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病理性损伤因素对肾小管上皮细胞表型转化的影响 被引量:4
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作者 李玲 邹万忠 +2 位作者 张波 王盛兰 郭华 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期12-17,共6页
目的 :观察低血清、高糖、高蛋白刺激下肾小管上皮细胞向间叶性细胞的表型转化 ,探讨损伤的肾小管上皮细胞在肾小管间质纤维化中的作用。方法 :以体外培养的人近端肾小管上皮细胞为对象 ,分别用含低血清(0 .2mol·L-1小牛血清 )、... 目的 :观察低血清、高糖、高蛋白刺激下肾小管上皮细胞向间叶性细胞的表型转化 ,探讨损伤的肾小管上皮细胞在肾小管间质纤维化中的作用。方法 :以体外培养的人近端肾小管上皮细胞为对象 ,分别用含低血清(0 .2mol·L-1小牛血清 )、高葡萄糖 (4.5 g·L-1)、高白蛋白 (15 g·L-1)的培养液培养 7d ,透射电镜检测细胞形态变化 ;免疫组化和Westernblot检测细胞表型改变 ,包括CK、Vimentin、α SMA、Ⅰ和Ⅲ型胶原 ,原位杂交检测Ⅰ型胶原mRNA表达 ,同时检测细胞TGFβ1蛋白表达。 结果 :低血清、高糖、高蛋白直接刺激下 ,肾小管上皮细胞出现明显形态学改变 ,包括细胞变为长梭形 ;透射电镜下细胞内线粒体明显减少 ,粗面内质网明显增加 ,并出现actin样微丝。免疫组化染色和Westernblot显示CK表达明显减弱 ,Vimentin、Ⅰ、Ⅲ型胶原、α SMA和TGFβ1表达增强。原位杂交显示Ⅰ型胶原mRNA表达增强。结论 :低血清、高糖、高蛋白可直接引起人近端肾小管上皮细胞TGFβ1表达增加 。 展开更多
关键词 肾小管 病理生理学 上皮细胞 代谢 纤维变性 表型转化
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IL-18对肾小管上皮细胞表型转化的影响 被引量:1
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作者 姚翠微 梁东 +2 位作者 刘华锋 唐德燊 陈孝文 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期364-367,共4页
目的:研究IL-18对体外培养肾小管上皮细胞表型转化的影响,以明确IL-18在慢性肾脏疾病中的可能作用机制。方法:应用体外细胞培养技术培养人肾小管上皮细胞株(HK2)。应用RTPCR技术检测α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、转化生长因子β1(TGFβ1)m... 目的:研究IL-18对体外培养肾小管上皮细胞表型转化的影响,以明确IL-18在慢性肾脏疾病中的可能作用机制。方法:应用体外细胞培养技术培养人肾小管上皮细胞株(HK2)。应用RTPCR技术检测α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA水平,用免疫细胞化学方法(ICC)及Westernblot技术分别检测IL18对HK2细胞表达αSMA蛋白的影响。结果:(1)IL-18可促进HK2细胞表达αSMA、TGFβ1mRNA,且两者之间呈正相关(P<0.05)。(2)IL18增加αSMA阳性HK2细胞百分数(P<0.05)。(3)IL18使HK2细胞αSMA蛋白表达水平增加。结论:IL-18可剂量和时间依赖性地促进肾小管上皮细胞转分化为肌成纤维细胞,促进肾间质纤维化。 展开更多
关键词 细胞介素18 小管上皮细胞 转分化 Α-平滑肌肌动蛋白 转化生长因子-β1
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HBV基因转染对肾小管上皮细胞凋亡及表型转化的影响
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作者 宋新文 盛云建 +1 位作者 车晓玲 邓存良 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期54-55,共2页
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染人体后不仅引起肝脏功能和结构的改变,还可引起肝外多种脏器损伤,其中乙型肝炎病毒相关性肾炎(hepa-titis B virus associated glomerulonephritis,HBV-GN)最受人们关注。但其发病机制... 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染人体后不仅引起肝脏功能和结构的改变,还可引起肝外多种脏器损伤,其中乙型肝炎病毒相关性肾炎(hepa-titis B virus associated glomerulonephritis,HBV-GN)最受人们关注。但其发病机制尚不清楚。研究发现肾小管间质纤维化在肾脏病变中有重要意义。我们前期研究发现慢性乙型肝炎患者TGF—β1水平升高, 展开更多
关键词 小管上皮细胞 乙型肝炎病毒 转染 凋亡 表型转化
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丹酚酸B对高糖诱导的肾小球系膜细胞表型转化及细胞外基质分泌的影响 被引量:10
4
作者 朱元美 尹步金 +4 位作者 张旭 唐保露 程宇鹏 杨解人 郑书国 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期248-252,共5页
