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异源四倍体鲫鲤及其原始父母本细胞周期蛋白B基因克隆与分子遗传分析 被引量:4
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作者 刘良国 陶敏 +3 位作者 段巍 刘少军 刘东 刘筠 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期849-858,共10页
细胞周期蛋白(cyclin)B是真核细胞周期运转中调控G2期至M期转化的关键因子.本实验根据斑马鱼细胞周期蛋白B1基因的剪切方式,设计3对特异于金鱼和银鲫细胞周期蛋白B基因外显子区兼并引物,首次扩增出异源四倍体鲫鲤及其原始亲本红鲫和鲤... 细胞周期蛋白(cyclin)B是真核细胞周期运转中调控G2期至M期转化的关键因子.本实验根据斑马鱼细胞周期蛋白B1基因的剪切方式,设计3对特异于金鱼和银鲫细胞周期蛋白B基因外显子区兼并引物,首次扩增出异源四倍体鲫鲤及其原始亲本红鲫和鲤鱼细胞周期蛋白B基因2条大小分别约为2.4kb和2.1kb的片段.测序及比对分析表明:这3种鱼的细胞周期蛋白B基因2个片段均包含8个外显子和7个内含子.内含子剪切位点符合GT-AG规则,推测细胞周期蛋白B基因2个片段可能是细胞周期蛋白B基因的2种存在形式.异源四倍体鲫鲤与其原始父母本细胞周期蛋白B基因片段序列的比较结果表明:无论是外显子区还是内含子区,异源四倍体鲫鲤与其原始亲本都具有较高的遗传相似性,在1025bp的外显子序列中相同的碱基位点数达963个,为异源四倍体鲫鲤来源于红鲫和鲤鱼提供了分子证据;同时,异源四倍体鲫鲤与其原始亲本差异碱基位点的存在又表明这一独特的多倍体物种与其原始亲本存在着进化上的变异.此外,还分别以细胞周期蛋白B基因外显子和内含子序列构建了包括异源四倍体鲫鲤及其原始父母本在内的系统进化树.结果初步表明:对于亲缘关系较近的物种,用外显子和内含子序列构建的系统进化树与传统的物种进化树一致;而对于亲缘关系较远的物种,用内含子序列构建的进化树与传统的物种进化顺序存在较大差异. 展开更多
关键词 异源四倍体鲫鲤 细胞周期蛋白b基因 内含子 分子遗传关系
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斑节对虾细胞周期蛋白B慢病毒载体的构建及对Hela细胞增殖影响 被引量:1
2
作者 周发林 黄建华 +2 位作者 邱丽华 杨其彬 江世贵 《南方水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期16-21,共6页
细胞周期蛋白B(Cyclin B)是影响卵母细胞发育成熟的重要基因。文章构建了PmCyB慢病毒表达载体,并和慢病毒包装复合物在293T细胞中包装成慢病毒颗粒。利用包装好的慢病毒颗粒,感染干扰了Cyclin B1基因的Hela细胞,研究了PmCyB对Hela细胞... 细胞周期蛋白B(Cyclin B)是影响卵母细胞发育成熟的重要基因。文章构建了PmCyB慢病毒表达载体,并和慢病毒包装复合物在293T细胞中包装成慢病毒颗粒。利用包装好的慢病毒颗粒,感染干扰了Cyclin B1基因的Hela细胞,研究了PmCyB对Hela细胞增殖的影响。结果表明,通过siRNA干扰细胞自身的Cyclin B1后,转染对照组病毒液的Hela细胞增殖减缓;同时,干扰后转入含有PmCyB重组慢病毒表达载体,Hela细胞增殖速度明显要高于转染对照组病毒液的Hela细胞的增殖速度。这一结果表明,PmCyB基因的过表达能补偿Cyclin B1缺失导致的细胞增殖减缓的现象,说明PmCyB基因具有细胞周期调控功能,是细胞增殖与分化的重要调控基因,且功能可能与人类的Cyclin B1相似。人类的Cyclin B1是卵母细胞发育成熟的重要基因。由此可以推断,PmCyB基因可能对斑节对虾(Penaeus monodon)卵巢发育成熟起着重要作用。 展开更多
关键词 斑节对虾 细胞周期蛋白b 慢病毒载体 细胞增殖
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上皮性卵巢癌组织中泛素与细胞周期蛋白B1的表达
3
作者 史惠蓉 卫玲 张瑞涛 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2010年第3期381-384,共4页
目的:检测上皮性卵巢癌组织中泛素(Ub)与细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)的表达情况。方法:应用免疫组织化学SP法检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性肿瘤组织及50例上皮性卵巢癌组织中Ub和Cyclin B1蛋白的表达。结果:上皮性卵巢癌组织中Ub和... 目的:检测上皮性卵巢癌组织中泛素(Ub)与细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)的表达情况。方法:应用免疫组织化学SP法检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性肿瘤组织及50例上皮性卵巢癌组织中Ub和Cyclin B1蛋白的表达。