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外源黄酮对红松胚性愈伤组织增殖和体胚发生的影响
1
作者 郭文慧 王越 +5 位作者 吴琳 杨剑飞 杨玲 张鹏 吴海波 沈海龙 《植物研究》 北大核心 2025年第1期130-138,共9页
黄酮在植物体胚发生过程中扮演重要角色。为了探究黄酮对红松(Pinus koraiensis)体胚发生的作用效果,该研究以红松胚性愈伤组织为试材,通过添加不同浓度、不同种类黄酮(槲皮素、柚皮素、儿茶素)及苯丙氨酸解氨酶(PAL)抑制剂2-氨基茚满-2... 黄酮在植物体胚发生过程中扮演重要角色。为了探究黄酮对红松(Pinus koraiensis)体胚发生的作用效果,该研究以红松胚性愈伤组织为试材,通过添加不同浓度、不同种类黄酮(槲皮素、柚皮素、儿茶素)及苯丙氨酸解氨酶(PAL)抑制剂2-氨基茚满-2-膦酸盐酸盐,测定处理后胚性愈伤组织增殖率、体胚数量及氧化胁迫相关指标变化。结果表明:胚性愈伤组织的增殖率随着外源黄酮浓度的升高逐渐降低,而体胚诱导数量先升高后降低,体胚产生数量在20μmol⋅L^(-1)的外源黄酮处理下达到最高。黄酮能够降低胚性愈伤组织中总活性氧水平(ROS)、过氧化氢(H_(2)O_(2))和丙二醛(MDA)含量,升高超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和谷胱甘肽过氧化物酶活性(GPX)。综上所述,外源黄酮主要通过影响胚性愈伤组织氧化胁迫水平,调控细胞增殖及胚性愈伤组织分化进程,促进红松体胚形成。 展开更多
关键词 红松 胚性愈伤组织 黄酮 体胚发生 氧化胁迫指标
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长期继代培养的楸树胚性愈伤组织难以分化的成因
2
作者 赵珊 董静 +3 位作者 郑帅 陈发菊 刘文 梁宏伟 《林业科学》 北大核心 2025年第6期130-138,共9页
【目的】探究长期继代下楸树胚性愈伤组织难以分化再生的发生机制,为楸树体细胞胚胎发生体系的分化再生和遗传稳定性提供理论基础。【方法】以新诱导的非胚性愈伤组织和初代胚性愈伤组织、继代培养7年的胚性愈伤组织为材料,开展细胞倍... 【目的】探究长期继代下楸树胚性愈伤组织难以分化再生的发生机制,为楸树体细胞胚胎发生体系的分化再生和遗传稳定性提供理论基础。【方法】以新诱导的非胚性愈伤组织和初代胚性愈伤组织、继代培养7年的胚性愈伤组织为材料,开展细胞倍性、差异表达基因及内源激素水平分析。【结果】1)通过染色体计数发现,初代胚性愈伤组织染色体保持二倍体状态(2n=40),而连续培养7年的胚性愈伤组织染色体数目发生了加倍现象,染色体数目为80~162;流式细胞仪鉴定发现连续培养7年的胚性愈伤DNA含量相比楸树实生苗增加3倍,其细胞倍性为六倍体。2)通过对转录组数据的GO和KEGG富集分析,发现差异表达基因显著富集在植物激素激活信号通路、转录调控、MAPK信号通路、发育过程的调控等通路,其中响应生长素信号的SAUR、ARF、AUX/IAA、GH3,脱落酸受体PYR/PYL,胞外蛋白AGP,转录因子ABI3等促进体胚分化发生的基因表达均下调,而乙烯合成抑制因子ETO1则表达上调。3)内源激素水平分析表明,连续继代7年的胚性愈伤组织中IAA和ABA的含量显著低于新诱导的胚性愈伤组织,这与其参与植物激素信号转导基因的下调表达相对应,而高水平的IAA和ABA可能是调控体细胞胚胎发生的关键。【结论】楸树胚性愈伤组织在长期继代过程中发生的染色体加倍、促进体胚发生相关基因的异常表达以及内源激素水平的显著下降,可能是造成其难以分化再生的根本原因。 展开更多
关键词 楸树 胚性愈伤组织 染色体加倍 转录组测序 内源激素
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香榧胚性愈伤组织的悬浮培养动力学及对赤霉素的响应
3
作者 杨正宇 周佳君 +1 位作者 胡恒康 张启香 《浙江农林大学学报》 北大核心 2025年第1期103-111,共9页