目的:研究丹酚酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞表型转化及细胞外基质分泌的影响及其机制。方法:培养人肾小球系膜细胞(HGMCs),随机分为正常对照组、高糖组及高糖+丹酚酸B高、中、低剂量组,高糖组和丹酚酸B各组用含高浓度(33.3 mmol/L)葡... 目的:研究丹酚酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞表型转化及细胞外基质分泌的影响及其机制。方法:培养人肾小球系膜细胞(HGMCs),随机分为正常对照组、高糖组及高糖+丹酚酸B高、中、低剂量组,高糖组和丹酚酸B各组用含高浓度(33.3 mmol/L)葡萄糖的培养基培养72 h,丹酚酸B各组同时加人相应浓度丹酚酸B共同孵育。Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平,ELISA法检测细胞Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)、纤维连接蛋白(FN)和层粘连蛋白(LN)的分泌水平,Western blot法检测转化生长因子β1(TGF-β1)的表达及Smad2和p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的磷酸化水平。结果:高糖孵育72 h后,肾小球系膜细胞α-SMA的蛋白表达水平明显升高,ColⅠ、ColⅢ、FN及LN蛋白的分泌水平显著增加(P <0.01),TGF-β1的表达及Smad2、p38 MAPK的磷酸化水平也明显升高(P <0.01);与丹酚酸B共同孵育可明显降低α-SMA蛋白的表达水平,ColⅠ、ColⅢ、FN和LN的分泌明显减少,TGF-β1的表达及Smad2、p38 MAPK的磷酸化水平显著下降(P <0.01或P <0.05)。结论:丹酚酸B可明显抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞表型转化,减少ColⅠ和ColⅢ等细胞外基质分泌,其机制与抑制TGF-β1/Smad信号通路及p38 MAPK活化有关。 展开更多
关键词 丹酚酸B 糖尿病 肾小球系膜细胞 表型转化 细胞外基质
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IL-8通过激活PKC/ERK信号通路促进肾癌细胞上皮细胞-间质细胞转化 被引量:7
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作者 毕良宽 林天歆 +6 位作者 许可慰 韩金利 黄海 张彩霞 董文 刘皓 黄健 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第10期981-986,共6页
上皮细胞-间质细胞转化(EMT)在肿瘤转移方面起着非常重要的作用.肾癌发生EMT的具体分子机制尚不清楚.IL-8是一个重要的炎症趋化因子,研究表明肾癌细胞可以分泌IL-8,但IL-8是否参与肾癌细胞EMT的调节目前尚无报道.我们研究发现,IL-8可以... 上皮细胞-间质细胞转化(EMT)在肿瘤转移方面起着非常重要的作用.肾癌发生EMT的具体分子机制尚不清楚.IL-8是一个重要的炎症趋化因子,研究表明肾癌细胞可以分泌IL-8,但IL-8是否参与肾癌细胞EMT的调节目前尚无报道.我们研究发现,IL-8可以促进肾癌细胞形态发生间质化改变,IL-8刺激后E-钙黏蛋白表达水平下降,N-钙黏蛋白表达上调.另外,IL-8可以促进肾癌细胞侵袭,但对肾癌细胞增殖的影响并不明显.进一步研究显示,IL-8通过激活蛋白激酶C(PKC)引起细胞外调节性激酶(ERK)磷酸化.因此,我们认为IL-8可能通过PKC/ERK信号通路促进肾癌细胞发生EMT,这可能是肾癌转移的重要机制之一. 展开更多
关键词 IL-8 上皮细胞-间质细胞转化 蛋白激酶C 细胞外信号调节性激酶(ERK)
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内源性结缔组织生长因子介导转化生长因子β_1对肾小管上皮细胞的转分化效应 被引量:4
6
作者 钱明 甘卫华 +5 位作者 陈荣华 潘晓勤 费莉 郭梅 黄艳军 徐颂周 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期77-81,85,共6页
目的:探讨内源性结缔组织生长因子(CTGF)在人肾小管上皮细胞(HK2)转分化过程中的作用。方法:将HK2细胞分为4组:对照组;转化生长因子β1(TGF-β1)5ng/ml刺激组;TGF-β15ng/ml刺激+CTGF反义ODN3mmol/L干预组;TGF-β15ng/ml刺激+CTGF正义OD... 目的:探讨内源性结缔组织生长因子(CTGF)在人肾小管上皮细胞(HK2)转分化过程中的作用。方法:将HK2细胞分为4组:对照组;转化生长因子β1(TGF-β1)5ng/ml刺激组;TGF-β15ng/ml刺激+CTGF反义ODN3mmol/L干预组;TGF-β15ng/ml刺激+CTGF正义ODN3mmol/L对照组。用倒置显微镜观察各组细胞的形态学变化,用RT-PCR检测各组细胞中CTGF、上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白(FN)mRNA表达变化。结果:TGF-β1刺激使HK2细胞形态由椭圆形转为梭形;下调E-cadherinmRNA表达,上调CTGF、α-SMA和FNmRNA表达,且CTGFmRNA表达变化在时间上早于E-cadherin、α-SMA和FNmRNA表达变化;CTGF反义ODN可对抗TGF-β1引起的细胞形态学改变和E-cadherin、CTGF、α-SMA、FNmRNA表达变化效应。结论:内源性CTGF介导了TGF-β1对HK2细胞的转分化效应。 展开更多
关键词 结缔组织生长因子 转化生长因子Β 小管上皮细胞 转分化
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miR-30d-5p对转化生长因子-β1诱导肾小管上皮细胞生长及迁移的影响 被引量:5
7
作者 陈香文 廖湘平 +9 位作者 李淑梅 李建平 刘志超 肖华 吴琼 龙圣海 龙英杰 谢先达 唐代荣 张浩 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第12期1239-1245,共7页
