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牦牛胃溶菌酶抗小鼠腹泻的研究
被引量：
1
1
作者
杨杜基
袁小迪
+5 位作者
李飙
张雨寒
孙鸿炜
刘益丽
袁国荣
江明锋
《动物营养学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第3期1952-1963,共12页
本研究采用PichiaPink^(TM)毕赤酵母表达系统对牦牛胃溶菌酶进行异源表达,以探索提高重组牦牛胃溶菌酶表达量的方法以及重组牦牛胃溶菌酶对大肠杆菌O111所致小鼠腹泻的治疗作用。试验选取10只体重相近的无特定病原体昆明小鼠,用大肠杆菌...
本研究采用PichiaPink^(TM)毕赤酵母表达系统对牦牛胃溶菌酶进行异源表达,以探索提高重组牦牛胃溶菌酶表达量的方法以及重组牦牛胃溶菌酶对大肠杆菌O111所致小鼠腹泻的治疗作用。试验选取10只体重相近的无特定病原体昆明小鼠,用大肠杆菌O111建立小鼠腹泻模型;建模成功后取30只小鼠随机分为6组,每组5只,设对照组、腹泻模型组、牦牛胃溶菌酶组、重组牦牛胃溶菌酶组、抗生素治疗组、溶菌酶产品治疗组,除对照组和腹泻模型组外其余各组灌胃给药,记录小鼠采食量及体重;第4天采血后全部扑杀,取小鼠十二指肠组织制切片做形态学观察;取肠道内容物进行肠道菌群Alpha和Beta多样性分析。结果表明:重组牦牛胃溶菌酶在诱导96 h时表达量最高,分子质量约为15.6 ku,比活性为1428.58 U/mg。攻毒后腹泻模型组、溶菌酶产品治疗组与对照组相比采食量显著降低(P<0.05);腹泻模型组与对照组相比,白细胞数、淋巴细胞数和中性粒细胞数均有极显著升高(P<0.01);十二指肠病理解剖观察发现,牦牛胃溶菌酶组肠道绒毛有所增长且厚度增加;重组牦牛胃溶菌酶组肠绒毛有所恢复。Alpha多样性分析发现,牦牛胃溶菌酶组的Simpson指数与对照组相比显著增加(P<0.05);腹泻模型组的变形菌门和弯曲杆菌门相对丰度显著增加(P<0.05);重组牦牛胃溶菌酶组和牦牛胃溶菌酶组的厚壁菌门和拟杆菌门相对丰度有所增加。本研究表明,牦牛胃溶菌酶对大肠杆菌引起的腹泻有较好的治疗效果。由于牦牛胃溶菌酶具备较强抗胃蛋白酶能力,其原酶及重组酶在饲料添加剂以及在食品加工和医疗卫生等领域具有一定的应用潜力。
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关键词
牦牛
胃溶菌酶
PichiaPinkTM毕赤酵母表达系统
重组牦牛
溶
菌
酶
肠道
菌
群
小鼠腹泻
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职称材料
反刍动物胃溶菌酶的研究进展
被引量：
10
2
作者
邓霄禹
胡明军
江明锋
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012年第9期143-147,共5页
反刍动物胃溶菌酶与其他溶菌酶相比,能在其他溶菌酶无活性或活性较低的胃中(含有胃蛋白酶和胃酸)保持较高的溶菌能力。作者从反刍动物胃溶菌酶的理化性质、酶活性影响因素、进化等方面综合介绍了反刍动物胃溶菌酶的部分特性,并对其应用...
反刍动物胃溶菌酶与其他溶菌酶相比,能在其他溶菌酶无活性或活性较低的胃中(含有胃蛋白酶和胃酸)保持较高的溶菌能力。作者从反刍动物胃溶菌酶的理化性质、酶活性影响因素、进化等方面综合介绍了反刍动物胃溶菌酶的部分特性,并对其应用前景作出展望。
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关键词
反刍动物
胃溶菌酶
特性
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职称材料
牦牛胃溶菌酶在解脂耶氏酵母中的重组表达及性质研究
3
作者
冉嫆
刘毓均
+1 位作者
夏果
江明锋
《饲料工业》
北大核心
2021年第1期53-58,共6页
研究牦牛胃溶菌酶基因(yak stomach lysozyme gene, ys LYZ)在解脂耶氏酵母中的异源表达、分离纯化及抗菌机制。通过人工合成构建p INA1297-ys LYZ,转化至宿主解脂耶氏酵母(Polh)菌株,分别培养24、48、72 h及96 h。发酵上清液经纯化后...
