Pcgf2促进鸡胚成纤维细胞重编程形成诱导多能干细胞

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作者 姚梓淇 廖立钦 +2 位作者 宋佳蓓 张新珩 谢青梅 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期311-320,共10页

【目的】以提高诱导鸡多能干细胞的干性为目的,利用Pcgf2基因与传统诱导多能干细胞的重编程因子共同诱导鸡多能干细胞。【方法】以鸡早期胚胎为模板,对Oct4、Sox2、Nanog、Lin28、C-myc、Klf4这6种传统的重编程因子及Pcgf2进行基因扩增... 【目的】以提高诱导鸡多能干细胞的干性为目的,利用Pcgf2基因与传统诱导多能干细胞的重编程因子共同诱导鸡多能干细胞。【方法】以鸡早期胚胎为模板,对Oct4、Sox2、Nanog、Lin28、C-myc、Klf4这6种传统的重编程因子及Pcgf2进行基因扩增,并与慢病毒载体重组为慢病毒质粒,在包装慢病毒并测定相对应的病毒滴度后,分组感染鸡胚成纤维细胞,在诱导的过程中对干细胞标记物进行检测。【结果】利用传统的重编程因子组合与加入Pcgf2共同诱导后的细胞都较早地表达出磷酸酶活性。加入Pcgf2诱导多能干细胞可以使细胞更早地出现类干细胞形态,且内源性基因Oct4、Sox2、Nanog和Lin28的表达得到更稳定的提高。【结论】Pcgf2在加入诱导体系后可以有效提高细胞的重编程接近干细胞状态。该研究可为选择重编程因子诱导鸡细胞完全重编程及其机制研究提供理论参考。 展开更多

关键词 鸡 慢病毒 多能转录因子 鸡胚成纤维细胞 体细胞重编程 诱导多能干细胞

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小分子组合诱导大鼠胚胎成纤维细胞重编程为功能性神经元

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作者 高群伟 代振佳 +2 位作者 杨新康 刘长青 刘高峰 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期498-508,共11页

目的:建立通过小分子化合物将大鼠胚胎成纤维细胞(REF)重编程为化学诱导神经元(ciNC)的方法体系,为细胞移植治疗神经退行性疾病提供安全有效的供体细胞。方法:以裴钢研究团队建立的人成纤维细胞直接重编程为神经元的方法为基础,通过更... 目的:建立通过小分子化合物将大鼠胚胎成纤维细胞(REF)重编程为化学诱导神经元(ciNC)的方法体系,为细胞移植治疗神经退行性疾病提供安全有效的供体细胞。方法:以裴钢研究团队建立的人成纤维细胞直接重编程为神经元的方法为基础,通过更换包被液、缓解氧化应激损伤、添加神经源性保护因子、调整毛喉素浓度和小分子去除实验对诱导培养基和成熟培养基进行优化,并通过免疫荧光法和蛋白质印迹法验证不同诱导阶段细胞的相关蛋白质。结果:以原方案进行诱导时,细胞存活率仅(34.24±2.77)%。包被液更换为基质胶后,细胞存活率上升到(45.41±4.27)%;添加褪黑素后细胞存活率提高至(67.95±5.61)%,(23.43±1.42)%的细胞转变为神经样细胞;添加小分子P7C3-A20后细胞存活率进一步提升至(76.27±1.41)%,(39.72±4.75)%的细胞转变为神经样细胞;毛喉素浓度提升至30μmol/L时,神经样细胞比例达到(55.79±1.90)%;去除SP600125后,(86.96±2.15)%细胞存活,神经样细胞生成率提高至(63.43±1.60)%。以优化后的方案诱导,可经过神经前体细胞将REF诱导为ciNC。其中,神经前体细胞能够高表达神经前体细胞标志物SRY-box转录因子2、配对盒6以及神经元特异性标志物Ⅲ类β-微管蛋白,而成纤维相关蛋白波形蛋白表达量减少。神经前体细胞在成熟培养基中诱导两周后,可见大部分细胞呈神经样细胞形态,诱导后的ciNC高表达Ⅲ类β-微管蛋白和微管相关蛋白2,而成纤维相关蛋白波形蛋白表达减少。结论:优化后的小分子组合在常氧条件下能将REF重编程为ciNC。 展开更多

