补阳还五汤通过调控外泌体miR-590-5p介导的巨噬细胞极化延缓大鼠血管衰老

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作者 涂舒谕 陈祥宇 +2 位作者 李程辉 黄丹萍 张莉 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1251-1259,共9页

目的 探讨补阳还五汤对血管衰老的延缓作用机制是否与外泌体miR-590-5p介导的巨噬细胞极化有关。方法 将18只雄性SD大鼠随机分为年轻组、衰老组和补阳还五汤组,6只/组。通过腹腔注射D-半乳糖300 mg·kg^(-1)·d^(-1)建立衰老模... 目的 探讨补阳还五汤对血管衰老的延缓作用机制是否与外泌体miR-590-5p介导的巨噬细胞极化有关。方法 将18只雄性SD大鼠随机分为年轻组、衰老组和补阳还五汤组,6只/组。通过腹腔注射D-半乳糖300 mg·kg^(-1)·d^(-1)建立衰老模型,补阳还五汤组灌胃补阳还五汤4.4 g/kg,年轻组、衰老组给予等量生理盐水。Vevo 3100高分辨率超声成像系统检测大鼠腹主动脉脉搏波传导速度(PWV)。分离胸主动脉,ELISA法测定血管组织衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)活性;免疫组织化学法检测p16、p21和SA-β-gal表达。提取各组大鼠血清外泌体并通过纳米颗粒跟踪分析及透射电镜观察外泌体的大小及形态;Western blotting检测血清外泌体表面标记物(CD63和CD81)、血管内皮细胞和血管平滑肌细胞标记蛋白(CD31和SM-22);qRT-PCR检测血清外泌体中miR-590-5p表达;免疫荧光染色和qRT-PCR检测巨噬细胞M1/M2比例及炎性细胞因子表达;生物信息学分析预测miR-590-5p靶基因;双荧光素酶报告基因实验验证miR-590-5p与SLC8A3的靶向关系;Western blotting检测血管组织中SLC8A3表达。结果 与年轻组相比,衰老组大鼠腹主动脉PWV升高(P<0.001),血管中p16、p21和SA-β-gal表达增加(P<0.05);与衰老组相比,补阳还五汤组能够逆转衰老引起的上述变化(P<0.05)。提取的血清外泌体大小为50~150 nm,呈现经典的双凹状囊性小泡结构。分离的血清外泌体不仅表达外泌体表面标记CD63和CD81,还可表达血管内皮细胞及血管平滑肌细胞标记蛋白CD31和SM-22。与年轻组相比,衰老组大鼠血清外泌体中miR-590-5p表达下调(P<0.001),血管中M1和M2巨噬细胞比例(P<0.01)以及M1巨噬细胞特异性细胞因子白细胞介素6和白细胞介素1β升高(P<0.01),M2巨噬细胞特异性细胞因子白细胞介素4和白细胞介素10降低(P<0.01)。与衰老组相比,补阳还五汤组上调衰老大鼠血清外泌体中miR-590-5p表达(P<0.001),抑制衰老血管巨噬细胞M1极化(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清外泌体miR-590-5p表达升高与M1/M2巨噬细胞比例呈负相关(P<0.05)。生物信息学分析显示,miR-590-5p与SLC8A3基因序列存在特异性互补结合位点,双荧光素酶报告实验证实miR-590-5p靶向SLC8A3基因并负调控SLC8A3表达(P<0.05)。Western blotting表明,与年轻组相比,衰老组血管组织中SLC8A3表达升高(P<0.05);与衰老组相比,补阳还五汤组中SLC8A3表达下调(P<0.05)。结论 补阳还五汤通过增加外泌体转运miR-590-5p靶向抑制SLC8A3基因表达,改善血管巨噬细胞M1极化及炎性细胞激活,进而延缓血管衰老。 展开更多

关键词 补阳还五汤 miR-590-5p 外泌体 巨噬细胞极化 血管衰老

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miR-139-5p修饰UC-MSC来源外泌体对乳腺癌细胞干性和放疗敏感性的影响

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作者 时彩艳 黄国定 +1 位作者 李崇伟 刘峰 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第3期251-256,共6页

目的探究miR-139-5p修饰的人脐带间充质干细胞(UC-MSC)来源的外泌体对乳腺癌细胞干性和放疗敏感性的影响。方法UC-MSC转染miR-139-5p模拟物和阴性对照后,提取外泌体并鉴定。将乳腺癌MCF-7细胞分为对照组、miR-NC Exo组、miR-139-5p Exo... 目的探究miR-139-5p修饰的人脐带间充质干细胞(UC-MSC)来源的外泌体对乳腺癌细胞干性和放疗敏感性的影响。方法UC-MSC转染miR-139-5p模拟物和阴性对照后,提取外泌体并鉴定。将乳腺癌MCF-7细胞分为对照组、miR-NC Exo组、miR-139-5p Exo组,免疫荧光染色观察外泌体被细胞摄取情况,细胞肿瘤球形成实验检测肿瘤球形成数量,Western blotting检测细胞中干性相关蛋白Nanog、SOX2和OCT4的表达。将MCF-7细胞分为对照组、2 Gy X线组、miR-139-5p Exo组、miR-139-5p Exo+2 Gy X线组,MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果成功分离到UC-MSC来源的外泌体,且转染miR-139-5p的UCMSC来源的外泌体中miR-139-5p相对表达量高于转染miR-NC的UC-MSC来源的外泌体(P<0.05),2种外泌体均能被MCF-7细胞摄取。与对照组、miR-NC Exo组比较,miR-139-5p Exo组MCF-7细胞肿瘤球形成数量减少,Nanog、SOX2和OCT4蛋白的相对表达水平下调(P<0.05)。与对照组比较,2 Gy X线组和miR-139-5p Exo组MCF-7细胞存活率下降,凋亡率升高(P<0.05);与2 Gy X线组比较,miR-139-5p Exo+2 Gy X线组MCF-7细胞存活率下降,凋亡率升高(P<0.05)。结论经miR-139-5p修饰的UC-MSC来源的外泌体能够抑制乳腺癌MCF-7细胞干性特征,并提高MCF-7细胞的放疗敏感性。 展开更多

