目的:观察肿瘤坏死因子α诱导蛋白2(TNF-α-induced protein 2,TNFAIP2)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达以及对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法:RT-PCR检测NSCLC中TNFAIP2 m RNA表达情况;免疫组...目的:观察肿瘤坏死因子α诱导蛋白2(TNF-α-induced protein 2,TNFAIP2)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达以及对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法:RT-PCR检测NSCLC中TNFAIP2 m RNA表达情况;免疫组化检测NSCLC中TNFAIP2蛋白表达情况。构建TNFAIP2基因短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰慢病毒载体(shRNA-TNFAIP2)和阴性对照慢病毒载体(shRNA-NC)分别感染H1299细胞后采用RT-PCR和Western blot检测感染效率。用Transwell实验检测细胞的迁移、侵袭能力;用CCK-8检测细胞的增殖能力;用流式细胞术检测细胞的凋亡能力;用Western blot检测细胞蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达的变化。结果:TNFAIP2 m RNA和蛋白质在NSCLC癌组织中的表达明显高于癌旁组织中的表达。慢病毒下调TNFAIP2表达后,shRNA-TNFAIP2组细胞迁移数(170±11)较shRNA-NC组(329±31)明显减少(P=0.001);侵袭细胞数(75±10)较shRNA-NC组(135±8)明显减少(P=0.001)。CCK-8结果提示,shRNATNFAIP2组的吸光度值明显低于shRNA-NC组(P=0.000);流式细胞术结果显示,shRNA-TNFAIP2组的凋亡率(18.730±0.490)%明显高于shRNA-NC组(6.570±0.870)%(P=0.000);Western blot结果显示,shRNA-TNFAIP2组较shRNA-NC组细胞蛋白N-cadherin、Vimentin表达降低,E-cadherin表达增加。结论:TNFAIP2在NSCLC中存在高表达,下调能够抑制细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡,逆转上皮间质转化。展开更多
文摘目的:观察肿瘤坏死因子α诱导蛋白2(TNF-α-induced protein 2,TNFAIP2)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达以及对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法:RT-PCR检测NSCLC中TNFAIP2 m RNA表达情况;免疫组化检测NSCLC中TNFAIP2蛋白表达情况。构建TNFAIP2基因短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰慢病毒载体(shRNA-TNFAIP2)和阴性对照慢病毒载体(shRNA-NC)分别感染H1299细胞后采用RT-PCR和Western blot检测感染效率。用Transwell实验检测细胞的迁移、侵袭能力;用CCK-8检测细胞的增殖能力;用流式细胞术检测细胞的凋亡能力;用Western blot检测细胞蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达的变化。结果:TNFAIP2 m RNA和蛋白质在NSCLC癌组织中的表达明显高于癌旁组织中的表达。慢病毒下调TNFAIP2表达后,shRNA-TNFAIP2组细胞迁移数(170±11)较shRNA-NC组(329±31)明显减少(P=0.001);侵袭细胞数(75±10)较shRNA-NC组(135±8)明显减少(P=0.001)。CCK-8结果提示,shRNATNFAIP2组的吸光度值明显低于shRNA-NC组(P=0.000);流式细胞术结果显示,shRNA-TNFAIP2组的凋亡率(18.730±0.490)%明显高于shRNA-NC组(6.570±0.870)%(P=0.000);Western blot结果显示,shRNA-TNFAIP2组较shRNA-NC组细胞蛋白N-cadherin、Vimentin表达降低,E-cadherin表达增加。结论:TNFAIP2在NSCLC中存在高表达,下调能够抑制细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡,逆转上皮间质转化。