目的 miR-30d-5p是否影响转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞生长及迁移尚不清楚。文中旨在研究miR-30d-5p对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞生长和迁移的影响及机制。方法 TGF-β1处理肾小管上皮细胞HK-2,分为:空白组(未经任... 目的 miR-30d-5p是否影响转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞生长及迁移尚不清楚。文中旨在研究miR-30d-5p对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞生长和迁移的影响及机制。方法 TGF-β1处理肾小管上皮细胞HK-2,分为:空白组(未经任何处理)、TGF-β1组、miR-NC组(转染miR-30d-5p阴性对照miR-NC)、miR-30d-5p组(转染miR-30d-5p)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-30d-5p阴性对照anti-miR-NC)、anti-miR-30d-5p组(转染anti-miR-30d-5p)、miR-30d-5p+pcDNA3.1组(转染miR-30d-5p与pcDNA3.1-BMP7阴性对照pcDNA3.1)、miR-30d-5p+pcDNA3.1-BMP7组(转染miR-30d-5p与pcDNA3.1-BMP7)、anti-miR-30d-5p+si-NC组(转染anti-miR-30d-5p与si-BMP7阴性对照si-NC)、anti-miR-30d-5p+si-BMP7组(转染anti-miR-30d-5p与si-BMP7)。除空白组外,其他各组经TGF-β1处理。qPCR检测miR-30d-5p的表达,Western blot检测P21和E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达, MTT检测细胞活性,Transwell检测细胞迁移,观察过表达miR-30d-5p或抑制miR-30d-5p对TGF-β1诱导肾小管上皮细胞的细胞活性及迁移的影响。生物信息学预测和双荧光素酶报告实验分析miR-30d-5p与骨形态发生蛋白7(BMP7)的靶向关系。评估其在TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞细胞活性及迁移中的作用。结果 TGF-β1组肾小管上皮细胞的miR-30d-5p表达、生长率和迁移细胞数较空白组明显升高(P<0.05),P21和E-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05)。miR-30d-5p组肾小管上皮细胞miR-30d-5p表达、生长率和迁移细胞数较miR-NC组明显增加(P<0.05),P21和E-cadherin蛋白表达显著减少(P<0.05)。与anti-miR-NC组比较, anti-miR-30d-5p组肾小管上皮细胞的miR-30d-5p表达、生长率和迁移细胞数明显降低(P<0.05),P21和E-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-30d-5p组WT-BMP7荧光素酶的活性、BMP7 mRNA表达明显降低(P<0.05)。与anti-miR-NC组比较,anti-miR-30d-5p组的BMP7 mRNA表达显著升高(P<0.05)。anti-miR-30d-5p+si-BMP7组肾小管上皮细胞的BMP7、P21和E-cadherin蛋白水平[(0.21±0.03)、(0.29±0.03)、(0.37±0.04)]较anti-miR-30d-5p+si-NC组[(0.71±0.05)、(0.53±0.04)、(0.63±0.05)]明显降低(P<0.05),生长率和迁移细胞数显著升高(P<0.05)。结论 miR-30d-5p通过靶向调控BMP7的表达促进TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞生长及迁移,为肾间质纤维化的机制研究提供了指导意义。 展开更多
关键词 miR-30d-5p 骨形态发生蛋白7 转化生长因子-Β1 小管上皮细胞 生长 迁移
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银杏叶提取物对转化生长因子β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响及其机制 被引量:4
8
作者 徐西振 郑常龙 +2 位作者 凃玲 赵刚 汪道文 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期2235-2238,共4页
目的:研究银杏叶提取物(extract of ginkgo biloba,EGB)对转化生长因子β1(transforming growth factor-β1 TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞HK2(human tubular epithelial cells)转分化的影响及其机制。方法:复苏并传代培养HK2细胞,应... 目的:研究银杏叶提取物(extract of ginkgo biloba,EGB)对转化生长因子β1(transforming growth factor-β1 TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞HK2(human tubular epithelial cells)转分化的影响及其机制。方法:复苏并传代培养HK2细胞,应用10μg/LTGF-β1诱导HK2细胞向间充质的转分化,给予EGB干预。应用West-ern印记法检测HK2细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、NADPH氧化酶p67phox以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的表达,检测细胞培养液上清中丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量。结果:EGB显著抑制TGF-β1诱导的E-cadherin下调(P<0.05)和α-SMA上调(P<0.05);EGB显著抑制TGF-β1诱导的p67phox表达增加(P<0.05),显著抑制TGF-β1诱导的SOD表达降低(P<0.05);同时,TGF-β1显著促进了MDA的产生(P<0.05),EGB可以部分抑制TGF-β1刺激的MDA浓度的升高(P<0.05)。结论:EGB显著抑制TGF-β1诱导的HK2细胞转分化,其机制可能是EGB抑制了TGF-β1诱导的p67phox上调并上调SOD的表达。 展开更多
