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假肠膜明串珠菌HL64中关键D-乳酸脱氢酶的鉴定及其酶学性质研究
1
作者 李鹏 刘兰 +1 位作者 王通 黄筱萍 《食品工业科技》 北大核心 2025年第12期165-172,共8页
假肠膜明串珠菌HL64合成高光学纯度D-乳酸,然而,关键D-乳酸脱氢酶尚不明晰。本文旨在通过全基因组测序,鉴定关键D-乳酸脱氢酶及其酶学性质,为进一步改造假肠膜明串珠菌HL64合成D-乳酸提供理论依据。半定量PCR初步确定关键D-乳酸脱氢酶,... 假肠膜明串珠菌HL64合成高光学纯度D-乳酸,然而,关键D-乳酸脱氢酶尚不明晰。本文旨在通过全基因组测序,鉴定关键D-乳酸脱氢酶及其酶学性质,为进一步改造假肠膜明串珠菌HL64合成D-乳酸提供理论依据。半定量PCR初步确定关键D-乳酸脱氢酶,克隆该基因,进行体外表达与纯化,深入研究相关酶学性质。结果表明LDH2(OYT93_08575)编码关键D-乳酸脱氢酶,其最适pH和反应温度分别是pH8和30℃。LDH2对丙酮酸及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的K_(m)值分别为0.578 mmol/L及0.275 mmol/L,对丙酮酸的K_(cat)及K_(cat)/K_(m)值分别为45.04 s^(-1)及7.88×10^(4) L/(mol·s),表明LDH2对丙酮酸具有较高催化效率。除了将丙酮酸作为底物以外,LDH2对草酰乙酸及苯丙酮酸也具备一定的催化能力。 展开更多
关键词 假肠膜明串珠菌 全基因组测序 D-乳酸 D-乳酸脱氢酶 酶学性质 酶动力学
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极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症致婴儿死亡1例
2
作者 郑大 莫玉叶 +4 位作者 王宁 黎秋辰 张艺凰露 唐双柏 黄二文 《法医学杂志》 北大核心 2025年第1期85-88,共4页
1案例1.1简要案情某女婴,132日龄,于某年6月5日以“出生3个月23天不能抬头”为代主诉就诊于某市妇幼保健院康复科,初步诊断为发育迟缓、遗传代谢性疾病待排,入院给予对症治疗。6月13日患儿出现发热并伴有呻吟、呼吸稍促等症状,经儿科会... 1案例1.1简要案情某女婴,132日龄,于某年6月5日以“出生3个月23天不能抬头”为代主诉就诊于某市妇幼保健院康复科,初步诊断为发育迟缓、遗传代谢性疾病待排,入院给予对症治疗。6月13日患儿出现发热并伴有呻吟、呼吸稍促等症状,经儿科会诊后于6月14日09:30转入儿科,10:20患儿突发神志不清,经抢救无效宣布临床死亡。 展开更多
关键词 法医病理学 极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症 婴儿 全基因组测序
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谷氨酸脱氢酶gdhA基因缺失对单增李斯特菌抗氧化应激的影响 被引量：1
3
作者 田篮鑫 杨雨婷 +3 位作者 秦祎 张政 田光明 方春 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期3771-3779,共9页
【目的】旨在阐明谷氨酸脱氢酶gdhA基因对单增李斯特菌抗氧化应激能力的影响,并探明glnR基因对gdhA基因的调控作用。【方法】采用同源重组技术构建单增李斯特菌gdhA基因缺失株;通过生长曲线测定亲本株10403S、缺失株10403S-ΔgdhA和回补... 【目的】旨在阐明谷氨酸脱氢酶gdhA基因对单增李斯特菌抗氧化应激能力的影响,并探明glnR基因对gdhA基因的调控作用。【方法】采用同源重组技术构建单增李斯特菌gdhA基因缺失株;通过生长曲线测定亲本株10403S、缺失株10403S-ΔgdhA和回补株10403S-CΔgdhA菌株的生长能力;利用抗氧化应激存活试验检测gdhA基因缺失对单增李斯特菌抗氧化应激能力的影响。诱导GdhA蛋白表达并纯化,制备兔多克隆抗体,并通过Western blotting检测抗体特异性。通过构建携带gdhA基因启动子区域的GFP报告质粒,测定氧化应激条件下glnR基因缺失对gdhA基因转录水平的影响。