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耐热α-淀粉酶产生菌枯草芽孢杆菌抗噬菌体的选育
被引量:
2
1
作者
张建宁
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2009年第12期5372-5374,共3页
[目的]选育出耐热α-淀粉酶产生菌枯草芽孢杆菌抗噬菌体菌株。[方法]从耐热α-淀粉酶产生菌枯草芽孢杆菌菌株HA06的异常发酵液中分离到了2种噬菌体,将其命名为KB011、KB012。以枯草芽孢杆菌HA06为出发菌株,采用噬菌体、紫外线和MNNG复...
[目的]选育出耐热α-淀粉酶产生菌枯草芽孢杆菌抗噬菌体菌株。[方法]从耐热α-淀粉酶产生菌枯草芽孢杆菌菌株HA06的异常发酵液中分离到了2种噬菌体,将其命名为KB011、KB012。以枯草芽孢杆菌HA06为出发菌株,采用噬菌体、紫外线和MNNG复合诱变法选育具有抗性的高产突变株,并对突变株的遗传稳定性和发酵的酶活力进行了考察。[结果]获得了3株抗性株,将其命名为KSB04、KSB08、KSB14,它们在试验浓度下对噬菌体KB011、KB012具有明显的抗性,在整个培养过程中表现正常。而敏感菌株HA06的生长则受到明显抑制,并产生大量的噬菌体,培养液中噬菌体的浓度最高可达1012pfu/ml以上。抗性株KSB04和KSB14有较好的遗传稳定性,在7次传代后酶活力仍在3 500 U/ml以上。[结论]获得了遗传稳定且发酵性能与出发菌相似的2株抗性株KSB04和KSB14。
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关键词
耐热α-淀粉酶
枯草芽孢杆菌
抗噬菌体菌株
发酵
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职称材料
嗜热脂肪芽孢杆菌耐热α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达
2
作者
N.Tsukagoshi
李尔炀
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
1990年第3期73-77,共5页
一序言杆菌属是分泌型酶类的重要来源(Priest 1977)。新近有一些队芽孢杆菌属菌种中克隆几种分泌酶类的报道,包括从解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens),凝结芽孢杆菌(B.Coagulans)和枯草芽孢杆菌(B.Subtilis)中克隆淀粉酶基因。
关键词
耐热α-淀粉酶
解
淀粉
芽孢杆菌
芽孢杆菌属
芽抱杆菌
地衣形芽孢杆菌
基因克隆
凝结芽孢杆菌
淀粉酶
活性
分泌酶
插入片段
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职称材料
合成嗜热酸性淀粉酶的毕赤酵母表达
被引量:
3
3
作者
柯涛
熊蓝
+4 位作者
张乃群
马向东
惠丰立
牛秋红
杨果
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期30-35,共6页
把密码子优化后的超耐热酸性α-淀粉酶的基因BD5088,引入载体pPIC9K中,将正确构建的重组质粒pPIC9K-BD5088转化毕赤酵母GS115细胞,得到酵母工程菌株。在酵母α-Factor及AOX1基因启动子和终止信号的调控下,重组超耐热酸性α-淀粉酶PrBD5...
把密码子优化后的超耐热酸性α-淀粉酶的基因BD5088,引入载体pPIC9K中,将正确构建的重组质粒pPIC9K-BD5088转化毕赤酵母GS115细胞,得到酵母工程菌株。在酵母α-Factor及AOX1基因启动子和终止信号的调控下,重组超耐热酸性α-淀粉酶PrBD5088在甲醇酵母中大量表达并分泌到胞外。该酶受甲醇的严格调控和诱导,在诱导培养5 d后酶活力达到最大值,表达量可达到约200 mg/L。与原核表达产物ErBD5088相比,PrBD5088的酶学性质发生了一定的改变。其最适反应温度由80℃增加到90℃。最适反应pH值仍为pH5.6,但范围更宽,在pH值5.0~6.5之间,其相对酶活在90%以上,在pH4.0~8.0范围内酶活性保留50%以上。而ErBD5088则只在pH5.0~7.0范围内能维持活性的50%以上。且PrBD5088的温度稳定性远高于ErBD5088。PrBD5088在100℃条件下热处理1 h仍具有80%以上的酶活力,而ErBD5088相同条件下的半衰期只有20 min。此外,Ca2+和Zn2+对维持rBD5088活性和稳定性会产生轻微促进作用,该酶的这些优点使其非常适于在工业生产上应用。SDS-PAGE测得该酶的分子量为56 ku,高于原核表达的酶蛋白。重组α-淀粉酶PrBD5088不存在N-连接的糖基化,但是存在O-连接的糖基化现象。本实验结果表明O-连接糖基化可适当提高PrBD5088的热稳定性、最适温度和酸性pH条件下酶活性。
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关键词
超
耐热
酸性
α-
淀粉酶
THERMOCOCCUS
sp.