关键词 体细胞重编程 小分子化合物 胚胎成纤维细胞 化学诱导神经元 大鼠

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microRNA在诱导体细胞重编程中的作用 被引量：7

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作者 王春生 张志人 +1 位作者 朴善花 安铁洙 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1545-1550,共6页

microRNA是调控基因转录后水平的一类长度约为22个核苷酸的非编码小分子RNA。大量研究证实,microRNAs广泛分布于真核生物,其在细胞的分化发育、生长代谢等各种活动中都起着重要的调节作用。诱导多能性干细胞(Induced pluripotent stem c... microRNA是调控基因转录后水平的一类长度约为22个核苷酸的非编码小分子RNA。大量研究证实,microRNAs广泛分布于真核生物,其在细胞的分化发育、生长代谢等各种活动中都起着重要的调节作用。诱导多能性干细胞(Induced pluripotent stem cell,iPS)是将体细胞诱导成为具有胚胎干细胞性质的多潜能干细胞。iPS过程的核心为体细胞表观遗传状态发生重编程,因此,探明体细胞重编程机制对建立完善的iPS技术具有重要理论和实际意义。利用病毒载体将Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc等因子导入体细胞的方法已不断发展,但"基因组整合"及原癌基因的参与增加了诱导细胞的致癌率。随着使用腺病毒、质粒或蛋白诱导等"非整合型"方法及L-myc的替换均可获得具有多潜能性的干细胞,癌变的风险大大降低。但其发生的理论机制仍不十分清楚。最近的研究证实,microRNAs影响体细胞的重编程过程,特别是miR302/367、miR200、miR-34和miR290/295等家族的microRNAs在体细胞诱导为iPS过程中发挥重要作用。文章就近年microRNA在诱导多能干细胞中的作用进行综述。 展开更多

关键词 MICRORNA 诱导多能干细胞 体细胞重编程

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MiR-302/367在体细胞向多能性干细胞重编程中的作用 被引量：1

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作者 朱海鲸 唐芙蓉 华进联 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1002-1009,共8页

MicroRNA-302／367（miR-302／367）发现于2003年，是一类长度在21～22nt的miRNA簇，与多能性干细胞自我更新及多向分化有重要关系．在体细胞向多能性干细胞重编程中具有重要作用．miR-302／367簇中各miRNA具有相对保守的种子区及靶基... MicroRNA-302／367（miR-302／367）发现于2003年，是一类长度在21～22nt的miRNA簇，与多能性干细胞自我更新及多向分化有重要关系．在体细胞向多能性干细胞重编程中具有重要作用．miR-302／367簇中各miRNA具有相对保守的种子区及靶基因，主要通过抑制靶基因蛋白质的翻译，从而促进间质．上皮转化（mesenchymal-epithelial transition，MET）、抑制细胞周期、调控细胞分化相关基因及表观遗传水平等方式促进体细胞向多能性细胞重编程．本文对miR-302／367的发现、结构、miR．302／367在多能性细胞中的作用及在体细胞向多能性干细胞重编程中的作用及其机理等做一综述． 展开更多

关键词 微小核糖核酸簇302 367 体细胞重编程 微小核糖核酸簇

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基因组稳定性与iPS细胞重编程的分子机制 被引量：1

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作者 李宏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期36-42,共7页

iPS细胞的研究成果是近年来生命科学的重大突破,研究者也因此获得2012年诺贝尔生理医学奖的殊荣。对iPS细胞基因组不稳定变异的来源,表观遗传修饰及其与iPS细胞重编程过程的关系等进行分析,总结最新的研究成果,并对iPS细胞的应用前景进... iPS细胞的研究成果是近年来生命科学的重大突破,研究者也因此获得2012年诺贝尔生理医学奖的殊荣。对iPS细胞基因组不稳定变异的来源,表观遗传修饰及其与iPS细胞重编程过程的关系等进行分析,总结最新的研究成果,并对iPS细胞的应用前景进行展望。 展开更多

关键词 诱导性多能干细胞 基因组不稳定 拷贝数变异 表现遗传修饰 细胞重编程

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治疗性克隆与体细胞重编程:殊途同归

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作者 杨进 刘国强 洪天配 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期101-105,共5页

