褐飞虱细胞色素P450单加氧酶基因CYP4CE1的克隆及表达谱 被引量：4

1

作者 杨之帆 刘晓黎 张艳艳 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期257-268,共12页

为了解P450基因在褐飞虱Nilaparvata lugens适应水稻品种过程中的重要作用,利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),快速扩增cDNA末端(RACE)和长距离聚合酶链式反应(LD-PCR)技术,克隆了褐飞虱4龄若虫的CYP4家族的一个P450单加氧酶基因,被命名... 为了解P450基因在褐飞虱Nilaparvata lugens适应水稻品种过程中的重要作用,利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),快速扩增cDNA末端(RACE)和长距离聚合酶链式反应(LD-PCR)技术,克隆了褐飞虱4龄若虫的CYP4家族的一个P450单加氧酶基因,被命名为CYP4CE1。该基因的全长cDNA序列(2160bp)含有一个1626bp的开放阅读框(ORF),编码541个氨基酸残基的蛋白质。通过GenBank数据库中的blastx搜索引擎进行同源性分析,结果表明CYP4CE1编码的蛋白与岸蟹Carcinus maenas的CYP4C39(GenBank登录号:JC8026)的相似性最高,两者的氨基酸序列同源性达43%;其次与热带蟑螂Blaberus discoidalis的CYP4C1(AAA27819)及黑腹果蝇Drosophilamelanogaster的CYP4C3(NP_524598)的相似性也较高,氨基酸序列同源性分别达42%。氨基酸序列比对表明该蛋白含有CYP4家族成员的所有保守特征序列,如螺旋K(E-R-P),氧结合结构域即螺旋I(AG-T),血红素结合区(PF-G--C-G-F)以及CYP4成员的特有特征序列(EVDTFMFEGHDTT)等。使用Northern杂交检测CYP4CE1随时间的表达变化,结果表明:与饲养于感虫水稻台中1号(Taichung Native1,TN1)上的若虫相比,在取食中度抗性水稻Minghui63(MH63)秧苗12,24,48,72h的各时间段的褐飞虱体内,该基因有2.1倍的过量表达且表达水平保持稳定。进一步通过Northern杂交检测该基因的组织表达特异性,结果显示:该基因在取食TN1秧苗的若虫脂肪体中表达量最高,在肠道组织及体壁中的表达水平较低;褐飞虱取食MH63秧苗24h后,该基因在体壁及脂肪体中的表达量略有上升(各约1.2倍),而在肠道组织中的表达量则大幅升高(约12倍)。肠道整体原位杂交表明,CYP4CE1在取食TN1秧苗的若虫的肠道组织及马氏管中均有本底水平的表达;若虫取食MH63秧苗后,该基因在上述肠道各区段表达水平明显增强。结果提示,在褐飞虱与水稻互作过程中CYP4CE1的重要功能之一可能是参与水稻有毒次生物质的代谢。 展开更多

关键词 褐飞虱 解毒酶 细胞色素P450单加氧酶 基因克隆 表达谱 水稻品种 抗虫性

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基于细胞色素P450单加氧酶介导的4-甲酚氧化降解途径的天麻素生物合成 被引量：6

2

作者 钟贝芬 杜磊 +7 位作者 李众 张伟 张兴旺 李菁 黄淑兰 胡翔 李盛英 刘琨 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2018年第4期33-40,共8页

为实现天麻素的微生物异源生产,将谷氨酸棒状杆菌中4-甲酚降解相关基因cre HIJEFD和药用植物红景天来源的尿苷二磷酸糖基转移酶基因ugt分别克隆至载体pRSFDuet-1和p ACYCDuet-1,转化大肠杆菌后获得重组菌株S1.在S1中诱导关键酶表达后,... 为实现天麻素的微生物异源生产,将谷氨酸棒状杆菌中4-甲酚降解相关基因cre HIJEFD和药用植物红景天来源的尿苷二磷酸糖基转移酶基因ugt分别克隆至载体pRSFDuet-1和p ACYCDuet-1,转化大肠杆菌后获得重组菌株S1.在S1中诱导关键酶表达后,外源添加4-甲酚,生物转化后对产物进行定性和定量分析.最终以5mmol/L 4-甲酚为底物,重组菌株S1在30℃诱导培养48 h后转化产物中有天麻素生成,产量达到1.5 mmol/L,摩尔转化率为30.3%.本研究实现了从4-甲酚到天麻素的生物转化,可为芳烃化合物降解与天然药物分子生物合成相偶联提供新的思路,并且具有一定的产业化应用前景. 展开更多