使用Western blotting检测氧化应激条件下glnR基因缺失对GdhA蛋白表达水平的影响,并检测glnR基因缺失对菌株存活能力的影响。【结果】生长曲线结果显示,gdhA基因缺失不影响单增李斯特菌在正常条件下的生长能力。在20 mmol/L H 2O 2条件下,缺失株10403S-ΔgdhA存活能力极显著高于亲本株10403S(P<0.01)。Western blotting结果显示,GdhA兔多克隆抗体制备成功。GFP荧光分析结果显示,glnR基因缺失后,gdhA基因转录水平极显著上调(P<0.01);在氧化应激条件下glnR基因缺失后GdhA蛋白表达水平极显著升高(P<0.01);glnR基因缺失菌株存活能力显著下降(P<0.05)。【结论】谷氨酸脱氢酶编码基因gdhA缺失不影响单增李斯特菌10403S正常生长,但显著提高其氧化应激条件下的存活能力,gdhA基因转录水平及GdhA蛋白表达水平受glnR基因负调控。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 谷氨酸脱氢酶 gdhA基因 氧化应激 glnR基因
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四川黑熊(Ursus thibetanus mupinensis)线粒体NADH脱氢酶亚基1基因(ND1)的序列分析 被引量：9
4
作者 侯万儒 陈瑜 +3 位作者 吴夏 彭正松 周才权 杨军 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期91-96,共6页
以四川境内的四川黑熊(Ursus thibetanus mupinensis)为研究对象,根据已报道的若干物种的NADH脱氢酶亚基1基因(ND1)序列信息设计引物.运用PCR技术从四川黑熊毛囊组织的总DNA中扩增出ND1基因序列.采用GenScan、Blast2·1、ORF finder... 以四川境内的四川黑熊(Ursus thibetanus mupinensis)为研究对象,根据已报道的若干物种的NADH脱氢酶亚基1基因(ND1)序列信息设计引物.运用PCR技术从四川黑熊毛囊组织的总DNA中扩增出ND1基因序列.采用GenScan、Blast2·1、ORF finder和Clustal W等软件分别对DNA序列进行预测、相似性比较、ORF查找以及多序列比对,并利用PredictProtein软件对蛋白质进行预测和结构分析.结果表明;PCR扩增所得DNA序列长度为957bp,包含了ND1基因,其ORF为957bp,编码317个氨基酸,编码蛋白的分子量为35·6×103Da,pI为7·83.四川黑熊的ND1基因序列及其所编码的氨基酸序列与其它熊、浣熊和小熊猫等动物的ND1基因序列和对应的氨基酸序列具有较高的相似性. 展开更多
关键词 四川黑熊 线粒体 脱氢酶亚基1基因 分析
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禾谷镰刀菌醛脱氢酶(ALDH)基因敲除突变体的转录组分析
5
作者 唐磊 翟焕趁 +5 位作者 葛锦雯 张帅兵 吕扬勇 魏闪 马平安 胡元森 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期733-744,共12页
【目的】对野生型PH-1菌株和醛脱氢酶(ALDH)基因FGSG_04194敲除突变体(ΔFg04194)进行转录组测序,分析禾谷镰刀菌ALDH调控菌丝生长和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)生成情况,为深入探究禾谷镰刀菌ALDH的生物学功能、DON生成机制及致病机理提... 【目的】对野生型PH-1菌株和醛脱氢酶(ALDH)基因FGSG_04194敲除突变体(ΔFg04194)进行转录组测序,分析禾谷镰刀菌ALDH调控菌丝生长和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)生成情况,为深入探究禾谷镰刀菌ALDH的生物学功能、DON生成机制及致病机理提供了理论依据。【方法】接种禾谷镰刀菌野生型PH-1、ΔFg04194突变体和基因回补突变体(ΔFg04194-C)菌株至CM培养基和小麦基质中,分析FGSG_04194基因对菌丝生长和DON生成的影响。