关键词 银杏叶提取物 转化生长因子Β 小管上皮细胞
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发酵红参总皂苷对高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞间充质转化的抑制作用及其机制 被引量:2
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作者 曲萌 郑鸿 +5 位作者 李焱 陈博学 姜雨竹 王胜告 于春艳 董志恒 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1182-1189,共8页
目的:探讨发酵红参总皂苷(FRGTS)对高糖诱导下肾小管上皮细胞发生上皮细胞-间充质转化(EMT)的抑制作用,并阐明其作用机制。方法:将大鼠肾小管上皮NRK-52E细胞分为正常对照组(5.5 mmol·L^(-1)D-葡萄糖)、高糖组(30.0 mmol·L^(-... 目的:探讨发酵红参总皂苷(FRGTS)对高糖诱导下肾小管上皮细胞发生上皮细胞-间充质转化(EMT)的抑制作用,并阐明其作用机制。方法:将大鼠肾小管上皮NRK-52E细胞分为正常对照组(5.5 mmol·L^(-1)D-葡萄糖)、高糖组(30.0 mmol·L^(-1)D-葡萄糖)、沉默信息调节因子1(SIRT1)抑制剂EX527组(30.0 mmol·L^(-1)D-葡萄糖+10.0μmol·L^(-1).EX527)、 FRGTS组(30.0 mmol·L^(-1)D-葡萄糖+25 mg·L^(-1)FRGTS)和EX527+FRGTS组(30.0 mmol·L^(-1)D-葡萄糖+10μmol·L^(-1)EX527+25 mg·L^(-1)FRGTS)。采用免疫荧光法检测各组细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组细胞中E-cadherin、α-SMA和SIRT1 mRNA表达水平,ELISA法检测培养上清液中Ⅰ型胶原(ColⅠ)水平,Western blotting法检测各组细胞中SIRT1、转化生长因子β1 (TGF-β1)和Smad3蛋白表达水平。结结果果:高糖培养48 h后,与正常对照组比较,高糖组NRK-52E细胞中E-cadherin蛋白表达水平和mRNA表达水平降低(P<0.01),α-SMA蛋白表达水平和mRNA表达水平升高(P<0.01),NRK-52E细胞上清液中ColⅠ水平升高(P<0.01),SIRT1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),TGF-β1和Smad3蛋白表达水平升高(P<0.01);与高糖组比较,FRGTS组NRK-52E细胞中E-cadherin mRNA表达水平升高(P<0.01),α-SMA mRNA表达水平降低(P<0.05),NRK-52E细胞上清液中ColⅠ水平降低(P<0.05), SIRT1 mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05或P<0.01),TGF-β1和Smad3蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01);与FRGTS组比较,EX527+FRGTS组NRK-52E细胞中E-cadherin mRNA表达水平明显降低(P<0.01),α-SMA mRNA表达水平明显升高(P<0.05), NRK-52E细胞上清液中ColⅠ水平升高(P<0.05), SIRT1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01), TGF-β 1和Smad3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结结论论:FRGTS可通过上调SIRT1表达,进而抑制TGF-β1/Smad信号通路,有效抑制肾小管上皮细胞发生EMT。 展开更多
关键词 发酵红参总皂苷 上皮细胞-间充质转化 沉默信息调节因子1 转化生长因子β1 SMAD 小管上皮细胞
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尿酸对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖及表型转化的影响 被引量:3
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作者 李莎莎 郭晓莉 杜燕 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期392-397,共6页
目的研究不同浓度尿酸对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)增殖及表型转化的影响。方法通过倒置显微镜下及透射电镜下观察尿酸干预前后HBZY-1细胞形态及超微结构改变;通过MTT法检测不同浓度尿酸对HBZY-1细胞增殖的作用;ELISA法检测... 目的研究不同浓度尿酸对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)增殖及表型转化的影响。方法通过倒置显微镜下及透射电镜下观察尿酸干预前后HBZY-1细胞形态及超微结构改变;通过MTT法检测不同浓度尿酸对HBZY-1细胞增殖的作用;ELISA法检测不同浓度尿酸作用HBZY-1细胞后血管紧张素Ⅱ的表达;分别通过RT-PCR、Western blot方法检测不同浓度尿酸作用HBZY-1细胞不同时间段后α-SMA、TGF-β1及fibronectin基因水平和蛋白水平的变化。结果 0.4 mmol/L尿酸作用HBZY-1细胞24 h可诱导系膜细胞转化为类似纤维细胞样形态。不同浓度尿酸作用HBZY-1细胞24 h均能促进细胞增殖,且在一定范围内其促增殖作用呈剂量依赖性增强。不同浓度尿酸作用HBZY-1细胞不同时间后可诱导其分泌血管紧张素Ⅱ,并在一定范围内呈剂量时间依赖性。RT-PCR及Western Blot结果均显示0.1 mmol/L以上的尿酸作用HBZY-1细胞48 h后,系膜细胞表型转化的指标α-SMA、TGF-β1及fibronectin的mRNA及蛋白表达均上调(P <0.05)。结论尿酸可促进体外培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖及发生表型转化。 展开更多
