应用抑制性消减杂交筛选志贺菌基因转移耐多药相关基因 被引量：1

1

作者 宋春花 王颖芳 +1 位作者 段广才 郗园林 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第1期63-66,共4页

目的:应用抑制性消减杂交技术初步筛选志贺菌基因转移耐多药相关基因。方法:以志贺菌基因转移耐多药株DNA为检测子,以其敏感株DNA为驱赶子,构建DNA消减文库,采用PCR鉴定及斑点杂交进行筛选,并随机挑取阳性克隆测序,所得结果在GenBank中... 目的:应用抑制性消减杂交技术初步筛选志贺菌基因转移耐多药相关基因。方法:以志贺菌基因转移耐多药株DNA为检测子,以其敏感株DNA为驱赶子,构建DNA消减文库,采用PCR鉴定及斑点杂交进行筛选,并随机挑取阳性克隆测序,所得结果在GenBank中进行同源性比较和分析。结果:成功构建了志贺菌基因转移耐多药株的特异性DNA消减杂交文库。选取部分阳性克隆进行杂交筛选,其中5个测序成功,与GenBank数据库进行初步比对,3个可能为新基因,2个为已知基因(Tn3926转座子部分的转座酶基因及23SrRNA核糖体核糖核酸)。结论:成功构建了志贺菌基因转移耐多药株的特异性DNA消减杂交文库并获得了其耐多药相关基因,提示转座子介导的耐药机制可能在志贺菌基因转移耐多药中起重要作用。 展开更多

关键词 志贺菌 基因转移 耐多药相关基因

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小儿恶性肿瘤化疗前后外周血多药耐药基因、多药耐药相关蛋白基因、肺耐药蛋白基因的变化及临床意义 被引量：7

2

作者 邓晓斌 王珊 +3 位作者 邹琳 李长春 章均 欧阳军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1087-1090,共4页

目的探讨实体恶性肿瘤化疗患儿外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中多药耐药基因(multi-drug resistance1,MDR1)、多药耐药相关蛋白基因(multi-drug resistance-associated protein1,MRP1)、肺耐药蛋白基因(l... 目的探讨实体恶性肿瘤化疗患儿外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中多药耐药基因(multi-drug resistance1,MDR1)、多药耐药相关蛋白基因(multi-drug resistance-associated protein1,MRP1)、肺耐药蛋白基因(lung resistance protein,LRP)的表达量及其与临床化疗的关系。方法应用实时荧光定量PCR(real-time fluores-cence quantitative PCR,FQ-PCR)技术,检测患儿化疗前后外周血和手术切除新鲜冻存组织,以及对照组外周血中MDR1、MRP1、LRP的mRNA表达量。结果所有化疗患儿外周血MDR1表达量与同期手术切除的肿瘤组织MDR1表达量存在正相关(r=0.894,P=0.000);化疗前后外周血MDR1表达量变化与肿瘤大小变化间存在负相关:神经母细胞瘤(r=-0.733,P=0.000),卵黄囊瘤(r=-0.874,P=0.000),淋巴瘤(r=-0.617,P=0.005);化疗前外周血MDR1表达量与首次化疗后相应肿瘤标志物变化大小呈负相关:神经母细胞瘤尿香草杏仁酸(VMA)(r=-0.440,P=0.046),卵黄囊瘤甲胎蛋白(AFP)(r=-0.831,P=0.000),淋巴瘤乳酸脱氢酶(LDH)(r=-0.495,P=0.031)。随着化疗次数的增加MDR1表达量增加(P<0.05)。结论动态检测患儿化疗前后PBMCs中MDR1mRNA水平对化疗疗效及预后的判定有一定的指导意义,可在一定程度上指导化疗方案的修订。 展开更多