【目的】以香榧Torreya grandis ‘Merrillii’胚性愈伤组织为试验材料,对其悬浮细胞的生长以及悬浮培养动力学进行研究,探究香榧胚性愈伤组织对赤霉素的响应。【方法】以实验室培育的香榧胚性愈伤组织为试验材料,通过测定细胞活力、细... 【目的】以香榧Torreya grandis ‘Merrillii’胚性愈伤组织为试验材料,对其悬浮细胞的生长以及悬浮培养动力学进行研究,探究香榧胚性愈伤组织对赤霉素的响应。【方法】以实验室培育的香榧胚性愈伤组织为试验材料,通过测定细胞活力、细胞鲜质量进行悬浮培养动力学的研究,优化培养条件,并对施加外源赤霉素A3 (GA3)的愈伤组织进行转录组分析。【结果】(1)在培养周期内,悬浮细胞的鲜质量增长呈“S”型曲线,细胞活力在3 d时达最高值后平稳下降。(2)香榧悬浮细胞培养最佳继代周期为9~12 d,最佳接种量为30 g·L^(-1),培养基最佳初始pH为5.7,最佳摇床转速为110r·min^(-1)。(3)对外源GA3处理后的香榧胚性愈伤组织进行转录组分析,共获得差异表达基因428个,其中上调基因236个,下调基因192个。在差异基因的GO富集分析中,GA3处理后上调表达基因主要参与催化活性、氧化还原过程、氧化还原酶活性等,在KEGG代谢通路中,差异表达基因主要富集在苯丙烷类生物合成、木栓质生物合成等途径中。【结论】香榧胚性愈伤组织培养动力学分析能获得最佳接种时期,优化培养条件能提高其细胞增长率及抗逆性,外源GA3处理下的香榧胚性愈伤组织细胞中,苯丙烷生物合成、木栓质生物合成等代谢通路为差异基因主要参与部分,且部分关键基因表达量变化可能在香榧愈伤组织生长发育、适应环境及应对胁迫中发挥重要作用。 展开更多
关键词 香榧 胚性愈伤组织 悬浮培养 赤霉素
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米槁胚性愈伤组织玻璃化法超低温保存体系的建立
4
作者 陈宇凡 吴媛 +4 位作者 林亮 杨湘云 帅甜 丁宁 吴之坤 《种子》 北大核心 2025年第5期16-25,35,共11页
为了建立米槁胚性愈伤组织超低温保存体系,解决米槁种质资源长期保存困难的问题,以米槁胚性愈伤组织为材料,采用玻璃化法对其进行超低温保存,研究冷冻保护剂种类和脱水时间对米槁胚性愈伤组织存活率、再生率和恢复能力的影响,并测试了... 为了建立米槁胚性愈伤组织超低温保存体系,解决米槁种质资源长期保存困难的问题,以米槁胚性愈伤组织为材料,采用玻璃化法对其进行超低温保存,研究冷冻保护剂种类和脱水时间对米槁胚性愈伤组织存活率、再生率和恢复能力的影响,并测试了恢复生长的愈伤组织体胚发生能力。结果表明,适宜米槁胚性愈伤组织的冷冻保护剂为PVS_(2),PVS_(2)处理70 min细胞存活率最高,为80.21%;适合米槁胚性愈伤组织超低温保存方法为Loading(WPM+2 mol/L甘油+0.4 mol/L蔗糖)25℃处理20 min, PVS_(2)(WPM+30%甘油+0.4 mol/L蔗糖+15%乙二醇+15%二甲基亚砜)0℃处理10 min, 40℃水浴解冻2 min, Unloading(WPM+1.2 mol/L蔗糖)25℃处理20 min。除PVS_(2)脱水处理0 min外,其余处理下均可以获得100%再生率。冻存后的子叶胚和成熟胚分化比例均高于未冻存的胚性愈伤组织,经冻存后的胚性愈伤组织与未冻存的胚性愈伤组织分化出的体胚形态上并没有差异,说明胚性愈伤组织可以作为米槁种质资源的超低温冻存材料进行超低温长期冻存。 展开更多
关键词 米槁 胚性愈伤组织 超低温保存 玻璃化法
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槟榔芋胚性愈伤组织诱导及植株再生体系的建立
5
作者 罗燕羽 黄绍力 +1 位作者 魏利国 刘伟光 《蔬菜》 2025年第5期43-49,共7页
为诱导槟榔芋胚性愈伤组织,建立植株再生体系,以广东炭步文冈槟榔芋试管芋植株的叶片、叶柄、球茎薄片、茎尖和根为材料,探究不同植物生长调节剂浓度配比对槟榔芋胚性愈伤组织诱导、增殖及植株再生的影响。结果表明:槟榔芋试管芋球茎上... 为诱导槟榔芋胚性愈伤组织,建立植株再生体系,以广东炭步文冈槟榔芋试管芋植株的叶片、叶柄、球茎薄片、茎尖和根为材料,探究不同植物生长调节剂浓度配比对槟榔芋胚性愈伤组织诱导、增殖及植株再生的影响。结果表明:槟榔芋试管芋球茎上部薄片为胚性愈伤组织诱导的最适外植体,诱导率为83.95%;胚性愈伤组织最佳增殖培养基为MS+2 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA,培养20 d后可增殖3.68倍;无生长调节剂的MS培养基的不定芽诱导效果最好,分化率达94.8%,添加0.05 mg/L NAA的1/2MS培养基的生根效果最好,生根率为100.00%。该研究建立了槟榔芋胚性愈伤组织发生途径的植株再生体系,为槟榔芋的种苗快速繁殖提供了技术支撑,也为后续的多倍体育种、体细胞杂交及遗传转化等试验提供了优良的受体材料。 展开更多
关键词 槟榔芋 胚性愈伤组织 植株再生 试管芋球茎薄片 外植体 再生体系 组织培养 快速繁殖