关键词 乳腺癌 miR-139-5p 外泌体 肿瘤细胞干性 放疗敏感性

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新风胶囊抑制软骨细胞炎症和细胞外基质降解:基于调控miR-502-5p/TRAF2/NF-κB轴 被引量：7

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作者 周巧 刘健 +3 位作者 万磊 朱艳 齐亚军 胡月迪 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期108-118,共11页

目的探讨新风胶囊(XFC)对白介素(IL)-1β诱导的软骨细胞功能的影响及作用机制。方法构建IL-1β诱导的软骨细胞炎症模型;SD大鼠灌胃制备XFC含药血清。细胞增殖实验(CCK-8)和流式细胞术筛选最佳XFC含药血清浓度;双荧光素酶报告分析miR-502... 目的探讨新风胶囊(XFC)对白介素(IL)-1β诱导的软骨细胞功能的影响及作用机制。方法构建IL-1β诱导的软骨细胞炎症模型;SD大鼠灌胃制备XFC含药血清。细胞增殖实验(CCK-8)和流式细胞术筛选最佳XFC含药血清浓度;双荧光素酶报告分析miR-502-5p和TRAF2的靶向关系。构建miR-502-5p抑制表达质粒(inhibitor)及阴性对照组,转染至软骨细胞中。分为对照组(NC),IL-1β组,XFC组,IL-1β+NC-inhibitor,IL-1β+miR-502-5pinhibitor,IL-1β+miR-502-5pinhibitor+XFC最佳含药血清组,酶联免疫吸附试验(ELASA)检测IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-4、IL-10的水平。逆转录PCR(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹实验(WB)、免疫荧光法检测Ⅱ型胶原α1(COL2A1)、基质金属蛋白酶13(MMP13)、软骨蛋白聚糖抗体(ADAMTS5)和miR-502-5p/TRAF2/NF-κB基因的表达。结果与NC组相比,IL-1β组中软骨细胞活力下降,细胞凋亡率升高,且miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达下降,IL-1β、TNF-α和ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达升高(P<0.05)。筛选得出20%XFC为最佳含药血清浓度。与IL-1β组相比,XFC含药血清干预后,软骨细胞活力升高,细胞凋亡率下降,IL-1β、TNF-α、ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κBp65表达下降,miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达升高(P<0.05)。与NC-inhibitor相比,转染miR-502-5p inhibitor后,IL-1β、TNF-α、ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达升高,miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达下降;与miR-502-5pinhibitor相比,将miR-502-5pinhibitor转染的软骨细胞和最佳XFC含药血清共培养后,XFC含药血清能逆转miR-502-5p抑制状态对软骨细胞炎症和ECM的影响。结论XFC抑制软骨细胞炎症、细胞外基质降解,减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤,其机制可能是通过调节miR-502-5p/TRAF2/NF-κB轴。 展开更多

关键词 miR-502-5p 骨关节炎 新风胶囊 炎症 细胞外基质

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miR-141-5p/ZNF705A对慢性粒细胞白血病细胞源外泌体调控骨髓间充质干细胞黏附作用的机制 被引量：1

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作者 鲍静 许晗 +3 位作者 汪万杰 许婷婷 戴霁菲 夏瑞祥 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期506-514,共9页

目的探讨慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞源外泌体(exosome,Exo)中miR-141-5p/ZNF705A对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)黏附作用的影响。方法电镜和NTA粒径分析检测CML患者外周血和K... 目的探讨慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞源外泌体(exosome,Exo)中miR-141-5p/ZNF705A对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)黏附作用的影响。方法电镜和NTA粒径分析检测CML患者外周血和K562细胞中的Exo形态大小;qRT-PCR和Western blot检测转染前后K562细胞的Exo、BMSCs标记分子及黏附蛋白的表达情况;细胞黏附实验检测BMSCs的黏附能力;CCK-8法检测BMSCs活性、萤光素酶实验检测miR-141-5p与ZNF705A结合情况等。结果qRT-PCR结果显示,miR-141-5p表达在CML患者和K562细胞源Exo中均明显降低;qRT-PCR和Western blot等结果表明,CML患者中BMSCs的黏附蛋白CD44和CXCL12表达明显降低,且能够吞噬K562细胞源Exo。进一步发现,与CD34^(+)细胞相比,K562源性Exo能够降低Exo促进的BMSCs中CD44和CXCL12表达和黏附作用;同时,双萤光素酶基因报告等验证miR-141-5p与ZNF705A靶向结合;最后发现通过上调K562细胞源Exo中miR-141-5p的表达,靶向抑制ZNF705A,进而促进BMSCs的活性和黏附功能。结论K562细胞下调Exo中miR-141-5p表达,减少对ZNF705A的靶向抑制,进而抑制BMSCs的黏附功能,从而调控CML患者的骨髓造血功能。 展开更多

关键词 miRNA-141-5p K562细胞 骨髓间充质干细胞 ZNF705A 外泌体 慢性粒细胞白血病

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胞浆-5'-核苷酸酶-Ⅱ在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义 被引量：4

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作者 曲莉莉 刘晓晴 +6 位作者 王伟霞 汤传昊 李俭杰 李晓燕 高红军 李晓兵 刘广贤 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期56-60,共5页