关键词 4-甲酚 天麻素 芳烃生物降解 生物合成 细胞色素P450单加氧酶

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用低G/C%含量引物通过PCR扩增家蝇细胞色素P-450 cDNA 被引量：10

3

作者 康巧华 陈年春 +1 位作者 周顺伍 齐顺章 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期225-230,共6页

根据昆虫细胞色素Ｐ－４５０基因的多型性和遗传多态性，以苯巴比妥钠诱导、室内饲养的杀虫剂敏感种群雌性家蝇ＭｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａｖｉｃｉｎａＭａｃｑｕａｒｔ为材料，提取总ＲＮＡ，以Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）－纤维素亲和层析... 根据昆虫细胞色素Ｐ－４５０基因的多型性和遗传多态性，以苯巴比妥钠诱导、室内饲养的杀虫剂敏感种群雌性家蝇ＭｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａｖｉｃｉｎａＭａｃｑｕａｒｔ为材料，提取总ＲＮＡ，以Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）－纤维素亲和层析分离出总ｍＲＮＡ；以此为模板反转录合成总ｃＤＮＡ。再以总ｃＤＮＡ为模板，以Ｐ－４５０ＣＹＰ６Ａ１ｃＤＮＡ序列为参考设计一对低Ｇ／Ｃ％含量引物，进行ＰＣＲ扩增，获得１．５ｋｂ左右的预期目的片段。 展开更多

关键词 家蝇 细胞色素p-450 CDNA PCR 遗传多态性

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细胞色素芳香化酶P-450在正常、子宫内膜异位症子宫内膜的表达及意义 被引量：16

4

作者 王化丽 于静 +2 位作者 王莲芬 汪洁平 曹锐 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期95-96,共2页

目的 :探讨细胞色素芳香化酶P - 45 0在子宫内膜异位症 (内异症 )发病中的作用 ,检测子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达用于诊断内异症的可行性。方法 :应用免疫组化方法检测正常子宫内膜和内异症的在位及异位内膜细胞色素芳香化... 目的 :探讨细胞色素芳香化酶P - 45 0在子宫内膜异位症 (内异症 )发病中的作用 ,检测子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达用于诊断内异症的可行性。方法 :应用免疫组化方法检测正常子宫内膜和内异症的在位及异位内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达。结果 :细胞色素芳香化酶P - 45 0在正常子宫内膜无表达 ,在内异症的在位和异位内膜均有强表达 ,增殖期与分泌期无差别。检测子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达 ,用于诊断内异症的敏感度为 91 5 % ,特异度为 10 0 % ,阳性预测值为 10 0 %。内异症子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达与AFS分期无相关性。结论 :子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0分泌增加促进内异症的发生 ;内异症子宫内膜细胞色素芳香化酶P -45 展开更多

关键词 细胞色素芳香化酶p-450 子宫内膜异位症 免疫组化方法 诊断

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担载金属卟啉模拟细胞色素P-450的催化丙烯环氧化 被引量：3

5

作者 索继栓 李树本 王弘立 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1995年第2期101-106,共6页

制备了SiO2化学键合金属卟啉Mn（TPP）Cl，Mn（TDCPP）Cl的担载配合物催化剂，并与单氧给体次氯酸钠（NaClO）构造了细胞色素P－450单加氧酶模拟体系，并考察了该体系的反应性能及其影响因素．金属卟啉经化学修饰的SiO2担载之后，由于... 制备了SiO2化学键合金属卟啉Mn（TPP）Cl，Mn（TDCPP）Cl的担载配合物催化剂，并与单氧给体次氯酸钠（NaClO）构造了细胞色素P－450单加氧酶模拟体系，并考察了该体系的反应性能及其影响因素．金属卟啉经化学修饰的SiO2担载之后，由于表面官能团与金属中心的轴向配位及刚性载体SiO2对金属卟啉在载体表面很好的位置分离作用，使得金属卟啉的抗氧化性及稳定性显著增加，表现出优良的催化丙烯环氧化反应性能． 展开更多

关键词 金属卟啉 细胞色素p-450 催化环氧化 锰 丙烯环

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大鼠肝脏微粒体中3种细胞色素P-450同工酶活性研究 被引量：1