糖基化
密码子优化
毕赤酵母GS115
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职称材料
马铃薯抗性淀粉的制备条件分析
被引量:
6
4
作者
李光磊
李新华
金锋
《沈阳农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期491-493,共3页
以马铃薯淀粉为原料,采用压热法研制了抗性淀粉的制备条件。分析了淀粉乳浓度、压热时间、pH值以及冷藏时间对抗性淀粉产率的影响。在压热法制备的基础上,进行酶法处理,确定了耐热-α淀粉酶、普鲁兰酶的最佳用量,使抗性淀粉产率得到极...
以马铃薯淀粉为原料,采用压热法研制了抗性淀粉的制备条件。分析了淀粉乳浓度、压热时间、pH值以及冷藏时间对抗性淀粉产率的影响。在压热法制备的基础上,进行酶法处理,确定了耐热-α淀粉酶、普鲁兰酶的最佳用量,使抗性淀粉产率得到极大提高。
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关键词
马铃薯抗性
淀粉
耐热α-淀粉酶
普鲁兰酶
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职称材料
题名
耐热α-淀粉酶产生菌枯草芽孢杆菌抗噬菌体的选育
被引量:
2
1
作者
张建宁
机构
江苏食品职业技术学院
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2009年第12期5372-5374,共3页
文摘
[目的]选育出耐热α-淀粉酶产生菌枯草芽孢杆菌抗噬菌体菌株。[方法]从耐热α-淀粉酶产生菌枯草芽孢杆菌菌株HA06的异常发酵液中分离到了2种噬菌体,将其命名为KB011、KB012。以枯草芽孢杆菌HA06为出发菌株,采用噬菌体、紫外线和MNNG复合诱变法选育具有抗性的高产突变株,并对突变株的遗传稳定性和发酵的酶活力进行了考察。[结果]获得了3株抗性株,将其命名为KSB04、KSB08、KSB14,它们在试验浓度下对噬菌体KB011、KB012具有明显的抗性,在整个培养过程中表现正常。而敏感菌株HA06的生长则受到明显抑制,并产生大量的噬菌体,培养液中噬菌体的浓度最高可达1012pfu/ml以上。抗性株KSB04和KSB14有较好的遗传稳定性,在7次传代后酶活力仍在3 500 U/ml以上。[结论]获得了遗传稳定且发酵性能与出发菌相似的2株抗性株KSB04和KSB14。
关键词
耐热α-淀粉酶
枯草芽孢杆菌
抗噬菌体菌株
发酵
Keywords
Thermostable
α-
amylase
Bacillus subtilis
Phage
-
resistant mutant
Fermentation
分类号
TQ925.1 [轻工技术与工程—发酵工程]
TS252.1 [轻工技术与工程—农产品加工及贮藏工程]
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职称材料
题名
嗜热脂肪芽孢杆菌耐热α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达
2
作者
N.Tsukagoshi
李尔炀
出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
1990年第3期73-77,共5页
文摘
一序言杆菌属是分泌型酶类的重要来源(Priest 1977)。新近有一些队芽孢杆菌属菌种中克隆几种分泌酶类的报道,包括从解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens),凝结芽孢杆菌(B.Coagulans)和枯草芽孢杆菌(B.Subtilis)中克隆淀粉酶基因。
关键词
耐热α-淀粉酶
解
淀粉
芽孢杆菌
芽孢杆菌属
芽抱杆菌
地衣形芽孢杆菌
基因克隆
凝结芽孢杆菌
淀粉酶
活性
分泌酶
插入片段
分类号
Q93 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
合成嗜热酸性淀粉酶的毕赤酵母表达
被引量:
3
3
作者
柯涛
熊蓝
张乃群
马向东
惠丰立
牛秋红
杨果
机构
南阳师范学院生命科学与技术学院
湖北大学生命科学学院
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期30-35,共6页
基金
河南省科技攻关计划项目(112102310093)
河南省教育厅自然科学研究计划项目(2011B180039)
南阳师范学院校级引进人才专项项目(nynu200748)资助