目的:胞浆-5'-核苷酸酶-Ⅱ(CN-Ⅱ)是一种核苷酸酶,具有水解酶及磷酸转移酶的活性,其异常表达可能与多种核苷类药物耐药有一定相关性。本研究旨在探讨CN-Ⅱ在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其与临床... 目的:胞浆-5'-核苷酸酶-Ⅱ(CN-Ⅱ)是一种核苷酸酶,具有水解酶及磷酸转移酶的活性,其异常表达可能与多种核苷类药物耐药有一定相关性。本研究旨在探讨CN-Ⅱ在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其与临床病理因素的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测116例NSCLC原发及转移病灶中CN-Ⅱ的表达并分析其中67例曾接受过吉西他滨方案化疗的患者其CN-Ⅱ表达与吉西他滨近期疗效及生存的相关性,采用χ2检验及Fisher精确检验分析其表达水平与临床病理因素的相关性,采用Kaplan-Meier方法分析TTP及OS(overall survival,OS),采用对数秩和检验比较不同CN-Ⅱ表达情况之间的差异。结果:116例NSCLC标本中CN-Ⅱ阳性表达率为53.4%,其表达水平与患者的年龄、性别、KPS评分、临床分期、肿瘤病理类型及分化程度等均无显著相关性。NSCLC原发病灶与淋巴结等转移病灶中CN-Ⅱ的表达水平亦无显著性差异。对67例接受含吉西他滨方案化疗NSCLC患者肿瘤组织标本的检测发现,吉西他滨化疗有效组(CR+PR)、疾病控制组(CR+PR+SD)及无效组(PD)的CN-Ⅱ阳性表达率分别为30.4%、36.7%及57.6%,前两者与后者相比均有显著性差异(CR+PR vs.PD组,P=0.008;CR+PR+SD vs.PD组,P=0.013);28例CN-Ⅱ阳性及39例阴性患者中位肿瘤进展时间(progeression free survival,PFS)分别为4.0个月及5.5个月,有显著性差异(95%CI:4.452-6.148,P=0.041),两组患者中位OS分别为9.5个月及11.0个月,无显著性差异(95%CI:8.667-13.333,P=0.282)。结论:CN-Ⅱ异常表达与吉西他滨治疗疗效有一定相关性,有可能成为潜在的疗效预测因子。 展开更多

关键词 5′-核苷酸酶 吉西他滨 耐药性 非小细胞肺癌

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Ⅱ型肺泡上皮细胞来源外泌体miR-21-5p靶向SKP2缓解支气管肺发育不良 被引量：2

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作者 蒋焰 王小勤 +5 位作者 梅鸿 刘鑫鑫 廖贞亮 余琨 冯帮海 覃松 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第23期3298-3305,共8页

目的探讨来源于Ⅱ型肺泡上皮细胞(typeⅡalveolar epithelial cells,AEC-Ⅱ)外泌体(exosomal,Exos)-miR-21-5p(简称miR-21)靶向S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase associated protein 2,SKP2)对支气管肺泡发育不良(bronchopulmonary dysp... 目的探讨来源于Ⅱ型肺泡上皮细胞(typeⅡalveolar epithelial cells,AEC-Ⅱ)外泌体(exosomal,Exos)-miR-21-5p(简称miR-21)靶向S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase associated protein 2,SKP2)对支气管肺泡发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的保护效应及作用机制。方法使用60只6~8周龄的SD大鼠,其中30只通过差速贴壁离心法提取原代AEC-Ⅱ并进行培养。密度梯度离心法用于获得AEC-Ⅱ来源的外泌体,密度梯度离心法用于提取AEC-Ⅱ培养基中囊泡,并通过透射电镜及粒径分析对其验证,双荧光素报告基因实验以确认miR-21与SKP2的靶向关系。剩余的30只大鼠按照3∶1的雌雄比例混合,以便于进行怀孕检测。将这些新生小鼠随机分为4个不同的实验组:空气对照组(Con组)、高氧处理组(BPD+PBS组)、接受高氧和外泌体治疗的小鼠(BPD+Exos-miR-21组),以及高氧联合外泌体miR-21抑制剂处理组(BPD+Exos-AV-miR-21组)。新生SD大鼠将暴露于85%的氧气环境中,以此建立BPD模型。经过14 d高氧处理后,使用RTq-PCR技术检测肺组织和外泌体中miR-21的表达水平。肺组织经HE染色观察其病理学变化,并计算了平均肺泡线性截距(MLI)和放射状肺泡计数(RAC)。分光光度法测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和总抗氧化能力(T-AOC)的水平,荧光分光光度法测定活性氧簇(ROS)水平。此外,利用Western blot技术检测了SKP2、NR2F2和VEGF-A蛋白的表达水平。结果电镜及粒径分析结果显示AEC-Ⅱ细胞提取的小泡结构物质属于外泌体,miR-21在外泌体中表达显著上调(P<0.01),双荧光素酶基因报告实验证实SKP2为miR-21的作用靶标。与Con组比较,BPD+PBS组及BPD+Exos-AVmiR-21组肺组织HE可见肺组织结构紊乱,肺泡增大、简化,ROS、MDA、MLI增高及SKP2蛋白表达升高(P<0.01);而RAC、SOD、T-AOC、miR-21下调及NR2F2、VEGF-A蛋白表达降低(P<0.01);与BPD+PBS组比较,BPD+Exos-miR-21组肺组织HE可见无肺泡数目增加,肺泡简化程度好转,同时MLI、ROS、MDA降低及SKP2蛋白表达降低(P<0.01);而ROC、SOD、T-AOC、miR-21上调及NR2F2、VEGF-A蛋白表达升高(P<0.01)。结论AEC-Ⅱ来源的Exos-miR-21可能靶向SKP2通过促进NR2F2、VEGF-A蛋白表达抑制氧化应激促进肺泡发育改善BPD。 展开更多

关键词 Ⅱ型肺泡上皮细胞 外泌体 微小RNA-21-5p 支气管肺发育不良 S期激酶相关蛋白2

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幽门螺杆菌诱导的胃癌细胞源性外泌体miR-382-5p通过靶向PTEN抑制巨噬细胞自噬并促进其M2极化 被引量：1

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作者 李文婧 郭开云 +7 位作者 罗俊姿 何运兴 段洁 王娜 王昆宁 曾怿歆 罗心怡 张艳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1153-1159,共7页