6

作者 郝福荣 严敏芬 +2 位作者 童顺高 许立明 金一尊 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第4期354-358,共5页

目的　研究大鼠肝脏微粒体中CYP2D1/ 2、CYP2C11、CYP1A2 3种细胞色素P 4 5 0同工酶的活性。方法　用诱导剂和抑制剂分别在体内和体外调节大鼠肝脏P 4 5 0同工酶活性 ,并用高效液相法检测同工酶底物的特异性代谢产物来计算同工酶活性。... 目的　研究大鼠肝脏微粒体中CYP2D1/ 2、CYP2C11、CYP1A2 3种细胞色素P 4 5 0同工酶的活性。方法　用诱导剂和抑制剂分别在体内和体外调节大鼠肝脏P 4 5 0同工酶活性 ,并用高效液相法检测同工酶底物的特异性代谢产物来计算同工酶活性。结果　 3种同工酶底物的特异性代谢产物的分离度达到了 1.5 ;天内、天间精密度均小于 10 .2 2 % ,天内、天间准确度均小于 14 .95 % ;相关系数都达到 0 .999。在体内腹腔注射地塞米松能使CYP1A2、CYP2D1/ 2、CYP2C11活性分别增加 1.3倍 (P <0 .0 5 )、1倍 (P <0 .0 1)和 2 .3倍 (P <0 .0 1)。β 萘黄酮可使CYP1A2活性增加 13.7倍 (P <0 .0 1)。在体外 ,呋拉茶碱可以不同程度地抑制CYP1A2、CYP2C11活性 ;普罗地芬、α 萘黄酮可以抑制CYP1A2活性 ;奎宁可以抑制CYP2D1/ 2活性。结论　甲苯磺丁脲、右美沙芬和非那西汀可以作为人体的探药 ,因而实验建立的方法有望用于检测人血浆或尿液中 3种探药的特定代谢产物 ,分别用于估测人肝脏CYP2C9、CYP2D6和CYP1A2的活性。 展开更多

关键词 细胞色素p-450 同工酶活性 诱导剂 抑制剂

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植物细胞色素P-450(Cyt.P450)对除草剂的代谢作用 被引量：13

7

作者 向文胜 苏少泉 赵长山 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 1997年第2期193-200,共8页

植物细胞色素Ｐ┐４５０（Ｃｙｔ．Ｐ４５０）对除草剂的代谢作用向文胜苏少泉赵长山（东北农业大学生命中心哈尔滨１５００３０）（农学院农药与杂草教研室）ＭＡＴＡＢＯＬＩＳＭＯＦＨＥＲＢＩＣＩＤＥＳＢＹＰＬＡＮＴＣＹＴＯＣＨ... 植物细胞色素Ｐ┐４５０（Ｃｙｔ．Ｐ４５０）对除草剂的代谢作用向文胜苏少泉赵长山（东北农业大学生命中心哈尔滨１５００３０）（农学院农药与杂草教研室）ＭＡＴＡＢＯＬＩＳＭＯＦＨＥＲＢＩＣＩＤＥＳＢＹＰＬＡＮＴＣＹＴＯＣＨＹＯＭＥＰ┐４５０ＸｉａｎｇＷｅｎ... 展开更多

关键词 植物细胞色素 p-450 除草剂 代谢

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大鼠心肌组织与肝脏组织中细胞色素P-450的含量测定 被引量：1

8

作者 耿益民 王雯 +2 位作者 芦玲巧 杨啸林 张立克 《首都医科大学学报》 CAS 1999年第1期62-62,共1页

对大鼠心肌组织中细胞色素Ｐ４５０含量的测定国内未见报道。本方法利用双光束紫外分光光度计测定了正常大鼠的心肌组织中Ｐ４５０的含量，并与肝组织Ｐ４５０的含量进行比较，以期探讨细胞色素Ｐ４５０与心脏疾病的关系。Ｗｉ... 对大鼠心肌组织中细胞色素Ｐ４５０含量的测定国内未见报道。本方法利用双光束紫外分光光度计测定了正常大鼠的心肌组织中Ｐ４５０的含量，并与肝组织Ｐ４５０的含量进行比较，以期探讨细胞色素Ｐ４５０与心脏疾病的关系。Ｗｉｓｔａｒ大鼠８只，雄性，体质量２０... 展开更多