文摘
把密码子优化后的超耐热酸性α-淀粉酶的基因BD5088,引入载体pPIC9K中,将正确构建的重组质粒pPIC9K-BD5088转化毕赤酵母GS115细胞,得到酵母工程菌株。在酵母α-Factor及AOX1基因启动子和终止信号的调控下,重组超耐热酸性α-淀粉酶PrBD5088在甲醇酵母中大量表达并分泌到胞外。该酶受甲醇的严格调控和诱导,在诱导培养5 d后酶活力达到最大值,表达量可达到约200 mg/L。与原核表达产物ErBD5088相比,PrBD5088的酶学性质发生了一定的改变。其最适反应温度由80℃增加到90℃。最适反应pH值仍为pH5.6,但范围更宽,在pH值5.0~6.5之间,其相对酶活在90%以上,在pH4.0~8.0范围内酶活性保留50%以上。而ErBD5088则只在pH5.0~7.0范围内能维持活性的50%以上。且PrBD5088的温度稳定性远高于ErBD5088。PrBD5088在100℃条件下热处理1 h仍具有80%以上的酶活力,而ErBD5088相同条件下的半衰期只有20 min。此外,Ca2+和Zn2+对维持rBD5088活性和稳定性会产生轻微促进作用,该酶的这些优点使其非常适于在工业生产上应用。SDS-PAGE测得该酶的分子量为56 ku,高于原核表达的酶蛋白。重组α-淀粉酶PrBD5088不存在N-连接的糖基化,但是存在O-连接的糖基化现象。本实验结果表明O-连接糖基化可适当提高PrBD5088的热稳定性、最适温度和酸性pH条件下酶活性。
关键词
超
耐热
酸性
α-
淀粉酶
THERMOCOCCUS
sp.
糖基化
密码子优化
毕赤酵母GS115
Keywords
thermoacidophilic
α-
amylase
Thermococcus sp.
glycosylation
optimal codon
Pichia pastoris GS115
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
马铃薯抗性淀粉的制备条件分析
被引量:
6
4
作者
李光磊
李新华
金锋
机构
沈阳农业大学
出处
《沈阳农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期491-493,共3页
文摘
以马铃薯淀粉为原料,采用压热法研制了抗性淀粉的制备条件。分析了淀粉乳浓度、压热时间、pH值以及冷藏时间对抗性淀粉产率的影响。在压热法制备的基础上,进行酶法处理,确定了耐热-α淀粉酶、普鲁兰酶的最佳用量,使抗性淀粉产率得到极大提高。
关键词
马铃薯抗性
淀粉
耐热α-淀粉酶
普鲁兰酶
Keywords
potato resistant starch
thermo
-
stable
α-
amylase
pullulanase
分类号
TS235.1 [轻工技术与工程—粮食、油脂及植物蛋白工程]
S532 [农业科学—作物学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
耐热α-淀粉酶产生菌枯草芽孢杆菌抗噬菌体的选育
张建宁
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2009
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
嗜热脂肪芽孢杆菌耐热α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达
N.Tsukagoshi
李尔炀
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
1990
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
合成嗜热酸性淀粉酶的毕赤酵母表达
柯涛
熊蓝
张乃群
马向东
惠丰立
牛秋红
杨果
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2012
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
马铃薯抗性淀粉的制备条件分析
李光磊
李新华
金锋
《沈阳农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
6
在线阅读
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职称材料
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