关键词 尿酸 肾小球系膜细胞 增殖 表型转化
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甲硫氨酸亚砜还原酶A在肾透明细胞癌侵袭转移中的作用机制
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作者 刘鸿翔 刘锡海 +1 位作者 陈敏坚 钟惟德 《中山大学学报(医学科学版)》 北大核心 2025年第4期639-650,共12页
【目的】本研究旨通过细胞学和动物实验验证甲硫氨酸亚砜还原酶A(MSRA)对肾透明细胞癌(ccRCC)增殖、凋亡、侵袭和转移的影响,揭示其潜在的生物学机制,为ccRCC的治疗提供新的分子靶点和策略。【方法】利用转染实验构建MSRA过表达细胞株;... 【目的】本研究旨通过细胞学和动物实验验证甲硫氨酸亚砜还原酶A(MSRA)对肾透明细胞癌(ccRCC)增殖、凋亡、侵袭和转移的影响,揭示其潜在的生物学机制,为ccRCC的治疗提供新的分子靶点和策略。【方法】利用转染实验构建MSRA过表达细胞株;通过细胞增殖实验、平板克隆实验、凋亡实验、划痕实验、侵袭实验评估MSRA对ccRCC细胞增殖、凋亡、侵袭和转移的影响;并进一步通过ROS检测,RT-qPCR、Western blot实验探讨其作用机制及相关信号通路;随后,利用裸鼠皮下移植瘤模型在动物水平上验证MSRA对ccRCC肿瘤生长和转移的影响,并初步探索其潜在的分子机制。【结果】OS-RC-2和786-O细胞株MSRA mRNA水平和蛋白表达量较低(RT-qPCR:0.57±0.09,0.56±0.04;WB:0.26±0.13,0.24±0.09);RT-qPCR和Western blot实验提示成功构建了OS-RC-2-pLVSO2-MSRA(RT-qPCR:108.04±1.80;WB:117.01±20.19)和786-O-pLVSO2-MSRA(973.45±51.37,WB:190.34±30.13)过表达细胞株,差异具有统计学意义(P<0.001);增殖实验提示OS-RC-2-pLVSO2-MSRA(72 h:1.246±0.003)和786-O-pLVSO2-MSRA(72 h:1.468±0.001)增殖活力降低,差异具有统计学意义(P<0.001);平板克隆实验提示OS-RC-2-pLVSO2-MSRA(0.090±0.002)和786-O-pLVSO2-MSRA(0.080±0.002)克隆数减少,差异具有统计学意义(P<0.001);凋亡实验提示OS-RC-2-pLVSO2-MSRA(2.013±0.116)和786-O-pLVSO2-MSRA(4.767±0.199)凋亡率增加,差异具有统计学意义(P<0.001);划痕实验提示OS-RC-2-pLVSO2-MSRA(0.643±0.028)和786-O-pLVSO2-MSRA(0.603±0.034)迁移距离较少,差异具有统计学意义(P<0.001);Transwell实验提示OS-RC-2-pLVSO2-MSRA(16.80±2.28)和786-O-pLVSO2-MSRA(21.40±4.78)穿透细胞数减少,差异具有统计学意义(P<0.001);荧光实验显示OS-RC-2-pLVSO2-MSRA(50.59±6.24)和786-O-pLVSO2-MSRA(62.87±5.35)活性氧含量降低,差异具有统计学意义(P<0.001);Western blot实验显示OS-RC-2-pLVSO2-MSRA和786-O-pLVSO2-MSRA中N-cadherin和Vimentin的表达量下降,而E-cadherin的表达量增加,差异具有统计学意义(P<0.001);Western blot实验显示OSRC-2-pLVSO2-MSRA和786-O-pLVSO2-MSRA中p-ERK1/2和p-SMAD3的表达量下降,差异具有统计学意义(P<0.001);动物实验提示OS-RC-2-pLVSO2-MSRA肿瘤体积降低(155.00±50.46),差异具有统计学意义(P<0.001);动物组织Western blot实验提示N-cadherin和Vimentin的表达量下降,而E-cadherin的表达量增加,差异具有统计学意义(P<0.001);OS-RC-2-pLVSO2-MSRA中IHC实验提示Ki-67、N-cadherin和Vimentin的表达量下降,而E-cadherin的表达量增加,差异具有统计学意义(P<0.001)。【结论】表达MSRA抑制ccRCCROS的表达,抑制EMT过程,进而抑制ccRCC的增殖、侵袭和转移。 展开更多
关键词 透明细胞 甲硫氨酸亚砜还原酶A 活性氧 上皮-间充质转化 肿瘤转移
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尿本周氏蛋白及转化生长因子β_1对肾近端小管上皮细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 周振海 李幼姬 +5 位作者 陈运贤 李小银 余学清 李娟 罗绍凯 原耀光 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期1257-1260,共4页