关键词 心肌组织 肝脏组织 细胞色素p-450 含量测定

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乙醇对肝细胞色素P-450氧化酶2E1的诱导 被引量：12

9

作者 李俊杰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期193-193,202,T004,共3页

目的 :研究摄入乙醇对肝脏CYP450 2E1的诱导。方法 :1 8例不同程度酒精性脂肪性肝炎患者 ,其中 1 2例酗酒持续至肝活检术前 1 - 3日内 ,6例则已戒酒 3周至 7个月 ;4例病因不明脂肪性肝炎患者 ,但无酗酒史。采用免疫组化方法对肝组织切... 目的 :研究摄入乙醇对肝脏CYP450 2E1的诱导。方法 :1 8例不同程度酒精性脂肪性肝炎患者 ,其中 1 2例酗酒持续至肝活检术前 1 - 3日内 ,6例则已戒酒 3周至 7个月 ;4例病因不明脂肪性肝炎患者 ,但无酗酒史。采用免疫组化方法对肝组织切片进行CYP450 2E1染色及程度评估。结果 :近日仍酗酒的患者中肝组织切片CYP450 2E1的免疫组化染色显著强于已戒酒、无酗酒者。结论 :持续摄入乙醇能显著诱导CYP450 2E1 ,但戒酒后乙醇的诱导作用可以随之减弱。 展开更多

关键词 乙醇 细胞色素p-450 氧化还原酶类

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细胞色素P-450铁卟啉模拟酶的快速混合停流吸收谱

10

作者 夏春谷 李臻 +1 位作者 尉迟力 李树本 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第3期253-258,共6页

采用快速混合停流技术 ,在实际反应条件下 ,考察了不同铁卟啉配合物FeⅢ(Por.)Cl(Por.=TPP、TMOPP和TFPP)与单氧给体过氧苯甲酸m CPBA构建的模拟酶体系中催化活性物种的生成及催化烯烃环氧化过程 .在氧给体m CPBA作用下 ,FeⅢ(TPP)Cl和F... 采用快速混合停流技术 ,在实际反应条件下 ,考察了不同铁卟啉配合物FeⅢ(Por.)Cl(Por.=TPP、TMOPP和TFPP)与单氧给体过氧苯甲酸m CPBA构建的模拟酶体系中催化活性物种的生成及催化烯烃环氧化过程 .在氧给体m CPBA作用下 ,FeⅢ(TPP)Cl和FeⅢ(TMOPP)Cl均生成了四价铁氧卟啉配合物 ,具有较高的催化环氧化活性 ,但存在严重的氧化分解 ;而FeⅢ(TFPP)Cl则生成了一种较稳定的中间体 ,以致催化活性较低 ,但当溶液中含有一定量的甲醇时 ,催化活性将出现大幅度的提高 . 展开更多

关键词 环氧化 细胞色素 p-450 单加氧酶 铁卟啉模拟酶

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细胞色素P-450对β-阻滞剂类药物代谢物与鼠肝微粒体大分子形成络合物的选择作用

11

作者 姚彤炜 陈妍 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2001年第5期197-200,共4页

目的 :探讨不同来源鼠肝微粒体对 β-阻滞剂类药物代谢形成络合物的选择能力和可能机制。方法 :将经 β-萘黄酮 (BNF)、苯巴比妥 (PB)、地塞米松 (DEX)、普萘洛尔 (PROP)、阿替洛尔(ATE) 5种药物处理的鼠肝微粒体及对照组微粒体分别与β... 目的 :探讨不同来源鼠肝微粒体对 β-阻滞剂类药物代谢形成络合物的选择能力和可能机制。方法 :将经 β-萘黄酮 (BNF)、苯巴比妥 (PB)、地塞米松 (DEX)、普萘洛尔 (PROP)、阿替洛尔(ATE) 5种药物处理的鼠肝微粒体及对照组微粒体分别与β-阻滞剂类药物共孵育 ,测定孵育后代谢络合物形成的差示光谱。结果 :与对照组相比 ,经 PROP处理的鼠肝微粒体降低 PROP代谢络合物形成 ,但增加美托洛尔 (METO)代谢络合物形成 ;PB抑制 PROP代谢 ;而 BNF诱导 METO代谢。 S-PROP在不同微粒体中形成络合物能力较 R-PROP强。结论 :细胞色素 P-4 展开更多