利用高通量转录组测序技术对野生型PH-1菌株和ΔFg04194突变菌株在CM培养基中培养72 h的菌丝进行转录组测序,对筛选出的差异表达基因(DEGs)进行GO功能注释和KEGG信号通路富集分析,利用实时荧光定量PCR对转录组测序结果进行验证。【结果】ΔFg04194突变体的菌落直径和生成的DON含量较野生型PH-1和ΔFg04194-C突变体菌株显著减少(P<0.05,下同)。野生型PH-1和ΔFg04194突变体转录组原始数据经过滤后获得34.9 Gb Clean data,共鉴定出329个DEGs,其中263个基因表达显著上调,66个基因表达显著下调。GO功能注释结果显示,DEGs显著富集在质膜成分、碳水化合物代谢和物质转运过程等条目上。KEGG信号通路富集分析显示,DEGs显著富集在碳水化合物代谢通路、氨基酸代谢通路、脂质代谢、能量代谢、生物降解代谢通路、细胞生长和死亡相关途径、信号转导途径等。将FGSG_04194基因调控下有代表性的DEGs分成五大类:几丁质合成相关的基因、跨膜转运蛋白相关的基因、转录因子相关基因、脂质代谢相关基因和能量代谢相关的基因。ΔFg04194突变体的ATP含量显著高于野生型PH-1和ΔFg04194-C突变体。运用实时荧光定量PCR检测7个DEGs的表达情况,其结果与转录组测序结果基本一致。【结论】FGSG_04194影响禾谷镰刀菌的菌丝生长和DON生成,并在ATP生成中起负调控作用,其机制可能与调控转录因子的表达、调控脂类代谢、氨基酸代谢和能量代谢等通路有关。 展开更多
关键词 禾谷镰刀菌 醛脱氢酶 转录组测序 差异表达基因
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法尼醇脱氢酶基因在不同单倍型棉蚜中的分化及表达分析
6
作者 杨心怡 张亚玲 +2 位作者 曹雪 季静 张帅 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期844-855,共12页
棉蚜Aphis gossypii Glover种群出现明显分化,表现在生物型间的寄主偏好差异及单倍型间基因组层面分化。为了解棉蚜种群分化过程中激素合成相关基因的演变,选择Hap1和Hap3型棉蚜的法尼醇脱氢酶(HGO)进行分析。根据本实验室发布的两种单... 棉蚜Aphis gossypii Glover种群出现明显分化,表现在生物型间的寄主偏好差异及单倍型间基因组层面分化。为了解棉蚜种群分化过程中激素合成相关基因的演变,选择Hap1和Hap3型棉蚜的法尼醇脱氢酶(HGO)进行分析。根据本实验室发布的两种单倍型棉蚜的基因组信息,在Hap1和Hap3型棉蚜基因组中各鉴定出5个AgosHGO基因,其中4个为重复拷贝,位于常染色体A1,另外1个位于常染色体A2。AgosHGO基因的CDS序列、基因结构在不同单倍型棉蚜间存在变异。在Hap3型棉蚜中,位于A1染色体上AgosHGO基因分布的区域存在一个Gypsy转座子的插入。利用NCBI公共数据已发布的棉蚜SRA数据,分析得到AgosHGO表达量与棉蚜的取食寄主显著相关,但不随体色及温度发生改变;AgosHGO3表达量在啶虫脒处理后显著下调50%;雄蚜成蚜期AgosHGO5表达量较若蚜期有显著上调,达14~20倍。本研究证实HGO基因在Hap1型和Hap3型棉蚜间出现分化,且其表达量能响应自身发育和外界环境变化,研究结果对于揭示棉蚜种群分化过程中激素响应的调控机制,开发基于激素调控的棉蚜生物防治技术具有重要的意义。 展开更多
关键词 棉蚜 种群分化 法尼醇脱氢酶 基因组 序列结构
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儿童琥珀酸脱氢酶缺陷型胃肠间质瘤伴肝转移1例
7
作者 赵丽 赵林胜 +2 位作者 陈静 詹江华 胡晓丽 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期781-782,共2页