结果:上皮性卵巢癌组织中Ub和Cyclin B1蛋白的阳性表达率分别为34.0%(17/50)和42.0%(21/50),与正常卵巢组织的5.0%(1/20)、5.0%(1/20)和卵巢良性肿瘤组织的10.0%(2/20)、15.0%(3/20)相比,差异有统计学意义(P=0.014;χ2=11.841,P=0.003)。上皮性卵巢癌组织中Ub和Cyclin B1蛋白的表达与FIGO分期(χ2=4.529,P=0.033;χ2=5.520,P=0.019)、分化程度(χ2=5.451,P=0.020;χ2=5.889,P=0.015)和淋巴结转移(χ2=6.269,P=0.012;χ2=6.226,P=0.013)有关。上皮性卵巢癌组织中Ub和Cyclin B1蛋白的表达有关联(χ2=5.451,rP=0.314,P=0.020)。结论:Ub和Cyclin B1可能协同参与上皮性卵巢癌的恶性进展和转移,可用于评估上皮性卵巢癌的恶性程度及预后。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 泛素 细胞周期蛋白b1
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急性白血病患者细胞周期蛋白B1基因表达与耐药的关系
4
作者 穆会君 谢平 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2005年第2期150-152,共3页
目的:研究急性白血病(AL)患者细胞周期蛋白B1基因的表达与耐药的关系。方法:应用半定量逆转录多聚酶链反应(RTPCR)检测了13例耐药急性白血病患者和14例非耐药急性白血病患者外周血细胞周期蛋白B1基因的表达水平,并应用荧光定量RTPCR对... 目的:研究急性白血病(AL)患者细胞周期蛋白B1基因的表达与耐药的关系。方法:应用半定量逆转录多聚酶链反应(RTPCR)检测了13例耐药急性白血病患者和14例非耐药急性白血病患者外周血细胞周期蛋白B1基因的表达水平,并应用荧光定量RTPCR对所有患者外周血mdr1基因的表达进行了检测。结果:耐药组细胞周期蛋白B1基因表达水平显著高于非耐药组(P<0.05,t=2.549),细胞周期蛋白B1与mdr1mRNA的表达呈正相关(r=0.404,P<0.05,t=2.208)。结论:细胞周期蛋白B1基因可以作为判断AL患者耐药的指标,对判断AL的预后具有一定的价值,细胞周期蛋白B1的表达与由mdr1介导的耐药相关。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白b1 急性白血病 逆转录-多聚酶链反应
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永生化食管上皮恶变细胞中核干细胞因子、细胞周期蛋白B1和PTEN的表达 被引量:1
5
作者 胡梦竹 王娟 +2 位作者 张巧 高社干 张功员 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第13期1512-1516,共5页
目的观察核干细胞因子(nucleostemin,NS)、细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)及抑癌基因PTEN mRNA和蛋白的表达情况。方法正常食管上皮细胞(shantou human embryonic esophageal epithelial cell line,SHEE)和永生化食管上皮恶变细胞(shantou h... 目的观察核干细胞因子(nucleostemin,NS)、细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)及抑癌基因PTEN mRNA和蛋白的表达情况。方法正常食管上皮细胞(shantou human embryonic esophageal epithelial cell line,SHEE)和永生化食管上皮恶变细胞(shantou human embryonic esophageal carcinoma epithelial cell line,SHEEC)连续传代培养,取对数生长期SHEE和SHEEC细胞,采用RT-PCR及Western blot方法检测细胞中NS、Cyclin B1及PTEN mRNA和蛋白的表达并做相关性分析,MTT法检测抑制NS表达后的细胞增殖活性。结果以SHEE细胞中NS、Cyclin B1和PTEN mRNA的表达量为1,SHEEC细胞中对应的相对表达量分别为(2.047±0.507)、(2.214±0.213)及(0.668±0.188),两组比较差异均有统计学意义(P<0.05);SHEE及SHEEC细胞中NS、Cyclin B1及PTEN蛋白表达量分别为(1.142±0.113),(3.161±0.108)、(1.585±0.056),(2.173±0.058)及(1.894±0.341),(1.162±0.524),两组比较差异均有统计学意义(P<0.05);NS mRNA和蛋白与Cyclin B1 mRNA和蛋白的表达呈正相关(r=0.832,P<0.01;r=0.991,P<0.05),与PTEN mRNA和蛋白的表达呈负相关(r=-0.924,P<0.01;r=-0.769,P<0.05);MTT检测结果显示,NS RNA干扰(RNA interference,RNAi)组与空白对照组和阴性对照组在干扰后12 h细胞增殖能力差异无统计学意义(P>0.05),而在干扰后24、36、48 h差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SHEEC细胞中NS、Cyclin B1 mRNA和蛋白的表达量均高于SHEE,而PTEN的表达量低于SHEE,NS可能对细胞恶变有影响。 展开更多