关键词 肝微粒体 酶学 细胞色素p-450 肾上腺素能β-受体拮抗剂 普萘洛尔 阿替洛尔 美托洛尔 络合物 药物代谢物 鼠

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重组缣孢菌细胞色素P-450nor的性质研究

12

作者 刘德立 祥云弘文 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第2期147-150,共4页

纯化的重组缣孢菌细胞色素P 4 50nor(recombinantfusariumoxysporumcytochromeP 4 50nor ,rF·P 4 50nor)用于动力学研究 .测得米氏常数Km (NO)和Km (NADH)分别为 0 1 2 8mmol/L和0 2 0 8mmol/L .Vmax (N2 O)为 1 1 363min- 1.光... 纯化的重组缣孢菌细胞色素P 4 50nor(recombinantfusariumoxysporumcytochromeP 4 50nor ,rF·P 4 50nor)用于动力学研究 .测得米氏常数Km (NO)和Km (NADH)分别为 0 1 2 8mmol/L和0 2 0 8mmol/L .Vmax (N2 O)为 1 1 363min- 1.光谱吸收特性研究表明 :rF·P 4 50nor具有典型的血红素蛋白的特性 ,在 4 1 3nm有最大吸收峰 .加入还原剂Na2 S2 O4 时 ,最大吸收峰前移至 4 0 5nm .与CO结合后 ,再加入还原剂Na2 S2 O4 时 ,在 4 50nm处表现最大吸收 .与NO结合后 ,最大吸收峰移至4 30nm附近 .这些光谱特征的变化与天然的F·P 4 展开更多

关键词 细胞色素 p-450nor 重组 动力学研究 镰孢菌

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大肠杆菌表达的重组细胞色素P-450nor的分离纯化

13

作者 刘德立 HirofumiShoun 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第1期79-82,共4页

用DE－52纤维素柱色谱法和FPLC法（fastProteinliquidchromatography）分离纯化了大肠杆菌表达的重组缣孢菌细胞色素P－450nor（recombinant　fusariumoxvsporumcytochromeP－450nor，rF．P－450nor）．经梯度洗脱MonoQ纯化后的rF．P－4... 用DE－52纤维素柱色谱法和FPLC法（fastProteinliquidchromatography）分离纯化了大肠杆菌表达的重组缣孢菌细胞色素P－450nor（recombinant　fusariumoxvsporumcytochromeP－450nor，rF．P－450nor）．经梯度洗脱MonoQ纯化后的rF．P－450nor为单一色谱峰，比活达55．20U／mg，纯化倍数约为1100倍，SDSPAGE检测为单一谱带． 展开更多

关键词 细胞色素 p-450nor 分离 纯化

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对模拟细胞色素P-450的卟啉类化合物的研究 被引量：3

14

作者 徐丰 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1989年第2期133-143,共11页

本文评述和总结了细胞色素P-450模型体系研究现状。

关键词 细胞色素p-450 p-450模拟体系 卟啉

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抗阿维菌素小菜蛾的细胞色素P450酶系研究 被引量：6

15

作者 黄剑 吕敏 +1 位作者 王群利 吴文君 《农药学学报》 CAS CSCD 2005年第4期316-322,共7页

通过对不同发育时期敏感和抗阿维菌素小菜蛾品系细胞色素P450含量的测定,以及使用不同模式底物对P450单加氧酶活性的比较研究发现:除成虫期外,不同发育时期抗性品系小菜蛾中P450和细胞色素b5的含量都高于敏感品系;抗性品系还原型辅酶Ⅱ(... 通过对不同发育时期敏感和抗阿维菌素小菜蛾品系细胞色素P450含量的测定,以及使用不同模式底物对P450单加氧酶活性的比较研究发现:除成虫期外,不同发育时期抗性品系小菜蛾中P450和细胞色素b5的含量都高于敏感品系;抗性品系还原型辅酶Ⅱ(NADPH)-细胞色素P450还原酶活性是敏感品系的1.97倍;同时发现抗性品系中甲氧试卤灵-O-脱甲基酶(MROD)、乙氧试卤灵-O-脱乙基酶(EROD)、乙氧基香豆素-O-脱乙基酶(ECOD)以及对硝基苯甲醚-O-脱甲基酶(PNOD)的活性均明显高于敏感品系,分别为敏感品系的9.41、4.15、1.67和2.94倍。研究结果表明,细胞色素P450含量和单加氧酶活性的增高是小菜蛾对阿维菌素产生抗性的一个重要机制。 展开更多

