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杂交构树UDP-葡萄糖脱氢酶基因编码蛋白的亚细胞定位及其启动子5'端缺失片段的功能分析 被引量:3
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作者 吉仁花 张文波 +4 位作者 林晓飞 包颖亮 特日格勒 包会嘎 白淑兰 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期932-942,共11页
为了研究杂交构树UDP-葡萄糖脱氢酶基因(DDBJ,BpUGDH基因登录号为LC457701)启动子不同区域的表达活性,利用5′端缺失及同源重组实验技术,将5个不同长度的BpUGDH启动子5′端缺失片段与GUS基因连接,并通过农杆菌介导法瞬时转化烟草;同时,... 为了研究杂交构树UDP-葡萄糖脱氢酶基因(DDBJ,BpUGDH基因登录号为LC457701)启动子不同区域的表达活性,利用5′端缺失及同源重组实验技术,将5个不同长度的BpUGDH启动子5′端缺失片段与GUS基因连接,并通过农杆菌介导法瞬时转化烟草;同时,为了定位BpUGDH基因编码的蛋白在细胞中表达的具体位置,利用GFP报告基因融合目的基因进行蛋白质的亚细胞定位。结果显示:BpUGDH基因启动子-244 bp以内的序列均能介导GUS基因的诱导表达,并且-973、-465、-355、-281和-244 bp之间的区域可能对BpUGDH基因启动子的活性发挥着至关重要的作用。另外,BpUGDH基因编码蛋白的亚细胞定位结果显示:BpUGDH位于叶绿体中。 展开更多
关键词 顺式作用元件 BpUGDH 亚细胞定位 杂交构树 5′端缺失分析法 瞬时表达
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橡胶树HbFCA启动子在转基因烟草中的功能缺失分析
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作者 李季 戴雪梅 +3 位作者 孙芳 黄天带 华玉伟 黄华孙 《热带农业科学》 2017年第7期62-66,74,共6页
利用5′缺失设计一系列引物,扩增HbFCA启动子质粒,获得5个启动子缺失片段,用这些片段分别替换PBI121载体中的CaMV35S启动子,得到5个HbFCA的5′缺失表达载体,即pA、pB、pC、pD和pE。利用农杆菌介导叶盘法进行烟草遗传转化,对组培瓶内生... 利用5′缺失设计一系列引物,扩增HbFCA启动子质粒,获得5个启动子缺失片段,用这些片段分别替换PBI121载体中的CaMV35S启动子,得到5个HbFCA的5′缺失表达载体,即pA、pB、pC、pD和pE。利用农杆菌介导叶盘法进行烟草遗传转化,对组培瓶内生根较好的烟草叶片GUS染色,结果发现,长度为最小片段的276 bp的pE可以较好地实现HbFCA启动子的功能。对橡胶树体细胞胚瞬时表达检测发现,pE片段也能启动表达,有较好的GUS活性,可以实现HbFCA启动子的功能。 展开更多
关键词 橡胶树 HbFCA 启动子 5′端缺失分析法 核心结构域
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杨树木质部特异启动子5'端侧翼序列缺失表达载体构建及转化烟草的研究 被引量:6
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作者 赵金风 李杰 +1 位作者 张爽 杜克久 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期858-861,共4页
采用5'端系列缺失分析法,PCR扩增杨树木质部特异性启动子JCesAP中与转录起始位点距离不同的5'端缺失启动子片段ZU2、ZU3、ZU4。为鉴定缺失片段的功能活性,以β-葡糖醛酸酶基因(GUS)作为报告基因,分别构建JCesAP启动子3个缺失片... 采用5'端系列缺失分析法,PCR扩增杨树木质部特异性启动子JCesAP中与转录起始位点距离不同的5'端缺失启动子片段ZU2、ZU3、ZU4。为鉴定缺失片段的功能活性,以β-葡糖醛酸酶基因(GUS)作为报告基因,分别构建JCesAP启动子3个缺失片段的表达载体,并通过农杆菌介导瞬时转化烟草。对转化烟草植株进行GUS活性检测的结果表明,缺失片段ZU3、ZU4有启动子活性,且ZU4启动子活性强度与CaMV35S启动子相当,转化烟草的叶片表面都呈现大面积蓝色,而ZU2没有启动子活性。木质部特异性核心启动子的筛选将有助于利用转基因技术治理桑天牛等天牛类蛀干害虫。 展开更多
关键词 杨树 木质部特异启动子 缺失分析法 载体构建 瞬时表达
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