关键词 小儿实体恶性肿瘤 多药耐药基因 多药耐药相关蛋白基因 肺耐药蛋白基因 外周血 荧光定量PCR

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鼻咽癌患者多药耐药相关蛋白基因的表达及意义 被引量：5

3

作者 胡国华 李兵 朱江 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期90-91,共2页

目的 :探讨MRP基因在鼻咽癌的表达状况及其与鼻咽癌临床病理特征的关系。方法 :应用免疫组化技术检测 40例鼻咽癌组织中多药耐药相关蛋白 (multidrugresistance -associatedprotein ,MRP)基因的表达 ,并分析与鼻咽癌临床病理特征的关系... 目的 :探讨MRP基因在鼻咽癌的表达状况及其与鼻咽癌临床病理特征的关系。方法 :应用免疫组化技术检测 40例鼻咽癌组织中多药耐药相关蛋白 (multidrugresistance -associatedprotein ,MRP)基因的表达 ,并分析与鼻咽癌临床病理特征的关系。结果 :鼻咽癌组织中MRP基因阳性表达率为 42 .5 %( 17/4 0 ) ,与年龄、性别和淋巴结转移无关 ,但是 ,T3～ 4 期鼻咽癌的表达率明显高于T1～ 2 期 (p <0 .0 5 )。结论 :MRP基因是鼻咽癌产生多药耐药的机制之一 ,并涉及肿瘤的浸袭 ,有可能成为判断预后和化疗效果的指标。 展开更多

关键词 鼻咽癌 多药耐药相关蛋白基因 MRP基因 免疫组化 表达率

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胃癌细胞多药耐药基因相关蛋白和p53表达及其相互关系 被引量：2

4

作者 金锋 樊华 +2 位作者 任常山 徐惠绵 王舒宝 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期452-454,共3页

目的 :研究胃癌细胞中多药耐药基因相关蛋白 (multidrugresistance associatedprotein ,MRP)和抑癌基因p5 3的表达以及与胃癌生物学行为之间的关系。方法 :用免疫组织化学方法对 4 0例胃癌组织标本MRP及p5 3表达进行检测。结果 :MRP阳... 目的 :研究胃癌细胞中多药耐药基因相关蛋白 (multidrugresistance associatedprotein ,MRP)和抑癌基因p5 3的表达以及与胃癌生物学行为之间的关系。方法 :用免疫组织化学方法对 4 0例胃癌组织标本MRP及p5 3表达进行检测。结果 :MRP阳性率为 4 5 % (18/ 4 0 )。MRP阳性病例中p5 3阳性率为 4 4 .4 % (8/ 18)。MRP阴性病例中p5 3阳性率为 4 0 .8%。MRP的表达与胃癌大体类型、组织类型、浸润深度、淋巴转移、远隔转移等因素无关。与p5 3的表达之间关系无显著意义。结论 :MRP在胃癌组织中有较高水平的表达 ,其表达水平与胃癌生物学行为特点无关。p5 展开更多

关键词 多药耐药基因相关蛋白 P53 胃癌 生物学行为

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多药耐药相关蛋白基因多态性与类风湿性关节炎关系的研究进展 被引量：3

5

作者 骆康凯 杨国安 王永福 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期175-180,共6页

类风湿性关节炎(RA)是一种慢性多关节对称性受累,以手小关节为主,伴多系统受累的全身性免疫系统疾病,发病率与致残率高,目前临床治疗主要以缓解病情抗风湿药(DMARD)控制病情进展为主,延缓关节的破坏。长期应用DMARD过程中发现其疗效逐... 类风湿性关节炎(RA)是一种慢性多关节对称性受累,以手小关节为主,伴多系统受累的全身性免疫系统疾病,发病率与致残率高,目前临床治疗主要以缓解病情抗风湿药(DMARD)控制病情进展为主,延缓关节的破坏。长期应用DMARD过程中发现其疗效逐渐下降,即产生耐药,然而DMARD耐药机制研究甚少。药物疗效和毒副作用的个体差异主要是由遗传因素决定的。我们总结了多药耐药相关蛋白基因多态性与RA传统药物治疗的相关性,分析了不同的基因型患者对药物的疗效及毒副作用,为个体化用药提供依据,从而实现精准医疗,RA的个体化用药。 展开更多

关键词 类风湿性关节炎(RA) 多药耐药相关蛋白基因 多态性 改善病情抗风湿药(DMARD) 综述

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应用抑制消减杂交(SSH)克隆肺腺癌多药耐药细胞特异表达基因 被引量：8