关键词 永生化食管上皮恶变细胞 核干细胞因子 细胞周期蛋白b1 PTEN
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细胞周期蛋白B1在恶性肿瘤中的研究进展 被引量:11
6
作者 冷远秀 徐林 +1 位作者 陈芳 罗清 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期1-4,共4页
细胞周期蛋白B1(cyclin B1,CCNB1)在调节细胞周期的G2/M期进展中起关键作用。越来越多的研究证实CCNB1在多种恶性肿瘤中表达,并参与肿瘤细胞的生长、分化、凋亡和转移。CCNB1在不同类型的肿瘤中存在差异性表达,其表达的变化影响肿瘤的... 细胞周期蛋白B1(cyclin B1,CCNB1)在调节细胞周期的G2/M期进展中起关键作用。越来越多的研究证实CCNB1在多种恶性肿瘤中表达,并参与肿瘤细胞的生长、分化、凋亡和转移。CCNB1在不同类型的肿瘤中存在差异性表达,其表达的变化影响肿瘤的发展、治疗及预后。本文综合近年来国内外的研究,对CCNB1在肿瘤的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白b1 肿瘤 G2/M期
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应用噬菌体展示技术筛选细胞周期素B2启动子DNA的结合蛋白 被引量:1
7
作者 郭江 成军 +3 位作者 赵龙凤 高学松 张黎颖 伦永志 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1049-1051,共3页
目的筛选细胞周期素B2(cyclinB2)启动子DNA结合蛋白,探索cyclinB2的表达调节机制。方法应用噬菌体展示技术,以cyclinB2启动子DNA片段作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行4轮“吸附洗脱扩增”富集过程,噬斑裂解液PCR扩增后,进... 目的筛选细胞周期素B2(cyclinB2)启动子DNA结合蛋白,探索cyclinB2的表达调节机制。方法应用噬菌体展示技术,以cyclinB2启动子DNA片段作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行4轮“吸附洗脱扩增”富集过程,噬斑裂解液PCR扩增后,进行DNA序列分析和同源性生物信息学搜索。结果噬菌体经富集后,筛选出20个阳性克隆,成功构建了克隆载体。序列测定后经过同源性搜索,确定了和cyclinB2启动子特异结合的肝细胞蛋白,共编码6种已知蛋白。结论用噬菌体人肝cDNA文库筛选得到cyclinB2启动子DNA结合蛋白,分析了这些蛋白的功能,为研究cyclinB2基因的转录调节机制奠定了基础。 展开更多
关键词 噬菌体展示技术 细胞周期蛋白b 启动子DNA结合蛋白筛选
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绞股蓝对海马注射Aβ_(1-40)大鼠脑内细胞周期蛋白表达和钙稳态变化的影响 被引量:20
8
作者 姚柏春 袁华 +1 位作者 黄翔 赵涓涓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期1618-1622,共5页
目的:探讨绞股蓝对海马注射Aβ1-40大鼠脑内细胞周期蛋白异常表达和钙稳态变化的影响。方法:动物随机分为绞股蓝组、模型组、对照组。运用淀粉样β蛋白双侧海马注射,模拟阿尔茨海默病脑内Aβ对神经系统的损害。Y型迷宫测试大鼠学习记忆... 目的:探讨绞股蓝对海马注射Aβ1-40大鼠脑内细胞周期蛋白异常表达和钙稳态变化的影响。方法:动物随机分为绞股蓝组、模型组、对照组。运用淀粉样β蛋白双侧海马注射,模拟阿尔茨海默病脑内Aβ对神经系统的损害。Y型迷宫测试大鼠学习记忆能力,免疫组织化学染色和积分吸光度分析检测细胞周期蛋白A、B1(cyc linA、cyc lin B1),Fura-2/AM-荧光法测定海马细胞内Ca2+含量;并对绞股蓝组大鼠给予绞股蓝皂苷灌胃,观察其对AD大鼠上述各项指标变化的影响。结果:Aβ1-40海马注射大鼠学习记忆能力明显低于对照组(P<0.05),脑内细胞周期蛋白A、B1蛋白水平明显高于对照组,海马神经元内Ca2+含量显著高于对照组;而给予绞股蓝在一定程度上能改善大鼠学习记忆能力,降低cyc lin A、cyc lin B1蛋白和Ca2+含量的水平(P<0.05)。结论:绞股蓝对Aβ引起的动物学习记忆能力减退、海马神经元内异常表达细胞周期蛋白和钙稳态失衡有一定的逆转作用。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 淀粉样Β蛋白 细胞周期蛋白A 细胞周期蛋白b 绞股蓝属