治疗性克隆和体细胞重编程是制备患者特异性自体干细胞的两种不同策略,近期已取得了重大的研究进展。治疗性克隆是通过体细胞核移植后形成克隆囊胚进而获得胚胎干细胞,体细胞重编程则是将特异性转录因子导入到体细胞核中而建立诱导性多... 治疗性克隆和体细胞重编程是制备患者特异性自体干细胞的两种不同策略,近期已取得了重大的研究进展。治疗性克隆是通过体细胞核移植后形成克隆囊胚进而获得胚胎干细胞,体细胞重编程则是将特异性转录因子导入到体细胞核中而建立诱导性多潜能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS细胞)。两者在方法学路径、技术难题、伦理争议等方面各不相同,但在应用研究层面上都涉及到干细胞的定向诱导分化、细胞移植治疗等相同的问题。本文总结了这两种生物技术的研究进展及其异同点。 展开更多

关键词 体细胞核移植 体细胞重编程 干细胞 转录因子

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端粒酶与体细胞重编程的最新研究进展 被引量：5

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作者 贺小英 荆乾鸽 +3 位作者 姜欣颖 吴宪 兰宗宝 马利兵 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1133-1140,共8页

端粒酶与体细胞重编程是当今生物界最热门的研究领域之一。研究端粒酶能揭示生物体胚胎早期发育、衰老和癌症发生的机制;细胞重编程则有望从根本上解决体细胞克隆技术问题,从而开启生命再造新时代。文章通过对端粒酶与体细胞重编程及二... 端粒酶与体细胞重编程是当今生物界最热门的研究领域之一。研究端粒酶能揭示生物体胚胎早期发育、衰老和癌症发生的机制;细胞重编程则有望从根本上解决体细胞克隆技术问题,从而开启生命再造新时代。文章通过对端粒酶与体细胞重编程及二者互作机制的最新研究进展进行详细阐述,发现细胞重编程面临的主要问题是效率低下,其根本原因是对其作用机制尚未完全了解;而最新研究证实,生殖细胞的端粒酶活性发生时序性变化可能在胚胎发育及细胞重编程过程中发挥重要调控作用。因此,揭示细胞重编程机制是今后研究工作的重心,尤其是揭示端粒酶在胚胎发育过程的分子调控机理及端粒酶调控细胞重编程可能开启的信号通路,对提高细胞重编程效率,推进克隆动物的生产实践并开启生命再造,以及为治疗癌症等人类重大疾病具有重要意义。 展开更多

关键词 端粒酶 体细胞重编程 表观修饰 调控作用 胚胎发育

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转录因子Ascl1诱导体细胞重编程为神经元的研究进展 被引量：1

8

作者 张莹丹 陈莉 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期873-877,共5页

转录因子Ascl1可将体细胞重编程为诱导神经元,包括将成纤维细胞、星形胶质细胞、Müller胶质细胞等体细胞重编程为不同的神经元亚型(多巴胺能神经元、氨基酸类神经元等)。该过程的机制较为繁琐复杂,其中涉及了分级机制及转录水平的... 转录因子Ascl1可将体细胞重编程为诱导神经元,包括将成纤维细胞、星形胶质细胞、Müller胶质细胞等体细胞重编程为不同的神经元亚型(多巴胺能神经元、氨基酸类神经元等)。该过程的机制较为繁琐复杂,其中涉及了分级机制及转录水平的变化。该文主要对Ascl1诱导体细胞重编程为神经元的研究展开综述。 展开更多

关键词 Ascl1 细胞重编程 诱导神经元

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小分子化合物诱导细胞重编程研究进展 被引量：1

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作者 顾珊 赵高平 李喜和 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期79-83,共5页