目的:探讨幽门螺杆菌(H.pylori)诱导的人胃癌细胞源性外泌体miR-382-5p对巨噬细胞自噬和极化的影响及机制,为进一步阐明H.pylori的致癌机制提供新线索。方法:超高速离心法和试剂盒提取H.pylori刺激组和对照组AGS细胞释放的外泌体,采用... 目的:探讨幽门螺杆菌(H.pylori)诱导的人胃癌细胞源性外泌体miR-382-5p对巨噬细胞自噬和极化的影响及机制,为进一步阐明H.pylori的致癌机制提供新线索。方法:超高速离心法和试剂盒提取H.pylori刺激组和对照组AGS细胞释放的外泌体,采用透射电镜(TEM)、纳米粒子跟踪分析(NTA)和Western blot对外泌体进行鉴定;qRT-PCR检测H.pylori诱导的胃癌细胞AGS源性外泌体中miR-382-5p表达;将miR-382-5p mimic转染至THP-1巨噬细胞,Western blot检测巨噬细胞自噬标志物LC3Ⅱ、P62、Beclin-1的表达,免疫荧光检测自噬小体数量;Western blot检测PTEN蛋白、其下游蛋白PI3K、AKT、mTOR及其磷酸化蛋白p-PI3K、p-AKT、p-mTOR表达水平;流式细胞术检测巨噬细胞表型分子CD206和HLA-DR表达水平;ELISA检测巨噬细胞上清中细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10和精氨酸酶1表达水平。结果:提取的外泌体符合外泌体形态,且高表达其表面标志蛋白CD9、CD63、TSG101;与空白对照组相比,H.pylori感染组AGS源性外泌体中miR-382-5p表达显著升高;miR-382-5p mimic转染导致巨噬细胞LC3、Beclin-1表达降低,P62表达升高,自噬小体数量降低;PTEN蛋白表达降低,p-PI3K、p-AKT、p-mTOR表达明显增加。转染同时导致巨噬细胞M2型标志蛋白CD206表达增加,M1型标志蛋白HLA-DR表达降低;IL-10和精氨酸酶1表达增加,IL-6和TNF-α表达降低。抑制剂BEZ235预处理可部分逆转miR-382-5p对巨噬细胞自噬和极化的影响。结论:H.pylori诱导的胃癌细胞源性外泌体miR-382-5p通过靶向PTEN基因,激活PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制巨噬细胞自噬并促进其M2极化。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 外泌体miR-382-5p 自噬 巨噬细胞极化 PI3K/AKT/mTOR信号通路

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人红细胞嘧啶5′-核苷酸酶Ⅰ分子量鉴定、氨基酸组成分析及其微量测序

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作者 潘竹林 李津婴 +7 位作者 闵碧荷 应康 周虹 许小平 宋献民 韩凤来 章卫平 张娴 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第1期61-65,共5页

为进一步探讨遗传性红细胞嘧啶 5′ 核苷酸酶Ⅰ (P5′N Ⅰ )缺乏症的发病机制 ,在纯化人红细胞P5′N Ⅰ的基础上 ,分别用质谱仪和氨基酸分析仪分析其分子量及氨基酸组成 ,同时将该酶经胰蛋白酶水解后进行微量测序 ,并行生物信息学分析... 为进一步探讨遗传性红细胞嘧啶 5′ 核苷酸酶Ⅰ (P5′N Ⅰ )缺乏症的发病机制 ,在纯化人红细胞P5′N Ⅰ的基础上 ,分别用质谱仪和氨基酸分析仪分析其分子量及氨基酸组成 ,同时将该酶经胰蛋白酶水解后进行微量测序 ,并行生物信息学分析。研究结果 :质谱分析表明在蛋白电泳呈一条带的纯化的人红细胞P5′N Ⅰ中发现 3种分子量成倍数关系 ,且质谱图曲线非常吻合的蛋白 ,分子量分别为 2 6 95 2 .9,5 5 4 76及 110 938。测出 1个酶解肽片段N末端的 10个氨基酸序列为 :I E G P T I R Q I E。在数据库中未发现同源性片段。氨基酸分析表明该酶至少由 18种氨基酸 ,约 2 5 3个氨基酸残基组成。结论 :人红细胞P5′N Ⅰ可能为一种多亚基组成的变构酶 ,生理状态下可能存在同源二聚体或四聚体。所测氨基酸序列可作为筛选目的基因的探针。所测氨基酸组成为确定其蛋白一级结构提供了重要依据。 展开更多

关键词 嘧啶5′-核苷酸酶 红细胞 氨基酸成分 微量测序 贫血

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胞外-5′-核苷酸酶在大鼠肝脏缺血预处理中作用的研究 被引量：2

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作者 汪海洋 许元鸿 王闯 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期660-662,共3页

目的探讨胞外-5′-核苷酸酶(5′-NT,CD73)在大鼠肝脏缺血预处理中的作用。方法建立大鼠肝脏热缺血再灌注模型。缺血预处理采用肝脏缺血3min,再灌注3min,反复重复此过程4次。经30min缺血后再灌注,利用Westernblot检测不同时间点CD73在大... 目的探讨胞外-5′-核苷酸酶(5′-NT,CD73)在大鼠肝脏缺血预处理中的作用。方法建立大鼠肝脏热缺血再灌注模型。缺血预处理采用肝脏缺血3min,再灌注3min,反复重复此过程4次。经30min缺血后再灌注,利用Westernblot检测不同时间点CD73在大鼠肝脏组织中的表达,HE染色显示肝脏病理组织学变化,酶学方法检测血清酶学指标(LDH、AST、ALT)变化。结果CD73的蛋白表达在大鼠肝脏缺血预处理后明显升高。药物抑制CD73的功能可以消除缺血预处理的作用,可溶性5′-核苷酸酶可以保护肝脏缺血损伤。结论CD73在大鼠肝脏缺血预处理的保护机制中发挥重要作用。可溶性5′-核苷酸酶可能用于肝脏缺血损伤的治疗。 展开更多

关键词 缺血预处理 缺血再灌注 胞外-5′-核苷酸酶 大鼠

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双峰驼血浆外泌体对肝癌细胞增殖和侵袭的影响

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作者 李泽旭 阿拉腾苏布德 +5 位作者 斯日古楞 牛雅如 贺星川 金君健 李子怡 么宏强 《动物医学进展》 北大核心 2025年第10期20-25,共6页