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脂质体转染细胞周期素B1反义脱氧寡核苷酸对HL60细胞增殖调控的影响
9
作者 贾晋松 徐世荣 +5 位作者 贾存荣 马劼 马卫东 姚银荣 王毅 石翠英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期228-233,共6页
目的 :探讨脂质体转染细胞周期素B1(cyclinB1)反义脱氧寡核苷酸 (ASON)对HL6 0细胞增殖调控的作用。方法 :用针对cyclinB1mRNA 5’端编码区起始密码子 (ATG/AUG)的ASON ,通过脂质体导入HL6 0细胞共培养后 ,用流式细胞术 (FCM)和RT -PCR... 目的 :探讨脂质体转染细胞周期素B1(cyclinB1)反义脱氧寡核苷酸 (ASON)对HL6 0细胞增殖调控的作用。方法 :用针对cyclinB1mRNA 5’端编码区起始密码子 (ATG/AUG)的ASON ,通过脂质体导入HL6 0细胞共培养后 ,用流式细胞术 (FCM)和RT -PCR分别检测cyclinB1蛋白和mRNA的表达水平 ,电镜和原位细胞凋亡检测法(POD)、FCM及DNA凝胶电泳法检测细胞凋亡。结果 :CyclinB1ASON组与SON及空白对照组相比 ,ASON能特异地抑制cyclinB1蛋白及mRNA水平的表达 ,当ASON的浓度达到一定程度时 ,HL6 0细胞的增殖及集落形成率均明显受抑制 ,出现细胞凋亡 ,并且此作用随ASON浓度的升高而增强。结论 :CyclinB1的特异ASON能封闭其蛋白及mRNA的表达水平 ,可剂量依赖性地抑制白血病细胞增殖 ,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白b1 寡核苷酸类 反义 脂质体 白血病 HL细胞 细胞凋亡
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TNF-α诱导Molt-4细胞周期特异性凋亡及cyclin B1的表达
10
作者 杨长永 路雪芹 +1 位作者 冯永东 龚建平 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期364-367,388,共5页
目的:观察TNF-α诱导Molt-4细胞的凋亡现象以及cyclinB1的表达,探讨膜受体途径细胞凋亡机制。方法:用TNF-α处理指数生长期的Molt-4细胞;应用API、免疫印迹电泳等方法检测细胞凋亡和cyclinB1的表达。结果:Molt-4细胞经TNF-α诱导后出现... 目的:观察TNF-α诱导Molt-4细胞的凋亡现象以及cyclinB1的表达,探讨膜受体途径细胞凋亡机制。方法:用TNF-α处理指数生长期的Molt-4细胞;应用API、免疫印迹电泳等方法检测细胞凋亡和cyclinB1的表达。结果:Molt-4细胞经TNF-α诱导后出现了明显的细胞凋亡,细胞凋亡主要发生在细胞周期的G1期,cyclinB1在G1期呈阳性表达。结论:TNF-α诱导的细胞凋亡具有细胞周期特异性,cyclinB1在G1期细胞中表达升高可能与G1期细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 细胞周期特异性 细胞凋亡 细胞周期蛋白b1
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Taurolidine联合X射线对小鼠恶性黑色素瘤细胞周期进程的影响 被引量:1
11
作者 孙宝胜 张矛 +3 位作者 刘林林 张伟静 孙娟 龚守良 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期21-25,共5页
目的:观察taurolidine联合X射线照射对小鼠恶性黑色素瘤(B16-4A5和B16-F10)细胞周期进程的影响,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的发生机制。方法:选择B16-4A5和B16-F10细胞系按给药浓度随机分为4组,taurolidine剂量分别为0、25、50和100μmol.L... 目的:观察taurolidine联合X射线照射对小鼠恶性黑色素瘤(B16-4A5和B16-F10)细胞周期进程的影响,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的发生机制。方法:选择B16-4A5和B16-F10细胞系按给药浓度随机分为4组,taurolidine剂量分别为0、25、50和100μmol.L-1,同时进行1、2和4Gy X射线照射,采用流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,Western blotting分析cyclin B、cdc2和caspase-3的表达。