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低温处理对红松胚性愈伤组织诱导生理机制的影响 被引量：2
6
作者 王越 郭文慧 +5 位作者 沈海龙 杨剑飞 杨玲 张鹏 吴海波 吴琳 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期13-18,共6页
为探究低温预处理对红松胚性愈伤组织诱导及生理机制的影响,采用红松(Pinus koraiensis)未成熟种子为外植体,探究低温预处理时间对胚性愈伤组织诱导率、未成熟种子中抗氧化酶活性、贮藏物质及植物激素质量分数的影响。结果表明:经4℃低... 为探究低温预处理对红松胚性愈伤组织诱导及生理机制的影响,采用红松(Pinus koraiensis)未成熟种子为外植体,探究低温预处理时间对胚性愈伤组织诱导率、未成熟种子中抗氧化酶活性、贮藏物质及植物激素质量分数的影响。结果表明:经4℃低温预处理21~28 d,对提高红松未成熟种子的胚性愈伤组织诱导率效果最佳,其中,2号家系经4℃低温预处理28 d,胚性愈伤组织诱导率可达25.00%,5号家系经4℃低温预处理21 d,胚性愈伤组织诱导率可达14.00%。经低温预处理后,未成熟种子中的淀粉、可溶性糖和可溶性蛋白质量分数和过氧化氢酶(CAT)活性随预处理时间的延长呈下降趋势,而超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)的活性则显著上升(P<0.05)。同时,4℃低温预处理21~28 d显著提高了红松未成熟种子中玉米素核苷(ZR)质量分数和生长素(IAA)质量摩尔浓度,降低脱落酸(ABA)质量分数。相关性分析结果表明,胚性愈伤组织诱导率与超氧化物歧化酶活性、过氧化物酶活性、玉米素核苷质量分数和生长素质量摩尔浓度呈极显著正相关,与脱落酸质量分数呈极显著负相关(P<0.01)。因此,低温处理主要通过调控红松未成熟种子中抗氧化酶活性及植物激素水平,促进胚性愈伤组织诱导能力。 展开更多
关键词 红松 低温预处理 胚性愈伤组织 抗氧化酶 激素
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黄瓜胚性愈伤组织的诱导保存和再生 被引量：1
7
作者 薛婉钰 刘娜 +3 位作者 苑鑫 张婷婷 曹云娥 陈书霞 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2024年第7期99-105,共7页
【目的】对黄瓜胚性愈伤组织的诱导保存和再生进行研究,为黄瓜高频率遗传转化奠定基础。【方法】以欧洲温室型黄瓜自交系14-1子叶节为外植体,在MS培养基上附加1.5 mg/L 2,4-D,进行25 d的胚性愈伤组织诱导培养后,取胚性愈伤组织在添加30,... 【目的】对黄瓜胚性愈伤组织的诱导保存和再生进行研究,为黄瓜高频率遗传转化奠定基础。【方法】以欧洲温室型黄瓜自交系14-1子叶节为外植体,在MS培养基上附加1.5 mg/L 2,4-D,进行25 d的胚性愈伤组织诱导培养后,取胚性愈伤组织在添加30,60,90,100,110,120,130,140和150 g/L蔗糖及1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基进行继代培养,每30 d继代1次,观察胚性愈伤组织的褐变情况及胚性分化能力,并用电子天平在超净工作台中记录胚性愈伤组织质量的变化。继代培养60 d后,将保存的胚性愈伤组织和体细胞胚移至含1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上,待出现体细胞胚后移至MS培养基进行萌发,观察再生小植株的生长情况。【结果】将欧洲温室型黄瓜自交系14-1的子叶节,接种到附加1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上进行诱导培养后,子叶节一端的愈伤组织集中聚集于下胚轴处,之后有黄色胚性愈伤组织产生。在继代培养过程中,当培养基中添加的蔗糖为60~150 g/L时,胚性愈伤组织能保持胚性愈伤状态达60 d。之后将继代培养60 d后的胚性愈伤组织转接至附加1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上,在蔗糖质量浓度为60 g/L条件下保存的胚性愈伤组织可诱导出正常胚状体,且能形成健康小植株。【结论】由黄瓜子叶节诱导出的胚性愈伤组织可在MS+60 g/L蔗糖的培养基上保存达60 d,之后能正常萌发形成胚状体,进而形成正常小植株。 展开更多
关键词 黄瓜 遗传转化 胚性愈伤组织 离体保存
