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Gpr124对高糖环境下视网膜微血管内皮细胞增殖、迁移和血管形成的调控作用 被引量:3
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作者 王玉雯 李芙蓉 袁容娣 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第18期2101-2109,共9页
目的研究高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞(human retinal microvascular endothelial cell,HRMEC)中G蛋白偶联受体124(Gpr124)表达的变化,以及干扰Gpr124对HRMEC的调控作用。方法免疫荧光观察Gpr124在HRMEC中的表达;高糖刺激HRMEC,将... 目的研究高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞(human retinal microvascular endothelial cell,HRMEC)中G蛋白偶联受体124(Gpr124)表达的变化,以及干扰Gpr124对HRMEC的调控作用。方法免疫荧光观察Gpr124在HRMEC中的表达;高糖刺激HRMEC,将细胞分为空白组和高糖组,CCK-8、EdU检测细胞活力与增殖情况;病毒抑制Gpr124表达后,将细胞分为空白对照组、高糖对照组、高糖+shRNA组以及高糖+Gpr124 shRNA组,划痕实验评估细胞迁移,基质凝胶评估细胞小管形成能力。Western blot检测Gpr124、VEGFA、MMP9和β-catenin相对蛋白表达水平。结果相较于空白组,HRMEC在高糖组中显示出显著提升的细胞活力和增殖细胞数(P<0.01)。高糖环境下,Gpr124、VEGFA以及MMP9的表达水平也显著增加(P<0.01)。同时,在各个时间点,高糖对照组的迁移面积以及体外血管形成面积和管径长度均显著高于空白对照组(P<0.01)。然而,在敲低Gpr124的表达后,高糖+Gpr124 shRNA组的HRMEC在迁移和体外血管形成能力上相较于高糖+shRNA组有显著的降低(P<0.01),并且高糖+Gpr124 shRNA组相比于高糖+shRNA组VEGFA、MMP9以及β-catenin蛋白表达减少(P<0.01)。结论Gpr124能够调控高糖环境下HRMEC的增殖、迁移以及管形成能力,并且还可以抑制VEGFA和MMP9的过度表达,这一影响可能是通过调节Wnt/β-catenin经典通路来实现的。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 G蛋白偶联受体124 血管内皮细胞 细胞迁移实验 血管形成
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沉默ski基因对大鼠星形胶质细胞迁移的影响 被引量:6
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作者 赵鑫 王兴文 +4 位作者 寇江力 李忠浩 郭永强 伍亚民 张海鸿 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2017年第8期905-911,共7页
目的研究ski基因在大鼠星形胶质细胞迁移过程中的作用。方法分离大鼠脑皮质星形胶质细胞,体外培养。合成ski基因和阴性对照小干扰片段。设置ski-siRNA转染组、阴性对照组和空白对照组。采用脂质体法将特异性针对ski基因的siRNA和阴性对... 目的研究ski基因在大鼠星形胶质细胞迁移过程中的作用。方法分离大鼠脑皮质星形胶质细胞,体外培养。合成ski基因和阴性对照小干扰片段。设置ski-siRNA转染组、阴性对照组和空白对照组。采用脂质体法将特异性针对ski基因的siRNA和阴性对照siRNA转入大鼠星形胶质细胞。采用Western blotting检测各组ski蛋白的表达水平;采用Transwell细胞迁移实验和细胞划痕实验检测ski-siRNA转染后星形胶质细胞迁移能力的变化。结果与空白对照组和阴性对照组比较,ski-siRNA转染组细胞内ski蛋白的相对表达水平显著降低(F=132.957,P<0.001)。Transwell细胞迁移实验发现,ski-siRNA转染组每孔迁移细胞数少于空白对照组和阴性对照组(F>47.197,P<0.05)。细胞划痕实验显示,转染组细胞1~5 d的划痕愈合率均明显低于对照组(F>69.187,P<0.01)。结论沉默ski基因能显著抑制星形胶质细胞的迁移能力,ski可能参与星形胶质细胞的转移过程,进而调控胶质瘢痕的形成。 展开更多