6

作者 陈杰 钱桂生 +3 位作者 黄桂君 熊玮 李靖 LI Jing 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期131-134,共4页

目的　克隆和筛选肺腺癌多药耐药细胞特异表达基因。方法　将肺腺癌多药耐药细胞 (SPC A 1/CDDP)作为实验组 ,肺腺癌细胞 (SPC A 1)作为对照组 ,应用抑制消减杂交技术 ,构建实验组特异表达cDNA消减文库 ;用斑点杂交初步筛选cDNA消减文库... 目的　克隆和筛选肺腺癌多药耐药细胞特异表达基因。方法　将肺腺癌多药耐药细胞 (SPC A 1/CDDP)作为实验组 ,肺腺癌细胞 (SPC A 1)作为对照组 ,应用抑制消减杂交技术 ,构建实验组特异表达cDNA消减文库 ;用斑点杂交初步筛选cDNA消减文库后 ,将获得的阳性克隆进行测序和同源性分析 (Genebank)。结果　建立了一个肺腺癌多药耐药细胞 (SPC A 1/CDDP)特异表达cDNA消减文库 ,斑点杂交初步筛选显示 2 3个克隆中有SPC A 1/CDDP特异表达cDNA片断 ,测序和同源性分析表明 2个cDNA片断为新序列 ,其余cDNA片断与已知基因有 96%～ 10 0 %的同源性。结论　 2个新的cDNA序列可能为未知肺腺癌多药耐药相关基因序列 ;抑制消减杂交是克隆特异表达基因的有效方法。 展开更多

关键词 人肺腺癌细胞 多药耐药相关基因 抑制消减杂交 SSH

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以多药耐药基因为靶标的siRNA对耐药肿瘤细胞药物敏感性和凋亡的影响 被引量：1

7

作者 胡海燕 郭坤元 +3 位作者 刘革修 马秀君 姜铧 马文丽 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期550-553,共4页

目的:研究应用以多药耐药相关蛋白(MRP)基因为靶标的siRNA(small interference RNA)抑制相应蛋白表达后,耐药肿瘤细胞药物敏感性和凋亡率的改变。方法:通过脂质体将以MRP基因为靶标的siRNA(100μmol/L)转入柔红霉素(DNR)0.8、1.6、3.2、... 目的:研究应用以多药耐药相关蛋白(MRP)基因为靶标的siRNA(small interference RNA)抑制相应蛋白表达后,耐药肿瘤细胞药物敏感性和凋亡率的改变。方法:通过脂质体将以MRP基因为靶标的siRNA(100μmol/L)转入柔红霉素(DNR)0.8、1.6、3.2、6.4、12.8μg/mL处理的肺癌耐药细胞株SW1573/R20;阿霉素(ADM)1.6、3.2、6.4、12.8、25.6μg/mL处理的白血病耐药细胞株K562/ADM;顺铂(DDP)0.125、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0μmol/mL处理的鼻咽癌耐药细胞株CNE2/DDP;以单纯化疗处理组和未处理组为对照。于转染后24、48、72h,用MTT法检测各组细胞生长抑制率,算出各细胞IC50。转染siRNA联合IC50剂量化疗处理6 h后流式细胞仪检测各细胞凋亡率和死亡率,24 h后RT-PCR检测相应基因mRNA表达水平,48 h后检测MRP蛋白表达率。结果:以MRP为靶标的siRNA明显抑制各肿瘤细胞靶基因蛋白和mRNA的表达,与未处理组相比均有统计学差异(P<0.05);转染以MRP为靶标的siRNA后,耐药肿瘤细胞对化疗药物敏感性明显增强,IC50明显降低,细胞凋亡率明显增加,与单纯化疗组相比有统计学差异(P<0.05)。结论:以MRP基因为靶标的siRNA,通过降低靶基因mRNA和蛋白表达,明显增加耐药肿瘤细胞药物敏感性和凋亡率。 展开更多

关键词 BCL-2基因 SIRNA 多药耐药相关蛋白基因

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原代视网膜母细胞瘤耐药基因及耐药蛋白表达的研究 被引量：2