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柑橘不同倍性种质胚性愈伤组织诱导及无病毒植株再生 被引量：2
8
作者 任家勤 黄雪冰 +6 位作者 杨雯惠 陈昊 邓家锐 敖义俊 解凯东 郭文武 伍小萌 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1332-1341,共10页
【目的】通过离体培养败育胚珠诱导柑橘二倍体和四倍体种质的胚性愈伤组织,为柑橘多倍体研究提供成对离体材料;继续诱导胚性愈伤组织再生无毒种苗实现柑橘无核品种提纯复壮。【方法】从柑橘成熟果实中挑取败育胚珠,接种于3种愈伤诱导培... 【目的】通过离体培养败育胚珠诱导柑橘二倍体和四倍体种质的胚性愈伤组织,为柑橘多倍体研究提供成对离体材料;继续诱导胚性愈伤组织再生无毒种苗实现柑橘无核品种提纯复壮。【方法】从柑橘成熟果实中挑取败育胚珠,接种于3种愈伤诱导培养基中,在离体培养过程中诱导并驯化胚性愈伤组织;再诱导愈伤组织分化为胚状体和不定芽,将不定芽嫁接到枳橙砧木形成完整植株;通过InDel标记和病毒检测鉴定再生植株的遗传来源和脱毒效果。【结果】离体培养诱导出13个柑橘种质的胚性愈伤组织,其中8个愈伤组织完成驯化,分别为红橘二倍体/四倍体(2x/4x)、W.默科特橘橙2x/4x、鄂柑1号椪柑2x/4x、日辉橘2x和早红脐橙。基因型影响柑橘胚性愈伤组织诱导效率,早红脐橙诱导率高达74.73%,而红橘诱导率仅6.85%;柑橘四倍体愈伤组织诱导率(0.56%~22.61%)低于对应二倍体(6.85%~37.75%)。3种不同培养基的胚性愈伤组织诱导效率不同,其中MGS培养基对温州蜜柑在内的5个品种的诱导率较高(14.13%~63.01%),MK培养基对温州蜜柑在内的4个品种的诱导率较低(21.62%~69.51%),但MK培养基对椪柑2x和红橘2x的诱导率分别为70.21%和17.31%。分别获得早红脐橙、伦晚脐橙、国庆1号温州蜜柑、大分4号温州蜜柑和兴津温州蜜柑5个无核品种的愈伤组织再生苗23、22、20、10和15株;嫁接嵌合体早红脐橙的愈伤组织再生苗经InDel标记鉴定实为罗伯逊脐橙;国庆1号温州蜜柑、伦晚脐橙和早红脐橙再生苗经PCR检测证明未感染黄脉病和衰退病病毒。【结论】柑橘胚性愈伤组织诱导率受品种基因型和培养基影响;同一品种的不同倍性种质,二倍体愈伤组织诱导率和胚状体发生率均较高;胚性愈伤组织再生植株实现了病毒完全脱除,是柑橘无核品种提纯复壮的有效手段。 展开更多
关键词 柑橘 胚性愈伤组织 倍性种质 无核品种 离体再生
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生长素和细胞分裂素诱导植物胚性愈伤组织研究进展 被引量：5
9
作者 许莹楠 刘艳军 +4 位作者 黄俊轩 韩启厚 高逸卓 鲁铭颖 古瑜 《长江蔬菜》 2024年第4期33-37,共5页
植物胚性愈伤组织在植物研究与应用中是一种重要的试材,有很多关于植物胚性愈伤组织诱导方法研究的报道。生长素和细胞分裂素被广泛应用于胚性愈伤组织的诱导,是胚性愈伤组织诱导的关键因子。阐述了生长素和细胞分裂素在植物胚性愈伤组... 植物胚性愈伤组织在植物研究与应用中是一种重要的试材,有很多关于植物胚性愈伤组织诱导方法研究的报道。生长素和细胞分裂素被广泛应用于胚性愈伤组织的诱导,是胚性愈伤组织诱导的关键因子。阐述了生长素和细胞分裂素在植物胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生过程中的作用,讨论了其在植物胚性愈伤组织诱导中的作用、使用方法与原则,为愈伤组织诱导、愈伤组织胚性化诱导等研究中植物生长调节剂的使用提供依据。 展开更多
关键词 生长素 细胞分裂素 胚性愈伤组织 植物激素 植物生长调节剂
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多倍体芦竹松散型胚性愈伤组织的诱导 被引量：1
10
作者 任俊涵 刘艳军 +4 位作者 裴毅 王硕 刘广慧 邱晓坤 张卓 《种子》 北大核心 2024年第12期143-148,156,共7页