关键词 SKI RNA干扰 星形胶质细胞 Transwell细胞迁移实验 划痕实验 大鼠
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敲减CMTM3增强前列腺癌细胞系PC3迁移与侵袭能力
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作者 胡风战 原婉琼 +5 位作者 王晓林 秦彩朋 盛正祚 杜依青 殷华奇 徐涛 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期594-597,共4页
目的:应用慢病毒载体shRNA对PC3细胞中的人趋化素样因子超家族成员3(CKLF-like MARVEL transmembrane domain containing 3,CMTM3)进行敲减,以探究CMTM3对前列腺癌细胞系生物学行为改变的影响。方法:研究分为两组进行,其中sh N为未敲减C... 目的:应用慢病毒载体shRNA对PC3细胞中的人趋化素样因子超家族成员3(CKLF-like MARVEL transmembrane domain containing 3,CMTM3)进行敲减,以探究CMTM3对前列腺癌细胞系生物学行为改变的影响。方法:研究分为两组进行,其中sh N为未敲减CMTM3的PC3细胞系对照组,sh393为敲减CMTM3的PC3细胞系实验组。运用Western blot检测PC3细胞系慢病毒shRNA敲减CMTM3后的表达,Transwell与细胞划痕实验检测敲减CMTM3对PC3细胞系迁移能力的影响,Matrigel实验检测敲减CMTM3对PC3细胞系侵袭能力的影响。结果:前列腺癌细胞系PC3经慢病毒敲减CMTM3后,sh393组CMTM3表达水平明显低于sh N组(0.004 0±0.000 4 vs.0.490 0±0.055 7,P<0.001),且sh393组侵袭(248.6±4.5 vs.113.0±3.3)、迁移(203.6±1.9 vs.103.0±1.2)及迁移愈合能力(95.0±2.9 vs.33.0±1.5)均明显强于sh N组(P<0.001)。结论:敲减CMTM3可以影响PC3细胞的迁移与侵袭能力,CMTM3下调与PC3细胞系肿瘤生物学特性的改变可能具有负相关性。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 CMTM3 基因敲减技术 细胞迁移实验 体外研究
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Galectin-3促进甲状腺乳头状癌细胞转移机制的研究 被引量:6
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作者 陆伟辉 王聪 +1 位作者 李宸 艾志龙 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期775-781,共7页
背景与目的:甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)是人体常见的肿瘤之一。半乳凝集素-3(Galectin-3)是一种参与调控肿瘤发生、发展的多功能蛋白。Galectin-3广泛表达于多种肿瘤组织及肿瘤患者的血清中。该研究旨在探索Galecti... 背景与目的:甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)是人体常见的肿瘤之一。半乳凝集素-3(Galectin-3)是一种参与调控肿瘤发生、发展的多功能蛋白。Galectin-3广泛表达于多种肿瘤组织及肿瘤患者的血清中。该研究旨在探索Galectin-3调控PTC细胞转移的相关机制。方法:对40例PTC组织切片进行Galectin-3染色及评分。对PTC细胞B-cpap行无血清培养后分别检测细胞内外的Galectin-3的表达水平。用两种不同方法抑制Galectin-3在细胞内外的表达后利用CCK8法及细胞划痕法检测细胞功能的改变。利用免疫荧光及共聚焦摄像技术观察在细胞内敲低Galectin-3表达后细胞形态的改变。结果:颈部淋巴结转移患者组织切片的Galectin-3染色评分显著高于临床无转移者(P<0.05)。抑制细胞内外Galectin-3的表达均能抑制PTC细胞迁移,但对于增殖的影响不同。敲低细胞内Galectin-3表达后,PTC细胞形态发生改变。结论:PTC患者组织中的Galectin-3表达与肿瘤转移相关。抑制细胞内外的Galectin-3表达均能显著降低肿瘤细胞的迁移。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 半乳凝集素-3 细胞迁移实验
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