目的 :研究多发性骨髓瘤 (MM)患者尿本周氏蛋白 (BJP)及转化生长因子 β1(TGF - β1)在体外对肾近端小管上皮细胞 (PTC)增殖的影响。方法 :将自MM患者尿中提取的λ型BJP和 /或TGF - β1与大鼠NRK .5 2E株PTC共同培养 ,用 [3 H]TdR掺入研... 目的 :研究多发性骨髓瘤 (MM)患者尿本周氏蛋白 (BJP)及转化生长因子 β1(TGF - β1)在体外对肾近端小管上皮细胞 (PTC)增殖的影响。方法 :将自MM患者尿中提取的λ型BJP和 /或TGF - β1与大鼠NRK .5 2E株PTC共同培养 ,用 [3 H]TdR掺入研究PTC增殖。并用ELISA法测定BJP与PTC培养上清液中的TGF - β1含量。结果 :①10 0 - 80 0 μmol/LBJP以浓度依赖方式抑制PTC增殖 ,当浓度≥ 4 0 0 μmol/L与对照组比较有显著差异 (P <0 .0 5 ) ,当加入 2 μg/LTGF - β1共同培养 ,在BJP浓度为 4 0 0 μmol/L时 ,[3 H]TdR掺入低于单用BJP(P <0 .0 5 ) ,但与单用BJP浓度为 80 0 μmol/L无显著差异 ;② 10 0 - 80 0 μmol/LBJP与PTC共同培养液中的TGF - β1含量均增加 ,尤以BJP为 4 0 0μmol/L明显大于对照组 (P <0 .0 5 ) ;③外源性 0 .5 - 10 μg/LTGF - β1与PTC共同培养 ,[3 H]TdR掺入随TGF - β1浓度增加而减少。结论 :MM患者λ型BJP可抑制PTC的增殖 ,其部分机理可能与其促进对PTC增殖也有抑制作用的TGF- 展开更多
关键词 本周蛋白 转化生长因子Β 近端小管上皮细胞
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吸烟对肾癌细胞上皮间质-转化的影响及意义 被引量:2
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作者 张涛 张涛涛 +11 位作者 吴旺宇 耿浩 刘杰 王弦 万阳 张志华 马嘉兴 方露 钱伟伟 李恩来 张志辉 于德新 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第11期1760-1765,共6页
目的比较吸烟对肾透明细胞癌患者肿瘤组织上皮-间质转化(EMT)过程中上皮标志蛋白[E-钙黏素(E-cadherin)]与间质标志蛋白[N-钙黏素(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)]表达的影响,分析吸烟暴露量和戒烟时间与EMT相关蛋白表达的关系。方法... 目的比较吸烟对肾透明细胞癌患者肿瘤组织上皮-间质转化(EMT)过程中上皮标志蛋白[E-钙黏素(E-cadherin)]与间质标志蛋白[N-钙黏素(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)]表达的影响,分析吸烟暴露量和戒烟时间与EMT相关蛋白表达的关系。方法本研究是以医院为基础的病例-病例研究。通过问卷调查患者吸烟情况后,选取肾透明细胞癌患者60例,其中吸烟(吸烟组)和非吸烟(非吸烟组)患者各30例。同时收集患者肿瘤组织标本,采用Western blot检测两组患者肾癌组织中E-cadherin、N-cadherin、vimentin蛋白表达水平;采用免疫组织化学(IHC)染色方法检测肾癌组织切片中E-cadherin、N-cadherin、vimentin蛋白染色并按染色强度和面积进行分级。结果Western blot检测发现,吸烟组肾癌患者E-cadherin表达较非吸烟组下降(P<0.05),然而vimentin表达升高(P<0.05)。与吸烟<20包-年组患者相比,吸烟>20包-年组患者肾透明细胞癌组织中vimentin表达升高(P<0.05)。IHC结果表明,吸烟组和非吸烟组患者vimentin的IHC评分分别为(4.17±1.05)和(3.17±1.02),吸烟组评分高于非吸烟组(P<0.01)。与吸烟<20包-年组患者相比,吸烟>20包-年组患者肾癌组织中vimentin的IHC评分升高(P<0.05),而E-cadherin和N-cadherin蛋白的IHC评分差异无统计学意义。结论吸烟能够诱导肾癌细胞发生EMT,并且EMT可能在吸烟诱导肾癌发生进展过程中发挥重要作用;高吸烟暴露量可以促使肾癌细胞发生EMT,吸烟对于EMT的诱导效应是长期存在的,短期戒烟对于EMT的发生可能无影响。 展开更多
关键词 吸烟 透明细胞 上皮-间质转化 E-钙黏素 N-钙黏素 波形蛋白
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罗格列酮对肾小管上皮细胞间质转化的影响 被引量:2
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作者 王银 黄小妹 陈文莉 《医药导报》 CAS 2015年第3期310-313,共4页
目的探讨罗格列酮对转化生长因子-β(TGF-β)诱导的肾小管上皮细胞间质转化(EMT)过程的影响。方法体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,并给予不同浓度TGF-β及罗格列酮处理,观察HK-2形态学变化,利用免疫印迹检测过氧化物酶体增殖激活物受体γ... 目的探讨罗格列酮对转化生长因子-β(TGF-β)诱导的肾小管上皮细胞间质转化(EMT)过程的影响。方法体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,并给予不同浓度TGF-β及罗格列酮处理,观察HK-2形态学变化,利用免疫印迹检测过氧化物酶体增殖激活物受体γ(PPARγ)、SMAD家族成员2/3、钙粘附蛋白-E(E-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)水平变化,通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)术检测PPARγ、E-cadherin、Vimentin、锌指转录因子Snail及Slug的mRNA水平变化,并利用双荧光素酶报告基因检测TGF-β及罗格列酮对E-cadherin启动子活性的影响。结果 TGF-β可诱导HK-2细胞发生伪足增多变长、细胞间隙变大等EMT样形态学变化,进而激活TGF-β下游的SMAD2/3信号通路,导致上皮细胞标志E-cadherin表达明显减少,伴有间质细胞标志的Vimentin表达增高,转录因子Snail及Slug的mRNA水平分别升高6倍以上,伴随E-cadherin启动子活性下降70%。罗格列酮可以显著抑制上述TGF-β诱导的EMT过程,表现为HK-2细胞足减少变短,细胞间隙变小等,同时伴有E-cadherin表达增加,Vimentin表达降低,Snail及Slug的mRNA水平明显降低,E-cadherin启动子活性恢复到对照组水平。结论罗格列酮可通过激活PPARγ促进E-cadherin转录活性及蛋白表达,拮抗TGF-β诱导的EMT过程。 展开更多