为了建立高效的芦竹体胚发生体系,本试验以带节间的多倍体芦竹组培苗幼嫩茎段为外植体,采用含有不同激素种类和浓度的培养基,在多次继代选择的条件下进行松散型胚性愈伤组织的诱导试验。结果表明,MS+0.25 mg/L 6-BA+1 mg/L 2,4-D为诱导... 为了建立高效的芦竹体胚发生体系,本试验以带节间的多倍体芦竹组培苗幼嫩茎段为外植体,采用含有不同激素种类和浓度的培养基,在多次继代选择的条件下进行松散型胚性愈伤组织的诱导试验。结果表明,MS+0.25 mg/L 6-BA+1 mg/L 2,4-D为诱导芦竹松散型愈伤组织的最佳培养基,具有愈伤组织诱导速度较快,结构松散,质地较软,呈白绿色的特点;芦竹松散型胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为1/2 MS+0.50 mg/L 6-BA+0.50 mg/L 2,4-D,通过电镜观察到愈伤组织全部呈胚性状态,结构松散、质地较硬、生长快速。在无激素的MS培养基上,将诱导出的芦竹松散型胚性愈伤组织进行转移,获得发育状态良好的胚状体需要经过5次继代培养。 展开更多
关键词 芦竹 胚性愈伤组织 胚状体
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矾根胚性愈伤组织诱导与植株再生 被引量：1
11
作者 任俞新 《寒旱农业科学》 2024年第8期747-751,共5页
为了建立矾根组培快繁体系,以矾根去顶尖幼嫩顶芽为外植体,研究不同培养基对胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织增殖以及植株再生的影响。结果表明,愈伤组织最佳培养基为MS+2.4-D 3.0 mg/L+6-BA 0.3 mg/L,愈伤诱导率达到93.0%,团块较大,结... 为了建立矾根组培快繁体系,以矾根去顶尖幼嫩顶芽为外植体,研究不同培养基对胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织增殖以及植株再生的影响。结果表明,愈伤组织最佳培养基为MS+2.4-D 3.0 mg/L+6-BA 0.3 mg/L,愈伤诱导率达到93.0%,团块较大,结构较松散,有颗粒状态,个别团块呈水浸状;以最优胚性愈伤组织增殖培养基为MS+2.4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.2 mg/L进行扩增,愈伤组织发育较好,结构较松散,颗粒状疣突分明,水分较少,呈淡黄绿色。胚状体分化最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.2 mg/L,胚状体诱导率达91.8%。对幼根发育不良的植株,在1/2MS+IBA 0.1 mg/L+IAA 0.1 mg/L培养基上进行生根培养效果好,生根率100%,平均根数5.5条,根长2~3 cm,苗高4.1 cm。 展开更多
关键词 矾根 去顶尖幼嫩顶芽 胚性愈伤组织 诱导 植株再生
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落叶松不同类型胚性和非胚性愈伤组织的生理生化差异 被引量：27
12
作者 齐力旺 李玲 +2 位作者 韩一凡 韩素英 Dietrich Ewald 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第3期20-29,共10页
以华北落叶松继代、增殖培养的不同类型的胚性及非胚性愈伤组织为材料 ,测定其氨基酸、糖类、酚酸、激素以及离子的含量 ,结果表明 :氨基酸含量的差异十分明显 ,质地硬的非胚性愈伤组织中 18种游离氨基酸含量为胚性愈伤组织的 2倍以上 ,... 以华北落叶松继代、增殖培养的不同类型的胚性及非胚性愈伤组织为材料 ,测定其氨基酸、糖类、酚酸、激素以及离子的含量 ,结果表明 :氨基酸含量的差异十分明显 ,质地硬的非胚性愈伤组织中 18种游离氨基酸含量为胚性愈伤组织的 2倍以上 ,经ABA处理后 ,胚性愈伤组织中多糖及邻苯二酚含量急剧升高 ;三糖含量与不同基因型密切相关 ;乙烯释放量在非胚性愈伤组织中高于胚性愈伤组织 ;金属离子CO+ + 的含量 ,胚性愈伤组织是非胚性愈伤组织的 12倍 ,胚性愈伤组织中铵态氮 (NH+4)与硝态氮 (NO-3)的比值是非胚性愈伤组织中的 10倍以上 ;实验结果为进一步探讨针叶树体细胞胚胎发生的生理生化机理提供依据。 展开更多
关键词 华北落叶松 酚酸 激素 氨基酸 游离糖 胚性愈伤组织 非胚性愈伤组织 体细胞胚发生
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白皮松胚性和非胚性愈伤组织生理生化特性研究 被引量：23
13
作者 李茜 张存旭 秦萍 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2008年第8期151-155,160,共6页