患儿,男,6岁,主因间断呕吐伴黑便、乏力2个月入院。体格检查:中度贫血貌,腹平软,未触及明显肿块,肝脏右肋下2 cm, 脾脏肋下未触及。血常规HGB 42 g/L;凝血功能:纤维蛋白原0.998 g/L。腹部MR示邻近肝左叶胃小弯侧实性包块伴较明显强化,... 患儿,男,6岁,主因间断呕吐伴黑便、乏力2个月入院。体格检查:中度贫血貌,腹平软,未触及明显肿块,肝脏右肋下2 cm, 脾脏肋下未触及。血常规HGB 42 g/L;凝血功能:纤维蛋白原0.998 g/L。腹部MR示邻近肝左叶胃小弯侧实性包块伴较明显强化,考虑来源于胃壁(图1)。CT示胃壁小弯侧软组织密度肿块,向胃腔内生长,病变密度较均匀,最大面31.1 mm×18.8 mm;肝实质内可见低密度结节影。 展开更多
关键词 胃肠间质瘤 儿童 琥珀酸脱氢酶 基因检测 免疫组织化学 病例报道
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1-磷酸甘露醇脱氢酶基因转化水稻的研究 被引量：16
8
作者 王慧中 刘俊君 +6 位作者 卢德赵 赵艳 颜美仙 钱前 彭学贤 陈受宜 黄大年 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期6-10,共5页
PCR和 Southern blotting检测表明 ,来自大肠杆菌的 mtl D基因已通过农杆菌介导整合进水稻基因组。mtl D基因在 T1代出现分离 ,T2 代出现纯系。在 0 .75% Na Cl胁迫下 ,7个转基因 T3 代株系都能检测到 mtl D酶活性 ,与对照相比细胞膜的... PCR和 Southern blotting检测表明 ,来自大肠杆菌的 mtl D基因已通过农杆菌介导整合进水稻基因组。mtl D基因在 T1代出现分离 ,T2 代出现纯系。在 0 .75% Na Cl胁迫下 ,7个转基因 T3 代株系都能检测到 mtl D酶活性 ,与对照相比细胞膜的相对电导率和大分子渗漏值明显降低。部分转基因株系能在 1 .0 % Na Cl浓度下正常生长 ,而对照在 0 .5% Na Cl浓度下已不能存活。通过有性杂交途径实现了 mtl D和 gut D两个基因的聚合 ,部分杂交后代株系能在 1 .2 5% Na Cl胁迫下正常生长结实。 展开更多
关键词 水稻 1-磷酸甘露醇脱氢酶基因 6-磷酸山梨醇脱氢酶基因 转基因植株 耐盐性 产量性性 有性杂交 农艺性状
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转甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因小麦的耐盐耐旱性 被引量：33
9
作者 张艳敏 郭北海 +7 位作者 蒋春志 温之雨 丁占生 李辉 李洪杰 何锶洁 陈受宜 朱至清 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期29-32,共4页
采用室内模拟盐、旱胁迫,结合田间实际测定的方法,对基因枪法获得的转BADH基因小麦多个株系的不同世代材料进行了耐盐、耐旱性鉴定。结果表明,在旱、盐胁迫条件下,转BADH基因小麦在种子萌发、幼苗生长、根系发育以及质膜保护等方面均比... 采用室内模拟盐、旱胁迫,结合田间实际测定的方法,对基因枪法获得的转BADH基因小麦多个株系的不同世代材料进行了耐盐、耐旱性鉴定。结果表明,在旱、盐胁迫条件下,转BADH基因小麦在种子萌发、幼苗生长、根系发育以及质膜保护等方面均比受体品种(对照)具有明显的优势;在田间生长条件下的转基因株系,其叶片蒸腾强度比对照明显降低,而离体叶片失水速率与对照没有明显差别。 展开更多
关键词 甜菜碱 醛脱氢酶 BADHA 小麦 转基因 耐盐性 耐旱性
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转甜菜碱醛脱氢酶基因玉米及其耐盐性研究 被引量：23
10
作者 何锶洁 董伟 +3 位作者 李慧芬 谷冬梅 陈受宜 田文忠 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1999年第2期50-52,共3页
构建了一个含有甜菜碱醛脱氢酶基因的表达载体，应用基因枪转化法将其转入玉米，获得了一些转基因植株。根据对目的基因的分子检测和对盐耐性的分析，证明转化的甜菜碱醛脱氢酶基因已整合入玉米染色体组，并且转基因玉米提高了对盐的耐性。
关键词 甜菜碱醛脱氢酶 基因 玉米 耐盐性 转基因玉米
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三角叶滨藜甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因的克隆及序列分析 被引量：26