关键词 罗格列酮 转化生长因子-Β 上皮细胞间质转化 纤维化
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骨形态发生蛋白-7诱导人肾成纤维细胞间质-上皮转化的研究 被引量:1
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作者 黄云剑 王梓华 +1 位作者 赵景宏 张静波 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第13期1239-1241,共3页
目的探讨骨形态发生蛋白-7(bone morphogenic protein-7,BMP-7)能否诱导人肾成纤维细胞出现间质-上皮的转化。方法原代培养获得人肾间质成纤维细胞,传至第3代用于本实验。培养液中添加1000ng/L BMP-7 72h后,观察细胞形态变化,MTT法检测... 目的探讨骨形态发生蛋白-7(bone morphogenic protein-7,BMP-7)能否诱导人肾成纤维细胞出现间质-上皮的转化。方法原代培养获得人肾间质成纤维细胞,传至第3代用于本实验。培养液中添加1000ng/L BMP-7 72h后,观察细胞形态变化,MTT法检测细胞增殖,ELISA法测定上清Ⅰ胶原含量,Western blot分析E-cadherin和Pax2蛋白表达。结果细胞与BMP-7孵育72h后,出现细胞聚集类似小管细胞团块。与对照组相比,成纤维细胞增殖活性减低,Ⅰ型胶原分泌下降,上皮标志物E-cadherin和肾发生的标志分子Pax2表达增加。结论肾成纤维细胞至少保持部分它胚胎时的印迹和可塑性,BMP-7可诱导人肾成纤维细胞呈现间质-上皮的转化。 展开更多
关键词 BMP-7 成纤维细胞 间质-上皮细胞转化
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透明细胞肾细胞癌中FOXD1的表达及其对786-O细胞增殖侵袭、上皮-间质转化的影响 被引量:1
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作者 吴峥 潘腾 +2 位作者 王淑彬 董稚明 汪治宇 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第4期439-444,共6页
目的探讨转录因子FOXD1在透明细胞肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,CCRCC)组织和细胞系中的表达及其对786-O细胞增殖侵袭、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法采用qRT-PCR技术检测CCRCC组织... 目的探讨转录因子FOXD1在透明细胞肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,CCRCC)组织和细胞系中的表达及其对786-O细胞增殖侵袭、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法采用qRT-PCR技术检测CCRCC组织和细胞系中FOXD1基因表达,并分析FOXD1表达与CCRCC临床病理特征及预后的关系;检测敲低FOXD1表达对786-O细胞生物学行为和EMT相关标志物表达的影响。结果CCRCC组织中FOXD1的表达量(0.9172±0.09658)高于对照组(0.5569±0.07482),差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤TNM分期、淋巴结转移及FOXD1高表达均为CCRCC患者预后相关的独立危险因子(P<0.05)。下调FOXD1基因发现,CCRCC细胞系786-O的体外侵袭与增殖活性明显减弱(P<0.05)。与对照组相比,敲低FOXD1表达后N-cadherin、Ki-67和vimentin表达下调(P<0.05),E-cadherin表达上调(P<0.05),差异均有统计学意义。结论FOXD1在CCRCC中异常高表达是影响CCRCC患者预后的独立因素,沉默FOXD1可使786-O细胞的增殖侵袭活性减弱,并抑制EMT进程,FOXD1发挥促癌基因作用。 展开更多
关键词 肿瘤 透明细胞细胞 FOXD1 增殖 侵袭 上皮-间质转化
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人肾小管上皮细胞在转化生长因子β_1诱导下桩蛋白表达研究 被引量:2
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作者 韩敬 张璟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1066-1068,共3页
目的探讨不同浓度重组人转化生长因子β1(humanrecombinanttransforminggrowthfactorβ1,rhTGFβ1)对人近端肾小管上皮细胞株(humankidneyproximaltubularepithelialcellline,HKC)表达桩蛋白(paxillin,Pax)的影响。方法将体外培养的HKC... 目的探讨不同浓度重组人转化生长因子β1(humanrecombinanttransforminggrowthfactorβ1,rhTGFβ1)对人近端肾小管上皮细胞株(humankidneyproximaltubularepithelialcellline,HKC)表达桩蛋白(paxillin,Pax)的影响。方法将体外培养的HKC随机分为3组:对照组(C组):无血清培养基(freeserummudium,FSM)培养;TGFβ1培养组(T1、T2组):分别用含不同浓度的TGFβ1(T1组:5ng/ml,T2组:10ng/ml)的FSM培养,48h后分别用逆转录多聚酶链式反应(RT PCR)、免疫组化方法和Westernblot检测HKC的PaxmRNA及蛋白表达情况。结果①C组:PaxillinmRNA及蛋白有基础的表达;②T1和T2组:PaxmRNA及蛋白表达均明显增加,T2组和T1组相比,Pax的mRNA及蛋白表达量增加更显著(P<0.01)。结论TGFβ1能呈剂量依赖性地诱导HKC合成Pax。 展开更多