研究牦牛胃溶菌酶基因(yak stomach lysozyme gene, ys LYZ)在解脂耶氏酵母中的异源表达、分离纯化及抗菌机制。通过人工合成构建p INA1297-ys LYZ,转化至宿主解脂耶氏酵母(Polh)菌株,分别培养24、48、72 h及96 h。发酵上清液经纯化后得到重组牦牛胃溶菌酶(recombinant yakstomach lysozyme, rys LYZ)。通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate poly-acrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)检测rys LYZ的分子量,用检测试剂盒测定其比活,通过电镜观测其对金黄色葡萄球菌的作用,并对rys LYZ在模拟猪胃液中的降解情况进行了观察。结果表明:rys LYZ的分子量为15 k Da,其表达量在培养72 h时最高,纯化后比活为1 855.42 U/mg。电镜下观察到rys LYZ作用金黄色葡萄球菌后,菌体出现孔洞,最终崩解。在模拟猪胃液中,rys LYZ可在胃蛋白酶作用4 h后仍保持部分完整,表明其具有优良的抗胃蛋白酶能力。本研究得到的rys LYZ能够在酸性环境中保持高酶活,主要通过破坏细菌胞壁发挥抑菌作用,并能有效抵抗胃蛋白酶的降解。
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关键词
胃溶菌酶
解脂耶氏酵母
异源表达
纯化
作用机理
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职称材料
题名
牦牛胃溶菌酶抗小鼠腹泻的研究
被引量：
1
1
作者
杨杜基
袁小迪
李飙
张雨寒
孙鸿炜
刘益丽
袁国荣
江明锋
机构
西南民族大学畜牧兽医学院
茂县科学技术和农业畜牧局
出处
《动物营养学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第3期1952-1963,共12页
基金
四川省科技计划项目(2023YFQ0076)
四川省重点研发项目(2021YFN0001)
四川省科技计划项目(2021YFYZ0001)。
文摘
本研究采用PichiaPink^(TM)毕赤酵母表达系统对牦牛胃溶菌酶进行异源表达,以探索提高重组牦牛胃溶菌酶表达量的方法以及重组牦牛胃溶菌酶对大肠杆菌O111所致小鼠腹泻的治疗作用。试验选取10只体重相近的无特定病原体昆明小鼠,用大肠杆菌O111建立小鼠腹泻模型;建模成功后取30只小鼠随机分为6组,每组5只,设对照组、腹泻模型组、牦牛胃溶菌酶组、重组牦牛胃溶菌酶组、抗生素治疗组、溶菌酶产品治疗组,除对照组和腹泻模型组外其余各组灌胃给药,记录小鼠采食量及体重;第4天采血后全部扑杀,取小鼠十二指肠组织制切片做形态学观察;取肠道内容物进行肠道菌群Alpha和Beta多样性分析。结果表明:重组牦牛胃溶菌酶在诱导96 h时表达量最高,分子质量约为15.6 ku,比活性为1428.58 U/mg。攻毒后腹泻模型组、溶菌酶产品治疗组与对照组相比采食量显著降低(P<0.05);腹泻模型组与对照组相比,白细胞数、淋巴细胞数和中性粒细胞数均有极显著升高(P<0.01);十二指肠病理解剖观察发现,牦牛胃溶菌酶组肠道绒毛有所增长且厚度增加;重组牦牛胃溶菌酶组肠绒毛有所恢复。Alpha多样性分析发现,牦牛胃溶菌酶组的Simpson指数与对照组相比显著增加(P<0.05);腹泻模型组的变形菌门和弯曲杆菌门相对丰度显著增加(P<0.05);重组牦牛胃溶菌酶组和牦牛胃溶菌酶组的厚壁菌门和拟杆菌门相对丰度有所增加。本研究表明,牦牛胃溶菌酶对大肠杆菌引起的腹泻有较好的治疗效果。由于牦牛胃溶菌酶具备较强抗胃蛋白酶能力,其原酶及重组酶在饲料添加剂以及在食品加工和医疗卫生等领域具有一定的应用潜力。
关键词
牦牛
胃溶菌酶
PichiaPinkTM毕赤酵母表达系统
重组牦牛
溶
菌
酶
肠道
菌
群
小鼠腹泻
Keywords
yak stomach lysozyme
PichiaPinkTM Pichia pastoris expression system
recombinant yak stomach lysozyme
intestinal flora
