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绿脓杆菌外毒素A与人组蛋白H_4嵌合蛋白基因克隆及其原核表达载体的构建 被引量:1
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作者 邓景致 欧阳红生 +4 位作者 涂长春 朱平 张国利 廖晓萍 薛崧 《黑龙江八一农垦大学学报》 2002年第3期60-63,共4页
设计引物以pCDPT2质粒(含PEA全序列)为模板亚克隆获得PEA功能区Ⅰa及功能区Ⅱ基因片段(1100 bp); 提取人染色体DNA作为模板,利用一对设计引物扩增获得了人组蛋白H4基因片段(316 bp);将两基因片段连接,构建了融合基因中间载体pMD-18T-PEA... 设计引物以pCDPT2质粒(含PEA全序列)为模板亚克隆获得PEA功能区Ⅰa及功能区Ⅱ基因片段(1100 bp); 提取人染色体DNA作为模板,利用一对设计引物扩增获得了人组蛋白H4基因片段(316 bp);将两基因片段连接,构建了融合基因中间载体pMD-18T-PEA-H4;融合基因经NcoⅠ及XhoⅠ酶切,以正确阅读框架插入相同酶切的pET-28A中,经酶切分析及PCR扩增检测,筛选到阳性克隆,其质粒测序结果表明成功地构建了毒性基因缺失的PEA与人组蛋白H4融合基因的原核表达载体,为进一步表达并获得大量的融合蛋白奠定了基础。 展开更多
关键词 基因克隆 原核表达载体 绿脓杆菌外毒素a 组蛋白H4 嵌合蛋白 真核细胞
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定点突变提高IL-4免疫毒素对淋巴瘤的选择性和杀伤活性
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作者 崔京霞 纪剑飞 +1 位作者 吕安国 吴文芳 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期874-879,F006,共7页
采用软件分析选择与IL-4分子结合与活性相关的重要位点13T,121R,通过定点突变得到IL-4突变基因cpIL4(13D121E),将其与绿脓杆菌外毒素突变基因PE38KDEL融合,成功地构建了编码免疫毒素cpIL4(13D121E)-PE38KDEL的融合基因.该基因在原核表... 采用软件分析选择与IL-4分子结合与活性相关的重要位点13T,121R,通过定点突变得到IL-4突变基因cpIL4(13D121E),将其与绿脓杆菌外毒素突变基因PE38KDEL融合,成功地构建了编码免疫毒素cpIL4(13D121E)-PE38KDEL的融合基因.该基因在原核表达系统中得到了高效表达,表达量占细胞全蛋白的30%以上.表达产物经亲和色谱和阴离子交换色谱纯化后,进行细胞毒性实验,证明其对表达型IL-4受体的淋巴瘤细胞Daudi具有良好的细胞毒作用,活性是同类型IL-4免疫毒素的2倍,而对表达型IL-4受体的内皮细胞活性较低. 展开更多
关键词 免疫毒素 白细胞介素-4(IL-4) 绿脓杆菌外毒素
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LHRH-PE40与正常肝组织和肝癌细胞表面LHRH受体结合特性的比较研究 被引量:3
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作者 赵刚 龚守良 朱平 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期193-195,共3页
目的 探讨重组促性腺激素释放激素 绿脓杆菌外毒素 4 0 (LHRH PE4 0 )与正常肝脏组织和肝癌细胞表面受体结合特性的差异。方法 用放射性配基结合分析的方法测定亲和力和受体容量。结果 LHRH PE4 0与肝癌细胞HEPG细胞的亲和力Kd为 (0 ... 目的 探讨重组促性腺激素释放激素 绿脓杆菌外毒素 4 0 (LHRH PE4 0 )与正常肝脏组织和肝癌细胞表面受体结合特性的差异。方法 用放射性配基结合分析的方法测定亲和力和受体容量。结果 LHRH PE4 0与肝癌细胞HEPG细胞的亲和力Kd为 (0 .4 3± 0 .12 )nmol·L-1,受体容量Bmax为 (0 .37± 0 .15 )nmol·mg-1,与正常肝脏组织未见结合。结论 重组毒素LHRH PE4 0和肝癌细胞HEPG的表面受体有较强的结合 ,而和正常肝脏组织无特异性结合。 展开更多
关键词 LHRH-PE40 正常肝组织 肝癌 细胞表面LHRH受体 重组促性腺激素释放激素-绿脓杆菌外毒素40
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细菌传染病、球菌传染病
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《国外科技资料目录(医药卫生)》 2000年第1期15-15,共1页
0000283 暴发性甲型链球菌的病原性[日]/村井法之//现代医疗.-1998,30(5).-77~86 冀医情0000284 肠球菌菌血症147例的研究[日]/平田范夫//感染志.-1998,72(4).-436 冀医情0000285 近10年间复数菌分离的败血症16例[日]/松尾勇作//感染志... 0000283 暴发性甲型链球菌的病原性[日]/村井法之//现代医疗.-1998,30(5).-77~86 冀医情0000284 肠球菌菌血症147例的研究[日]/平田范夫//感染志.-1998,72(4).-436 冀医情0000285 近10年间复数菌分离的败血症16例[日]/松尾勇作//感染志.-1998,72(4).-436 展开更多
关键词 甲型链球菌 肠球菌 复数菌 败血症 病原性 感染 菌血症 细菌传染病 暴发性 绿脓杆菌外毒素
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医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学)
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《国外科技资料目录(医药卫生)》 2001年第1期19-19,共1页
0100370 伯纳特立克次体对单核细胞功能的破坏:使αvβ3整合素和 CR3间的相互作用受损/Capo C//J Immunol.-1999,163(11).-6078~6085 四军大0100371 绿脓杆菌外毒素 A(Exotoxin A)对人嗜中性细胞活性氧释放能的影响[日]/斧康雄//感染志... 0100370 伯纳特立克次体对单核细胞功能的破坏:使αvβ3整合素和 CR3间的相互作用受损/Capo C//J Immunol.-1999,163(11).-6078~6085 四军大0100371 绿脓杆菌外毒素 A(Exotoxin A)对人嗜中性细胞活性氧释放能的影响[日]/斧康雄//感染志.-1999,73(4)- 展开更多
关键词 绿脓杆菌外毒素 立克次体 整合素 医学微生物学 活性氧释放 相互作用 嗜中性细胞 病原细菌学 病原微生物学 细胞功能
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