为探究双峰驼血浆外泌体对肝癌细胞增殖和侵袭的作用,采用超速离心法提取双峰驼血浆外泌体,并利用透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析技术对其形态特征进行观察和鉴定。同时,开展外泌体细胞示踪试验,评估肝癌细胞(HEP3B-luc)对外泌体的... 为探究双峰驼血浆外泌体对肝癌细胞增殖和侵袭的作用,采用超速离心法提取双峰驼血浆外泌体,并利用透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析技术对其形态特征进行观察和鉴定。同时,开展外泌体细胞示踪试验,评估肝癌细胞(HEP3B-luc)对外泌体的摄取情况。之后,将外泌体中表达差异显著的miR-144-5p的模拟物(mimics)和miR-144-5p阴性对照(mimics NC)转染至HEP3B-luc细胞,利用CCK-8法和细胞侵袭试验,检测miR-144-5p对HEP3B-luc细胞增殖和侵袭的影响。结果显示,提取的外泌体呈杯状或圆形,大小分布在50~200 nm之间,HEP3B-luc细胞能够有效摄取外泌体。CCK-8试验结果表明,与对照组相比,mimics组的HEP3B-luc细胞增殖能力显著降低(P<0.05),而mimics NC组无显著差异(P>0.05)。细胞侵袭试验结果显示,mimics组的HEP3B-luc细胞侵袭能力显著低于对照组(P<0.01),而mimics NC组无显著差异。以上结果表明,miR-144-5p能够显著抑制HEP3B-luc细胞的增殖和侵袭能力。 展开更多

关键词 双峰驼 血浆外泌体 miR-144-5p 肝癌细胞 细胞增殖 细胞侵袭

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5-氟尿嘧啶、丝裂霉素、肝素和地塞米松对体外不同生长状态晶状体上皮细胞生长的抑制作用 被引量：4

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作者 李秋明 董红涛 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第3期491-493,共3页

目的:比较体外不同生长状态的晶状体上皮细胞(LECs)对药物敏感性的差异,为体外药物筛选设计提供参考。方法:用含体积分数为10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基调整LECs浓度,分为2组:未融合增生组(细胞浓度为4×104mL-1)和融合维持组(细... 目的:比较体外不同生长状态的晶状体上皮细胞(LECs)对药物敏感性的差异,为体外药物筛选设计提供参考。方法:用含体积分数为10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基调整LECs浓度,分为2组:未融合增生组(细胞浓度为4×104mL-1)和融合维持组(细胞浓度为4×105mL-1),分别放入24孔板中,每孔接种1mL。接种后12h,未融合增生组、融合维持组分别用含体积分数为20%、2%的FBS及含有不同处理因素(含有不同质量浓度5-氟尿嘧啶、丝裂霉素、肝素和地塞米松的DMEM培养基)的培养液培养。作用48h后用MTT比色法检测细胞增生情况。结果:5-氟尿嘧啶和丝裂霉素对未融合增生组和融合维持组的LECs均产生明显的浓度依赖性抑制作用,同一质量浓度药物作用下,未融合增生组的抑制率高于融合维持组(P<0.05)。肝素和地塞米松对未融合增生组LECs有较明显的浓度依赖性抑制作用(P<0.05),而对融合维持组的LECs几乎没有影响。结论:体外不同生长状态的LECs对不同药物及剂量敏感性不同。5-氟尿嘧啶和丝裂霉素抑制LECs的增生作用强,但对处于融合维持状态的LECs毒性也明显;肝素和地塞米松对LECs有一定的增生抑制作用,对处于融合维持状态的LECs毒性低。 展开更多

关键词 晶状体上皮细胞 体外培养 生长状态 5-氟尿嘧啶 丝裂霉素 肝素 地塞米松

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间充质干细胞来源的外泌体通过microRNA-21-5p调节心脏自噬并影响心肌缺血大鼠的心脏功能 被引量：3

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作者 孙理华 王娟 +2 位作者 张岳 张颖 幸世峰 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第5期88-96,共9页

目的探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)分泌的外泌体(exosome,Exos)是否通过miR-21-5p调节心脏自噬并影响心肌缺血大鼠的心脏功能。方法在体外,观察MSCs-Exos对H2O2刺激H9C2s的影响;通过CCK-8测定法检测细胞活力;流式细胞... 目的探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)分泌的外泌体(exosome,Exos)是否通过miR-21-5p调节心脏自噬并影响心肌缺血大鼠的心脏功能。方法在体外,观察MSCs-Exos对H2O2刺激H9C2s的影响;通过CCK-8测定法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;荧光显微镜检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生;免疫印迹分析自噬相关蛋白和荧光GFP-LC3测定自噬体形成。在大鼠MI/RI模型中,通过TUNEL测定、免疫组织化学染色及超声心动图分别检查了MSCs-Exos对细胞凋亡、心肌LC3B表达和心脏功能影响。结果在体外实验中,MSCs-Exos显著提高了H2O2刺激的H9C2细胞活力(P<0.05),降低了ROS的产生和细胞凋亡率(P<0.05)。而与H2O2+MSCs-Exos组相比,H2O2+MSC-ExossimiR-21-5p组细胞活力显著降低(P<0.01),ROS的产生和细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。Western blot检测显示:与H2O2组相比,H2O2+MSCs-Exos组LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ和LC3B-Ⅱ的表达显著增强(P<0.01),p62的表达显著降低(P<0.01);与H2O2+MSCs-Exos组相比,H2O2+MSC-ExossimiR-21-5p组的LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ和LC3B-Ⅱ的表达显著降低(P<0.05),p62的表达显著增强(P<0.05)。自噬通量结果:与H2O2组比较,H2O2+MSCs-Exos组细胞中存在的GFP-LC3点数增加;而与H2O2+MSCs-Exos组相比,H2O2+MSC-ExossimiR-21-5p组细胞中存在的GFP-LC3点数显著降低(P<0.05)。在体内,RT-qPCR分析结果显示:在MSCs-Exos中和MI/RI后心肌组织中miR-21-5p的表达均呈正相关性。与其他各组相比,MI/RI+MSCs-Exos组的LC3B表达显著增强(P<0.01);心肌细胞凋亡显著减少(P<0.01);分数缩短率(FS%)和左心室射血分数(LVEF)均显著提高(P<0.05)。结论MSCs-Exos可通过调节心肌自噬改善MI/RI大鼠的心脏功能,其作用机制可能与miR-21-5p转移有关。 展开更多