关键词 小菜蛾 细胞色素P450 单加氧酶 细胞色素B5 阿维菌素 抗药性

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细胞色素P450Ⅱ E1-基因多态性在酒精性肝病发病中的意义 被引量：9

16

作者 孟祥伟 迟宝荣 +1 位作者 高沿航 孙逊 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期451-453,共3页

目的 :探讨细胞色素 P45 0 E1的基因型与酒精性肝病的相关性。方法 :采用 PCR- RFLP分析方法对 1 0 0例酒精性肝病患者 ,1 5 0例非酒精性肝病患者 ,2 5例酗酒无肝病者和 5 0例正常对照者进行 CYP45 0 E1多态性分析。结果 :CYP45 0 E... 目的 :探讨细胞色素 P45 0 E1的基因型与酒精性肝病的相关性。方法 :采用 PCR- RFLP分析方法对 1 0 0例酒精性肝病患者 ,1 5 0例非酒精性肝病患者 ,2 5例酗酒无肝病者和 5 0例正常对照者进行 CYP45 0 E1多态性分析。结果 :CYP45 0 El分成 A型为 C1基因野生纯和子 ,B型为( C1 /C2 )基因的杂合子 ,C型为 C2基因的突变型纯合子。酒精性肝病中 A、B、C型分别 3%、93%、4%;酗酒无肝病组 A型为 1 0 0 %;非酒精性肝病中 A、B型分别 74%、2 6%;健康志愿者 A、B型分别 72 %、2 8%。酒精性肝病与酗酒无肝病组、非酒精性肝病及健康志愿者比较 ,有统计学意义。乙肝引起肝癌与酒精相关性肝癌的 A型明显减少 ,而 B型则明显增多 ,有统计学意义。结论 展开更多

关键词 肝疾病 酒精性 细胞色素p-450/遗传学 基因多态性

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中国广东籍汉族人细胞色素P450_2E_1基因5'侧翼区多态性 被引量：5

17

作者 王建 刘焯霖 +3 位作者 黎锦如 邵明 潘锡榜 陈彪 《中山医科大学学报》 CSCD 1999年第1期29-31,共3页

目的：探讨中国广东籍汉族人细胞色素Ｐ４５０２Ｅ１基因５′侧翼区的多态性分布规律。方法：利用聚合酶链反应和ＲｓａⅠ、ＰｓｔⅠ限制性片段长度多态性（ＰＣＲＲＦＬＰ）技术对８２名正常中国广东籍汉族人的细胞色素Ｐ４５０２Ｅ... 目的：探讨中国广东籍汉族人细胞色素Ｐ４５０２Ｅ１基因５′侧翼区的多态性分布规律。方法：利用聚合酶链反应和ＲｓａⅠ、ＰｓｔⅠ限制性片段长度多态性（ＰＣＲＲＦＬＰ）技术对８２名正常中国广东籍汉族人的细胞色素Ｐ４５０２Ｅ１基因５′侧翼区的多态性进行了检测。结果：８２名正常中国广东籍汉族人的细胞色素Ｐ４５０２Ｅ１基因５′侧翼区Ｃ１（ＲｓａⅠ＋，ＰｓｔⅠ）、Ｃ２（ＲｓａⅠ，ＰｓｔⅠ＋）等位基因频率分别为０８５４，０１４６；基因型Ｃ１Ｃ１、Ｃ１Ｃ２、Ｃ２Ｃ２的比率分别为０７３２、０２４４、００２４，符合ＨａｒｄｙＷｅｉｎｂｅｒｇ平衡分布。结论：中国广东籍汉族人细胞色素Ｐ４５０２Ｅ１基因５′侧翼区ＲｓａⅠ和ＰｓｔⅠ多态性分布规律与欧美人显著不同。 展开更多

关键词 细胞色素p-450 遗传学 多态性 PCR-RFLP

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稳定表达人细胞色素P4501A2的HepG2细胞的建立及其代谢效应

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作者 诸葛坚 叶森 余应年 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2003年第5期403-406,共4页