8

作者 刘万丽 吴中耀 +1 位作者 杨华胜 颜建华 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2008年第12期908-911,共4页

目的研究视网膜母细胞瘤(Rb)瘤细胞多药耐药基因(MDR1)和多药耐药相关蛋白(MRP)基因以及相应耐药蛋白P-gp和MRP的表达水平。方法共35例Rb患儿,行眼球摘除术时取新鲜的肿瘤细胞,用RT-PCR的方法检测Rb瘤细胞是否有耐药基因MDR1和MRP基因... 目的研究视网膜母细胞瘤(Rb)瘤细胞多药耐药基因(MDR1)和多药耐药相关蛋白(MRP)基因以及相应耐药蛋白P-gp和MRP的表达水平。方法共35例Rb患儿,行眼球摘除术时取新鲜的肿瘤细胞,用RT-PCR的方法检测Rb瘤细胞是否有耐药基因MDR1和MRP基因的表达,用免疫组织化学的方法检测相应耐药蛋白P-gp和MRP的表达。结果34例Rb瘤细胞进行了耐药基因的检测,MDR1基因平均表达水平为0.41±0.38,MRP基因平均表达水平为0.73±0.92;35例Rb进行了耐药蛋白的检测,P-gp有15例阳性(42.9%),MRP有23例阳性(65.7%);34例Rb两种基因和蛋白两种方法的检验结果呈一致性;两种耐药基因及两种耐药蛋白的表达相互间有一定的联系。结论原代Rb瘤细胞中一部分个体有不同程度的耐药基因MDR1和MRP基因及其产物耐药蛋白P-gp和MRP的表达,提示Rb可能存在原发耐药性。 展开更多

关键词 视网膜母细胞瘤 多药耐药基因 多药耐药相关蛋白基因 P粘蛋白 多药耐药相关蛋白

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MDR相关新基因CA916798真核表达载体的构建及其对H446细胞增殖的影响 被引量：5

9

作者 王海晶 杨和平 周向东 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第24期2315-2318,共4页

目的构建新基因CA916798真核表达载体,并观察其对H446增殖的影响。方法以人A549细胞总RNA为模板,用RT-PCR技术扩增获得CA916798开放阅读框序列,连接入pBluescriptⅡSK克隆载体上,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,酶切与DNA... 目的构建新基因CA916798真核表达载体,并观察其对H446增殖的影响。方法以人A549细胞总RNA为模板,用RT-PCR技术扩增获得CA916798开放阅读框序列,连接入pBluescriptⅡSK克隆载体上,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,酶切与DNA测序鉴定准确,再用双酶切方法将CA916798开放阅读框序列定向连接到真核表达载体pQE-Trisystem中,构成pQE-Tri-CA916798,将pQE-Tri-CA916798转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确,脂质体转染人小细胞肺癌细胞系H446细胞,选取稳定转染不同质粒的H446细胞,采用MTT绘制细胞增殖曲线,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率。结果扩增出CA916798开放阅读框序列,大小约为350bp,重组质粒的酶切鉴定结果与预期一致,测序结果完全正确。转染了pQE-Tri-CA916798的H446细胞顺铂作用后增殖速度加快,凋亡率下降。结论成功构建了pQE-Tri-CA916798真核表达质粒,并初步证实了其与顺铂诱导的肺癌多药耐药相关。 展开更多

关键词 肺癌多药耐药相关基因 CA916798基因 H446细胞 表达载体

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肺癌耐药机制研究的新进展 被引量：7

10

作者 吕汪霞 苏丹 马胜林 《中国肺癌杂志》 CAS 2005年第2期152-155,共4页

关键词 机制研究 多药耐药相关蛋白基因 谷胱甘肽S转移酶 肺耐药蛋白基因 多药耐药基因 P-糖蛋白 TopoⅡ 拓扑异构酶 恶性肿瘤 手术机会 治疗手段 肺癌患者 生活质量 肿瘤细胞 研究发现 产物表达 系统表达 生存率 耐受性 化疗