结果:与25μmol.L-1taurolidine组比较,50和100μmol.L-1 taurolidine组诱导B16-4A5和B16-F10细胞发生G0/G1期阻滞,细胞数分别升高54.9%、73.7%和36.8%、55.5%(P<0.05);50μmol.L-1 taurolidine联合2和4Gy X射线照射组,细胞G2/M期阻滞消除,细胞数分别降低52.1%、44.2%和59.3%、52.7%(P<0.05)。与对照组、单纯taurolidine组及单纯照射组比较,联合4Gy X射线照射组cyclin B和cdc2的表达降低,caspase-3的表达升高(P<0.05)。结论:taurolidine联合X射线照射可去除G2/M期阻滞,可选择地抑制肿瘤细胞cyclin B和cdc2的表达、增强caspase-3的表达,共同诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 TAUROLIDINE X射线 细胞周期 细胞分裂周期2 细胞周期蛋白b
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miR-150、CCNB1及MFN2参与调控肝癌细胞Huh-7凋亡并抑制其侵袭迁移的机制研究 被引量:5
12
作者 文峰 向燕 《海南医学院学报》 CAS 2019年第9期650-653,共4页
目的:探究miR-150、细胞周期蛋白B1(CCNB1)及线粒体融合蛋白2(MFN2)参与调控肝癌细胞Huh-7凋亡并抑制其侵袭迁移的机制。方法:将肝癌细胞Huh-7分为对照组(control组)、阴性对照组(NC组)和miR-150过表达组(mimic组),通过质粒转染构建miR-... 目的:探究miR-150、细胞周期蛋白B1(CCNB1)及线粒体融合蛋白2(MFN2)参与调控肝癌细胞Huh-7凋亡并抑制其侵袭迁移的机制。方法:将肝癌细胞Huh-7分为对照组(control组)、阴性对照组(NC组)和miR-150过表达组(mimic组),通过质粒转染构建miR-150过表达细胞系。CCK-8和流式细胞术应用于检测细胞活力的凋亡,细胞划痕实验和Transwell应用于检测迁移和侵袭,qPCR检测miRNA和mRNA水平,WB检测蛋白的相对表达水平。结果:miR-150可显著抑制Huh-7的细胞活力而促进凋亡(P<0.01)。培养24 h后mimic组迁移率、侵袭率均显著低于control组和NC组(P<0.01)。Mimic组的CCNB1蛋白和mRNA的表达水平显著低于control组和NC组(P<0.01),MFN2显著高于control组和NC组(P<0.01)。结论:在肝癌细胞Huh-7中,miR-150可能通过下调CCNB1或上调MFN-2的水平抑制肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 肝癌 miR-150 细胞周期蛋白b1(CCNb1) 线粒体融合蛋白2(MFN2)
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AS-CLB1增强泰素帝抗Lewis肺癌细胞体内外增殖作用的研究
13
作者 张涛 张伶 +4 位作者 魏东 张汝 程朋 李继承 张宏 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期465-469,共5页
目的:研究细胞周期蛋白B1反义全长cDNA(AS-CLB1)对抗Lewis肺癌细胞(LL/2)体内外增殖作用的影响,为将AS-CLB1联合用于人肺癌等恶性肿瘤的治疗提供实验依据。方法:(0.01nmol/L~0.1μmol/L)处理LL/2亲本(LP),LL/2空载体(LV)及LL/2/AS-CLB1... 目的:研究细胞周期蛋白B1反义全长cDNA(AS-CLB1)对抗Lewis肺癌细胞(LL/2)体内外增殖作用的影响,为将AS-CLB1联合用于人肺癌等恶性肿瘤的治疗提供实验依据。方法:(0.01nmol/L~0.1μmol/L)处理LL/2亲本(LP),LL/2空载体(LV)及LL/2/AS-CLB1(LA)三种细胞,分别于1h及24h后用MTT比色法评估对各组细胞的杀伤作用。将上述三种细胞分别接种C57BL/6小鼠,成瘤后用(15mg/kg.d)处理各组动物,3d1次,一共4次,进行成瘤性及动物生存时间观察;流式细胞仪检测各组动物肿瘤组织细胞周期及凋亡。结果:无论是泰素帝处理1h还是24h,LA细胞存活率较LP、LV两对照均明显降低(P<0.05);其中处理1h后,泰素帝80nmol/L组LA细胞存活率低于对照9倍以上,处理24h后,20nmol/L组LA细胞存活率低于对照7倍左右。LA组小鼠肿瘤体积明显小于对照(P<0.05),接种后30天,LP组肿瘤体积大小为1981.29±318.56mm3,LV组为1673.36±297.96mm3,LA组仅为421.68±30.16mm3。LA组肿瘤组织中细胞在G1期所占比例为(89.7±0.5)%,凋亡率为(79.5±1.2)%,均较对照明显增加(P<0.05)。接种后60天,LA组尚有70%的小鼠存活,LP组仅30%,LV组仅40%存活,LA组动物生存时间明显延长(P<0.01)。结论:AS-CLB1可以明显增强抗LL/2细胞在体内外的增殖作用,此增强效应可能与AS-CLB1诱导细胞发生G1期阻滞及凋亡,增强了抗肿瘤作用有关。 展开更多