11
作者 何晓兰 侯喜林 +3 位作者 吴纪中 刘桂华 钦佩 朱卫民 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期15-19,共5页
以藜科植物山菠菜甜菜碱醛脱氢酶 (BADH)基因的保守区设计引物 ,通过RT PCR技术 ,从三角叶滨藜cDNA中分离了两个BADH基因片段BADH3 和BADH5,并利用巢式PCR、cRACE以及 3′ RACE获得全长BADH3 。测序结果表明 ,BADH3 和BADH5之间的核苷... 以藜科植物山菠菜甜菜碱醛脱氢酶 (BADH)基因的保守区设计引物 ,通过RT PCR技术 ,从三角叶滨藜cDNA中分离了两个BADH基因片段BADH3 和BADH5,并利用巢式PCR、cRACE以及 3′ RACE获得全长BADH3 。测序结果表明 ,BADH3 和BADH5之间的核苷酸同源性为 81 % ,其推测的氨基酸序列同源性 80 %。全长BADH3 核苷酸序列长 1 81 5bp ,79～ 1 5 78bp为一个开放阅读框架 ,推测的氨基酸序列全长 5 0 0个氨基酸残基 ,相对分子质量为 5 4 70 0 ,pI为 5 5。其核苷酸序列和推测的氨基酸序列与山菠菜同源性分别为 95 %和 93%。由三角叶滨藜 3′端部分BADH基因的克隆gBADH1 和gBADH2 推测的外显子序列分别与BADH5和BADH3 完全一致 ,且gBADH1 和gBADH2 的内含子插入位置和大小有较大差异。表明三角叶滨藜BADH基因是一个多基因家族 ,至少存在 展开更多
关键词 三角叶滨藜 甜菜碱醛脱氢酶 基因克隆 序列分析 RT-PCR技术
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梭梭甜菜碱醛脱氢酶基因克隆及序列分析 被引量：15
12
作者 石磊 甘晓燕 +3 位作者 陈虞超 陈晓军 李苗 宋玉霞 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期223-228,共6页
采用RT-PCR、RACE等方法从超旱生、耐盐植物梭梭(Haloxylon ammodendron)中扩增出BADH基因的cDNA序列(命名为HaBADH),其开放阅读框为1 503 bp,推测的氨基酸序列全长为500个氨基酸残基,并含有醛脱氢酶所具有的高度保守的十肽(VTLELGGKSP... 采用RT-PCR、RACE等方法从超旱生、耐盐植物梭梭(Haloxylon ammodendron)中扩增出BADH基因的cDNA序列(命名为HaBADH),其开放阅读框为1 503 bp,推测的氨基酸序列全长为500个氨基酸残基,并含有醛脱氢酶所具有的高度保守的十肽(VTLELGGKSP)以及与酶功能有关的半胱氨酸残基(C)。其核苷酸序列与藜科几种盐生植物如盐爪爪(Kalidium foliatum)、中亚滨藜(Atriplex centralasiatica)、三角叶滨藜(Atriplex triangu-laris)、菠菜(Spinacia oleracea)、山菠菜(Atriplex hortensis)和甜菜(Beta vulgaris)等的相似性均在85%以上,推导编码蛋白的氨基酸序列一致性均在87%以上,表明BADH基因在藜科植物中是一种比较保守的基因。研究结果为进一步从分子水平探明梭梭的抗旱、耐盐机制,挖掘并利用植物抗逆基因奠定基础。 展开更多
关键词 梭梭 甜菜碱醛脱氢酶 基因克隆 序列分析
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甲酸脱氢酶基因在大肠杆菌Rosetta中的高效表达 被引量：13
13
作者 徐娴 贾红华 +1 位作者 何冰芳 韦萍 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期5-8,共4页