目的 :建立稳定表达人细胞的色素 P4 5 0 1A2 (CYP1A2 )的 Hep G2细胞。方法 :将所克隆的野生型CYP1A2 c DNA从重组质粒 p GEM- CYP1A2中用 Kpn / Bam H 双酶切 ,并亚克隆到哺乳动物细胞表达载体p REP9中。再将重组质粒转化感受态大... 目的 :建立稳定表达人细胞的色素 P4 5 0 1A2 (CYP1A2 )的 Hep G2细胞。方法 :将所克隆的野生型CYP1A2 c DNA从重组质粒 p GEM- CYP1A2中用 Kpn / Bam H 双酶切 ,并亚克隆到哺乳动物细胞表达载体p REP9中。再将重组质粒转化感受态大肠杆菌 Top10 ,用氨苄青霉素抗性筛选和限制酶谱鉴定。改良的磷酸钙介导的细胞转染法将重组质粒 p REP9- CYP1A2转染肝癌细胞 Hep G2 ,用 RT- PCR技术对转基因细胞的 CYP1A2m RNA表达作了分析 ,并用 MTT法比较转基因细胞对黄曲霉素 B1(AFB1)细胞毒敏感试验。结果 :与 Hep G2细胞相比 ,Hep G2 - CYP1A2转基因细胞表达 CYP1A2 m RNA,能增强 AFB1的细胞毒作用。结论 :建立了稳定表达CYP1A2的转基因细胞系 ,可用于由 CYP1A2参与的毒理学与药物代谢研究。 展开更多

关键词 细胞色素p-450 癌 肝细胞 HEPG2 黄曲霉素B1

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对氨基二苯醚类对细胞色素P－450抑制机理的探讨

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作者 蒋惠娣 刘志强 《浙江医科大学学报》 CSCD 1994年第3期102-105,共4页

本文研究发现，体内抑制细胞色素Ｐ－４５０活性强、中、弱的三个对氨基二苯醚同系物──４－个氨基－２′，４′－二氯二苯醚、４－氨基－４′－氯二苯醚、４－氨基－２′，３′－二甲基二苯醚与苯巴比妥诱导的大鼠肝微粒体在ＮＡＤＰ... 本文研究发现，体内抑制细胞色素Ｐ－４５０活性强、中、弱的三个对氨基二苯醚同系物──４－个氨基－２′，４′－二氯二苯醚、４－氨基－４′－氯二苯醚、４－氨基－２′，３′－二甲基二苯醚与苯巴比妥诱导的大鼠肝微粒体在ＮＡＤＰＨ及Ｏ２存在下，于３７℃经或未经预孵育（５ｍｉｎ），对Ｐ－４５０对硝基茴香醚脱甲基酶均呈竞争性抑制。预孵育后三者Ｋｉ值依次为０．１１３±０．０９６、０．３６３±０．２６３、０．７０３±０．２４４μｍｏｌ／Ｌ。三者间差异显著（Ｐ＜０．０５）。三者Ｋｉ值与体内抑制Ｐ－４５０的能力呈负相关。若未经预孵育，三者Ｋｉ无明显差异。本实验还发现，三者体外形成的Ｐ－４５０－ＭＩ络合物可以解离。因此，本实验结果似提示，对氨基二苯醚类对Ｐ－４５０的抑制机理不同于传统的“准不可逆”抑制剂。 展开更多

关键词 对氨基二苯醚 细胞色素 p-450 拮抗剂 抑制剂

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一组碳氢化合物与细胞色素P－450自旋状态的定量构效关系

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作者 傅旭春 刘志强 《浙江医科大学学报》 CSCD 1994年第2期54-56,共3页

当细胞色素Ｐ－４５０与第Ⅰ类型化合物结合时，其自旋平衡向高自旋方向移动。本文用Ｈａｎｓｃｈ方法研究了作为第Ⅰ类型化合物的一组碳氢化合物与细胞色素Ｐ－４５０自旋状态的定量构效关系。结果表明，与底物结合后的细胞色素Ｐ－４... 当细胞色素Ｐ－４５０与第Ⅰ类型化合物结合时，其自旋平衡向高自旋方向移动。本文用Ｈａｎｓｃｈ方法研究了作为第Ⅰ类型化合物的一组碳氢化合物与细胞色素Ｐ－４５０自旋状态的定量构效关系。结果表明，与底物结合后的细胞色素Ｐ－４５０的自旋平衡常数与底物的脂溶性参数和立体性参数之间存在很好的线性相关性。对这两种参数影响Ｐ－４５０自旋状态的原因作了讨论。 展开更多

关键词 细胞色素 p-450 碳氢化合物

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