细胞重编程指细胞内的基因表达由一种类型转变为另一种类型,通常包含两层含义:一是分化的细胞重新恢复到多能性或全能性状态;二是从一种分化的细胞转变为另一种分化的细胞。细胞重编程可为临床患者特异性细胞治疗提供无限的细胞资源。... 细胞重编程指细胞内的基因表达由一种类型转变为另一种类型,通常包含两层含义:一是分化的细胞重新恢复到多能性或全能性状态;二是从一种分化的细胞转变为另一种分化的细胞。细胞重编程可为临床患者特异性细胞治疗提供无限的细胞资源。细胞重编程的途径有细胞核移植、转染特定转录因子、小分子化合物诱导等方法。核移植技术由于通常需要使用到卵子,而被认为存在伦理问题;转录因子的导入存在引起宿主基因突变的问题,限制了这一技术的临床应用。然而小分子化合物容易合成、细胞渗透性好,并且生物效应具有可塑性,使用小分子化合物诱导细胞重编程,避免了核移植的伦理问题和基因操作潜在的危害。目前,使用小分子化合物从体细胞诱导获得更安全的i PSCs(induced pluripotent stem cells),ci CMs(chemically induced functional cardiomyocyte cells)和ci NSLCs(chemical-induced neural stem cell-like cells)。对小分子化合物诱导细胞重编程,包括小分子化合物诱导多能干细胞;小分子化合物诱导潜能扩展的多能干细胞,以及小分子化合物诱导细胞转分化等方面的研究做了总结,并对小分子化合物诱导的未来发展做了展望,旨在为今后这方面的研究提供借鉴。 展开更多

关键词 细胞重编程 细胞转分化 小分子化合物

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植物细胞重编程机制及其在苔藓植物中的研究进展 被引量：1

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作者 张晓青 杨静薇 +6 位作者 王嘉靖 张璟璇 杨念 张勇洪 王国栋 郑兰兰 李琛 《安徽农业科学》 CAS 2017年第28期148-150,共3页

重编程在植物组织培养和干细胞治疗等领域有潜在的应用价值。目前,影响陆生植物重编程的分子机制还不清楚,而且缺少从进化-发育角度对重编程的研究。通过建立模式生物小立碗藓的再生体系,研究共有因子Pp CSP1/Lin28调控高等植物重编程... 重编程在植物组织培养和干细胞治疗等领域有潜在的应用价值。目前,影响陆生植物重编程的分子机制还不清楚,而且缺少从进化-发育角度对重编程的研究。通过建立模式生物小立碗藓的再生体系,研究共有因子Pp CSP1/Lin28调控高等植物重编程的作用机制,并对今后的研究进行展望。 展开更多

关键词 细胞重编程 小立碗藓 拟南芥 冷激蛋白

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微流控电融合芯片的研制及其在体细胞重编程中的应用

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作者 吴畏 徐海伟 +3 位作者 屈娅 张小玲 胡宁 阴正勤 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期29-33,共5页

目的开发高通量的细胞电融合平台,并通过此平台将小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)与体细胞融合,探讨融合细胞的多能性。方法本实验室自主研发微流控芯片,将转染了绿色荧光的mESCs与转染了红色荧光的NIH3T3细胞进行电... 目的开发高通量的细胞电融合平台,并通过此平台将小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)与体细胞融合,探讨融合细胞的多能性。方法本实验室自主研发微流控芯片,将转染了绿色荧光的mESCs与转染了红色荧光的NIH3T3细胞进行电融合,并计算其排队率与融合率。通过流式细胞仪筛选出表达两种荧光的融合细胞,观察融合细胞的表型。RT-PCR检测NIH3T3、mESC以及融合细胞的多能性基因(Nanog、OCT4、SOX2和LIN28)mRNA的表达水平。结果自主研发了微流控芯片,构建了高通量的细胞电融合平台,通过此平台将mESCs与NIH3T3进行电融合,其排队率为(44.35±10.99)%,融合率为(59.88±20.03)%,融合细胞可形成类似于ESC样的克隆。RT-PCR法结果显示mESC和融合细胞均表达多能性基因Nanog、OCT4、SOX2和LIN28 mRNA,而NIH3T3不表达。结论通过自主研发的微流控芯片,可实现mESCs与NIH3T3的高效融合,使体细胞重编程为多能性干细胞。 展开更多

关键词 电融合 体细胞重编程 微流控芯片 胚胎干细胞

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细胞重编程和移植技术用于帕金森病治疗的研究进展

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作者 李玲洁 崔巍 +1 位作者 徐淑君 王钦文 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1021-1031,共11页