关键词 小管上皮细胞 桩蛋白 转化生长因子Β1
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转化生长因子β_1诱导人肾小管上皮细胞表达结缔组织生长因子 被引量:1
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作者 卓文磊 张璟 +2 位作者 杨惠标 王彦 黄云剑 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第19期1717-1719,共3页
目的 研究转化生长因子 β1(transforminggrowthfactorβ1,TGFβ1)对人肾小管上皮细胞 (humanproximaltubularep ithelialcells ,HTECs)表达结缔组织生长因子 (connectivetissuegrowthfactor ,CTGF)的影响。方法 体外培养的HTEC被根... 目的 研究转化生长因子 β1(transforminggrowthfactorβ1,TGFβ1)对人肾小管上皮细胞 (humanproximaltubularep ithelialcells ,HTECs)表达结缔组织生长因子 (connectivetissuegrowthfactor ,CTGF)的影响。方法 体外培养的HTEC被根据随机数字表分为 3组 :对照组 (C组 ) :无血清培养基 (freeserummedium ,FSM)培养 ;TGFβ1a和TGFβ1b组 (Ta 组和Tb 组 ) :分别用含不同浓度TGFβ1(Ta 组 :2 0ng/ml,Tb 组 :40ng/ml)的FSM培养 ,96h后 ,分别用RT PCR和免疫组化方法检测HTEC表达CT GFmRNA和蛋白。结果 ①C组 :CTGFmRNA和蛋白表达为阴性 ;②Tb 组和Ta 组 :CTGFmRNA和蛋白表达皆呈阳性。Tb 组和Ta 组相比 ,CTGF的mRNA和蛋白表达量皆显著增加 (P <0 .0 1)。结论 TGFβ1能呈剂量依赖性地诱导HTEC合成CTGF。 展开更多
关键词 TGFΒ1 结缔组织生长因子 转化生长因子β1 蛋白表达 小管上皮细胞 RNA CTGF 无血清培养基 体外培养 RT-PCR
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阿霉素诱导MCF10A上皮细胞衰老模型的构建
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作者 王增盛 牛祖彪 +7 位作者 张波 郝佳慧 朱一超 杨瑞刚 任禾 刘辰瑜 孙强 任立成 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第1期147-155,共9页
本研究旨在构建稳定的上皮细胞衰老模型,以期用于衰老细胞清除剂(senolytics)药物的筛选和评价研究。探究了阿霉素(doxorubicin)诱导人非转化乳腺上皮细胞系MCF 10A衰老的最佳条件,包括最佳诱导浓度、最佳干预时长和最佳衰老天数,并多... 本研究旨在构建稳定的上皮细胞衰老模型,以期用于衰老细胞清除剂(senolytics)药物的筛选和评价研究。探究了阿霉素(doxorubicin)诱导人非转化乳腺上皮细胞系MCF 10A衰老的最佳条件,包括最佳诱导浓度、最佳干预时长和最佳衰老天数,并多维度验证了MCF 10A作为细胞衰老模型的可行性。阿霉素诱导MCF 10A细胞衰老的最佳条件是:用0.6μmol/L的阿霉素处理16 h在第8 d MCF 10A细胞达到最佳衰老状态。在最佳诱导条件下,加药组的衰老相关-β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase,SA-β-gal)染色阳性率达到97%;同时,检测mRNA、蛋白质和免疫荧光(immunofluorescence,IF)的表达,结果显示:加药组细胞相对于正常细胞的衰老相关分泌表型(senescence-associated aecretory phenotype,SASP)、p16、p21和p53蛋白质的表达量均显著升高,核纤层蛋白B1(lamin B1)显著下降(P<0.001)。加药组细胞与衰老细胞特有特征一致。本研究用阿霉素成功构建了MCF 10A上皮细胞衰老模型,为基于衰老上皮细胞的衰老细胞清除剂的筛选奠定了研究基础。 展开更多
关键词 上皮细胞衰老模型 阿霉素 人非转化乳腺上皮细胞系MCF 10A 衰老相关-β-半乳糖苷酶 衰老相关分泌表型
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乙醛促进人肾小管上皮细胞表型变化并增加细胞α平滑肌肌动蛋白的表达 被引量:2
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作者 李晓东 李胤祺 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期221-223,共3页
机体摄入大量的酒精后,约90%在肝脏乙醇脱氢酶的作用下转化为乙醛,并进入血液循环。肾脏是仅次于肝脏的酒精排泄器官。酒精及其代谢产物乙醛通过肾脏排泄到尿中,尿中乙醛的含量高于肝脏及血液中的含量。长期过量饮酒可导致酒精性肾损害... 机体摄入大量的酒精后,约90%在肝脏乙醇脱氢酶的作用下转化为乙醛,并进入血液循环。肾脏是仅次于肝脏的酒精排泄器官。酒精及其代谢产物乙醛通过肾脏排泄到尿中,尿中乙醛的含量高于肝脏及血液中的含量。长期过量饮酒可导致酒精性肾损害,酒精性肾损伤以肾小管间质病变为主,但其作用机制目前尚不清楚。肾小管上皮细胞发生表型转化是发生肾间质纤维化的重要机制之一。 展开更多
关键词 乙醛 小管上皮细胞 表型转化 肾小管间质纤维化
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