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ABCC4/MRP4和ABCC5/MRP5基因在NK/T细胞淋巴瘤的表达及与临床疗效的关系 被引量：4

11

作者 李汝平 韩丽娟 +4 位作者 张旭东 张明智 胡腾鹏 秦贝贝 文建国 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期8-14,共7页

背景与目的:NK/T细胞淋巴瘤(natural killer/T cell lymphoma)疗效差,多药耐药(multidrug resistance,MDR)的产生是引起肿瘤产生耐药和化疗疗效降低及失败的原因之一,本文通过研究多药耐药相关蛋白4(ABCC4 multidrug resistance associa... 背景与目的:NK/T细胞淋巴瘤(natural killer/T cell lymphoma)疗效差,多药耐药(multidrug resistance,MDR)的产生是引起肿瘤产生耐药和化疗疗效降低及失败的原因之一,本文通过研究多药耐药相关蛋白4(ABCC4 multidrug resistance associated protein,ABCC4/MRP)基因和多药耐药相关蛋白5(ABCC5 multidrug resistance associated protein,ABCC5/MRP)基因在NK/T细胞淋巴瘤SNK-6、YTS细胞株和组织中的表达情况,结合临床疗效了解其与预后的关系。方法:应用实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术和免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测ABCC4/MRP4、ABCC5/MRP5基因mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常NK细胞相比,ABCC4/MRP4、ABCC5/MRP5基因在SNK-6、YTS细胞株中高表达(P<0.05);与鼻炎组织相比,ABCC4/MRP4、ABCC5/MRP5基因在NK/T细胞淋巴瘤患者组织中高表达(P<0.05);ABCC4/MRP4、ABCC5/MRP5基因表达量的高低和临床疗效呈负相关(P<0.05)。结论:ABCC4/MRP4、ABCC5/MRP5基因及其表达蛋白影响NK/T细胞淋巴瘤的疗效。 展开更多

关键词 多药耐药相关蛋白4基因 多药耐药相关蛋白5基因 NK T细胞淋巴瘤 SNK-6 YTS细胞株

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球虫感染对蛋鸡肝脏和肠道mdr_1、mrp_2和bcrp mRNA表达水平的影响 被引量：1

12

作者 苏利娅 董玲玲 王丽平 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期95-99,共5页

为探索球虫感染对蛋鸡肝脏和肠道组织中多药耐药蛋白基因(mdr1)、多药耐药相关蛋白基因(mrp2)和乳腺癌耐药蛋白基因(bcrp)mRNA表达的影响,采用荧光定量PCR方法,以β-actin为内参,对球虫感染蛋鸡以及健康蛋鸡的肝脏、十二指肠、空肠、回... 为探索球虫感染对蛋鸡肝脏和肠道组织中多药耐药蛋白基因(mdr1)、多药耐药相关蛋白基因(mrp2)和乳腺癌耐药蛋白基因(bcrp)mRNA表达的影响,采用荧光定量PCR方法,以β-actin为内参,对球虫感染蛋鸡以及健康蛋鸡的肝脏、十二指肠、空肠、回肠中的mdr1和mrp2及bcrp mRNA进行相对定量测定。结果表明:与健康对照鸡比较,球虫感染导致mdr1 mR-NA表达水平在十二指肠中有显著上调(P=0.043),而在其他组织中mRNA表达水平均无显著差异(P>0.05);mrp2 mR-NA表达水平在健康和球虫感染蛋鸡的肝脏及肠道中均无显著差异(P>0.05);bcrp mRNA表达在肝脏(P=0.021)、回肠(P=0.021)、空肠(P=0.021)中均出现显著性下调,在十二指肠中则变化不显著。结论:球虫感染可使蛋鸡组织中的部分ABC(ATP-binding cassette)转运子的mRNA表达水平发生变化,但是不同基因在不同组织的变化趋势不同。提示:疾病期间用药可能会对药物的吸收和排泄有影响。 展开更多

关键词 球虫感染 多药耐药蛋白基因(mdr1) 多药耐药相关蛋白基因(mrp2) 乳腺癌耐药蛋白基因(bcrp) 实时定量PCR

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