帕金森病(Parkinson disease,PD)是一种复杂的中枢神经系统退行性疾病,主要病理特征为黑质致密部多巴胺神经元的进行性丧失.目前PD主要治疗手段包括药物和手术.但药物存在神经保护活性不足、缺乏对因治疗、晚期无药可用等问题,手术治疗... 帕金森病(Parkinson disease,PD)是一种复杂的中枢神经系统退行性疾病,主要病理特征为黑质致密部多巴胺神经元的进行性丧失.目前PD主要治疗手段包括药物和手术.但药物存在神经保护活性不足、缺乏对因治疗、晚期无药可用等问题,手术治疗风险较大.近年来,细胞重编程技术取得突破性进展,由重编程产生的诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)、诱导多巴胺神经元(induced dopamine neurons,iDNs)和诱导神经干细胞(induced neural stem cells,i NSCs)可用于治疗PD.移植iPSCs分化而来的多巴胺能神经元、iDNs和iNSCs至相应脑区,可起到神经替代与修复作用,有效治疗PD.本文重点介绍细胞重编程的机制,总结iPSCs、iDNs和iNSCs治疗PD的优缺点,并阐述尚存在的挑战,探讨可能的解决方案. 展开更多

关键词 帕金森病 细胞重编程 诱导多能干细胞 诱导多巴胺神经元 诱导神经干细胞 移植 多巴胺能神经元

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印记基因与细胞重编程 被引量：1

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作者 田佳卉 陈昱光 +1 位作者 胡建宏 雷安民 《畜牧兽医杂志》 2022年第3期30-33,36,共5页

细胞重编程可使分化的体细胞逆转回到全能性状态,或形成胚胎干细胞系,或进一步发育成一个新个体,开启了生物学中细胞可塑性研究的新领域。目前细胞重编程技术已逐渐成熟,但对于细胞重编程中的内部变化的具体机理仍然知之甚少。本文特别... 细胞重编程可使分化的体细胞逆转回到全能性状态,或形成胚胎干细胞系,或进一步发育成一个新个体,开启了生物学中细胞可塑性研究的新领域。目前细胞重编程技术已逐渐成熟,但对于细胞重编程中的内部变化的具体机理仍然知之甚少。本文特别综述了印记基因在胚胎发育中的变化及作用,探讨了细胞重编程过程中印记基因的意义及在重编程过程中的变化规律,以期人们从细胞内部变化的角度更加准确和充分地认识与理解细胞重编程过程,使之更加安全的应用于畜牧兽医研究领域,为家畜育种以及动物疾病防控提供新的思路。 展开更多

关键词 印记基因 细胞重编程 体细胞克隆

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基于分层网络和反馈机制的细胞重编程

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作者 刘仕进 刘艳伟 王瑞琦 《上海大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期552-559,共8页

在多潜能细胞分化并最终形成相应的谱系结构的过程中,多潜能细胞可能发生重编程.主要研究细胞分化过程中由双重负反馈回路的层级网络如何产生细胞重编程.通过建立数学模型对整个系统的分叉进行分析,揭示分层网络以及反馈机制产生细胞重... 在多潜能细胞分化并最终形成相应的谱系结构的过程中,多潜能细胞可能发生重编程.主要研究细胞分化过程中由双重负反馈回路的层级网络如何产生细胞重编程.通过建立数学模型对整个系统的分叉进行分析,揭示分层网络以及反馈机制产生细胞重编程的机理. 展开更多

关键词 细胞重编程 分层网络 反馈调控 分叉分析

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CAF-1在体细胞重编程中的作用机制 被引量：1

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作者 张迎冰 于芮峦 +3 位作者 乔培培 杨莹 张涌 苏建民 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1769-1777,共9页

染色质组装因子1(chromatin assembly factor-1,CAF-1),是由p150、p60、p48三个亚单位组成的组蛋白伴侣。CAF-1主要功能是在DNA复制中与增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)相互作用,负责募集组蛋白H3、H4沉积在... 染色质组装因子1(chromatin assembly factor-1,CAF-1),是由p150、p60、p48三个亚单位组成的组蛋白伴侣。CAF-1主要功能是在DNA复制中与增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)相互作用,负责募集组蛋白H3、H4沉积在新合成的DNA上以促进核小体装配。越来越多的研究解析CAF-1复合体的结构及其生物学功能,并发现CAF-1在体细胞重编程过程中发挥重要作用。因此,本文重点介绍了CAF-1的结构、生物学功能和在体细胞重编程中的作用。 展开更多

关键词 CAF-1 体细胞重编程 结构 功能

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细胞重编程技术和诱导性多能干细胞治疗视网膜疾病研究现状

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作者 方绿洁(综述) 丁勇(审校) +1 位作者 梁海(审校) 黄靖邦(审校) 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期864-869,共6页

