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双向电泳-质谱法分析人CD4^+CD25^+T细胞与CD4^+CD25^-T细胞蛋白质组差异
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作者 彭双发 吴军 +5 位作者 徐宁志 郑峻松 贺伟峰 易绍萱 陈希炜 袁军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第21期1888-1891,共4页
目的 用双向凝胶电泳-质谱法(2-DE/MS)分析人CD4+ CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞表达的蛋白质组,建立二者之间的差异表达谱。方法提取人脾脏源CD4+ CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞总蛋白质,双向电泳分离蛋白,比较两种细胞的蛋白质组表达差异... 目的 用双向凝胶电泳-质谱法(2-DE/MS)分析人CD4+ CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞表达的蛋白质组,建立二者之间的差异表达谱。方法提取人脾脏源CD4+ CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞总蛋白质,双向电泳分离蛋白,比较两种细胞的蛋白质组表达差异,对差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser des-orption/ionization time of flying mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)进行鉴定。结果胶图差异分析发现25个表达水平存在明显差异的蛋白质点,其中17个点在CD4+CD25-T细胞上调,8个点在CD4+CD25+T细胞上调。质谱初步鉴定出15个差异蛋白质点。结论CD4+ CD25+T细胞和CD4+ CD25-T细胞表达蛋白质组存在差异,这种蛋白质组的差异分析有助于进一步研究调节性T细胞功能相关蛋白质。 展开更多
关键词 CD4^+CD25^+调节性T细胞 蛋白质组 肽质量指纹分析
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γ射线照射前后IEC-6细胞蛋白质组的差异分析 被引量:6
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作者 章波 粟永萍 +4 位作者 艾国平 刘晓宏 魏永江 王锋超 程天民 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第24期2157-2160,共4页
目的 分析γ射线照射后肠上皮细胞系 (IEC 6)细胞蛋白质组的改变。方法 分别提取正常IEC 6细胞和经过 2 5Gy照射后细胞的蛋白样品 ,采用固相pH梯度双向凝胶电泳技术进行分离 ,考马斯亮蓝染色后经PDQuest软件分析双向电泳图谱 ,对部分... 目的 分析γ射线照射后肠上皮细胞系 (IEC 6)细胞蛋白质组的改变。方法 分别提取正常IEC 6细胞和经过 2 5Gy照射后细胞的蛋白样品 ,采用固相pH梯度双向凝胶电泳技术进行分离 ,考马斯亮蓝染色后经PDQuest软件分析双向电泳图谱 ,对部分差异的蛋白点进行胶内酶切、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI TOF MS)测定其肽质量指纹图谱 ,在网上检索数据库鉴定差异蛋白 ,并采用RT PCR间接证实其变化。结果 获得了较好的双向电泳图谱。图像分析显示 :在正常IEC 6细胞中检测到 ( 60 8± 3 9)个蛋白质点 ,细胞照射后的样品中检测到 ( 5 95± 3 1)个蛋白质点 ,其中匹配的蛋白点为 3 96个。对表达差异的 16个蛋白质点进行肽质量指纹图谱分析 ,经数据库检索后初步鉴定为一些与代谢、自由基清除、细胞骨架相关的蛋白。RT PCR证实了ERP2 9基因在照射后增强。结论 电离辐射可以诱导IEC 6细胞蛋白质组发生改变。 展开更多
关键词 电离辐射 肠上皮细胞 双向电泳 质量指纹图谱分析
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Bt Cry1Ac毒素筛选的粉纹夜蛾离体抗性细胞与敏感细胞蛋白质组的差异分析 被引量:3
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作者 蒋才富 刘凯于 +3 位作者 彭蓉 郑进 彭建新 洪华珠 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期686-690,共5页
采用双向电泳技术和肽质量指纹图谱技术分析了BtCry1Ac毒素筛选的粉纹夜蛾Trichoplusiani抗性BTI_Tn_5B1_4细胞与同源敏感细胞的蛋白质组的差异。用MelanieViewerⅡ软件在抗性细胞的双向电泳图谱上检测到的平均蛋白质点数为 70 7± ... 采用双向电泳技术和肽质量指纹图谱技术分析了BtCry1Ac毒素筛选的粉纹夜蛾Trichoplusiani抗性BTI_Tn_5B1_4细胞与同源敏感细胞的蛋白质组的差异。用MelanieViewerⅡ软件在抗性细胞的双向电泳图谱上检测到的平均蛋白质点数为 70 7± 2 5个 (n =3) ,在敏感细胞的双向电泳图谱上检测到的平均蛋白质点数为 6 37± 19个 (n =3) ,其中分辨率高、重复性良好的显著差异点有 10余个。对其中的一个敏感细胞特有的显著差异斑点进行了肽质量指纹图谱分析 ,经数据库查询表明该蛋白质与胞质外周蛋白具有同源性。 展开更多
关键词 BTI-Tn-581-4细胞 CRYLAC 抗性 双向电泳 质量指纹图谱分析
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大鼠不同发育时期胰腺相关蛋白的差异表达 被引量:6
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作者 周锦勇 胡静静 +5 位作者 仲燕 刘超 柴伟栋 袁栎 滕丽萍 德伟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1106-1113,共8页
探讨大鼠胰腺不同发育时期相关蛋白的差异表达 ,应用显微技术分离了大鼠孕 15 5天 ,孕 18 5天胚胎胰腺和新生鼠及成年鼠的胰腺 ,提取其蛋白质后 ,用固相pH梯度双向聚丙烯酰胺凝胶电泳和质谱分析等蛋白质组学方法 ,得到了 4个不同发育... 探讨大鼠胰腺不同发育时期相关蛋白的差异表达 ,应用显微技术分离了大鼠孕 15 5天 ,孕 18 5天胚胎胰腺和新生鼠及成年鼠的胰腺 ,提取其蛋白质后 ,用固相pH梯度双向聚丙烯酰胺凝胶电泳和质谱分析等蛋白质组学方法 ,得到了 4个不同发育时期的蛋白质表达谱 .对其中的 6个在孕 18 5天胚胎胰腺中有高丰度表达 ,而在成年鼠胰腺中缺失的蛋白质点 ,4个在成年胰腺中特异表达的蛋白质点 ,8个在成年胰腺中表达明显下调的蛋白质点和 1个在成年中表达上调的点 ,进行了肽质量指纹分析和蛋白质鉴定 ,共获得 18个点的肽质量指纹图 .经BIOWORK等软件搜索大鼠非冗余蛋白质数据库来鉴定其身份 ,发现其中 7个点为大鼠甲胎蛋白 (AFP)、 5个点为胰脂酶相关蛋白 1前体、 1个点为微管蛋白 β、 2个点为蛋白二硫异构酶、 1个为FLN2 9基因产物的类似物、 1个为胰蛋白酶V A前体、 1个为过氧化物氧化还原酶 4 .其中AFP为特异表达于大鼠胚胎期及新生期胰腺的蛋白质 ,在孕 18 5天的胰腺中表达量最高 ,在成年胰腺中极低表达 . 展开更多
关键词 大鼠胰腺 发育 双向凝胶电泳 质谱分析 质量指纹 蛋白质组学
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