甲酸脱氢酶是氧化还原酶辅酶NAD(P)^+和NAD(P)H再生循环体系中的关键酶。实验中,用PCR方法扩增了假丝酵母Candida boidinii中甲酸脱氢酶基因(fdh),分别构建了诱导型表达载体pUC-dh和pET- fdh,以E.coli Rosetta为表达宿主,获得了能够高... 甲酸脱氢酶是氧化还原酶辅酶NAD(P)^+和NAD(P)H再生循环体系中的关键酶。实验中,用PCR方法扩增了假丝酵母Candida boidinii中甲酸脱氢酶基因(fdh),分别构建了诱导型表达载体pUC-dh和pET- fdh,以E.coli Rosetta为表达宿主,获得了能够高效表达甲酸脱氢酶的重组菌。经诱导后重组菌Rosetta/pET- fdh的FDH比酶活为0.399U/mg(蛋白),Rosetta/pUC-fdh的FDH比酶活为0.163U/mg(蛋白)。经SDS- PAGE分析,Rosetta/pET-fdh和Rosetta/pUC-fdh表达的FDH蛋白分别占菌体可溶性总蛋白的17%和10%,实现了fdh基因在Rosetta中的高效表达。研究中所构建的重组菌为氧化还原反应中的辅酶再生奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 辅酶再生 甲酸脱氢酶 甲酸脱氢酶基因 高效表达
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盐胁迫下转甜菜碱醛脱氢酶基因水稻幼苗耐盐生理的研究 被引量：21
14
作者 孙耀中 东方阳 +3 位作者 陈受宜 杨晓玲 刘永军 郭学民 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2004年第3期38-42,共5页
在NaCl浓度0,3.0,5.0,7.0 g／L下,对转甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因水稻的两个品系51-22,52-7及其受体亲本中花8号进行幼苗耐盐性试验。结果表明:转.BADH基因水稻比其受体亲本耐盐性强,在高NaCl浓度(5.0,7.0 g／L)胁迫下,甜菜碱醛脱氢酶基... 在NaCl浓度0,3.0,5.0,7.0 g／L下,对转甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因水稻的两个品系51-22,52-7及其受体亲本中花8号进行幼苗耐盐性试验。结果表明:转.BADH基因水稻比其受体亲本耐盐性强,在高NaCl浓度(5.0,7.0 g／L)胁迫下,甜菜碱醛脱氢酶基因可以提高盐胁迫下水稻幼苗过氧化氢酶(CAT)活性,提高根系活力和叶绿素含量,稳定细胞膜的透性,降低植株体内Na+的积累,从而减轻幼苗受盐害的程度。盐胁迫下水稻幼苗的CAT活性、SNa+／K+、叶Na+／K+、叶绿素含量是影响幼苗生长的主要生理指标。 展开更多
关键词 盐胁迫 甜菜碱醛脱氢酶基因 转基因水稻 幼苗 耐盐生理
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草莓ζ-胡萝卜素脱氢酶基因ZDS的克隆及特征分析 被引量：17
15
作者 李永平 朱海生 +2 位作者 温庆放 花秀凤 林珲 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期670-674,共5页
用RT-PCR和RACE技术从草莓(Fragaria ananassa Duchesne)果实中克隆到ζ-胡萝卜素脱氢酶基因ZDS,命名为FaZDS,其cDNA全长2148 bp,具有1个1710 bp的完整开放阅读框(ORF),编码569个氨基酸。序列分析表明,FaZDS编码的氨基酸序列与其它植物... 用RT-PCR和RACE技术从草莓(Fragaria ananassa Duchesne)果实中克隆到ζ-胡萝卜素脱氢酶基因ZDS,命名为FaZDS,其cDNA全长2148 bp,具有1个1710 bp的完整开放阅读框(ORF),编码569个氨基酸。序列分析表明,FaZDS编码的氨基酸序列与其它植物的ZDS蛋白有很高的相似性。系统进化树分析表明,草莓与苹果的ZDS蛋白亲缘关系较近。原核表达结果表明FaZDS基因在大肠杆菌中能高效表达。用半定量RT-PCR技术进行组织表达模式分析表明,FaZDS基因在草莓的花、叶片和果实中均有表达,表达量为花>红果>粉红果>白果>青果>叶。 展开更多
关键词 草莓 ζ-胡萝卜素脱氢酶 FaZDS基因 基因克隆
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植物肉桂醇脱氢酶及其基因研究进展 被引量：20
16