【目的】探讨白皮松体细胞胚胎发生过程中各项生理生化指标与体细胞胚胎发生、发育的关系。【方法】以白皮松体细胞胚发生诱导阶段不同发育时期的胚性愈伤组织(EC)和非胚性愈伤组织(N-EC)为材料,对其不同培养时间(5,15,25和35 d)的可溶... 【目的】探讨白皮松体细胞胚胎发生过程中各项生理生化指标与体细胞胚胎发生、发育的关系。【方法】以白皮松体细胞胚发生诱导阶段不同发育时期的胚性愈伤组织(EC)和非胚性愈伤组织(N-EC)为材料,对其不同培养时间(5,15,25和35 d)的可溶性蛋白质、可溶性糖和淀粉含量及抗氧化物酶(POD,SOD,CAT)活性进行研究。【结果】EC中可溶性蛋白质和可溶性糖含量均在培养25 d时达到峰值,N-EC中可溶性蛋白和可溶性糖含量在培养15 d时达到峰值;EC中淀粉含量呈现先上升后下降再上升的变化趋势,N-EC淀粉含量一直呈下降趋势。EC中抗氧化物酶活性明显高于N-EC,SOD活性在培养15 d时达到峰值,表明SOD在体细胞胚诱导初期起主导作用;EC的CAT和POD活性均在培养25 d时达到峰值,说明CAT和POD在体细胞胚发生过程中对胚性细胞的进一步分化和发育起主导作用。【结论】白皮松体细胞胚胎发生诱导阶段,EC的生理生化代谢活性高于N-EC。 展开更多
关键词 白皮松 体细胞胚胎发生 胚性愈伤组织 非胚性愈伤组织 生理生化特性
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洋桔梗体细胞胚性愈伤组织诱导过程中超氧化物歧化酶和酯酶变化 被引量：1
14
作者 刘明志 陈勤 刘希 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期247-250,153,共5页
通过转移洋桔梗非胚性愈伤组织到含有1．0mg／L2，4-D的MS培养基（ecIM）上诱导了洋桔梗胚性愈伤组织形成，而非胚性愈伤组织在含1．0mg／L2，4-D和0．5mg／LKT的MS培养基（necSM）上继代培养。本研究比较分析了洋桔梗愈伤组织在ecIM和n... 通过转移洋桔梗非胚性愈伤组织到含有1．0mg／L2，4-D的MS培养基（ecIM）上诱导了洋桔梗胚性愈伤组织形成，而非胚性愈伤组织在含1．0mg／L2，4-D和0．5mg／LKT的MS培养基（necSM）上继代培养。本研究比较分析了洋桔梗愈伤组织在ecIM和necSM上的超氧化物歧化酶（SOD）活性及其同工酶酶谱、酯酶同工酶酶谱随着培养天数的变化。实验结果表明在ecIM和necSM上培养的洋桔梗愈伤组织的超氧化物歧化酶（sOD）活性在培养早期较低，然后随着培养天数增加而升高，维持在较高水平上，但SOD活性变化无明显规律性；另一方面，SOD同工酶在第4天后出现一新的同工酶谱带；此外，在ecIM和necSM上培养洋桔梗愈伤组织的酯酶（EST）同工酶在培养至第16～20天期间呈现显著缺失。 展开更多
关键词 洋桔梗 胚性愈伤组织 非胚性愈伤组织 超氧化物歧化酶 酯酶 同工酶
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玉米成熟胚胚性愈伤组织的诱导、高频再生及转化的研究 被引量：24
15
作者 王世玉 郑用琏 +2 位作者 刘亚 赵久然 张方东 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期423-428,共6页
以玉米自交系CML295、CML304和18-599R的成熟胚为外植体,结合幼胚离体培养方法,探讨并优化了成熟胚来源的胚性愈伤组织诱导及继代培养方法。对其愈伤组织的形态和组织切片的研究结果显示,继代过程可产生良好的Ⅱ型胚性愈伤组织。在分化... 以玉米自交系CML295、CML304和18-599R的成熟胚为外植体,结合幼胚离体培养方法,探讨并优化了成熟胚来源的胚性愈伤组织诱导及继代培养方法。对其愈伤组织的形态和组织切片的研究结果显示,继代过程可产生良好的Ⅱ型胚性愈伤组织。在分化培养中分别获得68.6%、75.4%和84.8%的高频再生率,每愈伤组织块成苗数分别为2.45、2.43和2.75。利用基因枪法转化pCAMBIA1301质粒后的GUS瞬时表达效率分别为57.9%、62.5%和73.1%,转化pCAMBIA1303质粒后检测GFP的瞬时表达效率分别为23.3%、40%和45.5%。以上3种基因型成熟胚来源的愈伤组织转化率与其对应的幼胚来源的胚性愈伤组织转化率相似。这一技术体系为玉米的遗传改良和功能基因组研究提供了重要的技术平台。 展开更多
关键词 玉米 成熟胚 胚性愈伤组织 再生 转化
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香蕉胚性愈伤组织的诱导及胚性细胞悬浮系的建立 被引量：25