关键词 间充质干细胞 外泌体 microRNA-21-5p 心脏自噬 心肌缺血/再灌注损伤

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miR-210-5p修饰间充质干细胞源外泌体促进大鼠脊髓损伤修复的机制 被引量：2

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作者 周永新 翟文静 +5 位作者 贾志强 赵晓光 王磊 方丽萍 翟莎菲 黄涛 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第6期711-714,共4页

目的探索miR-210-5p修饰间充质干细胞(MSCs)源外泌体对脊髓损伤(SCI)大鼠的治疗作用。方法分离、培养SD大鼠MSCs,利用miRNA-210-5p mimic或NC mimic转染MSCs。随后,将60只成年雄性SD大鼠随机分为五组,假手术组、SCI组、MSCs组、MSCs-NC ... 目的探索miR-210-5p修饰间充质干细胞(MSCs)源外泌体对脊髓损伤(SCI)大鼠的治疗作用。方法分离、培养SD大鼠MSCs,利用miRNA-210-5p mimic或NC mimic转染MSCs。随后,将60只成年雄性SD大鼠随机分为五组,假手术组、SCI组、MSCs组、MSCs-NC mimic组和miR-210-5p外泌体组,每组12只。用中度挫伤诱导SD大鼠SCI模型[8]。造模成功后,每天尾静脉注射200μL的MSCs外泌体或NC mimic外泌体或miR-210-5p外泌体;假手术组和SCI模型组每天尾静脉注射200μL的生理盐水溶液,连续7 d。采用BBB量表评估大鼠后肢运动功能;Western blot检测生长关联蛋白(GAP)-43、神经丝蛋白(NF)、Keap1和核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白的表达;RT-qPCR检测血红素加氧酶1(HO-1)、醌氧化还原酶(NQO1)的mRNA水平。结果与SCI模型组相比,miR-210-5p分泌体组大鼠的BBB评分显著升高(P<0.05)。进一步的研究发现,miR-210-5p分泌体组大鼠中GAP-43的表达被显著抑制(P<0.05),HO-1、NF、NQO1的表达则被增强(P<0.05),而Nrf2的抑制剂ML385逆转了miR-210-5p分泌体在SCI大鼠中的作用。结论miR-210-5p修饰MSCs源外泌体通过活化Keap1-Nrf-2通路促进大鼠的脊髓损伤修复。 展开更多

关键词 miR-210-5p 间充质干细胞 外泌体 脊髓损伤 Keap1-Nrf-2通路 大鼠

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人骨髓间充质干细胞外泌体来源的miR-335-5p促进人牙周膜干细胞的成骨分化:基于下调DKK1表达 被引量：3

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作者 刘屿 曾莲 +6 位作者 王卫红 杨艳玲 王洲 刘建启 李卫 孙婧宇 余晓宏 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期420-427,共8页

目的探讨人骨髓间充质干细胞(hBMMSCs)外泌体来源的miR-335-5p调控DKK1对人牙周炎中牙周膜干细胞(PDLSCs)成骨分化的影响及其作用机制。方法提取hBMMSCs外泌体,通过透射电镜、Western blot以及PKH67标记鉴定外泌体,通过TNF-α诱导PDLSC... 目的探讨人骨髓间充质干细胞(hBMMSCs)外泌体来源的miR-335-5p调控DKK1对人牙周炎中牙周膜干细胞(PDLSCs)成骨分化的影响及其作用机制。方法提取hBMMSCs外泌体,通过透射电镜、Western blot以及PKH67标记鉴定外泌体,通过TNF-α诱导PDLSCs构建牙周炎细胞模型。提取的外泌体与TNF-α诱导的PDLSCs共同培养。qRT-PCR检测miR-335-5p,促炎因子IL-1β、IL-6、IL-8和成骨标志基因RunX2、OCN、BMP-2 mRNA表达。茜素红和ALP染色检测钙结节,Western blot检测DKK1蛋白表达,双荧光素酶报告实验验证miR-335-5p与DKK1的靶向关系。结果提取的hBMMSCs外泌体中CD9和CD81显著表达(P<0.05)。hBMMSC外泌体降低TNF-α诱导的hPDLSCs中促炎细胞因子IL-1β(P<0.01)、IL-6(P<0.05)、IL-8(P<0.05)的mRNA表达并促进成骨标志基因RunX2(P<0.01)、OCN(P<0.05)、BMP-2(P<0.001)mRNA和钙结节生成。miR-335-5p在hBMMSCs外泌体中高表达,过表达miR-335-5p靶向下调DKK1(P<0.001),抑制促炎细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8的表达(P<0.001),促进成骨标志物BMP-2、OCN、RunX2的mRNA表达以及钙结节生成(P<0.001)。结论hBMMSC外泌体来源的miR-335-5p靶向下调DKK1,促进hPDLSCs成骨分化,抑制牙周炎的发展进程。 展开更多

关键词 牙周炎 骨髓间充质干细胞 外泌体 miR-335-5p 牙周膜干细胞 成骨分化

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星形胶质细胞通过Cx47调控外泌体介导的CHI3L1分泌并促进少突胶质前体细胞增殖

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作者 张笑妍 程楠楠 彭彦 《中南大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期573-585,共13页