作者 张鲁斌 谷会 +1 位作者 弓德强 常金梅 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期204-211,共8页
肉桂醇脱氢酶(cinnamyl alcohol dehydrogenase,CAD)作为植物次生代谢特别是木质素合成的关键酶,与植物生长发育和抵御病原菌入侵关系密切,研究CAD基因表达调控及其与组织木质化的关系具有重要的植物生理学意义.该文综述了植物CAD的蛋... 肉桂醇脱氢酶(cinnamyl alcohol dehydrogenase,CAD)作为植物次生代谢特别是木质素合成的关键酶,与植物生长发育和抵御病原菌入侵关系密切,研究CAD基因表达调控及其与组织木质化的关系具有重要的植物生理学意义.该文综述了植物CAD的蛋白特征、酶学性质、基因分布和分类、基因结构和表达调控以及CAD表达与木质素合成的关系,为研究CAD在植物生长发育和抗病中的作用提供理论指导. 展开更多
关键词 肉桂醇脱氢酶 木质素 基因家族 表达调控
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六个甘蓝型油菜油酸脱氢酶(FAD2)假基因的克隆和分析 被引量：12
17
作者 肖钢 张振乾 +2 位作者 邬贤梦 谭太龙 官春云 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期435-441,共7页
以甘蓝型油菜湘油15为材料,采用PCR方法克隆并分析了56个FAD2基因克隆和47个FAD2基因cDNA克隆,从中发现6个新的FAD2拷贝。它们与公布的甘蓝型油菜FAD2基因(AY577313)具有87.0%以上的同源性,没有内含子,在开放阅读框中存在1～12个终止密... 以甘蓝型油菜湘油15为材料,采用PCR方法克隆并分析了56个FAD2基因克隆和47个FAD2基因cDNA克隆,从中发现6个新的FAD2拷贝。它们与公布的甘蓝型油菜FAD2基因(AY577313)具有87.0%以上的同源性,没有内含子,在开放阅读框中存在1～12个终止密码子,其中有2个拷贝具有转录功能。将这6个FAD2拷贝在酿酒酵母中进行体内表达实验,通过气相色谱检测脂肪酸组成证明其不具备油酸脱氢酶功能,与对照相比,也没有改变酵母体内脂肪酸组成。由此推测这6个FAD2拷贝为假基因。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 油酸脱氢酶 FAD2 基因表达 酿酒酵母
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冠心病合并糖尿病患者乙醛脱氢酶2基因多态性与高血压的关系 被引量：12
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作者 王洪巨 潘强强 +4 位作者 高琴 康品方 李妙男 何培宝 汤阳 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期542-545,562,共5页
目的探讨皖北地区冠心病合并糖尿病患者乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因多态性与高血压的相关性。方法筛选出皖北地区167例冠心病合并糖尿病患者为研究对象,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)分析ALDH2基因G487A多态性。按... 目的探讨皖北地区冠心病合并糖尿病患者乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因多态性与高血压的相关性。方法筛选出皖北地区167例冠心病合并糖尿病患者为研究对象,应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)分析ALDH2基因G487A多态性。按照ALDH2基因型分为2组:野生型组(n=105)和突变型组(n=62),比较两组间高血压的患病率、高血压的危险因素以及收缩压、舒张压、脉压等指标的差异。结果冠心病合并糖尿病患者ALDH2基因突变型组高血压发生率高于野生型组(P<0.05);两组之间收缩压、脉压差明显大于野生型组,舒张压无明显差异。Logistic回归分析显示,ALDH2基因突变型增加了高血压的发生机率,与高胰岛素水平、胰岛素抵抗发挥协同作用。结论 ALDH2基因的突变与高血压存在相关性;携带A等位基因可能使冠心病合并糖尿病患者高血压发生的危险性增加。 展开更多
