CIDEC表达,即NG25通过PPARγ-CIDEC信号途径最终抑制HepG2细胞脂滴积累。 展开更多
关键词 转化生长因子β相关激酶1 转化生长因子β相关激酶1抑制剂 细胞脂滴积累 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 诱导细胞凋亡DNA分裂因子样效应因子C
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鹅脂滴包被蛋白PLIN基因的全长cDNA克隆及组织表达分析 被引量:1
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作者 吴少春 苏媛媛 +3 位作者 吴玉婷 马丽晨 郁建锋 顾志良 《常熟理工学院学报》 2019年第2期81-87,共7页
脂滴包被蛋白(perilipin, PLIN)是脂滴相关蛋白家族(PAT)中的成员,定位于脂滴表面.该蛋白对脂肪细胞的脂质代谢有重要的调控作用.本研究通过RT-PCR和RACE的方法,从太湖鹅脂肪组织总RNA中扩增出PLIN基因的全长cDNA,测序得到其长度为2 267... 脂滴包被蛋白(perilipin, PLIN)是脂滴相关蛋白家族(PAT)中的成员,定位于脂滴表面.该蛋白对脂肪细胞的脂质代谢有重要的调控作用.本研究通过RT-PCR和RACE的方法,从太湖鹅脂肪组织总RNA中扩增出PLIN基因的全长cDNA,测序得到其长度为2 267 bp,其中包括长度为1 584 bp的CDS区,共编码527个氨基酸残基.利用DNAMAN软件将该序列与其他物种的PLIN基因的同源性比较,结果发现鹅PLIN与鸭的同源性最高,达到96.42%,与人的同源性最低,为58.44%.利用MEGA 7.0软件构建基于PLIN基因cDNA序列的系统进化树,显示出PLIN基因的高度保守性.用荧光定量PCR分析其在鹅脂肪、胸肌、腺胃、脑、肾、腿肌、脾、心脏、肺、肌胃、肝实验结果为进一步分析该基因对鹅脂肪性状的作用奠定了基础. 展开更多
关键词 PLIN-1基因 脂滴蛋白 RACE 组织表达
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不同乳脂率德宏奶水牛乳腺组织脂滴形成相关基因的表达研究 被引量:1
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作者 唐娜 江俊才 +4 位作者 王梦迪 茶学典 张永云 杨忠 李卫真 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第12期4545-4553,共9页
本研究旨在探索脂滴形成相关基因嗜乳脂蛋白(BTN1A1)、黄嘌呤脱氢酶(XDH)、围脂滴蛋白1(PLIN1)和PLIN2在不同乳脂率德宏奶水牛乳腺组织中的表达差异。试验选取同一养殖小区的健康德宏奶水牛216头,采集乳样,用乳品分析仪测定乳脂率。根... 本研究旨在探索脂滴形成相关基因嗜乳脂蛋白(BTN1A1)、黄嘌呤脱氢酶(XDH)、围脂滴蛋白1(PLIN1)和PLIN2在不同乳脂率德宏奶水牛乳腺组织中的表达差异。试验选取同一养殖小区的健康德宏奶水牛216头,采集乳样,用乳品分析仪测定乳脂率。根据乳脂率测定结果,分为低乳脂率组(L组,<7.0%)、中乳脂率组(M组,7.5%±0.5%)和高乳脂率组(H组,>8.0%),每组选取第2胎、年龄相近、处于泌乳中期的德宏奶水牛各3头,采集乳样,进行乳脂率测定;屠宰后采集乳腺组织,提取总RNA,利用实时荧光定量PCR技术检测脂滴形成相关基因的mRNA表达水平,并与乳脂率及脂肪酸含量进行相关性分析。试验结果显示,BTN1A1、XDH、PLIN1和PLIN2基因具有相同的表达趋势:H组>M组>L组;其中H组德宏奶水牛乳腺组织BTN1A1、XDH、PLIN1和PLIN2基因mRNA表达水平均极显著高于M组和L组(P<0.01);M组BTN1A1基因表达水平与L组差异不显著(P>0.05),但XDH、PLIN1和PLIN2基因mRNA表达水平均极显著高于L组(P<0.01)。相关性分析表明,BTN1A1、XDH、PLIN1和PLIN2基因表达水平均与乳脂率、总脂肪酸、长链脂肪酸及不饱和脂肪酸含量呈极显著正相关(P<0.01)。本研究结果表明,BTN1A1、XDH、PLIN1和PLIN2基因在乳腺组织的表达可能对德宏奶水牛的乳脂合成及分泌有显著促进作用,可为深入解析脂滴形成相关基因在泌乳过程中的调控机制提供参考。 展开更多
关键词 德宏奶水牛 乳腺组织 脂滴形成相关基因 基因表达
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β-烟酰胺单核苷酸对牛卵母细胞脂滴含量及冷冻效果的影响
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作者 徐茜 杨柏高 +6 位作者 张航 冯肖艺 郝海生 杜卫华 朱化彬 张培培 赵学明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3348-3357,共10页
旨在探明β-烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)对牛卵母细胞脂滴含量和玻璃化冷冻效果的影响。本研究将牛卵母细胞置于含1μmol·L^(-1)NMN的培养液中进行体外成熟(in vitro,IVM)、玻璃化和体外受精(in vitro fertil... 旨在探明β-烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)对牛卵母细胞脂滴含量和玻璃化冷冻效果的影响。本研究将牛卵母细胞置于含1μmol·L^(-1)NMN的培养液中进行体外成熟(in vitro,IVM)、玻璃化和体外受精(in vitro fertilization,IVF),检测了牛卵母细胞的脂滴含量、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、凋亡水平和发育能力;添加NMN组作为NMN处理组,未添加NMN组作为新鲜对照组;添加NMN且进行玻璃化处理的作为NMN玻璃化组,未添加NMN但进行玻璃化处理的作为玻璃化对照组。结果表明,NMN组牛卵母细胞的脂滴含量、ROS水平、凋亡水平均显著低于新鲜对照组(P<0.05),卵裂率((89.57±7.58)%)和囊胚率((45.63±3.78)%)均显著高于新鲜对照组((80.77±0.70)%,(36.90±1.20)%,P<0.05);同时,NMN玻璃化组牛卵母细胞的ROS水平和凋亡水平也显著低于玻璃化对照组(P<0.05),并且解冻后的存活率((97.25±0.11)%)、卵裂率((75.47±1.11)%)和囊胚率((33.75±1.43)%)均显著高于玻璃化对照组((89.29±1.16)%、(52.00±1.26)%、(15.38±1.73)%,P<0.05)。本研究结果表明,添加NMN可以有效降低牛卵母细胞的脂滴含量,降低玻璃化牛卵母细胞的ROS水平和凋亡水平,从而提高玻璃化牛卵母细胞的发育能力。 展开更多
关键词 NMN 卵母细胞 脂滴 玻璃化 活性氧 凋亡
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