关键词 反义CDNA 细胞周期蛋白b1 泰素帝 LEWIS肺癌细胞
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光裸星虫CyclinB基因克隆及其在卵母细胞中的表达分析 被引量:1
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作者 邬婧 苏泳霖 +3 位作者 周丹 钟如卓 郭志诚 王庆恒 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1980-1990,共11页
【目的】探究细胞周期蛋白B(CyclinB)基因在光裸星虫(Sipunculus nudus)卵母细胞发育成熟过程中的作用,为揭示光裸星虫卵母细胞发育的分子机制提供理论依据。【方法】利用RACE克隆光裸星虫CyclinB(Sn-CyclinB)基因cDNA序列,通过ProtPara... 【目的】探究细胞周期蛋白B(CyclinB)基因在光裸星虫(Sipunculus nudus)卵母细胞发育成熟过程中的作用,为揭示光裸星虫卵母细胞发育的分子机制提供理论依据。【方法】利用RACE克隆光裸星虫CyclinB(Sn-CyclinB)基因cDNA序列,通过ProtParam、DNAMAN 9.0、COBALT、SOPMA、Phyer2、Pfam及BLAST等在线软件进行生物信息学分析,并以实时荧光定量PCR检测分析Sn-CyclinB基因在光裸星虫卵母细胞不同发育时期的表达情况。【结果】Sn-CyclinB基因cDNA序列全长2468 bp,包括141 bp的5'端非翻码区(5'-UTR)、1097 bp的3'端非翻码区(3'-UTR)及1230 bp的开放阅读框(ORF),编码409个氨基酸残基,在3'-UTR中存在3个胞质多聚腺苷酸化元件(CPE)、1个翻译调控元件(TCE)和1个K-box翻译调控元件。Sn-CyclinB蛋白分子量为46.304 kD,理论等电点(pI)为8.68,具有CyclinB特征序列(FLRRxSK)和Cyclin降解框(RxALGxIxN),属于亲水性蛋白,含有周期蛋白框(Cyclin box);其二级结构中α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲分别占56.72%、3.91%、0.73%和38.63%;CyclinB蛋白C端的保守性较N端高;与其他物种相比,光裸星虫Cyclin降解框(RALGTISN)的位置前移了13个氨基酸;光裸星虫与小头虫和欧洲帽贝的CyclinB蛋白三级结构高度相似。基于CyclinB氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树分为无脊椎动物和脊椎动物两大支,其中光裸星虫与小头虫及水蛭等无脊椎动物聚为一支。Sn-CyclinB基因在光裸星虫卵母细胞不同发育时期均有表达,且整体上呈双峰型变化趋势,其相对表达量的峰值分别出现在卵黄旺盛合成后期(O3)和肾管发育时期(O5)。【结论】Sn-CyclinB蛋白具有CyclinB特征序列,其3'-UTR含有多种与翻译调控相关的调控元件,参与光裸星虫卵母细胞减数分裂G_(1)/S期和G_(2)/M期的转换,对促进卵母细胞减数分裂有序进行起重要作用。 展开更多
关键词 光裸星虫 细胞周期蛋白b(Cyclinb) Cyclin降解框 表达分析 卵母细胞 减数分裂
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CCNB1基因在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义 被引量:6
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作者 崔宇平 马洪 +1 位作者 段晓峰 孙昆俊 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期395-397,共3页
目的:研究细胞周期蛋白B1(CCNB1)mRNA在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达及其临床意义。方法:利用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测CCNB1 mRNA在42例OSCC组织和17例口腔正常黏膜组织中的表达,并分析其相对表达量与临床特... 目的:研究细胞周期蛋白B1(CCNB1)mRNA在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达及其临床意义。方法:利用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测CCNB1 mRNA在42例OSCC组织和17例口腔正常黏膜组织中的表达,并分析其相对表达量与临床特征的关系。结果:CCNB1 mRNA在OSCC中高表达(P<0.05),高分化组织中表达量低于中低分化者(P<0.05),临床Ⅰ、Ⅱ期组低于Ⅲ、Ⅳ期(P<0.05)。不同年龄、不同性别组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CCNB1基因表达的增高可能在OSCC增殖过程中起到重要作用。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白b1(CCNb1) 口腔鳞状细胞癌(OSCC) 实时定量荧光聚合酶链反应