mice diarrhea
分类号
S816 [农业科学—饲料科学]
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职称材料
题名
反刍动物胃溶菌酶的研究进展
被引量：
10
2
作者
邓霄禹
胡明军
江明锋
机构
动物遗传育种学国家民委-教育部重点实验室
西南民族大学生命科学与技术学院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012年第9期143-147,共5页
基金
中央高校基本科研业务费专项资金(10NZYZJ01)
新津县科技局科研项目(2011-2)
文摘
反刍动物胃溶菌酶与其他溶菌酶相比,能在其他溶菌酶无活性或活性较低的胃中(含有胃蛋白酶和胃酸)保持较高的溶菌能力。作者从反刍动物胃溶菌酶的理化性质、酶活性影响因素、进化等方面综合介绍了反刍动物胃溶菌酶的部分特性,并对其应用前景作出展望。
关键词
反刍动物
胃溶菌酶
特性
Keywords
ruminants
stomach lysozyme
feature
分类号
Q556 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
牦牛胃溶菌酶在解脂耶氏酵母中的重组表达及性质研究
3
作者
冉嫆
刘毓均
夏果
江明锋
机构
西南民族大学青藏高原研究院
西南民族大学畜牧兽医学院
出处
《饲料工业》
北大核心
2021年第1期53-58,共6页
基金
西南民族大学研究生创新型科研硕士重点项目[CX2019SZ68]。
文摘
研究牦牛胃溶菌酶基因(yak stomach lysozyme gene, ys LYZ)在解脂耶氏酵母中的异源表达、分离纯化及抗菌机制。通过人工合成构建p INA1297-ys LYZ,转化至宿主解脂耶氏酵母(Polh)菌株,分别培养24、48、72 h及96 h。发酵上清液经纯化后得到重组牦牛胃溶菌酶(recombinant yakstomach lysozyme, rys LYZ)。通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate poly-acrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)检测rys LYZ的分子量,用检测试剂盒测定其比活,通过电镜观测其对金黄色葡萄球菌的作用,并对rys LYZ在模拟猪胃液中的降解情况进行了观察。结果表明:rys LYZ的分子量为15 k Da,其表达量在培养72 h时最高,纯化后比活为1 855.42 U/mg。电镜下观察到rys LYZ作用金黄色葡萄球菌后,菌体出现孔洞,最终崩解。在模拟猪胃液中,rys LYZ可在胃蛋白酶作用4 h后仍保持部分完整,表明其具有优良的抗胃蛋白酶能力。本研究得到的rys LYZ能够在酸性环境中保持高酶活,主要通过破坏细菌胞壁发挥抑菌作用,并能有效抵抗胃蛋白酶的降解。
关键词
胃溶菌酶
解脂耶氏酵母
异源表达
纯化
作用机理
Keywords
yak stomach lysozyme
Yarrowia lipolytica
heterologous expression
purification
mechanism of action
分类号
S816.3 [农业科学—饲料科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牦牛胃溶菌酶抗小鼠腹泻的研究
杨杜基
袁小迪
李飙
张雨寒
孙鸿炜
刘益丽
袁国荣
江明锋
《动物营养学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
反刍动物胃溶菌酶的研究进展
邓霄禹
胡明军
江明锋
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2012
10
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
牦牛胃溶菌酶在解脂耶氏酵母中的重组表达及性质研究
冉嫆
刘毓均
夏果
江明锋
《饲料工业》
北大核心
2021
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