目的:神经退行性变性疾病与髓鞘缺失紧密相关,而少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)的增殖和分化是髓鞘修复的关键,但其调控机制尚未完全明确。本研究旨在探讨星形胶质细胞(astrocytes,ASTs)通过间隙连接蛋白47(co... 目的:神经退行性变性疾病与髓鞘缺失紧密相关,而少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)的增殖和分化是髓鞘修复的关键,但其调控机制尚未完全明确。本研究旨在探讨星形胶质细胞(astrocytes,ASTs)通过间隙连接蛋白47(connexin 47,Cx47)调控外泌体介导的几丁质酶3样蛋白1(chitinase-3-like protein 1,CHI3L1)分泌及其对OPCs增殖的影响机制。方法:采用清洁的出生后第1天斯普拉格-道利(postnatal day 1 Sprague-Dawley,P1SD)乳鼠原代细胞,建立OPCs与ASTs上清液共培养组(A组)、ASTs与OPCs直接接触培养组(C组)及OPCs单独培养组(O组)。采用光学显微镜、5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,EdU)掺入及流式细胞术评估细胞状态和增殖能力。采用转录组测序(RNA sequencing,RNA-Seq)和生物信息学分析(bioinformatics analysis,BA)筛选3组中OPCs的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。采用蛋白质印迹(Western blotting,WB)和流式细胞术分析各培养组蛋白质表达和细胞周期。采用差速离心法分离、提纯外泌体,通过纳米颗粒追踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)、透射电子显微镜分析观察OPCs分泌的外泌体数量和质量,采用WB验证外泌体中CHI3L1的表达水平。采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术敲除Cx47,评估敲除后OPCs增殖能力和外泌体分泌情况。构建包裹CHI3L1的小单层脂质体(single unilamellar vesicles,SUVs)作为人工外泌体模型,采用NTA和电子显微镜鉴定其结构和尺寸。在敲除Cx47后,补充人工外泌体并采用流式细胞术和EdU试验检测OPCs增殖情况。结果:在直接接触共培养条件下,相较于O组和A组,C组OPCs增殖最为显著(P<0.05)。RNA-Seq和WB分析结果显示,ASTs通过Cx47显著促进OPCs的增殖,并增强富含CHI3L1的外泌体的分泌。在采用siRNA技术抑制Cx47表达后,OPCs增殖活性以及外泌体释放量均显著降低(P<0.05);再次补充分离提纯的外泌体和外源性CHI3L1后,采用siRNA技术敲除Cx47对OPCs细胞增殖的抑制作用被削弱。结论:本研究揭示了ASTs通过Cx47调控OPCs增殖的新途径,ASTs在直接接触OPCs时通过Cx47增强富含CHI3L1的外泌体分泌,将细胞间接触信号转化为分泌信号,从而促进OPCs增殖。CHI3L1作为外泌体中的关键分子,在神经系统中的功能和髓鞘修复中的作用机制值得深入研究。 展开更多

关键词 少突胶质前体细胞 星形胶质细胞 间隙连接蛋白47 外泌体 几丁质酶3样蛋白1 5-乙炔基-2'-脱氧尿苷 转录组测序 差异表达基因 细胞增殖

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5-羟色胺和氨海水对钝缀锦蛤解剖卵母细胞的体外促熟作用 被引量：3

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作者 巫旗生 祁剑飞 +5 位作者 宁岳 罗娟 庞小鹏 郭香 罗辉玉 曾志南 《渔业研究》 2022年第5期477-483,共7页

采用解剖卵母细胞体外浸泡促熟的方法,研究了5-羟色胺(5-HT)和氨海水对钝缀锦蛤(Tapes conspersus)卵母细胞的促熟作用。结果表明,采用一定浓度的5-HT和氨海水浸泡均能够显著诱导钝缀锦蛤卵母细胞的生发泡破裂(P<0.05),5-HT和氨海水... 采用解剖卵母细胞体外浸泡促熟的方法,研究了5-羟色胺(5-HT)和氨海水对钝缀锦蛤(Tapes conspersus)卵母细胞的促熟作用。结果表明,采用一定浓度的5-HT和氨海水浸泡均能够显著诱导钝缀锦蛤卵母细胞的生发泡破裂(P<0.05),5-HT和氨海水浸泡的卵母细胞受精率相差不大(P>0.05)。其中,10μmol/L 5-HT浸泡卵母细胞60 min获得的受精率最高,达到48.57%;0.020%氨海水浸泡卵母细胞45 min获得的受精率最高,达到50.75%,但畸形较多。 展开更多

关键词 钝缀锦蛤 卵母细胞 体外促熟 5-羟色胺 氨海水

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多房棘球蚴囊泡来源EVs及其emu-miR-10-5p促进小鼠肝星状细胞活化

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作者 王宇琦 达哇卓玛 +1 位作者 刘川川 樊海宁 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期454-463,482,共11页

目的明确多房棘球绦虫囊泡来源胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)及其emu-miR-10-5p在体外调节HSCs活化中的作用。方法小鼠腹腔注射原头节构建继发性多泡型包虫病模型,以小鼠体内病灶为材料培养多房棘球绦虫囊泡并进行PCR鉴定。透... 目的明确多房棘球绦虫囊泡来源胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)及其emu-miR-10-5p在体外调节HSCs活化中的作用。方法小鼠腹腔注射原头节构建继发性多泡型包虫病模型,以小鼠体内病灶为材料培养多房棘球绦虫囊泡并进行PCR鉴定。透射电镜观察培养囊泡组织中胞外囊泡结构。差速-超速离心法分离囊泡培养上清中EVs,透射电镜、纳米粒径以及Western blot对分离EVs进行鉴定。CCK-8检测不同浓度EVs作用后HSCs活力。EVs作用于HSCs后RT-qPCR和Western blot检测α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ表达水平。生物信息学分析确定emu-miR-10-5p为特异性miRNA。过表达emu-miR-10-5p后EdU检测HSCs增殖,RT-qPCR个Western blot检测细胞中α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ表达水平。干扰囊泡组织中emu-miR-10-5p后提取培养上清液中EVs作用于HSCs后,检测HSCs细胞中α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ表达水平。结果成功通过小鼠体内病灶材料培养出多房棘球蚴囊泡,经PCR扩增特异性基因证实为多房棘球绦虫来源。TEM观察培养囊泡表面有较多的囊状结构。通过差速-超速离心分离出多房棘球蚴囊泡来源EVs,并经TEM证实为球形、膜状结构。囊泡来源EVs能被HSCs内化,并促进HSCs增殖和活化。通过综合分析多房棘球绦虫感染小鼠血清、棘球蚴组织、棘球蚴囊泡来源EVs、生发层细胞、原头节miRNA测序结果,发现emu-miR-10-5p在上述成分中均存在表达,并通过RT-qPCR证实emu-miR-10-5p在多房棘球蚴囊泡来源EVs中存在的量较高。进一步研究证实过表达emu-miR-10-5p能促进HSCs增殖,增加HSCs中α-SMA、Collagen I和CollagenⅢmRNA及蛋白表达水平。而干扰囊泡中emu-miR-10-5p后从培养上清液中提取的EVs未增加α-SMA、Collagen I和CollagenⅢmRNA及蛋白表达水平。结论多房棘球蚴囊泡来源EVs及emu-miR-10-5p能够促进HSCs活化。 展开更多