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作者 徐春香 B.PANIS +4 位作者 H.STROSSE R.SWENNEN 李华平 肖火根 范怀忠 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期70-73,共4页
分别以3个香蕉品种的多芽体茎尖和5个香蕉品种的未成熟雄花为外植体,诱导产生胚性愈伤组织.结果分别从2个基因组类型为AAA的品种的多芽体茎尖和未成熟雄花获得了胚性愈伤组织,而未能从基因组类型为AAB或ABB的香蕉品种中获得胚性愈伤组织... 分别以3个香蕉品种的多芽体茎尖和5个香蕉品种的未成熟雄花为外植体,诱导产生胚性愈伤组织.结果分别从2个基因组类型为AAA的品种的多芽体茎尖和未成熟雄花获得了胚性愈伤组织,而未能从基因组类型为AAB或ABB的香蕉品种中获得胚性愈伤组织.胚性愈伤组织的诱导率受基因组类型、品种和培养条件等因素的影响.以上述4个品种的胚性愈伤组织为起始材料成功建立了胚性细胞悬浮系,不同香蕉品种,从其胚性愈伤组织建立胚性细胞悬浮系的难易程度有所不同. 展开更多
关键词 香蕉 胚性愈伤组织 基因诱导 胚性细胞 悬浮系统
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长白落叶松胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生 被引量：31
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作者 宋跃 甄成 +1 位作者 张含国 李淑娟 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第10期45-54,共10页
【目的】以长白落叶松的未成熟合子胚为外植体,进行胚性愈伤组织的诱导、增殖培养及体细胞胚胎发生的相关研究,揭示影响长白落叶松胚性愈伤组织诱导的关键因素,并探讨继代培养过程中添加不同种类、浓度的生长调节剂对胚性愈伤组织增殖... 【目的】以长白落叶松的未成熟合子胚为外植体,进行胚性愈伤组织的诱导、增殖培养及体细胞胚胎发生的相关研究,揭示影响长白落叶松胚性愈伤组织诱导的关键因素,并探讨继代培养过程中添加不同种类、浓度的生长调节剂对胚性愈伤组织增殖及体胚发生的影响。【方法】采集长白落叶松3个家系优良单株的种子,诱导胚性愈伤组织,比较外植体采集时间、家系、2,4-D浓度及基本培养基对胚性愈伤组织诱导的影响。诱导出的胚性愈伤组织继代于含不同种类、浓度生长调节剂的增殖培养基,通过体胚发生途径获得体细胞胚。选取发育正常的体胚进行萌发,待体胚生根后移栽。【结果】不同时间采集的未成熟合子胚,其胚性愈伤组织诱导率存在较大差别,授粉后63天的合子胚诱导率为5.61%,授粉后70天诱导率为22.35%,而授粉后80天未诱导出胚性愈伤组织;‘长77-22’、‘长77-37’和‘长73-50’3个家系胚性愈伤组织的平均诱导率分别为6.69%,11.17%和3.11%;2,4-D浓度对长白落叶松胚性愈伤组织诱导具有一定影响,在一定范围内胚性愈伤组织的诱导率会随2,4-D浓度升高而升高,当其浓度为1.5 mg·L^(-1)时胚性愈伤组织的诱导率最高,达到11.11%,而当2,4-D浓度超过1.5 mg·L^(-1)时,胚性愈伤组织的诱导率则开始下降;BM,MS,S培养基均能诱导出胚性愈伤组织,其中,BM培养基的诱导率最高,S培养基的诱导率次之,MS培养基的诱导率最低。胚性愈伤组织在含2,4-D 0.3 mg·L^(-1)、6-BA0.1 mg·L^(-1)及KT 0.1 mg·L^(-1)的BM培养基上增殖15天可获得相对较多的胚性愈伤组织,增殖率为345.93%;在含2,4-D 1.5 mg·L^(-1)、6-BA 0.5 mg·L^(-1)及KT 0.5 mg·L^(-1)的BM培养基上培养14天,再经诱导可获得较多的体细胞胚胎,每克愈伤组织平均诱导179.87个体胚,并且这些体胚的萌发率及植株再生率相对较高,分别为75.00%,66.67%;再生植株移栽成活率为27.08%。【结论】不同长白落叶松家系的胚性愈伤组织诱导率不同,散粉后70天的合子胚适合诱导胚性愈伤组织,基本培养基为BM,添加2,4-D 1.5 mg·L^(-1)。胚性愈伤组织长期继代在含高浓度生长调节剂的培养基上易丧失胚性,且增殖速度慢,但体胚的发生量及萌发率相对较高;适当降低生长调节剂浓度利于愈伤组织保持胚性及增殖,但体胚的发生量及体胚的萌发率有所下降;当培养基中生长调节剂浓度较低时,不利于愈伤组织的增殖,但仍能使其胚性长期保持;采用浓度为0.5 mg·L^(-1)的NAA代替0.15 mg·L^(-1)的2,4-D有助于胚性愈伤组织的增殖,并能在一定程度上提高体胚的萌发率。因此,可根据不同阶段的培养目的,选择添加不同种类和浓度生长调节剂的增殖培养基进行继代。 展开更多