关键词 乙醛脱氢酶2 基因多态性 高血压 糖尿病
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盐生植物盐节木甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆及表达 被引量：11
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作者 高天鹏 王春燕 +4 位作者 徐红伟 孙海丽 张鸣 张庆 石晓妮 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期317-324,338,共9页
采用RT-PCR、RACE技术从盐生植物盐节木(Halocnermum strobilaceum(Pall.)Bieb.)中克隆得到BADH基因的cDNA序列(命名为HsBADH),3'RACE和5'RACE测序结果用DNA Man软件拼接获得了1 849 bp全长的HsBADH cDNA序列(GenBank登录号:JN9... 采用RT-PCR、RACE技术从盐生植物盐节木(Halocnermum strobilaceum(Pall.)Bieb.)中克隆得到BADH基因的cDNA序列(命名为HsBADH),3'RACE和5'RACE测序结果用DNA Man软件拼接获得了1 849 bp全长的HsBADH cDNA序列(GenBank登录号:JN969894)。其开放阅读框为1 503 bp,推测编码501个氨基酸残基,并含有高度保守的十肽基序(VTLELGGKSP)和与酶功能有关的醛脱氢酶Cys残基。其核苷酸序列与几种藜科植物如梭梭、白梭梭、盐穗木、碱蓬、滨藜、菠菜、山菠菜的同源性为86%,与甜土植物水稻的同源性为66%。氨基酸序列与以上两类植物(盐生植物和甜土植物)的同源性比对分别为89%和70%,说明BADH基因在藜科盐生植物中是一种较高保守的基因。用不同浓度的NaCl胁迫处理盐节木植株,BADH mRNA的表达水平比对照植株高,说明盐节木BADH基因的表达受盐诱导,进一步说明甜菜碱醛脱氢酶催化合成的甜菜碱作为渗透调节的小分子物质,它的积累与盐胁迫存在紧密关联,本研究为进一步从生理和分子水平阐明盐节木的适应盐渍化生境的机制提供一定的参考。 展开更多
关键词 盐节木 甜菜碱醛脱氢酶 基因克隆 表达分析
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转甜菜碱醛脱氢酶基因提高烟草抗旱及耐盐性 被引量：19
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作者 司怀军 张宁 王蒂 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1335-1339,共5页
将甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因与组成型启动子CaMV35S启动子融合,构建了植物表达质粒pBIBB。通过根癌农杆菌介导将BADH基因导入烟草,经PCR、Southern杂交、Northern杂交证明BADH基因已整合到烟草基因组中并在转基因植株中转录和表达。测... 将甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因与组成型启动子CaMV35S启动子融合,构建了植物表达质粒pBIBB。通过根癌农杆菌介导将BADH基因导入烟草,经PCR、Southern杂交、Northern杂交证明BADH基因已整合到烟草基因组中并在转基因植株中转录和表达。测定转基因植株叶片中甜菜碱醛脱氢酶活性,结果显示对照植株没有BADH酶活性,转基因植株的各个株系间甜菜碱醛脱氢酶比活力差异较大,范围在0.1～1.0Umg-1间。转BADH基因的烟草在盐胁迫和聚乙二醇(PEG)胁迫条件下生长状态良好,生长势强于未转基因植株,说明BADH基因能在异源植物中正常翻译、表达和用于植物抗旱、耐盐基因工程的研究。 展开更多
关键词 甜菜碱醛脱氢酶基因 烟草 转化 抗旱 耐盐
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