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蓝萼甲素通过cyclinB1/CDK1途径诱导DU145细胞G2/M期阻滞 被引量:4
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作者 朱琳琳 徐祉轩 张明明 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第18期2235-2239,共5页
目的:研究蓝萼甲素(GLA)调节DU145细胞周期信号通路的表达,探讨GLA阻滞DU145细胞周期的作用机制。方法:不同浓度(1、2.5、5μg/ml)GLA分别刺激培养DU145细胞24 h,CCK8检测细胞增殖;流式检测细胞周期与凋亡;qRT-PCR与Western blot分别检... 目的:研究蓝萼甲素(GLA)调节DU145细胞周期信号通路的表达,探讨GLA阻滞DU145细胞周期的作用机制。方法:不同浓度(1、2.5、5μg/ml)GLA分别刺激培养DU145细胞24 h,CCK8检测细胞增殖;流式检测细胞周期与凋亡;qRT-PCR与Western blot分别检测细胞周期蛋白p21、cyclinB1、CDK1 mRNA与蛋白水平的表达;免疫荧光检测cyclinB1、CDK1在细胞中的定位表达。结果:5μg/ml GLA刺激培养DU145细胞24 h,细胞中p21表达升高,cyclinB1、CDK1表达降低,细胞周期显著阻滞于G2/M期,且细胞凋亡增加。结论:GLA能够通过cyclinB1/CDK1途径诱导DU145细胞周期阻滞于G2/M期,且作用效果与剂量密切相关。 展开更多
关键词 蓝萼甲素 细胞周期蛋白b1 细胞周期蛋白依赖性激酶1
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大蒜素诱导人胃癌SGC-7901细胞M期阻滞及其机制研究 被引量:14
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作者 陈铁军 哈敏文 +3 位作者 孙丽萍 宫月华 柳云恩 袁媛 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期686-688,共3页
目的:探讨大蒜素诱导人胃癌SGC-7901细胞M期阻滞作用及其机制。方法:以MTT比色法检测人胃癌细胞系SGC-7901细胞的增殖抑制率;采用免疫荧光染色、激光共聚焦显微镜检测等技术,比较药物处理前后M期细胞占总细胞数百分比的变化,观察细胞微... 目的:探讨大蒜素诱导人胃癌SGC-7901细胞M期阻滞作用及其机制。方法:以MTT比色法检测人胃癌细胞系SGC-7901细胞的增殖抑制率;采用免疫荧光染色、激光共聚焦显微镜检测等技术,比较药物处理前后M期细胞占总细胞数百分比的变化,观察细胞微管结构及细胞周期蛋白B1(cyclin B1)在胞内分布的变化,并做荧光定量分析cyclin B1在用药前后量的改变。结果:大蒜素抑制SGC-7901细胞的24h IC50为7.2μg/ml,72h IC50为20μg/ml;经大蒜素处理后,M期细胞占总细胞数的30.61%,明显高于对照组的4.69%(P<0.05)。经大蒜素处理后细胞变小变圆,微管结构消失,胞质模糊;而对照组细胞形态正常,微管结构清晰完整。经大蒜素处理后,胞质中cyclin B1表达升高,并向核内聚集,cyclin B1荧光定量明显高于对照组(P<0.01)。结论:大蒜素可以促进微管解聚,可以提高促成熟因子(MPF)的重要成份cyclin B1在细胞内的表达并促进其向核内转移,使细胞周期阻滞于M期。大蒜素可以作为一种新的作用于M期的抗肿瘤药物应用于临床。 展开更多
关键词 大蒜素 胃肿瘤 细胞周期 细胞周期蛋白b1 微管
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青蒿琥酯引起骨髓瘤细胞RPMI8226 G_2/M期阻滞 被引量:3
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作者 王素云 刘志妙 +8 位作者 郝洪岭 成志勇 杨晓阳 李杰 王瑞仓 李燕 杨洁 袁军 王超 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期794-796,共3页