关键词 长白落叶松 体胚诱导 胚性愈伤组织 体细胞胚胎 植株再生
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龙眼胚性愈伤组织长期继代培养及其染色体数目变异 被引量：40
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作者 赖钟雄 陈春玲 +3 位作者 黄素华 桑庆亮 潘东明 陈振光 《福建农业大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第1期29-32,共4页
从龙眼幼胚培养诱导并筛选出的松散型胚性愈伤组织 ,在继代培养基上已培养 6 a以上 ,所保持的若干愈伤组织仍具有强烈的体细胞胚胎发生能力 .经细胞学检查 ,其中个别愈伤组织系的部分愈伤组织团发现有2 n=3x=4 5,或 2 n=4 x=6 0等染色... 从龙眼幼胚培养诱导并筛选出的松散型胚性愈伤组织 ,在继代培养基上已培养 6 a以上 ,所保持的若干愈伤组织仍具有强烈的体细胞胚胎发生能力 .经细胞学检查 ,其中个别愈伤组织系的部分愈伤组织团发现有2 n=3x=4 5,或 2 n=4 x=6 0等染色体数目的变异细胞 。 展开更多
关键词 龙眼 胚性愈伤组织 染色体数目变异 继代培养 长期继代保持
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玉米幼胚培养胚性愈伤组织诱导力的遗传变异分析 被引量：22
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作者 潘光堂 夏燕莉 +1 位作者 刘玉贞 荣廷昭 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期386-390,共5页
选用 6个玉米自交系 ,配制完全双列杂交组合进行幼胚培养 ,测定胚性愈伤组织诱导率作为评价指标 ,用 Hay-m an双列杂交分析法和 Griffing配合力分析方法 1进行遗传分析。结果表明 ,胚性愈伤组织诱导率在基因型间差异显著 ,其性状遗传为... 选用 6个玉米自交系 ,配制完全双列杂交组合进行幼胚培养 ,测定胚性愈伤组织诱导率作为评价指标 ,用 Hay-m an双列杂交分析法和 Griffing配合力分析方法 1进行遗传分析。结果表明 ,胚性愈伤组织诱导率在基因型间差异显著 ,其性状遗传为加性 -显性模型 ,加性变异占 94 .4 1% ,显性变异仅占 5 .5 9% ,显性变异表现为部分显性 ;该性状遗传力高 ,表现为受主效 -微效多基因控制的质量 -数量性状 ,且一般增效基因为隐性 ;正反交效应在部分亲本中表现显著 ;玉米高胚性愈伤组织诱导率自交系 18(红 )和 18(白 )不仅产量配合力高、抗病性强、自身产量和其他农艺性状表现好 ,而且胚性愈伤组织诱导率这一性状的一般配合力高、特殊配合力方差小 。 展开更多
关键词 玉米 幼胚培养 胚性愈伤组织 诱导力 遗传变异 配合力 遗传效应
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陆地棉中棉所24胚性愈伤组织的诱导及植株再生 被引量：21
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作者 于娅 刘传亮 +5 位作者 马峙英 李付广 李凤莲 王玉芬 武芝霞 张朝军 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第2期306-310,共5页
以陆地棉"中棉所24"为材料进行了全固体体细胞培养,获得了愈伤组织和再生植株。愈伤组织诱导阶段采用0.01IAA+0.01KT+0.012,4-D的培养基效果好,继代时间多为30～50d;激素由高到低的继代可明显提高胚性愈伤分化率,IAA和KT含量... 以陆地棉"中棉所24"为材料进行了全固体体细胞培养,获得了愈伤组织和再生植株。愈伤组织诱导阶段采用0.01IAA+0.01KT+0.012,4-D的培养基效果好,继代时间多为30～50d;激素由高到低的继代可明显提高胚性愈伤分化率,IAA和KT含量均较低,IAA/KT比例为1∶1～1∶6,胚性愈伤最高分化率为50.22%。 展开更多
关键词 棉花 组织培养 胚性愈伤组织 植株再生
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