关键词 多房棘球蚴病 胞外囊泡 肝星状细胞 emu-miR-10-5p

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沉默血小板反应蛋白-1基因对亚溶解型C5b-9诱导肾小球系膜细胞分泌细胞外基质的影响

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作者 邱文 李妍 +2 位作者 周建博 赵聃 王迎伟 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期29-34,47,共7页

目的研究沉默血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)基因对于亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物诱导大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)分泌细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的影响。方法设计合成针对TSP-1基因4... 目的研究沉默血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)基因对于亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物诱导大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)分泌细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的影响。方法设计合成针对TSP-1基因4个靶点的小发夹RNA(small hair RNA,shRNA),并构建相应的表达质粒,筛选沉默效率最佳的TSP-1shRNA(shTSP-1)后,将shTSP-1转染体外培养的大鼠GMC,再给予sublytic C5b-9刺激。以Westernblot检查TSP-1、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)及Ⅳ型胶原蛋白(collagenⅣ)的表达情况。另用ELISA法测定培养上清中总转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和活化TGF-β1的含量。结果核酸序列分析证明,4种TSP-1shRNA重组质粒均构建成功。Western blot实验证实,构建的shTSP-1-3(Thbs1-3)具有最佳的沉默效率。将shTSP-1-3转染大鼠GMC后,在沉默TSP-1基因表达的同时,能明显抑制由sublytic C5b-9诱导的TGF-β1活化及细胞外基质(FN和collagenⅣ)的合成。结论 TSP-1基因表达在sublytic C5b-9刺激大鼠GMC诱导TGF-β1活化及ECM分泌的过程中,发挥了重要的促进作用。 展开更多

关键词 肾小球系膜细胞 亚溶解型C5b-9复合物 血小板反应蛋白-1 细胞外基质 小发夹RNA

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脐带间充质干细胞外泌体转运miR-21-5p促进子宫内膜间质细胞增殖的作用机制 被引量：7

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作者 吕承晓 段华 +2 位作者 汪沙 甘露 徐倩 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第12期1262-1268,共7页

目的脐带间充质干细胞(UCMSC)已被证实通过其外泌体发挥加速损伤子宫内膜修复的作用,但其具体作用机制仍不明确。文中旨在探索UCMSC外泌体所携带的miR-21-5p对于子宫内膜间质细胞增殖的影响。方法增殖期子宫内膜标本取自2018年1月至6月... 目的脐带间充质干细胞(UCMSC)已被证实通过其外泌体发挥加速损伤子宫内膜修复的作用,但其具体作用机制仍不明确。文中旨在探索UCMSC外泌体所携带的miR-21-5p对于子宫内膜间质细胞增殖的影响。方法增殖期子宫内膜标本取自2018年1月至6月首都医科大学附属北京妇产医院妇科微创中心,因宫颈上皮内瘤变III级、子宫肌瘤等行开腹或腹腔镜下全子宫切除的3例患者。通过胶原酶消化法原代分离培养子宫内膜间质细胞并鉴定。采用差速离心法提取UCMSC外泌体并鉴定。荧光定量PCR检测UCMSC外泌体及其处理后的子宫内膜间质细胞内的miR-21-5p的表达水平后,并通过CCK8和EdU染色检测抑制组(转染miR-21-5p inhibitor)、对照组(转染miR inhibitor NC)、空白组(未转染)子宫内膜间质细胞的增殖活性。此外,采用生物信息学分析预测外泌体miR-21-5p在子宫内膜间质细胞内的潜在靶mRNA及其所参与的主要细胞生物学进程。结果 CCK8结果显示,24、48、72 h,抑制组的吸光度显著低于对照组和空白组(P<0.01)。EdU染色结果显示,转染后48 h后,抑制组的外泌体增殖活性[(7.47±0.44)%]显著低于对照组和空白组[(13.47±0.47)%、(14.60±1.08)%],差异有统计学意义(P<0.01)。通过GO分析和KEGG通路富集分析,发现miR-21-5p的潜在靶基因参与2162种生物学进程(P<0.05)、300种分子生物学功能(P<0.05)和214种细胞学组分(P<0.05),并富集到3条细胞信号通路(P<0.05),推测miR-21-5p可能通过这些途径促进外泌体增殖和损伤子宫内膜损伤修复。结论 UCMSC外泌体通过转运miR-21-5p能够参与调控多种与子宫内膜再生修复相关的基因表达及信号通路,从而有效促进子宫内膜间质细胞增殖,加速损伤子宫内膜修复进程。 展开更多

关键词 脐带间充质干细胞外泌体 miR-21-5p 子宫内膜间质细胞 增殖 再生修复

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红细胞嘧啶5′核苷酸酶的纯化及其抗血清的制备 被引量：3

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作者 李建婴 闵碧荷 21cn.com 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第3期327-330,共4页

利用UMP ADH Sepharose4B亲和层析的方法纯化正常人红细胞嘧啶 5′ 核苷酸酶 (P5′N ,EC 3 1 3 5) .结果表明 :利用UMP ADH Sepharose4B亲和层析柱可有效、专一性吸附P5′N ,纯化液经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示一条蛋白质带 ,测定纯化物... 利用UMP ADH Sepharose4B亲和层析的方法纯化正常人红细胞嘧啶 5′ 核苷酸酶 (P5′N ,EC 3 1 3 5) .结果表明 :利用UMP ADH Sepharose4B亲和层析柱可有效、专一性吸附P5′N ,纯化液经聚丙烯酰胺凝胶电泳显示一条蛋白质带 ,测定纯化物相对分子质量 2 8× 10 3 ,等电点 ( pI) 5 2 .纯化物免疫家兔后 ,得兔抗人P5′N抗血清 。 展开更多

关键词 红细胞 嘧啶-5′-核苷酸酶 亲和层析 溶血性贫血

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