随着细胞重编程技术的发展,如今我们可以通过转录因子来重编程转录组,从而使一种细胞类型转化为另一种细胞类型。值得注意的是,这种方法实现了将体细胞转化为诱导性多能干细胞(iPSCs),为获得患者特异性多功能干细胞提供了可能。Shinya Y... 随着细胞重编程技术的发展,如今我们可以通过转录因子来重编程转录组,从而使一种细胞类型转化为另一种细胞类型。值得注意的是,这种方法实现了将体细胞转化为诱导性多能干细胞(iPSCs),为获得患者特异性多功能干细胞提供了可能。Shinya Yamanaka及其研究小组于2006年首次发现了这项技术,最开始的iPSCs是由小鼠成纤维细胞在转录因子Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc的作用下诱导去分化而形成。这项技术在医疗领域具有巨大的潜力,为研究和发展治疗眼部疾病方法开创了新纪元。本文将对患者特异性iPSCs在建造三维疾病模型以及各型视网膜疾病模型,细胞替代治疗及临床试验,药物高通量筛选试验及毒性检验方面的运用进行综述,并论述直接重编程技术的进展,以及利用iPSCs和细胞重编程技术进行眼科研究的未来方向。 展开更多

关键词 诱导性多功能干细胞 细胞重编程 视网膜 疾病建模 细胞治疗 药物筛选

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敲降同源异型盒C8对7因子诱导的体细胞重编程的抑制作用

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作者 黄依 方仕才 +3 位作者 王波 明金 李陈 裴端卿 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期426-433,共8页

为探究7因子(Jdp2-Jhdm1b-Mkk6-Glis1-Nanog-Esrrb-Sall4)诱导的体细胞重编程机制,通过正向与反向遗传学方法、定量分析重编程关键分子事件及同时敲降同源异型盒C8(homeobox C8, Hoxc8)和SMAD家族成员6(SMAD family member 6, Smad6)等... 为探究7因子(Jdp2-Jhdm1b-Mkk6-Glis1-Nanog-Esrrb-Sall4)诱导的体细胞重编程机制,通过正向与反向遗传学方法、定量分析重编程关键分子事件及同时敲降同源异型盒C8(homeobox C8, Hoxc8)和SMAD家族成员6(SMAD family member 6, Smad6)等方式解析Hoxc8在细胞多能性网络重建过程中的相关作用。结果表明:敲降Hoxc8可显著抑制7因子诱导的体细胞重编程,但过表达Hoxc8对其无影响。敲降Hoxc8既不影响重编程中多能性标记基因的上调与体细胞标记基因的下调,也不影响间质-上皮转化(mesenchymal-epithelial transition, MET)标记基因与细胞增殖标记基因的表达。同时敲降Hoxc8与Smad6可使单独敲降Hoxc8导致的重编程效率降低情况得到恢复。综上所述,Hoxc8在7因子诱导的体细胞重编程中具有重要作用,为进一步揭示Hoxc8调控细胞命运转变的机制提供了参考。 展开更多

关键词 体细胞重编程 诱导多能干细胞 同源异型盒C8 SMAD家族成员6

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敲降同源异形框D12抑制7因子介导的体细胞重编程

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作者 方仕才 黄依 +6 位作者 王波 赵国庆 李陈 明金 董春阳 李闯 裴端卿 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1188-1196,共9页