目的研究青蒿琥酯对人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226细胞周期的影响及可能机制。方法分别以浓度为0、25、50μg/mL的青蒿琥酯作用于RPMI8226细胞,用透射电镜观察细胞变化,流式细胞术检测细胞周期分布,蛋白质印迹法检测细胞周期相关蛋白cyc... 目的研究青蒿琥酯对人多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226细胞周期的影响及可能机制。方法分别以浓度为0、25、50μg/mL的青蒿琥酯作用于RPMI8226细胞,用透射电镜观察细胞变化,流式细胞术检测细胞周期分布,蛋白质印迹法检测细胞周期相关蛋白cyclin B1和p34cdc2的变化。结果 50μg/mL青蒿琥酯处理48h后,多数细胞显示出凋亡细胞的特征性形态。随着青蒿琥酯浓度增加,G0/G1期细胞的比例逐渐下降(P<0.05),G2/M期细胞的比例逐渐上升(P<0.05),细胞明显阻滞于G2/M期。细胞周期蛋白cyclin B1表达水平随青蒿琥酯浓度的增加而增加,p34cdc2表达水平随青蒿琥酯浓度的增加而降低。结论青蒿琥酯能将RPMI8226细胞阻滞于G2/M期,其机制可能与cyclin B1的升高及p34cdc2的降低有关。 展开更多
关键词 青蒿琥酯 多发性骨髓瘤 细胞周期 细胞周期蛋白b1 CDC2蛋白激酶
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食管癌组织中CyclinB1/CDK1复合物表达量与血清及病灶中标志分子含量的相关性 被引量:3
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作者 季语祝 陈曦 +2 位作者 谢刚 谢春燕 王芳 《海南医学院学报》 CAS 2017年第19期2716-2719,共4页
目的:研究食管癌组织中CyclinB1/CDK1复合物表达量与血清及病灶中标志分子含量的相关性。方法:选择在本院诊断为食管癌的患者作为食管癌组并采集食管癌病灶组织、癌旁病灶组织及血清标本,选择同期体检的健康志愿者作为对照组并采集血清... 目的:研究食管癌组织中CyclinB1/CDK1复合物表达量与血清及病灶中标志分子含量的相关性。方法:选择在本院诊断为食管癌的患者作为食管癌组并采集食管癌病灶组织、癌旁病灶组织及血清标本,选择同期体检的健康志愿者作为对照组并采集血清标本。测定食管癌病灶组织、癌旁病灶组织中CyclinB1/CDK1复合物、抑癌基因、侵袭基因的表达量以及血清中肿瘤标志物的含量。结果:食管癌病灶中CyclinB1、CDK1、E2F-1的mRNA表达量显著高于癌旁病灶;食管癌组患者血清中肿瘤标志物CYFRA21-1、SCC-Ag、CD44v5、Stathmin的含量均显著高于对照组志愿者且与食管癌病灶中CyclinB1、CDK1、E2F-1的mRNA表达量呈正相关,食管癌病灶中PTEN、Spink8、p21、p18的mRNA表达量显著低于癌旁病灶且与食管癌病灶中CyclinB1、CDK1、E2F-1的mRNA表达量呈负相关,食管癌病灶中nestin、β-catenin、Snail、Vimentin的mRNA表达量显著高于癌旁病灶且与食管癌病灶中CyclinB1、CDK1、E2F-1的mRNA表达量呈正相关。结论:食管癌组织中CyclinB1/CDK1复合物的高表达能够促进癌细胞的增殖和侵袭。 展开更多
关键词 食管癌 细胞周期蛋白b1 细胞周期蛋白依赖性激酶1 肿瘤标志物 侵袭
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舌鳞癌中p34cdc2与cyclin B1的表达及相关研究 被引量:2
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作者 陈新 周健 +2 位作者 王元银 何家才 王银龙 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第6期620-623,共4页
目的研究舌鳞癌组织中p34cdc2与cyclin B1蛋白的表达,探讨它们阳性表达的相关性及其与舌鳞癌临床病理特征的关系。方法随机收集舌鳞癌标本60例,对照上皮包括正常舌组织11例、癌旁组织49例。采用免疫组织化学SP法显示p34cdc2与cyclin B1... 目的研究舌鳞癌组织中p34cdc2与cyclin B1蛋白的表达,探讨它们阳性表达的相关性及其与舌鳞癌临床病理特征的关系。方法随机收集舌鳞癌标本60例,对照上皮包括正常舌组织11例、癌旁组织49例。采用免疫组织化学SP法显示p34cdc2与cyclin B1蛋白的表达,并结合舌鳞癌的临床病理特征进行分析。结果舌癌组织中可见p34cdc2与cyclin B1蛋白表达并显棕色/黄色,主要定位于细胞浆中。两种蛋白在癌组织中存在增多表达,与正常组织和(或)癌旁组织中的表达差异有显著性(P<0.01)。p34cdc2蛋白的表达在舌鳞癌不同临床分期、组织分级和有无淋巴结转移组间差异有显著性(P<0.05),而与年龄、性别无统计学意义;同时cyclin B1蛋白的表达也在舌鳞癌不同临床分期、组织分级中差异有显著性(P<0.05),而在不同年龄、性别及有无淋巴结转移组间差异无显著性。结论p34cdc2及cyclin B1蛋白在舌鳞癌中有表达增多现象,或许可反映舌鳞癌细胞分裂增殖能力;增多表达的p34cdc2及cyclin B1蛋白可作为评价舌鳞癌临床分期和组织分级等临床病理特征的参考指标之一。 展开更多
关键词 舌肿瘤 鳞状细胞 CDC2蛋白激酶 细胞周期蛋白b 免疫组织化学 细胞增殖
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