分化的体细胞可通过体外过表达多能性相关的转录因子重编程为诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)。体细胞重编程的过程需要细胞内各个转录因子相互作用,协同调控细胞命运的转变。同源异形框D12(homeobox D12,Hoxd12... 分化的体细胞可通过体外过表达多能性相关的转录因子重编程为诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)。体细胞重编程的过程需要细胞内各个转录因子相互作用,协同调控细胞命运的转变。同源异形框D12(homeobox D12,Hoxd12)是调控脊椎动物胚胎发育的关键转录因子之一,对足趾发育、体轴形成和细胞内信号转导具有重要作用。但Hoxd12关于体细胞重编程和胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)方面的研究未见报道。本研究首先以7因子(Sall4-Esrrb-Jdp2-Glis1-Mkk6-Nanog-Kdm2b,7 factors)和Yamanka因子(Oct4-Klf4-Sox2,Yamanaka factors)诱导的重编程体系为模型,并结合RNA敲降(shRNA)和基因过表达技术,研究Hoxd12在体细胞重编程中的功能;其次利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建Hoxd12基因敲除的胚胎干细胞系,同时结合体外拟胚体形成(EB)和转录物组测序技术(RNA-seq),探索Hoxd12在ESCs多能性维持和退出中的功能。本研究得出以下结论:(1)敲降Hoxd12的表达抑制7因子诱导的重编程(**P<0.01),但对Yamanaka因子诱导的重编程无显著作用。(2)在7因子和Yamanaka因子诱导多能性的不同时期过表达Hoxd12对重编程无显著作用,且Hoxd12无法替代7因子当中的任何1个因子。(3)Hoxd12基因的敲除对ESCs多能性的维持无显著影响。(4)Hoxd12基因的敲除对ESCs在EB球形成中的谱系决定无显著影响。(5)Hoxd12基因的敲除抑制ESCs的增殖(Day3*t=12.91,Day4*t=4.87,Day5*t=5.98)。本研究初步揭示了Hoxd12在体细胞重编程和ESCs增殖中具有重要作用,为进一步深入理解Hoxd12调控细胞命运转变提供新的参考。 展开更多

关键词 同源异形框D12 诱导多能干细胞 体细胞重编程 胚胎干细胞 细胞增殖

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Myocardin重组蛋白表达及其在人骨髓间充质干细胞重编程为血管平滑肌细胞中的作用 被引量：1

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作者 麦丽萍 杨翔宇 +3 位作者 吴岳恒 余细勇 何国东 李晓红 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1409-1414,共6页

目的:研究心肌素(myocardin)重组蛋白的表达及分离纯化方法,并探讨myocardin重组蛋白对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,h BMSCs)向血管平滑肌细胞转分化的作用。方法:构建myocardin原核表达载体,摸索最... 目的:研究心肌素(myocardin)重组蛋白的表达及分离纯化方法,并探讨myocardin重组蛋白对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,h BMSCs)向血管平滑肌细胞转分化的作用。方法:构建myocardin原核表达载体,摸索最佳诱导myocardin重组蛋白表达的方法及优化分离纯化方式。使用纳米转导试剂包裹myocardin形成纳米-蛋白复合体,转染h BMSCs,观察蛋白转导效率;蛋白转导成功后,检测血管平滑肌的特异性标志物平滑肌肌球蛋白重链的表达情况,观察h BMSCs向平滑肌细胞转化情况。结果:与传统方法相比较,高浓度法诱导myocardin重组蛋白的表达量更高,新采用的洗脱方式能获取更多的myocardin重组蛋白;纳米-myocardin复合体可成功转染h BMSCs并诱导其向血管平滑肌样细胞转化。结论:Myocardin重组蛋白能被高效转导到细胞内,并促使h BMSCs重编程为血管平滑肌样细胞。 展开更多

关键词 心肌素 重组蛋白 平滑肌肌球蛋白重链 骨髓间充质干细胞 细胞重编程

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体细胞重编程为多巴胺神经元的研究进展 被引量：1

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作者 郑媛媛(综述) 翁晓滨 王跃嗣(审校) 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2022年第9期987-992,共6页

帕金森病(PD)是一种进行性神经退行性疾病,当前治疗措施主要包括药物和手术治疗,药物治疗仅缓解症状,手术治疗风险性较大。近年来,细胞重编程方法为PD的治疗带来新进展,经细胞重编程技术获得的诱导多能干细胞(iPSCs)、诱导神经干细胞(iN... 帕金森病(PD)是一种进行性神经退行性疾病,当前治疗措施主要包括药物和手术治疗,药物治疗仅缓解症状,手术治疗风险性较大。近年来,细胞重编程方法为PD的治疗带来新进展,经细胞重编程技术获得的诱导多能干细胞(iPSCs)、诱导神经干细胞(iNSCs)和诱导多巴胺神经元(iDNs)可移植治疗PD。文章主要综述iPSCs和iNSCs治疗PD的局限性,总结体细胞直接重编程为iDNs的方法,并探讨体细胞直接重编程为iDNs的优缺点。 展开更多

关键词 帕金森病 细胞重编程 诱导多巴胺神经元 诱导多能干细胞 诱导神经干细胞

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